人抗内因子抗体(IFA)酶联免疫(ELISA)分析试剂盒使用说明书
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ELISA试剂盒说明书,人骨髓抑制因子1elisa试剂盒ELISA试剂盒说明书,人骨髓抑制因子1elisa试剂盒供应商:上海樊克生物有限公司ELISA试剂盒规格:(1) 规格:96T 可以测90个样,5个标准孔,1个空白孔(2)规格:48T 可以测42个样,5个标准孔,1个空白孔保存条件:2-8℃低温保存保质期:6个月,所有试剂盒均提供最新批次。
试剂盒成分:酶标板,试剂,标准品等。
ELISA试剂盒说明书,人骨髓抑制因子1elisa试剂盒试剂准备试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。
1. 标准品复溶:试剂盒提供6管标准品,每管已标定浓度,并且冻干。
实验前在每个标准品管中加入0.5mL样本稀释液,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动助其溶解,使其恢复为每个标准品管身标注的浓度。
2. 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
试剂盒性能:1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990以上。
2.批内与批见应分别小于9%和11%ELISA试剂盒说明书,人骨髓抑制因子1elisa试剂盒试剂的准备:按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂。
ELISA中用的蒸馏水或去离子水,包括用于洗涤的,应为新鲜的和高质量的。
自配的缓冲液应用pH计测量较正。
从冰箱中取出的试验用试剂应待温度与室温平衡后使用。
试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保存。
ELISA试剂盒的优势:全面——混合 8 种不同的常见抗原,对自身免疫性疾病进行全面筛查。
快速——检测时间短( ~2 小时),确诊时间更早准确——ELISA 检测方法,灵敏度高,特异性强,适用性好。
质优——美国技术开发,高品质及高可靠性的分析性能。
价低——国内自生产,符合国内实情,降低生产成本。
ELISA试剂盒说明书,人骨髓抑制因子1elisa试剂盒Matters needing attention:1 kit from the cold storage environment should be taken in the room temperature balance 15-30 minutes after the use of the enzyme labeled package was not used after the plate Kaifeng, the board should be loaded into the sealed bag.2 washing buffer will crystallization, heated the water solubilization dilution, washing does not affect the results.3 each step sample should be used, and often to check its accuracy, in order to avoid the test error. A sample within 5 mins, ifthenumberofsampleismuch, recommend to use volley like.4 please each simultaneous determination of standard curve, it is best to do multiple holes. Such as samples to be measured matter content is too high (the sample od high standard product the first hole hole OD), please first sample dilution multiples (n times) were measured and calculated please then multiplied by the total dilution ratio (n * * 5).5 closure plate membrane only a one-time use, to avoid cross contamination.The 6 substrate stored.7 in strict accordance with the instructions of the operation, determine the test results to the microtiter plate reader as a standard.8 of all samples, washing liquid and various waste materials are handled should be transmitted.9 different batches of this reagent can not be mixed.10 and English instructions are different, the English specification shall prevai ELISA试剂盒说明书,人骨髓抑制因子1elisa试剂盒ELISA试剂盒说明书,人骨髓抑制因子1elisa试剂盒具有以下优点:1)快速:仅需传统夹心法ELISA 1/3的操作时间,1小时即可完成整个试验流程;2)简单:只需1个洗涤步骤;3)灵活:可单独或同时检测总蛋白及磷酸化蛋白,可在同一板上检测不同的靶蛋白;4)灵敏:达到甚至超过行业标准,且结果一致性良好;5)兼容:常规比色法检测,实验室常规酶标仪读数;ELISA试剂盒说明书,人骨髓抑制因子1elisa试剂盒产品特点:1.专一性强,灵敏度高2.免费提供产品最新报价,实验原理,产品用途及中英文说明书。
