肺炎支原体IgM说明书

呼吸道感染病原体IgM九联检非典型肺炎是一组由非典型病原体：如嗜肺军团菌、肺炎支原体、肺炎衣原体、腺病毒、呼吸道合胞病毒、流感病毒、副流感病毒等引起的肺部炎症，临床表现不一，临床中很难针对特定病原体进行治疗，容易造成患者治疗不当以及抗生素滥用。

呼吸道感染病原体IgM九联检采用间接免疫荧光法检测血清中相关病原体IgM型抗体，对疾病的早期诊断和指导治疗具有重要的意义一、检测内容、方法及检测人群1、检测内容：包括①嗜肺军团菌血清1型②肺炎支原体③Q热立克次体④肺炎衣原体⑤腺病毒⑥呼吸道合胞病毒⑦甲型流感病毒⑧乙型流感病毒⑨副流感病毒1、2和3型3、适用人群：儿童及成人呼吸道感染患者，尤其是呼吸道症状不典型，或长期发热抗生素治疗无效者二、临床意义1、呼吸道感染性疾病的早期快速诊断;2、对病原体的鉴别诊断提供导向性依据3、指导临床合理用药三、标本采集1、空腹静脉采血3ml（普通不抗凝管）2、严格无菌操作四、结果报告及意义1、结果报告：以阴性（—）/ 阳性（+）表示2、结果意义①嗜肺军团菌血清1型：是社区获得性肺炎的重要致病菌，最常见的是嗜肺军团菌血清1型，感染者常伴随有全身症状。

在血清学诊断中，间接免疫荧光法（IFA）是唯一的标准技术。

军团菌肺炎潜伏期为2~10天，IgM抗体在感染后1周左右出现，并可持续存在3~6个月。

②肺炎支原体：肺炎支原体引起的肺炎在儿童和青少年中最为常见，肺炎支原体可在呼吸道黏膜上皮内潜伏，部分患者无明显症状；但大部分患者为显性感染。

在3岁以下儿童以上呼吸道感染多见，成人以肺炎表现为主。

肺炎支原体肺炎潜伏期14~21天，起病缓慢，IgM抗体一般在感染后1周出现, 3～4周达高峰, 可持续存在3~6个月。

③Q热立克次体：Q热是由Q热立克次体引起的全身疾病，会造成发热、非典型性肺炎、肝炎或心内膜炎。

IFA检测是最灵敏和最具指示性的血清学诊断方法。

急性感染Q热立克次体的潜伏期为2～38天，通常为12～19天，IgM抗体一般在感染后2周左右出现，4～8周达高峰, 可持续存在3~4个月。

支原体检测试剂盒使用说明书1.试剂：支原体检测试剂盒由武汉源深生物科技有限公司提供。

2.实验方法:巢式PCR的方法检测支原体污染：A.待检细胞汇合率在90％以上时取100 µL细胞上清液到离心管内B.95o C孵育5分钟C.短暂高速离心15秒钟左右D.试剂盒里的组份：引物混合物(Primer Mix) 20 µL阳性对照DNA (Positive Control DNA) 15 µL阴性对照(Internal Control DNA) 20 µL巢式PCR一共需要做2轮PCR，本检测方法不受其他来源（如所培养细胞）DNA的影响，不但提高了检测的灵敏度，同时也提高了特异性。

(1)第一轮PCR:PCR 混合物：向0.2 mL PCR薄壁管中依次加入以下组分，盖紧管盖，轻弹管壁混匀，稍加离心。

E.热循环程序：将准备好的PCR管放入PCR仪，运行如下程序。

PCR 混合物：向0.2 mL PCR薄壁管中依次加入以下组分，盖紧管盖，轻弹管壁混匀，稍加离心。

F. 热循环程序：将准备好的PCR 管放入PCR 仪，运行如下程序。

试验结果：2％ 琼脂糖凝胶电泳，TBE 缓冲液，PCR 产物及Marker 均点样10µL ，于50V 下电泳1hr ，EB 染色15min ，紫外灯下观察。

电泳结果见下图：图中泳道M 为DNA Marker ，1和2为待检测细胞系的第一轮PCR 产物 (1st )，3和4为待检测细胞系的第二轮PCR 产物 (2nd ), 其中1、3为阳性对照管PCR 产物，2、4为阴性对照PCR 产物。

