分子植物育种，2009年，第7卷，第4期，第811-816页Molecular Plant Breeding,2009,Vol.7,No.4,811-816新思路、新技术、新方法Novel Thinking &Technology玉米种子DNA 快速提取及杂交种纯度的快速鉴定谭君杨俊品*四川省农业科学院作物研究所,国家玉米改良中心成都分中心,成都,610066*通讯作者,****************摘要本研究用玉米杂交种渝单8号及其双亲的干种子作为材料，使用NaOH 溶液研磨玉米种子胚，提取基因组DNA ，并利用多重PCR 扩增进行玉米杂交种子的纯度鉴定。
结果表明，利用玉米种子快速提取方法获得的DNA 可进行正常的SSR 扩增，并且从20对玉米核心引物中筛选出了8对扩增谱带呈双亲互补型的引物，将其中3对引物YISSR 、phi072和phi299852组合起来扩增，扩增谱带清晰可辨，对渝单8号杂交种子的纯度进行准确鉴定。
初步表明利用多重PCR 技术鉴定玉米种子纯度是可行的，不仅简便快速，而且降低了检测成本。
关键词玉米种子,DNA 提取,SSR,纯度鉴定A Rapid Method of DNA Extraction from Maize Seeds and Purity Identifi-cation of Maize HybridsTan Jun Yang Junpin *Chengdu National Corn Improvement Sub-center,Crop Institute,Sichuan Academy of Agricultural Sciences,Chengdu,610066*Corresponding author,****************DOI:10.3969/mpb.007.000811Abstract A rapid DNA extraction method of genome DNA from maize seeds was established in this study.Dryseeds of Yudan8and its parents were adopted as testing materials,NaOH solution was used as an abrasive for breaking embryo,and multiplex PCR amplification was made use of purity identification of maize hybrids.Test re-sults showed that the resultant DNA was very suitable for SSR.And the core of corn from 20primers were screened out of eight pairs of parents were amplified bands primers complementary.Eight pairs of primers which could make the amplified bands of parents complementary were screened out of 20maize core primers,and three primers of which (YISSR,phi072and phi299852)were combined together to amplify and identify the purity of maize hybrids Yudan8.The amplified bands were clear and discernible.The results preliminarily indicated it is feasible,simple and effective,and expenditure-saving in maize hybrids identification.Keywords Maize seed,DNA extraction,SSR,Purity identification/doi/10.3969/mpb.007.000811基金项目：本研究由国家863计划(2006AA100103;2007AA10Z172-S)、国家科技支撑计划(2006BAD01A03;2006BAD13B03)、农业部转基因生物新品种培育重大专项(2008ZX08003-001)、北京农业育种基础研究创新平台项目(YZPT02-06)、四川省科技支撑计划(2008NZ0004)、四川省国际合作项目(2007HH021)、四川省农作物育种攻关项目和四川省农科院青年科技基金项目共同资助SSR 标记具有快速、准确，信息含量高、呈共显性遗传、易于分析和重复可靠等特点，因此，自1989年该技术产生以来，已被广泛应用于玉米基因定位和QTL 分析(刘福霞等,2005;李凌雨等,2005;杨华等,2005,科学通报,50(8):772-776)、玉米品种DNA 指纹图谱构建(吴渝生等,2003;王凤格等,2003;李晓辉等,2005)、自交系遗传多样性分析(李新海等,2003;王凤格等,2005;聂永心等,2005;肖木辑等,2006;Yao et al.,2007;陈发波等,2007)和分子标记辅助育种等(田清震等,2004;杨华等,2005,科学通报,50(8):分子植物育种Molecular Plant Breeding772-776)。
玉米种子形态要巧鉴
玉米种子形态要巧鉴：
1.试验样品
随机从净度分析的样品中数400粒种子，鉴定时必须设置重复，每个重复不超过100粒种子。
2.鉴定的方法
根据种子的形态，必要时借助放大镜进行逐粒的检查。
必要时备有标准的样品或者鉴定的图片等相关的资料；
3.鉴定的标准：
鉴定玉米种子可以根据粒型（马齿型，半马齿型、硬粒型）、粒色（白色、黄色、红色、紫色），籽粒的顶部性状（长方，长圆，圆）、顶部颜色以及粉质的多少、胚的大小、性状，胚的部的皱折的有无，多少，花丝的遗迹的位置与明显的程度，稃色籽粒上棱角的有无以及明显的程度等。
幼苗鉴定法
在适宜的发育条件下，让幼苗发育到一定的阶段，根据幼苗的形态特征区分不同的品种，或者在一定的逆境条件下，根据品种对逆境的反映来鉴定不同的品种。
1.试验样品
随机数取净度分析后的净种子400粒，设置重复，每个重复不超过00粒。
2.鉴定方法
将种子置于沙床上，（加水量为沙的持水量的60%）在25度的光照培养箱中培养14天，也可以在室温透光的条件下培养。
3.鉴定标准：
玉米的芽鞘颜色是可遗传的质量性状，可以据此来区分不同的品种。
芽鞘颜于芽鞘颜色不同的品种。
感官识别杂交种子质量
核心提示：1、杂交水稻：新稻种有光泽，颜色发青，有清香味；陈稻种色泽发暗，颜色发黄，有的会有霉味。
水分低而干燥的种子，握在手里有哗哗的响声，牙咬发1、杂交水稻：新稻种有光泽，颜色发青，有清香味；陈稻种色泽发暗，颜色发黄，有的会有霉味。
水分低而干燥的种子，握在手里有哗哗的响声，牙咬发出的声音响亮，种子断面光滑。
杂交水稻种的颖壳中部有一圆圆的小黑点，是种子在扬花授粉期间留下的柱头遗迹，这是真种子的一种标志。
2、杂交玉米：质量好的种子，籽粒均匀一致，饱满度、整齐度好。
同一品种，粒型要一致。
玉米品种的粒型主要有硬质型、半马齿型、马齿型。
硬质型玉米的籽粒顶端不凹陷，如苏玉10号；半马齿型的玉米籽粒的顶端略微凹陷，如郑单958、浚单20；马齿型的玉米籽粒凹陷最深，如济单7号。
粒色要一致，玉米种子颜色有黄色、淡黄色、橘红色、紫色、白色、黄白相间等；如郑单958的颜色是淡黄的，没有光泽；而浚单20籽粒的颜色是黄色的，大华玉2号籽粒的颜色是橘红色的，鲁单981的籽粒是黄色和白色相间的，它们的光泽度都很好，很亮。
种子胚最下端（玉米嘴子），常带有从玉米轴上脱落下来的鳞片，不同的轴色具有不同颜色的鳞片，也是区别玉米品种的依据。
如郑单958、浚单20是白轴的，籽粒上常带有白色的鳞片，大华玉2号、济单7号是红轴的，籽粒上常带有红色的鳞片，特别是新收获的籽粒上鳞片较多。
