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奶牛妊娠诊断

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基于外周血液中基因差异表达分析的奶牛早期妊娠诊断

基于外周血液中基因差异表达分析的奶牛早期妊娠诊断
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２・ ６
中 奶 ・ １・ 科 国 冲２ ０８ 技 ０ ・
基于外周血 液 中基 因差异表达分 析的奶牛早期妊娠诊断
程蕾 ，刘晓华 ，钱运国 ，童伟文，王定发 ，王肆玖 ，凌明湖 ，夏瑜
（ 湖北 省武 汉 市畜牧兽 医科学研 究所 ， 汉 武 ４０ ６ ） ３ ０ ５
中图分类号 ：８ ３ 文献 标识码 ： 文章编号 ：０ ４ ４ ６ （０ ０ ０ — ０ ６ ０ ￥２ ． ３ Ａ １０ ～ ２ ４ ２ １ ） ８ ０ ２ — ２ 摘要 ： 牛的早 期妊娠 诊 断在 实际生产过 程 中具 有重 要 的意 义 ． 是现 有 的妊娠 诊 断技 术 因存 在诸 多弊端 而很 少 奶 但 能够在 生产 中应 用和推 广。 妊娠 识 别阶段 某些 关键 基 因在 外 周血液 中显著 差异表 达规 律为我 们探 索新 的早期妊娠 诊 断技 术提供 了契机 。本 文对奶 牛妊娠 诊 断的研 究进展进 行 了ｘ要 阐述 ， 出了通 过 分析 外周血 液 中关键基 因的 ｌ 司 － ｘ － 提 表 达情 况对奶 牛进行 早期妊娠 诊 断的 方法 ， 并着重就 其基 本原理 、 用前 景 以及存在 的 问题 进行 了阐述 。 应
Ｍａ ｐｎ ｆ Ｔ ｒ ｏｙｃｎ ｒ ｔ ｎａ ｄｂ ｈ ｖｏ ａｔ Ｉ１ ． ｒｄｔ． ０ ３ ｐ ｉｇｏ Ｌｆ ｄ ｏ ｆ ｍａｉ ｎ ｅａ ｉｒｎｃｔｅＪ ＪＨｅｅ ｉ ２０ ， Ｑ ｏｂ ｏ ｏ ｉ ｌ ． ｙ
【４ １ 】Ｍｅ ａ ． Ｐ ｔｒＣ． ，Ｉ ｅＴ ｈ ｒＳ Ｋ， ｅｅ Ｔ ｍｋ ，Ｈｅｍａ ． ａ ｔａｉｅｔ ｉ ｌｃ ｍａｐｎ ｎ ｒ ｎＷ Ｑｕｎｉ ｔ ｒ ｔｏ ｉ ｐｉｇｉ ｔ ｖ ａ
ｃ ｌｉｇｔ ｉ ｎＳ ｅｉｈｄｉ ａｔ ］． ． ｉ ｃ． ０ ６８ ：６４ ３７１ ａｖｎ ａｔ ｉ ｗ ｄｓ ａｒ ｃｔｅＪ Ｊ Ｄａｒ Ｓ ｉ２０ ，９３ ６ — ６ ． ｒ ｓ ｙ ｌ ］ ｙ

奶牛早期妊娠诊断分子筛选研究

奶牛早期妊娠诊断分子筛选研究

奶牛早期妊娠诊断分子筛选研究作者：李志明王彦平郭勇王春伟王相国倪和民来源：《安徽农业科学》2021年第17期摘要 [目的]探究整合素αv β3、TGF-β、HSP10、PAG、IL-10等妊娠因子在荷斯坦奶牛早期妊娠过程中的规律，筛选奶牛早期妊娠诊断标志因子。

[方法]选取49头荷斯坦奶牛，在输精后第7、14、21、28天取外周血，采用荧光定量PCR方法分析整合素αv β3的表达趋势和变化规律，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）方法分析TGF-β、HSP10、PAG、IL-10的表达趋势和变化规律。

