细菌基本形态和特殊结构观察

油镜的使用方法
油镜使用注意事项
• 油镜的识别：油镜头上都有标记；标有100×；镜 头前端有黑、白或红色的圆圈；刻有“III”或Oil等， 其入光孔径也较其他物镜小； • 油镜头使用后应立即用擦镜纸擦净镜头上的油。 注意在擦拭时，要求顺一个方向旋转擦，不能两 个方向来回擦； • 取送显微镜时，应右手持镜臂，左手托镜座，平 端于胸前。 • 不用时，将接物镜转开呈“八”字状，集光器下 降，罩上镜罩。对号归位。
葡萄球菌
链球菌
淋病奈瑟菌
大肠埃希菌
水弧菌
细菌的特殊结构
破伤风杆菌 示：芽孢
炭疽芽孢杆菌 示：芽孢
肺炎链球菌 示：荚膜
伤寒沙门菌 示：鞭毛
菌毛和鞭毛
霍 乱 弧 菌 鞭 毛
空 肠 弯 曲 菌 的 双 毛 菌 伤 寒 沙 门 菌 周 毛 菌
铜 绿 假 单 胞 菌 丛 毛 菌
油镜原理示意图
实验一：细菌形态结构观察
实验目的与实验用品
实验目的
• 1 掌握细菌的基本形态和特殊结构 • 2 掌握显微镜油镜的使用方法
实验用品
标本片：葡萄球菌，链球菌，大肠杆菌，霍乱弧 菌等； 特殊结构标本片：伤寒杆菌（鞭毛），产气荚膜 杆菌（荚膜），破伤风杆菌（芽孢），显微镜， 擦镜纸，酒精乙醚等。
细菌基本形态标本片
作业
• 认真书写实验报告。 • 仔细观察细菌的形态，排列及染色，绘图。 • 值日生做好值日
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ

微生物学实验二
细菌的染色和形态观察
（验证性实验）
微生物学教研室 郭棵棵
实验内容
上节课实验结果观察
显微镜油镜头的使用与保护
示教：细菌的基本形态与特殊结构的观察
操作：单染色、革兰染色 材料：葡萄球菌、大肠杆菌肉汤培养物 载玻片 2张 /人 1支/6人
教学目标
了解：
1.显微镜油镜镜头的使用与保护
革兰染色的原理：
等电点学说
化学学说 通透性学说
等电点学说：
革兰阳性菌的等电点（PI 2-3)比革 兰阴性菌的等电点(PI 4-5)低，在pH=7 的染液中，革兰阳性菌所带的负电荷比 阴性菌多，因而摄取碱性染料比较多且 牢固，不易被酒精脱色。
化学学说 ：
革兰阳性菌的细胞内含有某些特殊化 学物质，一般认为是核糖核酸镁盐，能与 染料和碘液结合成为稳定的化学物，不易 被酒精溶解脱色。
思考题
1. 革兰染色的过程如何？
2. 有时候革兰阳性菌被染成革兰阴性菌的色调，
这是为什么？
革兰染色的步骤
1：制片 3：固定 2：干燥 4：染色： 初染：结晶紫 1分钟
媒染：碘液
脱色：95%酒精
1分钟
半分钟
复染：稀释复红
半分钟
革兰染色结果判断
紫
球
碘
阳
酒
杆
红,
阴,
一
阳
一
紫
半
阴半Leabharlann 红脑 淋 卡，白 抗 胞 除外
革兰氏染色的意义：


将细菌分为革兰阳性、阴性两大类。
分析细菌的致病性。 指导临床用药。
革兰染色法过程
1、涂片：先在玻片上放一滴生理盐水，然后刮取菌 苔在盐水中乳化，涂成直径约为0.5cm 的膜。 2、干燥：在远离火焰上方微微烘干。 3、固定：火焰固定。 4、革兰染色过程： 初染：结晶紫 1分钟 媒染： 碘液 1分钟 脱色： 95%酒精 半分钟 复染： 稀释复红 半分钟 5、镜检：阳紫阴红 球阳杆阴

