蛙心灌流实验报告
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实验二离体蛙心灌流实验
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一、实验目的
1.学习离体器官(蛙心)灌流的方法。
2.观察理化因素对蛙心活动的影响。
二、实验原理
蛙心的灌流:蛙心无营养性血管,离体之后采用人工灌流的方法,仍可保持其新陈代谢,心脏仍能有节律的自动收缩、舒张,并维持较长时间,心肌的营养是通过心脏内膜液体的直接渗透而得。
心肌:
受体受体激动剂效应
β
1
肾上腺素
去甲肾上腺素心率增快、房室传导加速、心肌收缩力加强。
M 乙酰胆碱心率减慢、房室传导
减慢、心肌收缩力减
弱。
1.
含有NaCl、CaCl
2、KCl、NaH
2
PO
4
、 Na
2
HPO
4
和蒸馏水,其电解质、晶体渗透压、pH值与蛙的组织液相近。
2.0.65%NaCl灌流:
3.2%CaCl
2
灌流:
4.1%KCl灌流:
5.1:10000 E 灌流
6.1:10000 Ach灌流
7.心得安
β
1受体阻断剂,抑制肾上腺素与β
1
受体结合,使E不能发挥作用。
8.阿托品
M受体阻断剂,抑制Ach减慢心率,加速房室传导,增加心房收缩力。
三、 实验器材
离体蛙心 任氏液、l %KCl 溶液、2%CaC12溶液、0.65%NaCl 溶液、1:10000 肾上腺素、1:10000乙酰胆碱、心得安、阿托品
四、 实验步骤
五、 结果与分析
心率:34次/min 最大收缩力:2.5g 最小收缩力:1.1g
图1 正常脉搏曲线
心率:35次/min 最大收缩力:1.6g 最小收缩力:1.1g
图2 0.65%NaCl 灌流脉搏曲线
任氏剂 0.65%NaCl
任氏液清洗
2%CaCl 2
任氏液清洗
1%KCl
任氏液 2.药物试剂
E 任氏液清洗 心得安+E 任氏液清洗 Ach
任氏液清洗 阿托品+Ach
任氏液
1.离子试剂
分析:细胞外液中Ca2+浓度降低,2期Ca2+内流减少,胞浆中Ca2+减少,心肌收缩力降低。
心率:38次/min
最大收缩力:3.5g
最小收缩力:1.1g
灌流脉搏曲线
图3 2%CaCl
2
分析:心肌的舒缩活动与心肌肌浆中的钙离子浓度的高低有关。心肌肌浆网不发达,储钙能力差,易受细胞外钙离子浓度高低影响。细胞外液中Na+与Ca2+有竞争性抑制,细胞外液Ca2+浓度升高,细胞兴奋时内流Ca2+增加,心肌收缩力增强。慢反应细胞4期去极速度加快,心率增快。
心率:21次/min
最大收缩力:3.4g
最小收缩力:1.1g 图4 1%KCl灌流脉搏曲线
分析: K+与Ca2+在细胞膜上有竞争性抑制,细胞外液中K+浓度升高,K+抑制细胞膜对Ca2+转运,因此进入细胞内Ca2+降低,心肌的兴奋—收缩耦联作用减小,心肌收缩力减弱。
心率:35次/min
最大收缩力:3.5g
最小收缩力:0.9g 图5 肾上腺素灌流脉搏曲线
分析:肾上腺素与心肌细胞膜上的β
受体结合,心肌细胞和肌浆网膜Ca2+通透
1
性增强,肌浆中Ca2+浓度升高,心肌收缩力增强。而且肾上腺素使肌钙蛋白与钙离子亲和力下降,肌钙蛋白对钙离子的释放增强,肌浆网膜摄取钙离子的速度加快,钠-钙离子的交换增加,复极期向细胞外排出钙离子增多,心肌舒张速度增快,整个舒张过程明显加强。
心率:34次/min
最大收缩力:2.5g
最小收缩力:1.1g 图6 心得安+E灌流脉搏曲线
分析:心得安是β1受体阻断剂,能够抑制肾上腺素与β1受体结合,使E不能发挥作用,因此心率及心肌收缩力保持不变。
心率:33次/min
最大收缩力:2.5g
最小收缩力:1.1g 图7 乙酰胆碱灌流脉搏曲线
分析:乙酰胆碱与心肌细胞膜上的M受体结合,心肌细胞膜K+通道的通透性增强,促进K+外流,动作电位期间Ca2+内流减少,心肌收缩力降低。同时乙酰胆碱可直接抑制Ca2+通道,导致Ca2+内流减少,心肌收缩力降低。
心率:34次/min
最大收缩力:2.5g
最小收缩力:1.1g 图8 阿托品+Ach灌流脉搏曲线