微生物检验与临床PPT精选文档

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2、气体灭菌：利用化学消毒剂形成的气体来杀灭微生物。 臭氧杀菌消毒 广泛存在于自然界中，雷雨过后的空气有一种清新的感觉， 是因为空中放电产生臭氧，消灭了空气中的微生物，净化了空 气。 臭氧具有强烈的杀菌消毒作用。其杀菌消毒原理是：臭氧 在常温、常压下分子结构不稳定，很快自行分解成氧和单个氧 分子，后者具有很强的活性，对细菌具有很强的氧化作用，臭 氧氧化分解了细菌内氧化葡萄糖所必需的酶，从而破坏其细胞 膜，将它杀死。多余的氧原子则会自行重新结合成为普通氧分 子，不存在任何有毒残留物，故称为无污染消毒剂。不但对各 种细菌（包括肝炎病毒、大肠杆菌、绿脓杆菌及杂菌等）有极 强的杀灭能力，且对杀死霉菌也很有效。
灭菌和消毒的比较： 共性：杀灭微生物以控制其污染和防止传染。 区别： 1、杀灭微生物完全性的差异。灭菌要求完全杀灭 微生物，灭菌后的药品不应含有活的微生物。而消毒不完 全杀灭微生物，只能杀灭一部分微生物即病原微生物。这 是相对的。因为强效消毒剂在适宜条件下可能达到灭菌效 果；不适宜条件下灭菌，有不完全杀灭微生物的可能。 2、方法上的差异：灭菌方法具有多样性，消毒常借化学 物质。 3、效果检查的差异：灭菌效果用无菌检查法检测，而消 毒效果以消毒剂的效价评定。

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2、液体石蜡保存法：
本法是用石蜡将培养物与空气隔绝，以降低菌种的生理生化水 平，并可防止水分蒸发，从而延长菌种的保藏期。
（1）方法： 将菌种接种于斜面或穿刺于0.3- 0.5 %琼脂半固体高层培养基 中，培养好备用。 取化学纯的液体石蜡装在试管中，每管10~15ml，加棉塞，瓶口 包上纸， 121℃高压灭菌 30min ，取出置 37℃温箱或 110~ 170 ℃烤箱中 1 ~ 2 h 或干燥器内除去液体石蜡中的水分 将上述液体石蜡加入培养好的菌种试管内，液体石蜡液面以高 出培养基最上端 1 ㎝为宜，将试管直立，放入4℃冰箱中保藏。 适用范围：适用于保藏部分霉菌，酵母菌和放线菌，对细菌保 藏效果较差。 （3）特点： 本方法简便易行，是实验室常用的一种保藏方法，该法 主要使菌种与空气隔绝。

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1.2.3 临床微生物室建设（4分）
a. 临床微生物室开展病原微生物涂片、分离培养、鉴
定和药敏试验等工作，及时准确地出具报告，检验 质量符合质控要求（2分）
b. 有专人负责与临床沟通，参与抗菌药物临床应用管
理，为临床抗菌药物合理应用提供咨询、培训等技 术支持，有工作记录(2分)
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1.3.3提高临床微生物标本送检率，加强限制使用级和特殊 使用级抗菌药物临床应用管理（7分)
1.无菌体液细菌涂片染色细菌检查
2.合格标本细菌培养 3.肺炎链球菌尿抗原 4.军团菌抗原/抗体检查 5.真菌涂片及培养 7.降钙素原检测（PCT）
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隐球菌抗原？
6.血清真菌G实验或GM实验
青霉素的发现是抗感染治疗的里程碑
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恩格斯说：“我们不要过分陶醉于人 类对自然界的胜利。对于每一次这样 的胜利，自然界以后都会报复我们。”
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群体监测 获得性耐药
《抗菌药物应用管理办法》
1. 主要目标菌 耐药率≧30%的抗菌药，
及时预警本机构医务人员。
2. 主要目标菌 耐药率≧40%的抗菌药，
应慎重经验用药。
3. 主要目标菌 耐药率≧50%的抗菌药， 应参照药敏结果选药。 4. 主要目标菌 耐药率≧75%的抗菌药， 应暂停该类药的应用，
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主要内容