产品信息和操作指南Human IgE预包被 ELISA kit Cat# : DKW12-1820-048 / DKW12-1820-096本试剂盒专用于科研,而非用于诊断Human IgEDKW12-1820目录产品简介 (1)知识背景 (1)试剂盒提供的试剂 (2)需要实验者自行准备的试剂与仪器 (2)注意事项 (3)试剂的配制 (5)操作过程 (7)结果分析 (9)试剂盒的保存 (9)操作步骤一览表 (10)参考文献 (11)ELISA测定中可能会出现的问题及解决方法 (12)预包被ELISA 试剂盒系列产品 (15)1、产品简介:达优®人IgE ELISA试剂盒是通过酶联免疫吸附技术,体外定量检测人血清、血浆、缓冲液或细胞培养液中的IgE,可同时检测天然的和重组的IgE。
本试剂盒为预包被板,整个过程孵育时间不超过4小时,洗涤9次。
本试剂盒专用于科研,而非用于诊断。
使用前请仔细阅读说明书并检查试剂盒组分,若有任何疑问请与达科为生物工程有限公司联系,E-mail:*************.检测范围:32-0.5 ng/mL灵敏度:0.1ng/mL重复性:板内、板间变异系数均<10%。
2、知识背景:抗体根据抗原性和抗体重链分为IgG、IgA、IgM、IgE和IgD 五种。
IgE是介导I型变态反应的重要抗体,在支气管哮喘、鼻炎、食物过敏、药物、病原体等特应性疾病的发病过程中发挥着关键作用。
而抗IgE单克隆抗体可以与血液中IgE结合,降低血清总IgE水平,并下调肥大细胞、嗜碱性粒细胞表面的IgE高亲和力受体FcεRI的表达,从而抑制了IgE介导的免疫反应(1-6)。
3、试剂盒提供的试剂:试剂规格配制Cytokine standard 2/1瓶* 干粉状,按瓶上说明操作Biotinylated antibody 2/1瓶* 1:100用Dilution buffer R(1×)稀释Streptavidin-HRP 2/1瓶* 1:100用Dilution buffer R(1×)稀释Dilution buffer R(1×) 3/2瓶* 即用型Washing buffer(50×)1瓶 150∶用蒸馏水稀释TMB 1瓶即用型Stop solution 1瓶即用型Precoated ELISA plate 8×12或8×6*即用型封板膜 2/1张* 即用型说明书1份*:96/48 Tests4、需要实验者自行准备的试剂与仪器:1.酶标仪(建议参考仪器使用说明提前预热)2.微量加液器及吸头:P10,P50,P100,P200,P1000 3.蒸馏水或去离子水4.全新滤纸5.旋涡振荡器和磁力搅拌器5、注意事项:1.试剂应按瓶上标签说明储存,使用前室温平衡20-30分钟。
人chemerin酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用预期应用ELISA法定量测定人血清、血浆或其它相关液体中chemerin含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中chemerin水平。
用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入chemerin抗原、生物素化的抗人chemerin抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的chemerin呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板:一块(96孔)2.标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为20,000pg/ml,做系列倍比稀释后,分别稀释10,000pg/ml,5,000pg/ml,2,500pg/ml,1,250pg/ml,625pg/ml,312.5pg/ml,156pg/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0pg/ml,临用前15分钟内配制。
如配制10,000pg/ml标准品:取0.5ml20,000pg/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3.样品稀释液:1×20ml/瓶。
4.检测稀释液A:1×10ml/瓶。
5.检测稀释液B:1×10ml/瓶。
6.检测溶液A:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液A1:100稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100ul),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。
如1ul检测溶液A加99ul检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
7.检测溶液B:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B1:100稀释。
2022年修订第一版(本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断!)产品货号:E-EL-H0064c产品规格:96T/48T/24T/96T*5Elabscience 人内皮素1(ET-1)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书Human ET-1(Endothelin 1) ELISA Kit使用前请仔细阅读说明书。
如果有任何问题,请通过以下方式联系我们:销售部电话技术部电话************电子邮箱(销售)********************电子邮箱(技术)**************************网址:具体保质期请见试剂盒外包装标签。
请在保质期内使用试剂盒。
联系时请提供产品批号(见试剂盒标签),以便我们更高效地为您服务。