60 d后通过直检对50头荷斯坦奶牛进行怀孕检测。

[结果]50头奶牛中有23頭受孕、26头未受孕。

通过分析受孕和未孕奶牛血液中整合素αv β3基因的表达量，发现整合素αv β3基因在受孕奶牛血液中的表达量高于未孕奶牛，特别是输精后第21、28天受孕奶牛的表达量显著增高（P<0.05）;TGF-β、HSP10、PAG、IL-10蛋白质表达量变化在28 d内不能有效区分怀孕奶牛与未孕奶牛。

[结论]整合素αv β3可作为奶牛早期妊娠诊断标志因子，理论上可将孕检的时间窗口提前到早期妊娠阶段的第21天。

关键词荷斯坦奶牛;整合素αv β3;血液;早期妊娠;诊断中图分类号 S823 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2021）17-0088-04doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2021.17.024Abstract [Objective] To study the regularit y of pregnancy factors such as integrin αv β3， TGF-β， HSP10， PAG， IL-10 in the early pregnancy of Holstein cows， and screen out the marker factors for the early pregnancy diagnosis of dairy cows.[Method] 49 Holstein cows were selected and peripheral blood was taken on the 7th， 14th ， 21st， and 28th days after insemination. Fluorescence quantitative PCR was used to analyze the expression trend and change laws of integrin αv β3， and the enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA） method was used to analyze the expression trend and change laws of TGF-β， HSP10， PAG， and IL-10. After 60 days， 50 Holstein cows were tested for pregnancy by using rectum examination.[Result] Among 50 detected Holstein cows， 23 cows were pregnant and 26 cows were not. By analyzing the expression of integrin αv β3 gene in the blood of pregnant and non-pregnant dairy cows， it was found that the expression of integrin αv β3 gene in the blood of pregnant dairy cows was higher than that of non-pregnant dairy cows，especially the expression level of dairy cows on the 21st and 28th days after insemination increased significantly（P<0.05） . Through analyzing the expression level changes of TGF-β， HSP10， PAG， IL-10 within 28 days， pregnant cows could not effectively distinguished from non-pregnant c ows.[Conclusion] Integrin αv β3 could be used as a diagnostic marker for early pregnancy of dairy cows.In theory， the time window for pregnancy examination could be advanced to the 21st day of early pregnancy.Key words Holstein cows;Integrin αv β3;Blood;Early pregnancy;Diagnosis对于奶牛养殖行业而言，配种效率将直接影响企业效益[1]，主要表现为产奶量降低、护理成本增加2个方面。

母牛妊娠期、妊娠症状与检查方法

母牛妊娠期、妊娠症状与检查方法

母牛妊娠期、妊娠症状与检查方法
一、妊娠期
母牛配种以后，从受精开始，经过发育到成熟的胎儿娩出为止，这段时间称为妊娠期。

牛的妊娠期一般为275~285天，平均为280天。

妊娠期的长短与牛的品种、类型、个体、年龄、饲养管理条件的不同而有差别。

一般饲养管理条件好的比饲养条件差的短，怀母犊比怀公犊的短。

母牛妊娠后，为做好下一步的生产安排及分娩前的准备工作，应大致确定妊娠母牛的预产期。

其推算的方法，预产期可按配犊月份减3，日数加6的公式计算。

例1：3号母牛于2000年5月10日配种，它的预产期为：5－3＝2（月）……预产月份。

10＋6＝16（日）……预产日期
即3号母牛的预产期是在2001年2月16日。

例2：5号母牛于2001年1月28日配种，它的预产期为：月份不够减，须借一年，故加12，则（1＋12）－3＝10（月）；日数加上6已超过1个月的天数，故减去30天，再往月份里加上1个月。

即28＋6－30＝4（日）……预产日期
10＋1＝11（月）……预产月份
所以5号母牛的预产期是在2001年11月4日。

二、妊娠症状
1。

奶牛早期妊娠诊断技术的研究进展

奶牛早期妊娠诊断技术的研究进展

奶牛早期妊娠诊断技术的研究进展陈超，张欣欣，安志高，胡祥维，华丽萍，李可可，杨利国（华中农业大学动物科技学院，武汉 430070）中图分类号：S823.3 文献标识码：A 文章编号：1004-4264（2019）04-0026-04DOI: 10.19305/ki.11-3009/s.2019.04.006摘 要：高效准确的早期妊娠诊断，可以缩短母牛的产犊间隔，从而达到提高母牛繁殖效率的目的。

