三维培养药敏实验测定的胃癌药物敏感性与
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2024经内镜消化系统常见恶性肿瘤组织取样及类器官培养专家共识(完整版)消化系统恶性肿瘤是全球主要的癌症病种,其发病率和死亡率均居前列。
部分进展期肿瘤需要接受化学治疗、放射治疗、靶向药物治疗或者免疫治疗。
肿瘤对治疗的敏感性是决定患者临床结局的关键因素。
肿瘤类器官可较好保留原始肿瘤的遗传学特征与生物学行为,可用于评价治疗敏感性。
消化内镜对消化系统肿瘤取样具有独特的优势,但目前国内尚无关于经内镜消化系统恶性肿瘤组织取样及后续相关类器官培养的共识。
2024年,中华医学会消化病学分会医工交叉协作组组织全国领域内权威专家讨论,结合国内外循证与生物实验证据,形成了内镜取样与类器官培养专家共识,以期规范各医疗机构与类器官培养平台操作。
本共识包括内镜取样适应证与伦理、内镜取样、样本存储与运输和类器官培养等4个部分,共15条陈述。
类器官作为一种可模拟原始组织形态、细胞成分和遗传特性的三维细胞培养形态,已被广泛用作研究发育和疾病的模型[1, 2]。
近年来,随着临床肿瘤精准治疗的深入开展,对肿瘤治疗(化学、靶向、放射、免疫)效果的精准预测已成为热门领域。
既往一般通过患者的临床特征、肿瘤分期、影像学特征、分子学标志物,甚至联用人工智能来预测肿瘤对治疗敏感与否[3, 4, 5, 6, 7, 8]。
但这些预测都是间接的,我们更迫切地需要获取更直接的肿瘤敏感性数据。
传统的消化道肿瘤机制研究及敏感性试验采用肿瘤细胞系、动物模型,以及患者来源肿瘤异种移植模型[9]。
前者的缺点在于突变的细胞系已无法反映原始肿瘤的特性,后两者的缺点在于造模时间长、费用高、难以高通量应用,部分模型也难以反应原始肿瘤的特性;而类器官则可较好地弥补这几者的缺陷[10, 11]。
患者来源的肿瘤类器官(patient-derived organoids,PDO)的样本主要通过外科手术切除、活组织检查及采集循环肿瘤细胞等方式获得[11]。
通过外科手术获取样本,患者术后需等待较长时间才能得到敏感性检测结果。
医生三基试题(附参考答案)一、单选题(共62题,每题1分,共62分)1.肺癌性淋巴管炎之微结节常位于: ( )A、纵隔旁B、支气管血管束周围C、肺底部D、肺门周围E、肺尖部正确答案:B2.下列有关疝的叙述,哪项是正确的A、未进入阴囊的疝为腹股沟直疝B、疝囊在精索前外方的疝为腹股沟直疝C、腹股沟周围呈半球状的腹外疝为直疝D、压住内环让病人站立咳嗽,疝块复现的疝为直疝E、极易嵌顿的疝为腹股沟斜疝正确答案:D3.下列哪项违反了手术时无菌操作规则A、穿无菌手术衣后,手术者背部不能接触B、穿无菌手术衣后,手术者肩以上不能接触C、穿无菌手术衣后,手术者腰以下不能接触D、穿无菌手术衣后,手术者双手可交叉置于腋下E、不可在手术人员背后传递器械正确答案:D4.下列哪种体征是骨折的专有体征A、功能障碍B、肿胀与淤斑C、反常活动D、局部压痛E、局部疼痛正确答案:C5.绞窄性肠梗阻的 X 表现,错误的是: ( )A、咖啡豆征B、空回肠换位征C、假肿瘤征D、多个小跨度卷曲肠襻E、大跨度的襻正确答案:E6.《医院感染管理规范》对抗菌药物合理使用的要求中哪一项错误A、医院应安排抗感染专家或有经验医师负责医院抗感染药物使用的指导、咨询工作B、提高细菌培养的送检率,促进抗菌药物合理使用水平C、医院抗菌药物使用率力争控制在60%以下D、检验科和药剂科分别负责定期公布医院主要病原菌及其药敏试验结果E、有条件的医院应开展抗感染药物临床应用的监测正确答案:C7.绿色瘤是A、原始粒细胞在骨组织、骨膜下或软组织中浸润,聚集成肿块B、胆管上皮癌因淤胆所致C、原发性肝细胞癌转移到皮下,分泌胆汁所致D、绒毛膜癌阴道转移性结节E、血管肉瘤出血,产生胆绿蛋白所致正确答案:A8.皮革胃属于: ( )A、溃疡型胃癌B、蕈伞型胃癌C、浸润型胃癌D、平坦型胃癌E、混合型胃癌正确答案:C9.青春期龈炎的主要病因是A、牙错合拥挤B、戴各种正畸矫治器C、口呼吸习惯D、刷牙习惯不良E、青春期内分泌特别是性激素的改变正确答案:E10.病人女性,35岁,反复浮肿3年,BP21/13kPa,Hb80g/L,尿蛋白(++),镜检RBC 2~ 4/Hp,BUN 10mmol/L。
专家共识:液体活检在临床肿瘤诊疗应用和医学检验实践中的专家共识液体活检(liquid biopsy)在肿瘤临床诊断治疗领域的应用日益广泛,是实现对肿瘤"个体化精准医疗"的重要手段。
为科学规范液体活检技术在临床检验中的应用,中华医学会检验医学分会、国家卫生健康委员会临床检验中心共同制定了《液体活检在临床肿瘤诊疗应用和医学检验实践中的专家共识》。
本专家共识围绕CTC和ctDNA两种靶标,综合近年来发表的液体活检领域重要研究成果、结合我国肿瘤液体活检的临床实践需求,就相关的临床常用检测技术的实施和质量管理提供常规指导原则。
液体活检技术的选择(一)ctDNA检测技术的选择目前,实验室常用的ctDNA检测技术包括扩增受阻突变体系(amplification refractorymutation system,ARMS)、二代测序(next-generation sequencing,NGS)、数字PCR(digital PCR,dPCR)和核酸质谱检测等。