阳性对照管在200bp 左右，和300-400 bp 处各有一条带，证明本次实验准确可靠 (不同的支原体Mycoplasma, such as M. fermentans, M. hyorhinis, M. arginini, M. orale, M. hominis, M. arthritidis, M. hyopneumoniae and Acholeplasma laidlawii 的保守区的片段长度不一，大概在200-400 bp 之间)。

北京索莱宝科技有限公司
支原体预防剂说明书
货号：CA1100
规格：500μL
保存：-20℃，一年（避免反复冻融，建议分装保存。

）
注意：1.请在收到货后，将试剂管瞬时离心。

2.产品出现沉淀属正常现象，在分装或使用前须在室温下震荡溶解至澄清透明状，不影响产品的使用效果。

产品说明：
支原体是一种大小仅为0.2~0.3μm，无细胞壁，可透过一般过滤膜（0.22~0.45μm）的原核生物，在细胞培养过程中，支原体感染发生率达到63%，因而细胞培养过程中被支原体污染是一个世界性的难题。

多篇文献研究表明：当细胞（特别是传代细胞）被支原体污染后，细胞内的DNA、RNA及蛋白表达发生改变，而细胞的生长率一般并未发生显著的影响，因而细胞被支原体污染一般难以察觉。

支原体预防剂是属于多肽类抑制剂，能够有效预防支原体的污染，不会导致细胞产生耐药性。

随着培养时间的延长，会被缓慢降解为氨基酸，不会产生二次污染，可用于大规模发酵、细胞治疗等领域；同时，支原体预防剂具有广谱性，可替代双抗，用于预防常见细菌的污染；细胞毒性小，已在多种细胞上进行过验证。

使用说明：
1.建议现配现用。

2.使用支原体预防剂处理时，建议保持细胞密度在50～60%。

3.推荐支原体预防剂的稀释比例为1:2000，例如：20mL的培养基加入10μL的支原体预防剂。

4.建议根据细胞的周期不一样，每2～4天处理1次，或长期处理，以预防支原体污染。

5.可直接加入血清、培养基中，用于预防支原体污染；
第1页共1页。

肺炎支原体3小时快速培养鉴定试剂盒(培养法)
药品名称：
通用名称：肺炎支原体3小时快速培养鉴定试剂盒(培养法)
英文名称：暂无
成份：
该试剂盒为液体单一试剂，技术性能要求为：特异性：用标准肺炎支原体菌株检验，其培养结果为阳性(草绿色)；用等量灭菌生理盐水代替菌株检验，培养结果应为阴性(紫红色)灵敏度：本品用变色单位法试验，灵敏度≥10-8CCU;其主要组成为：牛心浸液、小牛血清、酵母浸液、抑菌剂、生长因子等。

适应症：
该产品用于体外定性检测肺炎支原体，用于临床肺炎支原体感染的快速筛查和临床辅助诊断。

用法用量：
暂无
不良反应：
暂无。

禁忌：
暂无。

注意事项：
暂无。

贮藏：
暂无
有效期：
暂无
标准文号：
鄂械注准20142402025。

临床肺炎支原体抗体IgM、IgG区别、误区及要点总结MP 是社区获得性肺炎（CAP）的主要病原体，对于MP 肺炎，咳嗽、发热是常见临床症状；但有15% 患者无任何临床表现。

因此，为明确患者有无MP 感染，临床可进行病原体培养、检测MP 核酸或抗原、血清MP 抗体滴度等检查手段。

病原体培养是诊断MP 感染的金标准。

但病原体培养耗时长、检测MP 核酸或抗原暂未普及，故测定患者血清MP 抗体滴度是诊断MP 感染的重要方法。

误区一：MP-IgM 抗体、IgG、IgA 一概而论MP 侵袭人体后，血清中最早发现MP-IgM 抗体、其次是IgA，随着患者病程延长，后续可在患者血清中测出IgG。

现将MP 抗体的临床特点总结在表1。

表1 MP 抗体的临床特点对MP 急性感染者，临床可使用大环内酯类、喹诺酮、四环素类药物进行抗感染治疗。

不同的是MP 既往感染者无需药物治疗。

误区二：MP 抗体1:40 = MP 感染临床多采用颗粒凝集（PA）法测定血清MP 抗体，其数值为MP-IgM、IgG 抗体之和，当MP 抗体数值≥1:40 定为阳性。