家畜早期妊娠诊断方法的研究具有悠久的历史，从原始的外部观察法到目前应用最广泛且最直接的直肠检查法，再到后期发展起来的超声波检查法以及近年来研究比较多的易于商业化的间接检测法。

本文对在生产中具有实际应用效果且具有一定发展前景的早期妊娠诊断技术应用现状进行了综述。

关键词：奶牛；早期妊娠诊断；繁殖随着经济的高速发展和生活水平的不断提高，人们对于乳制品的需求量越来越大，要求也越来越高，这也对奶牛养殖业的发展提出了更高的要求，所以为了满足社会发展的需要，需不断推进奶牛养殖的现代化和科学化。

经过半个多世纪的发展，中国奶牛产业已经从传统、落后、粗放的养殖模式转变成规模化、标准化、精细化、产业化养殖的模式，很多先进技术也得到了大力的推广[1]，其中早期妊娠诊断技术在近些年也得到了快速的发展。

早期妊娠诊断技术在畜牧养殖业中一直扮演着重要的角色，特别是在奶牛养殖业中。

母牛在配种后应尽早地确定是否妊娠，这对于保胎、减少空怀、提高母畜的繁殖力是非常重要的[2]。

经过早期妊娠诊断，对于确定怀孕的母牛，尽早提供妊娠母牛所需要的营养与环境，加强饲养管理，能够保证胎儿的正常发育，避免胚胎的早期死亡或流产；对于未妊娠的母牛，找出原因后及时采取措施进行二次配种，对于多次配种不孕的母牛及时淘汰，通过缩短产犊间隔而达到提高母牛繁殖效率的目的。

简便有效的妊娠诊断方法，尤其是早期妊娠的诊断方法，能够大大提高母畜的繁殖效率。

母畜繁殖效率一直是畜牧生产中极为重视的问题，繁殖效率的提高能大大提高畜牧生产的经济效益。

牛的生殖器官疾病—妊娠毒血症(牛病防治技术课件)

牛的生殖器官疾病—妊娠毒血症(牛病防治技术课件)
妊娠毒血症
奶牛妊娠毒血症
也称母牛肥胖综合征、牛的脂肪肝和肥胖牛的酮病。多 发生在由于干奶期过渡饲养而造成过度肥胖的高产奶牛分娩 之时。临床上以食欲废绝、胃肠蠕动停止，间有黄疸为特征。
病因
妊娠后期尤其是Βιβλιοθήκη 双犊的母牛，产后泌乳需要大量能量，引起机 体对能量需要急剧增加，当饲料缺乏或配合不当，碳水化合物不足时， 奶牛得不到充足的能量。另外，一些疾病如难产、产道损伤、子宫炎、 生产瘫痪、消化不良等而影响母牛食欲，致使母牛需要的能量缺乏。 这些条件下奶牛以动用体脂来供应能量，当动用体脂超过一定限度时， 产生大量酮体，同时脂肪积聚于肝脏，引起本病的发生。
病理变化
死后剖检，最突出的病理变化是肝脏，明显肿大、苍 白、黄色、质地脆多脂，肾、肾上腺有类似的病变。
诊断
本病主要发生在一些饲养管理有缺陷的产后数日内， 以及有以上致病因素的肥胖奶牛。但应将单独发生本病或 相伴一些疾病而发生时，特别要和急性子宫炎、皱胃变位、 创伤性网胃—心包炎以及母牛爬卧综合症相鉴别。化验室 诊断及尸体剖检可帮助确诊。
症状
1.急性型 随母牛分娩而表现出症状，精神抑郁，食欲废绝，瘤胃蠕 动减弱，少奶或无奶。可视粘膜发绀、黄染。步态强拘， 目光呆视，对外界反应差。有的排出黄褐色、具有恶腥臭 味的稀粪。于2-3天内死亡或后期卧地不起而淘汰。
症状
2.亚急性型 多于分娩3天后发病。主要呈现产后酮病。食欲废绝，少奶，
粪少且干，有酮味。病程绵延，渐进性消瘦，有乳房炎时， 可见乳房肿胀，乳汁呈脓性或极度稀薄，呈黄水样，酮乳。 产道内积蓄大量褐色具有臭味的恶露。后期卧地不起，磨 牙，呻吟，最终衰竭而死。
治疗
目的：抑制脂肪分解，减少脂肪酸在肝脏中的积 存，加速脂 类的利用。