Copyright ©2021-2022 Elabscience Biotechnology Co.,Ltd. All Rights Reserved目录用途 (3)基本性能 (3)检测原理 (3)试剂盒组成及保存 (4)试验所需自备物品 (5)样品收集方法 (5)注意事项 (6)■ 试剂盒注意事项 (6)■ 样品注意事项 (6)样本稀释方案 (6)检测前准备工作 (7)操作步骤 (8)结果判断 (10)技术资源 (10)典型数据 (10)性能 (11)■ 精密度 (11)■ 回收率 (11)■ 线性 (11)声明 (12)Intended use (13)Character (13)Test principle (13)Kit components & Storage (14)Other supplies required (15)Sample collection (15)Note (16)■ Note for kit (16)■ Note for sample (16)Dilution Method (17)Reagent preparation (17)Assay procedure (18)Calculation of results (20)Technical resources (20)Typical data (20)Performance (21)■ Precision (21)■ Recovery (21)■ Linearity (21)Declaration (22)用途该试剂盒用于体外定量检测人 血清、血浆或其他相关生物液体中ET-1浓度。
人α干扰素(IFN-α)酶联免疫分析试剂盒使用方法检测范围:96T1μg/L -32μg/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中α干扰素(IFN-α)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人α干扰素(IFN-α)水平。
用纯化的人α干扰素(IFN-α)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入α干扰素(IFN-α),再与HRP标记的α干扰素(IFN-α)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的α干扰素(IFN-α)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人α干扰素(IFN-α)浓度。
试剂盒组成1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
附件3 免疫荧光法(IFA)检测人血清IgG抗体试验材料:(1)抗原片:家鼠型和姬鼠型汉坦病毒标准毒株感染Vero E6或Vero细胞制备,低温干燥保存;(2)阳、阴性对照:单克隆抗体或确诊阳性患者恢复期血清(阳性对照)、阴性血清;(3)羊抗人(或兔抗人)IgG荧光抗体;(4)常用稀释液:pH7.2~7.4PBS、伊文思兰等;(5)荧光显微镜。
检测步骤:(1)用pH7.4,0.02mol/L PBS稀释待检血清,从1:20开始做2倍或4倍连续稀释至需要的稀释度。
(2)取出抗原片,用蒸馏水漂洗后,冷风吹干。
(3)用加样器依次从高稀释度到低稀释度逐个加入已稀释的待检血清,加入量以覆盖细胞抗原面为准(若为双份血清,最好上排为急性期血清,下排为恢复期血清),在37℃水浴箱湿盒孵育30~40分钟(每次试验同时设阳、阴性对照)。
(4)用PBS震荡洗涤3次,每次5分钟,再用蒸馏水洗涤1次脱盐,冷风吹干。
(5)用含1:3万的伊文思兰PBS按工作浓度稀释荧光结合物,滴加各孔(以覆盖细胞抗原面为准),在37 ℃水浴箱湿盒孵育30分钟,然后同(4)洗涤、漂洗、吹干。
(6)荧光显微镜观察结果。
结果判断:细胞内病毒特异性荧光为黄绿色颗粒,分布在感染细胞的胞浆内。
根据特异性荧光颗粒多少、荧光亮度、阳性细胞在细胞总数中所占比例,可将免疫荧光反应大致区分为1~4个“+”。
可参考阳性细胞数:<25%为“+”,25%~50%为“++”,51%~75%为“+++”,>75%为“++++”;无特异性荧光者为“—”(阴性)。
检测抗体滴度时,以能观察到明显特异性荧光反应(>“+”)最高血清稀释度的倒数表示。
意义:阳性结果,表明曾受到汉坦病毒感染,>1:20有诊断参考意义;恢复期血清抗体滴度比急性期抗体滴度有4倍或4倍以上升高则可确诊。
人转化生长因子α(TGF—α)ELISA试剂盒操作步骤产品名称:人转化生长因子α(TGFα)ELISA试剂盒英文名称:TGFα ELISA Kit产品规格:48T/96T保管条件:28℃低温保管检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本。
例如适合检测包含血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培育上清、组织匀浆等标本.需要而未供给。
试剂配制:1、酶联板(Assay plate ):一块(96孔或者48孔)。
2、标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3、样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素标记抗体稀释液(BiotinantibodyDiluent):1×10ml/瓶。
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液(HRPavidinDiluent):1×10ml/瓶。
6、生物素标记抗体(Biotinantibody):1×120μl/瓶(1:100)7、辣根过氧化物酶标记亲和素(HRPavidin):1×120μl/瓶(1:100)8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、停止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
注意事项:1. TGFα 人转化生长因子αELISA检测试剂盒使用前请保管在28℃。
复溶后的标准品若未用完,请废弃。
2. 微量试剂运输中颠簸和可能的倒置,会使液体沾到管壁或瓶盖。
因此使用前请1000转/分别心1分钟,以使附着管壁或瓶盖的液体沉积到管底。
3. 从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶,属于正常现象,微加热至40℃使结晶完wan全溶解后再配制洗涤液。
(加热温度不要超出50℃)使用时洗涤液应为室温。
4. 不同批号的试剂盒组份躲避混用(洗涤液和反应停止液除外)。
人IFN-γ检测试剂盒(ELISA法)说明书【产品名称】人IFN-γ检测试剂盒(ELISA法)【包装规格】96 T/盒【预期用途】本试剂仅供科研使用,不适合用于临床检测。
用于测定人血清、人血浆、细胞上清液及相关液体样本中IFN-γ的含量。