因人群免疫应答的差异，MP 抗体滴度数值范围为1:40 至1:10240，滴度数值越高者病情越重、临床并发症更多。

图1的检验报告，能否诊断MP 急性感染？图1 一患者MP 抗体滴度报告患者血清MP 总抗体≥1:160 需考虑急性感染 [2]，应进行药物治疗；但1:40 并非药物治疗的临界参考值误区三：MP-IgM 阴性，排除MP 感染患者感染MP 后4~5 d，可从其血清标本中检出MP-IgM。

为此，若MP 感染者病程较短，则MP-IgM 尚未完成血清转化，可导致假阴性结论。

故临床诊断MP 感染，应综合患者病史、临床表现等，不可单纯依赖MP-IgM 检查而作出判断。

误区四：MP 相关肺炎，肺部病灶不吸收，药物治疗就不停止对于MP 所致的肺炎，抗感染疗程为5—7 天，反应较慢者可达10—14 d。

肺炎支原体抗体IgM金标检测试剂盒产品简介肺炎支原体抗体IgM金标检测试剂盒按2005版《医疗器械分类目录》，属临床医学检验辅助设备（6840）。

管理类别为Ⅱ类。

产品简介如下：3.1结构组成3.1.1产品结构3.1.2检测卡:由检测条和聚苯乙烯塑料外壳制成。

3.1.3检测条:由已包被了检测线和对照线的硝酸纤维素膜、化学偶合物膜、样品吸收膜，胶纸等部分经层压而成，再分切成固定宽度的条状。

3.2主要原材料3.2.1重组肺支特异蛋白抗原：为三种基因重组表达肺支特异蛋白抗原用于包被硝酸纤维素膜检测线。

3.2.2抗人免疫球蛋白M单克隆抗体：纯化的抗人免疫球蛋白M单克隆抗体，用于胶体金的标记。

3.2.3抗鼠免疫球蛋白M抗体：纯化的兔抗鼠免疫球蛋白M抗体，用于包被硝酸纤维素膜控制线。

3.2.4金标检测条：由S1—S7部分构成：S1选用亲和性高分子纤维素膜，经预先处理后制备成反应膜用来显示整体系统的反应结果；S2、S3选用可使液体爬行速度较快，吸附力较强的粗纤维吸水纸或无纺布，其作用在于被粘贴在反应体的不同部位吸收待检样品标本；S4同样选取吸附力较强的无纺布，作为金标记抗体的固相吸附材料；S5为不同规格的双面胶，用于固定各种反应膜和吸水材料于S7上；S6塑料基板，作为测试条反应体的支撑物；S7单面胶带，用于固定金标反应膜和吸水材料于S6上；3.3基本参数3.3.1 试剂盒的基本参数应符合表1的规定。

表2：基本参数3.3.2外观3.3.2.1检测卡表面应平整、无划伤、开裂、变形及污渍；检测条各组分附着牢固、内容齐全；3.3.2.2检测卡壳应平整，上下盖应均匀合拢，无明显间隙；检测条在外壳内应附着牢固。

3.3.3符合率：3.3.3.1阴性符合率：试剂卡测试肺支IgM抗体阴性质控血清10份，假阳性判断结果不多于1份，符合率应≥90%。

3.3.3.2阳性符合率：试剂条测试肺支IgM阳性质控血清10份，假阳性判断结果不多于1份，符合率应≥90%。

肺炎支原体igm抗体正常值范围是多少肺炎支原体igm抗体正常值是多少肺炎支原体抗体igm正常值小于1:20：1. 正常值差异：肺炎支原体抗体igm正常值小于1:20，不同的医院参考值可能存在差异。