奶牛常见产科疾病的诊断与综合防治

奶牛常见产科疾病的诊断与综合防治

奶牛常见产科疾病的诊断与综合防治作者：徐春玉雷国毅来源：《新农村》2018年第03期本文就较常见的奶牛产科疾病：流产、难产、胎衣不下、子宫内膜炎、乳房炎等做以介绍。

以供参考。

1流产因母体或胎儿的生理发生紊乱或二者间的正常关系被破坏，而使妊娠中断，一般是指在妊娠42-260天内出现妊娠中断或胎儿死亡。

1.1症状：奶牛乳房突现肿大，阴唇肿胀。

乳头里可挤出清亮液体。

阴门处有黏液排出。

需及时检查是干尸、早产、死胎等。

1.2治疗：可皮下注射黄体酮50-100mg。

一天一次。

连用五天。

也可用补肾气、固冲任、调气血安胎的药剂。

如泰山磐石散：白术30g、党参60g、黄芪30g、当归20g、杜仲25g、白芍18g、熟地25g、续断30g、桑寄生25g、阿胶30g、菟丝子30g、补骨脂30g研末。

开水冲调、温灌。

1.3预防：加强饲养管理。

防范损伤母牛，严格用药、防疫制度，危、禁、疑药绝对不用。

严禁自发性传染性等疾病的传播等。

2难产多因母牛骨盆狭窄，早配、胎儿超大或胎位不正。

因而母牛分娩时间就会延长。

使胎儿难于或不能排出，并且平时饲养失调，母牛体弱气衰等造成的。

2.1症状：根据预产期分娩前兆已出现，但久不能排出胎儿，分娩时子宫壁和腹壁的收缩时间长。

间隙短，力量强：或宫颈尚完全张开，胎儿还没进入产道。

胎水已破。

还有的倒生，胎儿又大。

臀部先进产道。

2.2治疗：对阵缩与努责无力的母牛在产道润滑时，可直接以手拽出，不能拽出时，要及时进剖腹产；因胎位不正引发的难产。

需先矫正后设法拽出。

无法矫正的采取截胎术。

还可服用催产剂草药，之后助产。

可取大戟25g、丹参50g、穿山甲50g、滑石100g、桃仁50g、皂角20g、加适量水煎之，以米汤调温灌。

2.3预防：配种不能过早，合理饲养，妊娠末期，适量减少高蛋白质饲料以防胎儿过大，严格干奶时间，及时停奶，适当运动，预产期时，分娩环境要安静。

避免惊吓。

3胎衣不下胎衣不下是母牛娩出胎儿后，胎衣在生理时限内没有排出。

母牛妊娠早期诊断技术简介


否盈利 。母牛繁殖率是 由产犊 间隔时间决定 的 ，其影响 因素
包括繁殖疾病造成 的屡配不妊和空怀时 间太 长 ．目前常规方
射 、散射 、绕射 、衰减 以及声 源与接收器相对运 动产 生多普 勒频 移等物理特 性 ，应用不 同类型 的 Ｂ超仪接受这 些反射 、 散射信号 。显示各种组织形态 。
母 牛妊娠早期诊断技术简介
桑雷 孙世坤 陈冬金 陈岩 峰 谢喜 平 （ 福 建省农 业科 学院畜牧 兽 医研 究所
摘要 ：妊娠早期诊 断技术 能缩短母 牛空怀时 间，是提 高繁 殖
３ ５ ０ ０ １ ３ ）
验影 响摸胎 的准确率 ：②母 牛的怀胎 时间长短影响判断空怀
效率的手段 。关 系到养殖场 （ 户）的切 身利益 。本 文从诊 断
第六 ，定期 为兔驱 虫。
５ 总 结
为 了保证新 西兰兔健康生长 ，还需要做好防疫 工作 。 第一 ，加强对兔 场的 日常管理 ，做好 卫生工作 ，对兔舍 温度 、通 风 、光照 、湿度等指标进行严格 的控制 ，为兔 养殖
提供一个 良好的环境 ： 第 二 ，对饲料安全进行严格把关 ，防止发霉饲料混入投食
率能达 到 １ ０ ０ ％．同时还发现青 年牛 ２ ０ ～ ２ ８ ｄ Ｂ超妊娠 诊断准
该种 方法一般是在配种后 两月进行 ，技术员徒手 或戴 手 套 将手通过母牛肛门伸进直肠 内 ，隔着直肠触摸子宫 角 、子
宫 中动脉和卵巢 ，依据手 的触 觉判断母牛是否怀 胎及 怀胎时 间 ，该 种技术优点 不需要任何 设备 ，快捷 简便 ，准确 率高 ， 目前广大养殖户和养殖小 区大部分采用该种技术 ．然而直肠
检查也存在缺点 ： ①操作技术不易掌握，配种员实际操作经

