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Klf10 is upregulated by NGF and attenuates cell cycle progression in the cell line PC12

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Tieg1/Klf10isUpregulatedbyNGFand

AttenuatesCellCycleProgressioninthe

PheochromocytomaCellLinePC12

GabrieleSpittau,1,2NicoleHappel,3MaikBehrendt,2T.IvoChao,2

KerstinKrieglstein,1,2andBjo¨rnSpittau1,2*

1DepartmentofMolecularEmbryology,InstituteofAnatomy&CellBiology,UniversityofFreiburg,Freiburg,Germany2DepartmentofNeuroanatomy,CenterofAnatomy,UniversityofGo¨ttingen,Go¨ttingen,Germany3InstituteofBiochemistryandMolecularCellBiology,UniversityofGo¨ttingen,Go¨ttingen,Germany

ThetranscriptionfactorTieg1/Klf10belongstoafamily

ofSp1/Klfproteinsthathavebeenshowntoplayimpor-

tantrolesduringdevelopmentandmaintenanceofvari-

oustissuesandcelltypes.UpregulationofTieg1/Klf10

hasbeenreportedforTGF-b,BMP2,BMP4,ActivinA

andGDNFasmembersoftheTGF-bsuperfamily.More-

over,estrogen,thecytostaticdrugshomoharringtonine

andvelcadeaswellasnitricoxidearealsoabletotrig-

gerTieg1/Klf10transcription.Recentstudiessuggesta

roleformembersoftheneurotrophinfamilyinregulating

Tieg1/Klf10transcriptionalupregulation.Usingsemi-

quantitativeRT-PCRandimmunoblotting,wepresent

datadescribingthatnervegrowthfactor(NGF)regulates

theexpressionofTieg1/Klf10inthepheochromocytoma

celllinePC12inaTrkA-dependentmanner.Moreover,

weprovideevidencefortheexistenceofNGF-respon-

siveelementsinthe50-regulatoryregionofTieg1/Klf10

thatcontainbindingsitesforthetranscriptionfactors

Sp1andCREB.AftertreatmentwithNGFPC12cells

exitthecellcycleandstarttodifferentiatetowardsa

neuron-likephenotypeindicatedbyneuriteoutgrowth.

Usingflowcytometryanddifferentiationassayswedem-

onstratethatTieg1/Klf10reducescellcycleprogression

inPC12cellsbutfailstopromotetheirterminaldifferen-

tiation.Together,ourresultsidentifyTieg1/Klf10asa

newNGFtargetgeneandsubstantiateitsanti-prolifera-

tivefunctionintheNGFsignalingpathwayinPC12

cells.VC2010Wiley-Liss,Inc.

Keywords:NGF;cellcycle;Tieg1/Klf10;PC12;

differentiation

TIEG1/KLF10wasoriginallyisolatedasanearly

responsegenethatisrapidlyupregulatedaftertreatment

ofhumanosteoblastcellswithTransformingGrowth

Factorbeta1(TGF-b1)(Subramaniametal.,1995).

Cooketal.(1998)identifiedTIEG2/KLF11which

shares91%homologywithTIEG1/KLF10withinthe

zincfingerregionand44%homologyintheN-terminal

region.Additionally,Tieg1/Klf10

and

Tieg3/Klf11

have

beencharacterizedasmurineisoforms(Yajimaetal.,1997;Wangetal.,2004).AllTiegproteinssharea