【IFN-γ简介】20世纪30年代,许多病毒学家在研究两种病毒感染同一宿主细胞时,发现普遍存在两种病毒相互拮抗的现象,由此产生了病毒间干扰现象的概念。
1957年发现细胞与病毒一起培养后能产生一种可溶性因子,该因子能“干扰”病毒感染新的细胞,此因子被称为“干扰素”。
此后证明干扰素(interferon,IFN)是由一族分泌蛋白质组成,对同种病毒具有广谱抗病毒活性,它存在于各种脊椎动物体内,平时细胞内含量很低,经病毒或其它干扰素诱导剂诱导后产量可以提高。
IFN蛋白家族基于它们的基因序列、染色体定位和受体特异性分为3型,即I型、II型和III型干扰素。
I型包括IFN-α、β、ω、ε、κ、δ、τ、ζ等;II型干扰素由单基因家族IFN-γ构成,又称为免疫干扰素;III型干扰素是一种新发现的细胞因子,与I型干扰素关系密切,称为IFN-λ。
γ-干扰素主要是由抗原、有丝分裂素等刺激、活化的CD4+Th1、CD8+T细胞及NK细胞所分泌的一类可溶性糖蛋白。
抗原、T细胞促分裂素(PHA、ConA)、细胞因子(IL-2、IL-12、IL-18、bFGF、PDGF、EGF)、葡萄球菌肠毒素B,均会诱导γ-干扰素的合成。
【检验原理】人IFN-γ检测试剂盒的检验原理是双抗体夹心ELISA(酶联免疫吸附试验)法,预先用抗人IFN-γ捕获抗体包被微孔板,加样时,标准品或样本和检测抗体(HRP标记的抗人IFN-γ抗体)同时加入微孔板中,人IFN-γ上的2个抗原决定簇分别与捕获抗体和检测抗体结合,形成“捕获抗体-人IFN-γ-检测抗体”的免疫复合物而附着在酶标板上,游离的成分则通过洗涤过程被除去。
抗内因子抗体(IFA)ELISA试剂盒抗内因子抗体(IFA)ELISA试剂盒货号:GD-8524规格:96T/48T品牌:上海古朵保质期:6个月,所有试剂盒均提供最新批次。
用途科研实验。
ELISA试剂盒elisa试剂盒elisa试剂盒步聚elisa试剂盒促销elisa试剂盒规格抗内因子抗体(IFA)ELISA试剂盒性能:1. 灵敏度:最小的检测浓度小于1号标准品。
稀释度的线性。
样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0. 990。
2. 特异性:不与其它细胞因子反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。
问题及解决办法1. 加入反应终止液后,没有吸光值或吸光值偏低。
a.原因:未加入酶标记物。
解决办法:请按照操作步骤进行。
b.原因:试剂盒内容物未能充分回。
解决办法:确定试剂盒内容物回温后再进行操作。
c.原因:室温太低。
解决办法:若室温太低(<19℃),请于操作步骤4,适当延长温育时间。
d.原因:未使用试剂盒的清洗液清洗。
解决办法:请用试剂盒内所提供的清洗液清洗。
e.原因:试剂盒已过有效期限。
解决办法:请更换成仍在有效期限内的试剂盒。
抗内因子抗体(IFA)ELISA试剂盒操作注意事项1.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。
稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3.不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前使用。
4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。
使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。
底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。
避免用手接触,有毒。
实验完成后应立即读取OD值。
8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
人抗内因子抗体(IFA)酶联免疫(ELISA)分析试剂盒使用说明书樊克生物专业供应本试剂盒仅供研究使用。
检测范围:48T 25 ng/L -800 ng/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本抗内因子抗体(IFA)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人抗内因子抗体(IFA)水平。
用纯化的人抗内因子抗体(IFA)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入抗内因子抗体(IFA),再与HRP标记的抗内因子抗体(IFA)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的抗内因子抗体(IFA)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中人抗内因子抗体(IFA)浓度。
试剂盒组成1 20倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7 终止液3ml×1瓶2 酶标试剂3ml×1瓶 8 标准品(1600ng/L)0.5ml×1瓶3 酶标包被板12孔×4条9 标准品稀释液1.5ml×1瓶4 样品稀释液3ml×1瓶 10 说明书1份5 显色剂A液3ml×1瓶 11 封板膜2张6 显色剂B液3ml×1/瓶12 密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
800 ng/L 5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液400 ng/L 4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液200 ng/L l 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液100 ng/L 2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液50 ng/L 1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。
测定应在加终止液后15分钟以内进行。
注意事项:1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。