B超影像学在奶牛早期妊娠诊断中的应用


Ｂ超诊 断奶 牛早 期妊 娠 的 准确 率 ，描 绘 奶 牛 妊娠 典 型 影像 图特 征 。 结 果表 明 ：奶 牛 配 种 ３０ ｄ
内 ，应 用 Ｂ超 法进行 早期妊 娠诊 断 ，比 直肠检 查 方法提 前 ３０ ｄ以上 ，诊 断符 合 率 达 ９８．８３％ 。
本 实验 为 牛场应 用 Ｂ超早期 妊娠 诊 断提供 了参 考 资料 。
研究较少 ，应用奶牛 Ｂ超 影像学 ，提早检测 调整探查角度 ，直 至 出现 满意影像 。最好 涂
出妊娠母牛 ，对提 高规模化奶 牛场 的经济效 耦合剂从而保护探头 。
益具有极其重要 的意义 。
１．５ 判 断 标 准
１ 材料与方法
出现一个或多个 规则 的黑色孕 囊 暗区或
１．１ 仪器设备
关键 词 ：兽 用 Ｂ超仪 ；早 期妊娠 诊 断 ；奶 牛
．
中图分类 号 ：￥８２３．３ 文献标 识码 ：Ａ 文章编 号 ：１００５—２７３９（２０１２）０５—０００９—０３
繁殖效率是奶 牛业一个 十分重 要 的生产 荷斯坦奶牛 。
指标 。当前奶牛繁殖效 率十分 低下 ，主要表 １．３ 检查部位
本文在 ３０ ｄ内实际检测 中发现 ，少数母牛 出
现 了假怀孕和子宫 卵巢疾病 ，这 些情况 的 出
现会给生产带来 较大影响 。利用 Ｂ超仪 可 以
准确及时地进行诊 断 ，降低 空怀率 。对 有生
殖疾病 的奶牛及时治疗 ，避免 因假 孕 和子宫
３ 讨论
卵巢疾病带来 的直接 经济损失 ，充分体 现 了
者胎儿 骨骼影像 即可确认为早孕 阳性 。
５０Ｓ型便携式兽 用 Ｂ超仪 （荷 兰 ）；奶 牛
Ｂ超早期妊娠 诊 断符合 率计 算公 式 ：直

