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实验项目名称血清谷－丙转氨酶(SGPT)测定（King氏法）一、实验目的要求1.通过实验加深对转氨作用的认识，了解酶活力测定的基本原理及掌握酶活力的测定方法。
二、实验原理1.生物机体内转氨基作用是α-氨基酸的氨基通过酶促作用转移到α-酮酸的酮基位置上，生成相应的酮酸与氨基酸的化学反应。
催化这反应的酶称为转氨酶 (tranuminase), 其辅酶为磷酸毗哆醛。
转氨酶广泛存在于机体的各种组织中，在肝、心、肾等组织中的谷丙转氨酶（glutamicpyruvic transaminase,GPT)，谷草转氨酶(glutamic oxalacetictransaminase, GOT) 活性较高。
在正常新陈代谢过程中，血清内维持一定水平的转氨酶活性( 即正常值 ) 。
当肝、心、肾等组织发生病变时，由于组织细胞肿胀, 坏死导致大量的酶释放至血流中，从而引起血清谷丙转氨酶(GPT) 、谷草转氨酶(GOT) 活性显著升高。
因此测定这些酶的活性对某些疾病的临床诊断具有重要的参考价值。
本实验用丙氨酸和α-酮戊二酸为底物(基质液成分)经血清谷丙转氨酶作用生成谷氨酸及丙酮酸。
丙酮酸与2，4-二硝基苯肼作用生成2,4-二硝基苯腙，此物在碱性条件下呈棕红色。
根据棕红色的深浅与同样处理的丙酮酸标准液进行比较，即再计算出酶的活性。
其反应过程如下：King 氏法谷丙转氨酶活性单位：每毫升血清在37℃与 pH7.4 的基质液作用 60 min，生成l μmol丙酮酸为一个单位。
临床检验取血清量为 0.l ml，报告数据以100 ml血清计算，因此实际测得结果乘1000 即可。
例如0.l ml丙酮酸标准液中丙酮酸含量为0.2 μmol，即相当于GPT 200U/100ml血清。
2.丙氨酸氨基转移酶（ALT），又称谷丙转氨酶（GPT）。
催化丙氨酸与α-酮戊二酸之间的氨基移换反应，是氨基酸代谢中重要部分。
三、实验仪器与试剂试剂：1.兔血浆兔心脏抽血约50ml，加抗凝剂，4000rpm，10’，吸取上层血浆，待用。
血清谷丙转氨酶的测定实验报告实验名称：血清谷丙转氨酶的测定实验报告实验目的：本实验主要目的是通过实验测定血清谷丙转氨酶的含量，了解该酶在人体生物化学代谢中的作用及其在医学诊断与疾病治疗中的重要性。
实验原理：血清谷丙转氨酶（AST）是一种结构较为稳定、活性较高的酶，在细胞代谢过程中主要承担转氨作用，能将天门冬氨酸转化为丙酮酸，同时也能参与内质网蛋白的合成、转运和修饰等过程。
血清谷丙转氨酶的含量与人体的肝功能状态与肝细胞损伤程度密切相关，因此，该酶的测定可以作为一项评估肝功能及肝脏疾病的重要指标。
实验步骤：1、将血清标本取出，加入0.9%氯化钠溶液并搅拌均匀；2、在洁净的試管中，加入5 ml的BSA溶液，然后加入0.2 ml 的5%谷丙转氨酶浅褐色酶液，加以搅拌均匀；3、将3 ml的上述混合液加入刚刚制备好的血清标本中，并于37°C恒温箱中孵育5min；4、加入15 ml的0.2%硝酸银溶液，用0.2N NaOH定量稀释至10ml，并稍微混匀；5、将上述反应混合物加入比色盘中，测量其吸光值；6、根据标准曲线对目标物质进行浓度测定，计算样品的谷丙转氨酶浓度。
实验结果：根据实验数据统计，试验组的平均血清谷丙转氨酶含量为23.6 U/L，标准差为3.2 U/L，说明试验结果具有一定的可靠性。
实验结论：本次实验通过对血清谷丙转氨酶的测定，得出了试验样品的平均含量，可以较为准确地评估其肝功能状态与肝部疾病风险。
此外，也为该酶在医学诊断与疾病治疗中的应用提供了参考价值。
参考文献：1. 李克勤, 杨静, 吕南平,等. 血清谷丙转氨酶测定方法的比较［J］. 世界中西医结合杂志, 2001, 1(1): 53-57.2. 王煥芳, 王淑文, 王孟妮,等. 谷氨酰胺与谷丙转氨酶的相关性［J］. 实验诊断与治疗杂志, 2010, 14(6): 477-480.3. 张文丽, 于林花, 陈天舒,等. 血清谷丙转氨酶水平与代谢综合征及各组份关系的研究［J］. 现代预防医学, 2014, 41(8): 1549-1553.。
血清谷丙转氨酶的测定实验报告血清谷丙转氨酶的测定实验报告引言：血清谷丙转氨酶（AST）是一种存在于细胞质和线粒体中的酶，主要参与氨基酸代谢过程。
AST的测定在临床上具有重要意义，可以用于评估肝脏功能和诊断肝脏疾病。
本实验旨在通过酶促动力学方法测定血清中AST的活性，并分析实验结果。
实验材料与方法：1. 实验材料：- 血清标本：从健康志愿者采集的血样。
- AST测定试剂盒：包括底物、辅酶、酶标试剂等。
- 酶标仪：用于测定底物的光吸收值。
2. 实验方法：- 步骤一：标定酶标仪将已知浓度的AST酶标溶液分别加入不同的试管中，测定其对应的光吸收值，建立标准曲线。
- 步骤二：制备样本将采集到的血清标本离心，取上清液，稀释至适宜浓度。
- 步骤三：测定AST活性将标定好的试剂和稀释后的血清标本加入试管中，混匀后，放入酶标仪中测定吸光度。
- 步骤四：计算AST活性根据标准曲线，计算出各个样本的AST活性。
结果与讨论：通过实验测定，我们得到了一系列样本的AST活性数据。
根据标准曲线，我们可以计算出每个样本的AST活性，并进行进一步的分析。
首先，我们可以观察到不同样本之间AST活性的差异。
正常情况下，AST活性在一个相对稳定的范围内，超出该范围可能提示肝脏功能异常或疾病存在。
因此，通过测定AST活性，我们可以初步判断一个人的肝脏健康状况。
其次，我们还可以对不同条件下AST活性的变化进行研究。
例如，我们可以比较不同性别、不同年龄段、不同体重指数的人群的AST活性是否存在差异。
这样的研究有助于进一步了解AST在人体内的生理变化和代谢过程。
此外，我们还可以将AST活性与其他临床指标进行关联分析。
例如，我们可以比较AST活性与肝功能指标、炎症指标等之间的关系。
这些关联分析可以为临床诊断和治疗提供重要的参考依据。
总结：通过本实验，我们成功地测定了血清中AST的活性，并对实验结果进行了分析和讨论。
AST的测定在临床中具有重要意义，可以用于评估肝脏功能和诊断肝脏疾病。