2. 抗体阴性表示：肺炎支原体抗体为阴性，说明体内没有支原体的感染。

3. 抗体阳性表示：肺炎支原体抗体igm超过1:20，说明体内有支原体的感染。

4. 肺炎支原体感染症状：肺炎支原体感染后可以引起支原体肺炎，症状包括持续性干咳、高热、头痛、咽痛等。

5. 治疗建议：治疗上主要是在医师指导下给予大环内酯类抗生素如红霉素等药物治疗，建议如有支原体的感染，尽早就诊，在医师指导下给予治疗。

肺炎支原体阳性如何治疗1、支原体肺炎的病人表现有头痛咽痛、发热、咳嗽、恶心呕吐等症状。

治疗的时候，也需要对症治疗，比如使用解热镇痛药物，柴胡以及对乙酰氨基酚等，还可以物理降温，痰多咳嗽也需使用化痰止咳的药物。

2、患者注意休息，补充足够的营养提高抗病能力。

此外，抗菌的药物治疗有大环内酯类，比如红霉素和罗红霉素等，罗红霉素药物胃肠副作用较少。

治疗支原体肺炎的药物首选的有红霉素、克拉霉素、阿奇霉素等。

3、还有有些患者盲目使用一些药物，比如青霉素和头孢菌素等药物常用来治疗一些呼吸道感染和肺炎等，是不合适的。

支原体肺炎的治疗不同于其他细菌感染引起的肺炎一样，所以积极接受正规的检查和治疗是必要的。

支原体肺炎一直咳嗽怎么办1.生活调理：支原体肺炎患者反复咳嗽一般可以通过生活调理来缓解，患者可以适量吃具有清热解毒、止咳化痰作用的食物，如银耳、百合、杏仁、银杏果、核桃、雪梨、川贝等，对治疗支气管炎有一定的辅助作用，同时还需要多喝温热水，能有效缓解症状。

2.药物治疗：支原体肺炎患者反复咳嗽通常可以通过药物治疗来缓解。

患者可以在医生的指导下服用阿奇霉素分散片、红霉素肠溶胶囊、硫酸特布他林片、氨茶碱片、羧甲司坦口服溶液、盐酸溴己新片等药物进行治疗，能有效缓解症状。

肺炎支原体lgM检测【原理】肺炎支原体快速检测卡可检测血清中的肺炎支原体lgM抗体。

患者的血清样品分别加入两个测试孔内，当样品沿膜扩散时，分别加入3滴抗人lgM碱性磷酸酶复合物、3滴洗液和2滴底物，5分钟后观察结果。

质控孔为质量控制，固定有人lgM，测试孔固定有肺炎支原体抗原。

阳性反应结果为蓝色，阴性结果为无色。

【材料】1、患者血清。

2、肺炎支原体lgM检测试剂盒，包括：（1）检测卡：单独锡纸包装，卡上固定有肺炎支原体抗原或人lgM（质控孔）。

（2）阳性质控液（1.7ml）：含有人抗肺炎支原体lgM的0.1%叠氮钠缓冲液。

（3）阴性质控液（1.7ml）：0.1%叠氮钠缓冲液。

（4）酶结合物：（11ml）：含有以碱性磷酸酶标记的抗人lgM单克隆抗体的0.1%叠氮钠缓冲液。

（5）洗液：9.5%（W/V）的呱基氢氯酸。

（6）底物（15ml）：含有5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸的0.1%叠氮钠的缓冲液。

（7）移液管。

【样本处理】血清样品2—8℃可保存3天，如果不能在此期间测试，-20℃保存，样品不宜反复冻融。

【操作】1、从冰箱中取出试剂盒，置室温平衡20分钟。

2、从锡纸袋中取出检测卡，作好标记。

3、用移液管滴加2滴血清到卡下端两个测试孔中。

4、22—25℃下孵育2分钟。

2分钟内血清应沿膜扩散至上端的测试孔中。

5、加入3滴酶结合物到下端两个测试孔中，22—25℃下孵育2分钟，酶结合物应沿膜扩散至上端的测试孔中。

6、加入3滴洗液到上端两个测试孔中，等待完全吸收。

7、滴加2滴底物试剂到上端两个测试孔，22—25℃下孵育5分钟，5分钟后立即观察反应结果。

【结果】根据上端两个反应孔的反应结果判断：阳性结果：上端两孔都出现蓝色。

提示肺炎支原体性lgM存在。

阴性结果：质控孔出现蓝色或轻微蓝色，测试孔无色或呈暗灰色，提示不存在肺炎支原体lgM或其浓度在检测下限之下。

无效反应：质控孔不出现蓝色。

产生无效反应的可能原因为：试剂或检测卡质量问题，操作不当，样品扩散不好，酶结合物严重污染，血清中含有过多脂质成分等。

肺炎支原体(MP)核酸扩增检测试剂盒说明书(PCR-荧光探针法)【名称】中文名：肺炎支原体(MP)核酸扩增检测试剂盒英文名：Myeoplasma Polymerase Chain Reaction(PCR)Diagnostic Kit汉语拼音：fei yan zhi yuan ti he suan kuo zeng jian ce shi ji he【目的】本试剂盒适用于检测呼吸道分泌物、咽拭子等标本中肺炎支原体(MP)DNA，适用于肺炎支原体感染的辅助诊断及其感染病人药物疗效监控和流行病学调查。