highlyconservedC2H2zincfingerDNAbindingdo-

mainattheC-terminalend(ChrismanandTindall,

2003;Wangetal.,2004)andthreerepressiondomains

attheN-terminalend,thelatterconsistentlyreferredto

asR1,R2andR3(Cooketal.,1999;Wangetal.,

2004).Thesestructuralandfunctionalfeaturesdefine

themasanindependentsubfamilyofSp1/Klftranscrip-

tionfactors(Kaczynskietal.,2003).Likethefounding

memberSp1,Tiegproteinsbindtocis-regulatoryGC-

richpromotersequences(Cooketal.,1998;Johnsen

etal.,2002)andareabletoactastranscriptionalrepress-

ors(Yajimaetal.,1997;Cooketal.,1998;Gohlaetal.,

2008)aswellasactivators(Ouetal.,2004;Notietal.,

2004).AlthoughoriginallyintroducedasTGF-b-induci-

bleearlygenes,thetranscriptionalupregulationofTieg-

encodinggeneshasbeendescribedforavarietyof

factorsandtreatmentparadigms.Forinstance,Tieg1/

Klf10upregulationhasbeenreportedforBMP2,BMP4

(Hefferanetal.,2000;Alvares-Rodriguezetal.,2007),

ActivinA(Hefferanetal.,2000)andGDNF(Yajima

etal.,1997)asmembersoftheTGF-bsuperfamily.

Moreover,estrogen(Tauetal.,1998),thecytostatic

drugshomoharringtonineandvelcade(Jinetal.,2007)

aswellasnitricoxide(Mitsumotoetal.,2003)have

beenshowntoactivatethetranscriptionofTieg1/Klf10.

Recently,Wahabetal.(2005)reportedontheTrkA-

dependentupregulationofTieg1/Klf10aftertreatment

ofmesangialcellswithCTGF.Thisfindingtogether

withstudiesshowingBDNF-mediatedTieg1/Klf10

Contractgrantsponsor:DeutscheForschungsgemeinschaft;Contractgrantnumber:Kr1477/11-2.

*Correspondenceto:Dr.Bjo¨rnSpittau,DepartmentofMolecularEm-bryology,InstituteofAnatomyandCellBiology,UniversityofFreiburg,Albertstrabe17,79104Freiburg,Germany.E-mail:bjoern.spittau@anat.uni-freiburg.de

Received20July2009;Revised16November2009;Accepted3December2009

Publishedonline12February2010inWileyInterScience(www.interscience.wiley.com).DOI:10.1002/jnr.22364JournalofNeuroscienceResearch88:2017–2025(2010)

'2010Wiley-Liss,Inc.顺式调控

系膜

亚型induction(Wibrandetal.,2006)giverisetotheconclu-

sionthatTieg1/Klf10mightbeatargetgeneofneuro-

trophins.Indeed,averyrecentlyreportbyDijkmansand

colleagues(2008)identifiedTieg1/Klf10asanNGF-re-

sponsiveimmediate-earlygeneinPC12cells.Neurotro-

phinssignalviatyrosinekinasereceptorsTrkA,TrkBor

TrkCorthelowaffinityreceptorp75NTR(Chao,2003).

UponligandbindingTrksformhomodimersand

undergoautophosphorylation.Thisreceptorautophos-

phorylationresultsinactivationofseveraldifferentsig-

nalingpathways,involvingsmallG-proteins,mitogen

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Jasplakinolide通过稳定细胞骨架调控内皮细胞功能

Jasplakinolide通过稳定细胞骨架调控内皮细胞功能

Jasplakinolide通过稳定细胞骨架调控内皮细胞功能

靖旭;孙金隆;张晓芸;唐可欣;尹青令;吴海燕;王金红;王济潍;成敏

【摘 要】目的 研究细胞骨架稳定剂Jasplakinolide(JAS)对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)增殖、黏附、迁移、体外成血管能力等生物学功能的影响.方法 JAS(100 nmol·L-1)干预不同时间后,荧光显微镜观察HUVECs细胞骨架的改变.采用CCK-8法、黏附能力测定实验、改良的Boyden小室及Matrigel法分别检测其增殖、黏附、迁移及体外血管形成等功能性指标.结果 JAS对HUVECs细胞骨架的作用具有时间依赖性:100 nmol·L-1 JAS处理1 h后细胞骨架明显变粗,荧光强度增加.而作用24 h后,细胞骨架聚集为团块状.JAS(100 nmol·L-1)可明显增加HUVECs的黏附、迁移及体外成血管能力,但对HUVECs增殖无明显影响.结论 JAS可通过稳定细胞骨架影响HUVECs的生物学特性.