4.芽胞(endospore or spore)： 定义:细菌在一定环境条件下，胞浆脱水浓缩， 在菌体内形成的多层膜状结构的圆形或卵圆形 小体。 形成条件：缺乏营养物质，有害代谢产物堆 积 性质：是休眠状态，不是繁殖方式 功能 对细菌起保护作用：多层膜包绕，通透性降 低 芽孢死亡作为灭菌是否彻底的指标
革兰氏染色法（Gram Stain）
由丹麦医生Hans Christian Gram于1884年创立。
步骤：
涂片固定 结晶紫初染 碘液媒染 乙醇脱色
结果:
阳性菌——紫色 阴性菌——红色
番红复染
Figure
Figure 1 - A Gram stain of Gram + Staphylococcus cells.
普 通 光 学 显 微 镜 基 本 构 造
放大倍数=
物镜放大倍
数×目镜放
大倍数
低倍镜的操作
1. 置显微镜于固定的桌上。
2. 旋动转换器，将低倍镜移到镜筒下方与之对直。
3. 转动反光镜向着光源处，同时用眼对准目镜，仔细观 察，视野亮度均匀。 4. 将标本放在载物台上，使观察的目的物置于圆孔的正 中央。 5. 将粗调节器向下旋转，眼睛注视物镜，以防物镜和载 玻片相碰，当物镜的尖端距载玻片约0.5cm处时停止旋转。 6. 左眼向目镜观察，调节粗、细调节器直至目的物清晰
功能 ：与致病性有关：粘附性
3.菌毛(fimbria or pili)
定义：某些细菌表面遍布着比鞭毛 纤细、短而直的丝状物。只 有在电镜下才能观察。 化学成分：主要是蛋白质 菌毛的种类与作用： ① 普通菌毛：数量多，粘附于受体 上---致病性 ② 性菌毛：少，雄性菌 （F+) ，雌性 菌（F-)---接合；噬菌体吸附受体

地衣芽孢杆菌
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铜绿假单胞菌引起皮肤感染
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27
炭疽芽孢杆菌感染后引起的 病症
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破伤风梭状芽孢杆菌
通过伤口感染进入体内，毒素作 用于脊髓，引起肌肉强直性痉挛
20:25:08
29
螺形菌(spiral bacterium)
弧菌 螺菌 螺旋体
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霍乱弧菌
20:25:08
球菌(coccus)
葡萄球菌(streptococcus)
葡萄球菌是一群革兰氏阳性 球菌，因常堆聚成葡萄串状， 故名。
多数为非致病菌，少数可导 致疾病。
葡萄球菌是最常见的化脓性 球菌，是医院交叉感染的重要 来源。
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金黄色葡萄球菌常寄生于人和动物的皮肤、鼻 腔、咽喉、肠胃、痈、化脓疮口中，空气、污 水等环境中也无处不在。是常见的食源性致病 菌，在适当的条件下，能够产生肠毒素，引起 食物中毒，由其引起的食物中毒占食源性微生 物食物中毒事件的25%左右，成为仅次于沙门氏 菌和副溶血杆菌的第三大微生物致病菌。
细胞膜是在细胞壁里面的包围着细胞质的一层半透膜
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原核微生物的细胞膜结构与真 核细胞的相似，只是原核的细胞膜
一般不含有固醇。真核细胞膜含固 醇，使得细胞膜较坚韧。
原核细胞膜磷脂双分子层里面
不饱和脂肪酸含量远远比真核生
物多，使得细胞膜的流动性更强。
2.渗透压 细菌体内含有高浓度的营养物质和无机盐，其渗透压比其他生物细胞为
高；革蓝氏阳性菌的渗透压高达20 25个大气压，革蓝氏阴性菌较低，也 有5 6个大气压。