ARMS方法是目前获得中国食品药品监督管理局(China Food and DrugAdministration,CFDA)批准可用于临床ctDNA检测的方法,在临床实践中应用相对普及。
由于NGS方法在技术与成本方面存在瓶颈,使得ARMS在检测诸如EGFR等已知突变中具有明显优势。
针对未知突变的发掘,NGS方法则具有其他方法无可比拟的技术优势。
包括Nature Medicine、Lancet Oncology 及New England Journal of Medicine在内诸多顶级期刊所报道的多项临床试验结果证实NGS在耐药监测中具有重要的临床价值:通过NGS监测可有效发掘耐药新突变,及时调整干预措施,切实提高靶向治疗疗效。
dPCR和基于质谱的核酸检测方法尽管可应用于已知突变ctDNA的检测,但仅限于实验室自建,尚缺乏高等级循证医学证据的支持,目前仍难以进入临床实践。
《内科学》试题含参考答案一、单选题(共100题,每题1分,共100分)1、2型糖尿病最常见的死亡原因是()A、糖尿病高渗状态B、糖尿病神经病变C、心脑血管并发症D、糖尿病酮症酸中毒E、糖尿病肾病正确答案:C2、急性糜烂性胃炎主要临床表现为()A、恶心呕吐B、腹胀腹泻C、腹痛不适D、呕血黑便E、黄疸正确答案:D3、女性,26岁,腹泻1年,每日2-3次,进食蔬菜、蛋白后腹泻加重,多次查粪常规,可见红、白细胞,严重时可见肉眼脓血便,粪培养多次阴性,为明确诊断,最有效的诊断方法是()A、依靠临床表现B、X线钡剂灌肠C、纤维结肠镜检D、血清免疫球蛋白E、粪常规及培养正确答案:C4、慢性心力衰竭症状急性加重的最常见诱因是( )A、肺血栓栓寒B、药物治疗不当C、感染D、情结激动E、体力活动正确答案:C5、支气管哮喘患者发作时禁用的药物是( )A、沙丁胺醇B、泼尼松C、氨茶碱D、肾上腺素E、吗啡正确答案:E6、患者,男,41岁。
因发热、咽痛10天来诊。
化验WBC89X109/L,疑诊为慢性粒细胞白血病(CM),下列选项中,支持CML慢性期的化验结果是( )A、血小板降低B、NAP阳性率明显降低C、外周血可见有核红细胞D、骨髓中巨核细胞减少E、骨髓中原粒+早幼粒细胞> 50%正确答案:B7、男性,50岁。
多饮、多尿、乏力、体重减轻12年,近3个月颜面及双下肢水肿。
查体:血压170/110mmHg,身高175cm,体重53kg,贫血貌,尿蛋白(++)。
应首先考虑()A、糖尿病肾病B、肾盂肾炎C、肾小球肾炎D、肾动脉硬化E、肾动脉狭窄正确答案:A8、阵发性心房颤动的治疗原则是( )A、转复窦率,发作时控制室率B、抗凝治疗,发作时控制室率C、抗凝治疗,发作时转复窦率D、预防复发,发作时转复窦率E、预防复发,发作时控制室率正确答案:E9、下列哪个不是RA的病因?()A、遗传因素B、感染C、性激素D、输血E、以上均是正确答案:D10、某糖尿病患者男56岁,双足多处皮肤蜂窝组织炎,空腹血糖8mmol/l,肝肾功正常,该患者治疗以何种为佳()A、饮食疗法+胰岛素B、饮食疗法+格列本脲C、饮食疗法+运动疗法D、饮食疗法+二甲双胍E、饮食疗法+达美康正确答案:A11、男,21岁。
Matrigel三维细胞培养方法培养的原代乳腺癌细胞生长情况及对阿霉素敏感性观察张震;齐晓敏;张薇;张培;曹旭晨;肖春花【摘要】Objective To observe the growth of primary breast cancer cells cultured in Matrigel three-dimensional cell culture method and its sensitivity to adriamycin.Methods The primary breast cancer cells were cultured by two-dimensional monolayer culture and Matrigel three-dimensional cell culture methods.On the 1st, 3rd, 5th and 7th day of culture, Olympus IX70 inverted microscope was used to observe the morphology of primary breast cancer cells under the condition of two-dimensional monolayer culture and three-dimensional culture.CellTiter-Glo(R) Luminescent Cell Viability Assay was applied to observe the cell proliferation and its sensitivity to adriamycin.Primary breast cancer cell growth curve and drug sensitivity curve were drawn based on the observation results.Results The primary breast cancer cells with two-dimensional monolayer culture were in adherent growth, and the cancer cells gathered