【期刊名称】《中国药理学通报》

【年(卷),期】2013(029)008

【总页数】5页(P1079-1083)

【关键词】内皮细胞;细胞骨架;Jasplakinolide;增殖;黏附;迁移;成血管

【作 者】靖旭;孙金隆;张晓芸;唐可欣;尹青令;吴海燕;王金红;王济潍;成敏

【作者单位】潍坊医学院,麻醉学系,山东,潍坊,261053;潍坊医学院医学研究实验中心,山东,潍坊,261053;潍坊医学院医学研究实验中心,山东,潍坊,261053;潍坊医学院,麻醉学系,山东,潍坊,261053;潍坊医学院医学研究实验中心,山东,潍坊,261053;潍坊医学院,麻醉学系,山东,潍坊,261053;潍坊医学院医学研究实验中心,山东,潍坊,261053;山东大学医学院,山东,济南,250012;潍坊医学院医学研究实验中心,山东,潍坊,261053

锌指蛋白KLF12抑制人子宫内膜间质细胞体外蜕膜化过程中胰岛素样生长因子结合蛋白-1表达

锌指蛋白KLF12抑制人子宫内膜间质细胞体外蜕膜化过程中胰岛素样生长因子结合蛋白-1表达

锌指蛋白KLF12抑制人子宫内膜间质细胞体外蜕膜化过程中胰岛素样生长因子结合蛋白-1表达

金晓艳;蒋玥;山惠枝;张慧;颜桂军;孙海翔

【期刊名称】《生殖医学杂志》

【年(卷),期】2014(23)5

【摘 要】目的 人子宫内膜间质细胞蜕膜化标志蛋白胰岛素样生长因子结合蛋白-1

(insulin-like growth factor binding protein-1,IGFBP-1)参与调控月经周期、排卵、蜕膜化、胚胎种植以及胎儿生长等生理过程,本研究旨在探索锌指蛋白KLF12对人子宫内膜间质细胞体外蜕膜化过程中IGFBP 1表达的影响.方法 制备Ad Flag

KLF12重组腺病毒,通过荧光定量聚合酶链式反应(PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)结合重组腺病毒介导的KLF12过表达实验,阐述人子宫内膜间质细胞体外蜕膜化过程中KLF12对IGFBP 1表达调控作用.结果 成功获得滴度为2×1011 ifu/ml的重组KLF12腺病毒,该腺病毒可在人子宫内膜间质细胞中高表达Flag KLF12融合蛋白;体外分离培养的人子宫内膜间质细胞经8 Br cAMP和醋酸甲羟孕酮(medroxy

progesterone acetate,MPA)联合诱导蜕膜化后,KLF12的mRNA表达随着诱导时间延长逐渐降低,72 h降低最明显,较未刺激降低约70％;过表达KLF12显著抑制8 Br cAMP和MPA诱导的人子宫内膜间质细胞中IGFBP 1 mRNA的表达,并以时间依赖的方式明显抑制IGFBP 1的分泌(P＜0.01);过表达KLF12明显抑制人子宫内膜间质细胞体外蜕膜化过程中IGFBP 1启动子转录活性.结论 锌指蛋白KLF12抑制人子宫内膜间质细胞体外蜕膜化过程中IGFBP 1的表达与分泌.

【总页数】8页(P393-400) 【作 者】金晓艳;蒋玥;山惠枝;张慧;颜桂军;孙海翔

【作者单位】南京医科大学鼓楼临床医学院,南京市210029;南京医科大学鼓楼临床医学院,南京市210029;南京医科大学鼓楼临床医学院,南京市210029;南京医科大学鼓楼临床医学院,南京市210029;南京大学医学院附属鼓楼医院生殖医学中心,南京市210008;南京医科大学鼓楼临床医学院,南京市210029;南京大学医学院附属鼓楼医院生殖医学中心,南京市210008