细菌培养概述 常见的感染病原体与感染类型 感染的诊断与治疗 报告单的解读 开展有效的临养的作用
寻找感染源 选择敏感药物 评价疗效 流行病学调查 耐药监测网的建立
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培养的送检指征
当病人出现下列系统炎症反应的临床或实验室特征时 应当采血送血培养：体温＞38℃或＜36℃；心率＞90 次/分钟；呼吸频率＞20次/分钟或PaCO2＜32mmHg； 白细胞计数＞12*109/L或＜4*109/L 发 热： 高热（39C以上），伴有明显的 毒血症状，以间歇迟张热多见。 皮 疹： 革兰阴性菌—瘀点 伤寒—玫瑰疹 斑疹伤寒—暗红色斑丘疹 肝脾肿大：革兰阴性菌败血症 关节疼痛：革兰阳性菌败血症 神志昏迷或休克：革兰阴性菌毒血症状

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血液标本采集注意事项
• 采血时机:最好在抗菌治疗前 ,以寒战和
发热前1小时为宜。
• 采血部位:多部位，通常在两前臂 • 采血数量：24小时采集2-3套（1需氧+1厌
氧=1套）
• 采血量：一定要足够，成人每瓶10ml,儿童
每瓶1-3ml。
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-
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Effect of Volume
100
90
80
常用培养基生长试验
血琼脂
巧克力 琼脂
孵育条件 需氧或CO2， 24小时
需氧或CO2， 48小时
已知菌株（ATCC)
化脓链球菌19615 肺炎链球菌6035 大肠埃希菌25922 淋病奈瑟菌43069 流感嗜血杆菌10211
SS琼脂
需氧，24小时
鼠伤寒沙门菌14028 福氏志贺菌12022 粪肠球菌29212 大肠埃希菌25922
70
60 % Relative 50
Yield
40
30
20
10
0
5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60
Overall/M- ayo ml
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#
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Bottles
Volume 5
of blood (ml)
Relative
yield (%) 10
Volume 10
of blood (ml)
Relative
yield (%) 40
血量的影响
2
3
4
10
15
20
40
60
70
20
30
40
70-
80

（一）医院感染标本的采集和 运送的基本原则




发现医院感染应及时采集微生物标本 作病原学检查，二、三级医院微生物 标本送检率不应低于70%。 尽量在抗菌药物使用之前采集标本。 标本采集时应严格执行无菌操作，减 少或避免机体正常菌群及其他杂菌污 染。 标本采集后应立即送至实验室，床旁 接种可提高病原菌检出率。
标本送检方法 --血液与骨髓
① 通常采血部位为肘静脉。疑似细菌性心内膜炎时，以 肘动脉或股动脉采血为宜。切忌在静滴抗菌药物的静 脉处采取血标本。 ② 采血部位的局部皮肤应严格消毒。将采集的血液注入 血培养基前，应过火消毒针头，最新资料显示更换针 头容易造成新的污染。血培养瓶应在避光室温中保存， 不必置冰箱保贮。 ③ 每次采血量成人5-10ml，婴幼儿l-5ml，培养基与血 液之比以 10：1为宜，以稀释血液中的抗生素、抗体 等杀菌物质。为提高阳性率，我们一般要求成人采血 不少于8 ml，儿童不少于3 ml，婴儿1-2 ml。
三、分析前的质量控制
分析前质量控制是我国目前临床实验室 诊断质量保证中较为薄弱的环节，严重影 响临床微生物学实验室对感染样本中致病 菌的分离培养的阳性率和医院感染病原体 监控，也影响临床诊断，合理选用抗菌药 物，降低耐药菌的产生和提高感染的治愈 率，而且对预测或及时发现医院感染的暴 发流行、杜绝感染蔓延、研究医院感染的 发病机制和环节、制定有效的医院感染控 制措施等，均具有十分重要的意义。严格 实施正确的微生物标本送检和检验方法， 是做与
脓液
① 无菌生理盐水擦洗病灶表面后用棉拭子取病 灶深部的脓液和分泌物，置运送培养基内送 检。 ② 对未渍破的脓肿宜用碘酒、酒精消毒皮肤后， 以无菌注射器抽取脓液送检：也可于切开排 脓时用无菌棉拭子采样。