一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。
如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月The performance of kit:1 sensitivity: minimum detection concentration is less than 1 standard. Linearity of dilution. Sample linear regression and the expected concentration correlation coefficient R value is 0.990.2: no specific reaction with other cytokines.3 repeatability: plate, plate between the coefficients of variation were less than 10%.Human type III procollagen amino terminal peptide ELISA kit steps:1 before use, all reagents and mixing. Do not allow liquid to produce a large number of bubbles, so as to avoid adding a large number of bubbles, resulting in the addition of the error.2 according to determine the number of sample number plus standard strip number. Each standard and blank hole is recommended to do the hole. Each sample can be made according to its own quantity, and can be used as a hole in the hole.3 diluted after standard 50ul in reaction hole, added to the sample 50 UL in reaction hole to be measured. Immediately joined the 50 UL antibody biotin. Cover the membrane plate, gently oscillating mixing, 37 degrees Celsius for 45 minutes.4 left hole liquid, each hole filled with washing liquid, oscillating 30 seconds off the washing liquid, pat dry with absorbent paper. Repeat this operation 4 times. If the washing machine with washing, washing times increased once.5 per hole adding chain affinity enzyme -HRP 100ul, gently oscillating mixing, 37 degrees 30 minutes incubation.6 left hole liquid, each hole filled with washing liquid, oscillating 30 seconds off the washing liquid, pat dry with absorbent paper. Repeat this operation 4 times. If the washing machine with washing, washing times increased once.7 per hole adding substrate A, B 50ul, gently oscillating mixing, 37 degrees 5 minutes incubation. Avoid light.8 remove ELISA plate, quickly add 50ul terminated liquid, adding the stop solution immediately after the determination results.9 od determination of each hole at the wavelength of 450nm.The result of judgment and analysis:1, instrument value: Yu Bo 450nm ELISA od read the hole on the instrument2, to the OD value as a vertical coordinate (y), corresponding ot standard concentrations as a horizontal coordinate (x), do have corresponding curve, sample ot content can be according to the OD value by standard curve conversion out corresponding concentration, multiplied by the dilution multiple; or with the standard concentration and the OD value calculated the regression equation of the standard curve, the sample OD value in the equation to calculate the sample concentration, multiplied by the dilution factor is the actual concentration of the sample.3, detection range: 0-100ng/ml4, sensitivity: 0.39ng/ml。