抗衰老蛋白Klotho_对急性肾损伤中氧化应激反应的抑制作用研究进展

抗衰老蛋白Klotho_对急性肾损伤中氧化应激反应的抑制作用研究进展

山东医药2023 年第 63 卷第 35 期

抗衰老蛋白Klotho对急性肾损伤中氧化应激

反应的抑制作用研究进展

高丽梅1，2，张紫怡1，2，覃志成1

1 山西医科大学第五临床医学院肾内科，太原030000；2 山西省肾脏病重点实验室

摘要：Klotho是近年来发现的一种抗衰老基因，主要表达于肾脏，具有抗氧化、抗凋亡、抗炎等多重生物学效应。

急性肾损伤（AKI）是临床常见疾病，发病急且致死率高，极易进展为慢性肾脏病，甚至走向肾衰竭。氧化应激是AKI

发病机制中的重要一环，而Klotho可通过多种信号转导通路减轻氧化应激，保护脏器免受损伤或延缓疾病进展，在

不同病因导致AKI发生的过程中均具有肾脏保护作用。研究显示，Klotho可通过激活叉头转录因子（FoxOs）、核因

子红系2相关因子2（Nrf2）、环磷酸腺苷/蛋白激酶A（cAMP/PKA）信号通路、减轻内质网应激、减轻线粒体功能障

碍、促进促红细胞生成素受体（EPOR）表达等抑制氧化应激反应，从而减轻AKI。

关键词：Klotho；氧化应激；叉头转录因子、核因子红系2相关因子2、环磷酸腺苷/蛋白激酶A；

内质网应激；线粒体功能障碍；急性肾损伤

doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2023.35.027

中图分类号：R692 文献标志码：A 文章编号：1002-266X（2023）35-0108-04

急性肾损伤（AKI）是一组以急性肾功能减退为

特征的临床综合征，具有高发病率、高病死率，是全

球关注的卫生健康问题之一。研究显示，氧化应激

及其全身效应在AKI的发生发展中起着关键作

用［1］。因此，找到一种针对肾细胞氧化应激的调节

剂，对预防或控制AKI的发生发展具有重要意义。Klotho是1997年由KURO-O等［2］研究自发性高血压小鼠模型时发现的一种基因，当该基因缺陷时，实验

小鼠会表现出生长缓慢、寿命缩短、血管钙化、骨质

疏松等类似人类早衰的特征，其编码的蛋白为Klotho蛋白，分为膜型和分泌型两种。膜型 Klotho

细胞功能调控的重要转录因子TFEB

细胞功能调控的重要转录因子TFEB

陈太琪, 等. 细胞功能调控的重要转录因子TFEB· 53 ·

收稿日期：2012-05-04

第一作者：陈太琪(1989-)，男，硕士生，

E-mail: taiqichen123@*通信作者：刘宁(1982-)，女，博士，助理研究员，E-mail: ningliu9@生命的化学, 2013, 33(1): 53-57

细胞功能调控的重要转录因子TFEB

陈太琪1，姜 丛1，王 平1，刘 宁1,2*

(1华东师范大学生命科学学院生命医学研究所，上海 200241；2杭州师范大学医学部衰老研究所，杭州 310036)

摘要：转录因子TFEB (transcription factor EB)属于亮氨酸拉链bHLH-LZ (basic-helix-loop-helix leucine-zipper)类转录因子中的MiTF/TFE (microphthalmia-transcription factor E)家族成员，参与调控许多重要

的细胞生理过程，例如胎盘血管新生、肾癌的发生等。最近研究表明，TFEB能通过调控细胞自噬和

溶酶体相关的基因表达而调控细胞自噬以及溶酶体功能。因此，对于TFEB的生物学功能及其相关调

控机制的研究，将为进一步阐释其生理病理发生过程及相关疾病的治疗提供重要的线索及理论依据。

关键词：转录因子TFEB；自噬；溶酶体

Function and regulation of the transcription factor TFEB

CHEN Taiqi1, JIANG Cong1, WANG Ping1, LIU Ning1,2*

(1The Institute of Biomedical Sciences and School of Life Sciences, East China Normal University, Shanghai 200241, China; 2Institute of Aging Research, Hangzhou Normal University School of Medicine, Hangzhou, 310036, China)