like a nest, with a variety of forms.The primary breast cancer cells with three-dimensional cell culture gathered into close multi-tumor cell microspheres.The proliferation of primary breast cancer cells cultured by two-dimensional monolayer culture on the 1st, 3rd, 5th and 7th day was 1.00±0.00, 1.39±0.29, 2.08±0.25 and 3.26±0.41.The proliferation of primary breast cancer cells cultured by Matrigel three-dimensional cell culture was 1.00±0.00, 1.25±0.08, 1.79±0.10 and 1.58±0.02.With theincrease of adriamycin concentration, the inhibition rate of proliferation of primary breast cancer cells increased under two-dimensional monolayer culture and three-dimensional culture.But the proliferation inhibition rateof primary breast cancer cells with three-dimensional cell culture was lower than that with two-dimensional cell culture.Conclusion The primary breast cancer cells with Matrigel three-dimensional cell culture can gather into close spheres, the cell proliferation rate slows down, and the sensitivity of adriamycin decreases.Matrigel three-dimensional cell culture is better for culturing primary breast cancer cells.%目的观察Matrigel三维细胞培养方法培养的原代乳腺癌细胞生长情况及其对阿霉素的敏感性.方法分别采用二维单层培养法、Matrigel三维细胞培养方法培养原代乳腺癌细胞.在培养的第1、3、5、7天,采用Olympus Ⅸ70倒置显微镜观察二维单层培养及三维培养条件下的原代乳腺癌细胞形态, 采用CellTiter-Glo(R)发光法观察细胞生长增殖情况及其对阿霉素的敏感性,绘制原代乳腺癌细胞生长曲线及药敏曲线.结果二维单层培养的原代乳腺癌细胞贴壁生长,癌细胞聚集成巢状,呈多种形态.三维细胞培养的原代乳腺癌细胞聚集成紧密的多肿瘤细胞微球.二维单层培养第1、3、5、7天原代乳腺癌细胞的增殖倍数分别为1.00±0.00、1.39±0.29、2.08±0.25、3.26±0.41;三维培养第1、3、5、7天原代乳腺癌细胞的增殖倍数分别为1.00±0.00、1.25±0.08、1.79±0.10、1.58±0.02.随阿霉素浓度升高,二维单层培养及三维培养下的原代乳腺癌细胞增殖抑制率增高.但三维细胞培养的原代乳腺癌细胞增殖抑制率均低于二维细胞培养.结论 Matrigel三维细胞培养的原代乳腺癌细胞可聚集成紧密的球形,细胞增殖速度变慢,对阿霉素的敏感性降低.Matrigel三维细胞培养原代乳腺癌细胞效果较好.【期刊名称】《山东医药》【年(卷),期】2017(057)019【总页数】4页(P17-20)【关键词】乳腺肿瘤;乳腺癌;Matrigel三维细胞培养方法;细胞形态;细胞增殖;药物敏感性【作者】张震;齐晓敏;张薇;张培;曹旭晨;肖春花【作者单位】天津医科大学肿瘤医院,国家肿瘤临床医学研究中心,天津300060;天津市"肿瘤防治"重点实验室;天津市恶性肿瘤临床医学研究中心;天津医科大学肿瘤医院,国家肿瘤临床医学研究中心,天津300060;天津市"肿瘤防治"重点实验室;天津市恶性肿瘤临床医学研究中心;天津医科大学肿瘤医院,国家肿瘤临床医学研究中心,天津300060;天津市"肿瘤防治"重点实验室;天津市恶性肿瘤临床医学研究中心;天津医科大学肿瘤医院,国家肿瘤临床医学研究中心,天津300060;天津市"肿瘤防治"重点实验室;天津市恶性肿瘤临床医学研究中心;天津医科大学肿瘤医院,国家肿瘤临床医学研究中心,天津300060;天津市"肿瘤防治"重点实验室;天津市恶性肿瘤临床医学研究中心;天津医科大学肿瘤医院,国家肿瘤临床医学研究中心,天津300060;天津市"肿瘤防治"重点实验室;天津市恶性肿瘤临床医学研究中心【正文语种】中文【中图分类】R734.2乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤,病死率占女性癌症死亡原因的15%[1]。