奶牛繁殖技术


（二）输精注意问题：输精部位、次数、时间，并做好 配种记录。
任务二 奶牛的输精技术
三、输精操作技术 使用直肠把握子宫颈法进行人工授精。
任务三 奶牛的妊娠诊断 一、妊娠母牛的主要生理变化
（一）生殖器官的变化：包括卵巢、子宫、子宫颈、 阴道和阴门等的器官发生的变化。 （二）母牛全身的变化
任务三 奶牛的妊娠诊断 二、妊娠诊断方法
注意：助产时，不可用力过猛，强拉胎儿，以防止子宫翻 转脱出，并注意避免脐带断在脐孔内。
任务四 奶牛的分娩与助产 三、母牛的助产技术 （二）新生牛犊的护理技术
1、保证牛犊呼吸畅通：胎儿产出后，擦净口腔和鼻 孔黏液。若无呼吸，应进行人工呼吸。 2、脐带处理：脐带一般被扯断，需用5%碘酒涂抹脐 带断口进行消毒。 3、尽早吸食初乳：犊牛应在出生后0.5-1小时吃到初 乳，以获得免疫保护和足够的营养。
任务四 奶牛的分娩与助产
二、分娩过程
任务四 奶牛的分娩与助产 三、母牛的助产技术 （一）母牛的助产
正常分娩时，不要过早去帮助。母牛阵缩、努责微弱，应 进行助产。 方法是：用消毒过的助产绳缚住胎儿两腿系部，并用手指 擒住胎儿下颌，随着母牛阵缩和努责时一起用力拉，当胎 头经过阴门时，一人用双手后住院阴唇及会阴部，避免撑 破。胎头拉出后，再拉的动作要缓慢，以免发生子宫翻转 脱出。当胎儿腹部通过阴门时，将手伸到胎儿腹下，握住 脐带根部和胎儿一起向外拉。
结
束
谢
谢
大
家!
扩张称开口期。平均为6小时（1~12小时），经产母 牛较快，初产牛较慢。
2、胎儿产出期：从子宫颈完全开张到胎儿排出母
体外称为胎儿产出期。产出期一般1~4小时，初产母 牛较经产牛慢，产双胎时两胎相隔1~2小时。

奶牛早期妊娠诊断研究进展

娠 诊 断 ，与 直 肠 检 查 法 比较 ，妊 娠 符 合 率 为 ９ ． ％（Ｏ５ ）空杯 符合 率为 ７ ．３ ８１ ） ８ｏ ５ ／１ ， ４ ２７％（／１。张 寿 等 （９９ 应 用 Ｓ Ｄ １９ ） Ｃ 一Ⅱ型兽 用 超 声 多普 勒 仪 检
查 宫 血 音 对 ５ 头 受 配 乳 牛 进 行 了早 期 怀 孕 诊 １
果 优于 成年 牛 。陈兆英 等 （９０ 应用 超声 多普 勒 １９ ） 仪 从 直 肠 探 查 宫 血 音 诊 断 奶 牛 中后 期 妊 娠 的 结 果 与直 肠 检 查 的全 部 符 合 ，与 直肠 检 查 相 比操
作， 容易掌握 ， 省时省力。马群山等（９ ９用 Ｄ Ｓ １９ ） Ｒ 超 声波 仪 对 配 种 后 ２ ～ ５ １４ ｄ的 ６ ２头 母 牛 进 行 妊
４ ６ ｘ ｏ几￣ ６ ｘ Ｏ Ｌ， ３ ９ ． ｌ９ ６ ． ｌｌ 对 Ｏ头 受 配母 牛进 行 测 ５ ５
４血清酸滴定法
妊 娠母 牛产 生一 种 特 有 的免 疫 球 蛋 白 ， 在 它 酸性环境 中具有与其它蛋 白质形成低 溶性 复合 物（ 絮状 物 ） 特性 ， 可以对奶 牛进行早期 妊娠诊 据此 断。安翠花等 （ ４对配 后 １４５ １９ ） ９ ｄ的母牛用 血清 ６ 酸 滴定法进行早期妊娠诊 断 ， 准确率达 ９ ． ％。何 ５８ ９ 宝祥 等 （９ ７对人 工授 精后 １～５ １９ ） ６４ ｄ的 ６ ８头奶 牛 的 ８ 份 血清经血清 酸滴定法检 测 ，结果对 妊娠 牛 ９ 诊 断 的 准 确 率 为 ８ ． ％（２ ６ ，非 妊 娠 牛 为 ８ ８ ３／ ） ８ ３ ９． ％（８ ） ０ ７ ４ ￣３。马群 山等 （９ ９对配 种后 １４ ５ ５ １９ ） ６ ｄ
断 ，并 与 直肠 检查 结 果进行 验 证 ，结 果 ２ ～０ 、 ０ ３ ｄ ３ ～ １ 、１ ７ｄ的符 合 率 分 别 达 ８ ． 、０ ％和 １６ ｄ６ ～ ５ ６７ １０ ％ １０ 对 １ ０％， ２头未 孕牛检 测 的符合 率 为 １０ ０％。
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