其检测结果仅供参考。

【原理】本试剂盒选取一对肺炎支原体(MP)特异性引物和一条特异性荧光探针，应用碱裂解法提取肺炎支原体(MP)DNA，后者在耐热DNA聚合酶（Taq酶）作用下，配以FQ-Buffer(内含Mg2+、Tris-HCl等)、四种核苷酸单体（dNTPs）等成分，通过PCR-荧光探针体外扩增法对肺炎支原体(MP)进行扩增，从而达到快速检测定量之目的。

【组成】名称数量规格核酸提取液B4管500μl/管Taq酶系1管80μl/管MP-PCR MIX1管960μl/管MP阳性质控品1管50μl/管(107Copies/ml)阴性质控品1管500μl/管【标本采集、保存和运输】1.适用标本：呼吸道分泌物、咽拭子等标本。

2.标本采集：呼吸道分泌物：使用一次性吸痰器，患儿取头部向上平卧位，将吸痰管缓缓插入咽喉部，调节负压，将气管深部分泌物(在雾化吸入后效果更好)缓缓吸入储存瓶中，反复数次，储存瓶中分泌物即为标本，标本应立即密闭送检。

咽拭子：用无菌棉试子取咽部分泌物(多数会有粘稠的痰液)，将咽拭子转至一盛有1-3ml生理盐水(或PBS)的5ml离心管中，密闭送检。

3.保存和运输：述处理后的标本可保存于-20℃，保存期为6个月，-70℃可长期保存。

运送应采用0℃冰壶。

【适用仪器】主要包括ABI GeneAmp PCR System7700、ABI GeneAmp PCR System7500、ABI PRISM7300、LightCycler 等毛细管的仪器，MJ Opticon系列或取得资格认证的定量PCR仪。

mp_IgM(支原体IgM抗体)的标准数值mpigm正常值一般是在0-1.1之间。

患者若超过 1.1，则表明支原体抗体IgM为阳性。

此时IgM抗体出现比较早，肺炎支原体感染后一周出现，3-4周达到高峰，然后明显下降。

因为肺炎支原体感染的潜伏期为2-3周，当患者出现症状时，IgM抗体已达到相对较高的水平。

若IgM抗体呈阳性，可作为急性肝炎的诊断指标。

建议患者若有不适应及时去医院进行治疗。

支原体IgM抗体检测是诊断肺炎支原体感染的一种重要方法。

当mp_IgM抗体阳性时，意味着患者可能感染了肺炎支原体。

在感染后的不同阶段，IgM抗体的水平会有所变化。

正常情况下，mpigm值应在0-1.1之间，若超过1.1，即可判定为阳性。

肺炎支原体感染后，IgM抗体会在一周左右出现，并在3-4周时达到高峰。

随后，抗体水平会逐渐下降。

这一变化趋势与肺炎支原体感染的潜伏期（2-3周）相吻合。

当患者出现症状时，IgM抗体已达到相对较高的水平。

因此，IgM抗体阳性可以作为肺炎支原体感染的一个诊断依据。

此外，IgM抗体阳性还可能与其他疾病有关，如急性肝炎。

在这种情况下，患者需要及时就医，接受专业治疗。

早期诊断和治疗对于改善疾病预后至关重要。

总之，了解mp_IgM抗体正常值及其在肺炎支原体感染过程中的变化，有助于临床诊断和治疗。

当mpigm值超过1.1时，应引起医生和患者的重视，及时进行相关检查，确诊病因并给予恰当的治疗。

同时，患者在出现不适症状时，也应尽快就医，以便得到及时的诊断和治疗。

这样才能降低并发症的风险，提高疾病治愈率。

汉恒生物SaveIt TM抗支原体试剂说明书产品简介：支原体（mycoplasma）：又称霉形体，为目前发现的最小的最简单的原核生物。

支原体细胞中唯一可见的细胞器是核糖体（支原体是原核细胞，原核细胞的细胞器只有核糖体）。

在细胞培养过程中应当定期做支原体检测，万一细胞已受支原体污染时，最佳的处理原则为将细胞高压灭菌后丢弃，以免污染其它洁净的细胞株。

但是若受污染的细胞比较珍贵，必须去除支原体污染，则可以通过混合使用抗生素以达到目的。

支原体没有细胞壁的，传统的抗生素一般对其无效。

汉恒生物推出的SaveIt TM支原体试剂能够在不影响细胞状态的前提下能够有效的清除支原体污染，从而使一些珍贵的细胞受到支原体污染之后能够得到挽救。

试剂包装清单以及储层条件：试剂名货号储存及运输条件规格有效期汉恒生物SaveIt TM抗支原体试剂-20°C保存，常温运输0.2ml 2年汉恒生物SaveIt TM抗支原体试剂-20°C保存，常温运输1ml 2年使用方法：汉恒生物SaveIt TM 抗支原体试剂在使用前确保瓶盖密封，解冻之室温，轻轻旋动混匀后用消毒酒精擦拭盖子后放入超净台。

按照1:1000的比例将SaveIt TM加入受污染的细胞的培养液中，轻轻晃动混匀后放入二氧化碳培养箱继续正常培养（注意尽量不要和其他正常的细胞一起操作，以免殃及其他细胞）。

注意事项：1. 如发现细胞状态变差，颗粒感增多，细胞表面不光滑，可使用汉恒生物SaveIt TM抗支原体试剂进行细胞抗支原体处理，处理后应进行支原体检测；2. 使用前请仔细阅读本试剂说明书，按照说明进行操作；3. 为了您的健康，实验操作请穿实验服和一次性手套；4. 汉恒生物SaveIt TM抗支原体试剂是汉恒生物自主研发产品，汉恒生物对SaveIt TM拥有专利知识产权。

肺炎支原体抗体IgM金标检测试剂盒作业指导书1目的建立肺炎支原体抗体IgM金标检测试剂盒作业指导书，确保生产过程处于受控状态。

2范围适用于肺炎支原体抗体IgM金标检测试剂盒相关工序的操作者。

3职责3.1操作人员应严格执行本作业指导书。

3.2生产主管负责监督检查。

3.3质检部质检员负责抽查执行情况。

4工作内容4.1生产工艺流程图※胶体金制备★胶体抗胶体单克隆体金反金应膜抗体检标检测制备进测记★肺炎支原体重组抗原的表达※NC膜处理兔抗鼠IgG抗体制备抗原检测NC膜检测★NC膜包被抗体检测质装产贴切量卡品分NC 检检板条包反测测应膜检测入库注：※关键过程★特殊过程4.2作业内容4.2.1胶体金制备（柠檬酸三钠还原法）氯金酸（HAuCl4）水溶液放入三角瓶内加热至沸腾→加热柠檬酸三钠溶液→混匀，搅拌煮沸10至15分钟→待胶体金溶液颜色由蓝→紫→红，冷却即可。

4.2.2金标抗体（反应膜）制备以0.1M碳酸钾溶液调胶体金溶液pH8.0-9.0→加入抗人IgM单抗，15分钟后加入聚乙二醇→离心，调532nm测OD值5～10，方阵滴定法选定标记工作浓度→用无纺布浸湿胶体金溶液，干燥、平整，检测。

4.2.3金标抗体反应膜质检将制备好的金标抗体反应膜按5‰比例抽检，与标准反应膜匹配组装成品，同时与标准成品作如下对照检测：a)符合率：样品稀释液、阴性质控血清无假阳性，阳性质控血清均呈阳性；b)反应强度：+/+++（阳性反应线/阴性反应线）；c)反应时间：30s～5min。

确认合格后才能转入下一工序。

4.2.4NC反应膜制备亲和性高分子硝酸纤维素膜→活化处理12小时→用水洗5次，每次20分钟→室温干燥后→取纯化Cpn重组MOPP抗原和兔鼠IgG抗体溶于10%CS中，浓度均为2mg/ml，用Cpn重组肺炎支原体抗原在NC膜上包被肺炎支原体抗体阳性检测线→用兔抗鼠IgG 抗体在NC膜上包被对照线→干燥后，用BS液封闭，H2O清洗后，室温干燥，备用。

痰液样本
a 痰液中加入4倍体积的生理盐水，用1ml的枪头反复吹打后置4摄氏度冰箱过夜
b 用枪头或吸管混匀后吸取1ml至1.5ml离心管中，12000rpm离心5分钟
c 去上清，沉淀中加入50ulDNA提取液充分混匀，100摄氏度恒温处理10+-1分钟
d 12000rpm离心5分钟，备用

咽拭子
a 加灭菌生理盐水1.5ml到无菌玻璃管，充分震荡混匀，挤干棉拭子，立即离心，或者4摄
氏度冰箱过夜
b 12000rpm离心5分钟，去上清，沉淀加灭菌生理盐水1ml混匀，12000rpm离心5分钟
以下步骤同上面c和d

PCR扩增
加入2ul的样本DNA或2ul的阳性定量参考品 注意不要进入蜡层，打在PCR反应管壁上，
8000rpm离心数秒。即可检测。