盐酸金刚烷乙胺原料药稳定性试验报告

盐酸金刚乙胺口服溶液盐酸金刚乙胺口服溶液使用说明书•【药品名称】通用名称：盐酸金刚乙胺口服溶液商品名称：立安英文名称：RimantadineHydrochlorideOralsolution•【成份】盐酸金刚乙胺•【性状】本品为桃红色溶液,味芳香。

•【适应症】本品适用于预防和治疗A型（包括H1N1、H2N2、H3N2）流感病毒感染。

1．预防：在年满1岁的儿童、健康成人和老年病人的对照研究中，发现本品能安全有效的预防不同亚族A型流感病毒传染引起的症状和体征。

本品不能完全阻止A型流感病毒的宿主免疫反应，服用本品的个体对自然发病或接种仍会持续免疫反应，但这以后接触相关抗原病毒，有保护作用。

在感染暴发期间服用后，2～4周的时间内有预防作用。

超过6周，其预防作用的安全性和有效性未被论证。

2．治疗：在人群中确认或怀疑A型流感时，有病毒感染症状的成年人可服用本品；在出现A型流感病毒症状48小时内服用本品，能减少发烧持续的时间和减轻全身症状。

•【规格】100ml:1g。

•【用法用量】本品为口服制剂，用法与用量如下：1．成年人和儿童的预防用药：成年人：本品推荐给成年人的剂量是0.1g（即10ml），每日二次。

对于严重的肝功能不全、肾衰竭（Crcl≤10ml/min）患者及中老年家庭护理患者，推荐剂量为每日0.1g（即10ml）。

目前，还没有多剂量的数据可以证实对于肾或肝损伤的受试者是安全的。

因为在多剂量期，金刚乙胺的代谢物有可能积累。

对任何肾功能不全患者应该监视其不良反应，必要时调整剂量。

儿童：对于10岁以下儿童，本品每日一次，每次5mg/kg，但总量不超过0.15 g（即15ml）。

对于10岁或以上的儿童，用量与成年人一样。

2．成年人的治疗用药：盐酸金刚乙胺对于成年人的推荐剂量0.1g(即10ml)，每日二次。

对于严重肝功能不全、肾衰竭（Crcl≤10ml/min）和老年人家庭护理患者,推荐剂量为每日0.1g（即10ml）。

L-睛化物稳定性试验报告L-睛化物就就是L-肉碱生产过程中得第一步中间体（第二步中间体:L-肉碱粗品；第三步中间体：L-肉碱潮品），由于L-肉碱生产工艺为间歇操作, 即每生产一步中间体，生产完毕并出具合格检测报告后，存入中间体仓库，以 备下一步生产投料所需。

根据本公司L-肉碱产品得整个生产周期丄-睛化物 入库后可能存放得最长时间为4周（约28天）。

以此周期为时间依据制定了L-睛化物稳定性试验方案，用于验证L-睛化物在再试验期限内得各项质量指标数据得稳定性，并且能否符合L-睛化物得质量标准，此次稳定性试验得整个 周期为28天，具体得稳定性试验方案以ICH 药物稳定性指导原则为恳础制定, 以确保L-睛化化物稳定性试验得可操作性。

二、脸证3期2010 年1 月 13 a ----- 20 10 年 2 月 10 日三、验证方案1）样品储存与包装:考虑到L-睛化物今后得贮藏、使用过程，本次用于稳定性试验得样品批次与最终规模生产所用得睛化物得包装与放置条件相同。

2）样品批次选择：此次稳定性试验共抽取三批样品，且抽取样品得批次与最3）抽样频率与日期：从2010. 1. 13超,每隔7天取样一次，共取五次，具体1、20、20 1 0、1、27、201 0、2、3、2010. 2、10■以确保试验次数足以满足L-睛化物得稳定性试验得/S'汶*o O4）检測项目；根据L-睛化物得质量标准得规定，此次稳定性试验得检测项一、概述日期为：20 1 0、1、13、2010.目共五项，分别为外观、氯含量、熔点、比旋度、干燥失重。

这些指标在L一睛化物得储存过程中可能会发生变化，且有可能影响其质量与有效5）试样来源与抽样：L一睛化物由公司102车间生产，经检测合格后储存于中间体仓库，本次穩定性试验得L-睛化物均取自于该中间体仓库，其抽样方法与抽样量均按照L-睛化物抽样方案进行抽样。

抽样完毕后直接进行检测分析，并对检测结果进行登记,保存，作为稳定性数据评估得依据。

HPLC法测定复方氨酚烷胺胶囊中盐酸金刚烷胺的含量目的：建立测试复方氨酚烷胺胶囊中盐酸金刚烷胺含量的高效液相方法，并对此方法进行系统的方法学验证，以确保应用该方法测试的结果准确、可靠。

方法：采用蒸发光散射检测器，色谱柱：Agilent TC-C18柱（4.6 mm×250 mm，5 μm，Agilent，美国），流动相：甲醇-1%醋酸铵缓冲溶液（用醋酸调至pH 3.5）（22∶78），流速：1 ml/min，检测温度为104 ℃。

结果：盐酸金刚烷胺在20～120 μg/ml范围内线性关系良好，相关系数为0.9990（n=6）；本法灵敏度高，精密度和重复性良好；平均加样回收率为101.96%，RSD为0.89%；供试品溶液室温放置8 h稳定。

结论：本方法测定盐酸金刚烷胺的含量准确、可靠，测得的盐酸金刚烷胺灵敏度高，操作简单、用时短，可用于复方氨酚烷胺胶囊中盐酸金刚烷胺的含量测定。

标签：蒸发光散射检测；复方氨酚烷胺胶囊；盐酸金刚烷胺；含量测定复方氨酚烷胺胶囊由对乙酰氨基酚、盐酸金刚烷胺、马来酸氯苯那敏、人工牛黄、咖啡因几种主要成分组成，是临床常用的解热镇痛药。

中国药典中盐酸金刚烷胺的含量测定方法采用的是滴定法[1]，该方法操作较为繁琐，认为误差较大。

为更有效、快速、可靠的测定盐酸金刚烷胺含量，2006年修虹等[2]建立了HPLC-ELSD方法测定复方氨酚烷胺胶囊中盐酸金刚烷胺的含量。

笔者在此基础上对盐酸金刚烷胺的测定方法进行了适当的改进，经过方法学验证，该方法回收率、准确度及重现性均为良好，且灵敏度与峰形更好，现报告如下。

1 实验材料1.1 仪器与设备Agilent 1260型高效液相色谱仪（配有脱气机、自动进样器、恒温箱、液相色谱泵、柱温箱及蒸发光散射检测器），由Chemstation化学工作站系统控制（Agilent，德国）；METTLER TOLEDO AB135-S型十万分之一天平（METTLER，瑞士）；XW-80A涡旋混合器（上海沪西分析仪器厂）；TGL16M型冷冻离心机（长沙英泰仪器有限公司）；AHL-2001-P痕量型分析型超纯水机（艾科浦，重庆颐洋企业发展有限公司）。

原料药稳定型研究方案原料药，研究其稳定性是在考察其在温度、湿度、光线的影响下随时间变化的规律，为其生产、包装、贮存、运输条件和有效期的确定提供科学依据。

本试验采用高温、高湿、光照等试验方法，通过目测法鉴定其外观，通过水分测定仪测定水分，通过电位滴定仪测定其含量。

我们这次所做的影响因素条件为：高温条件为为60℃±2℃，高湿为90%±5%，加速条件为：40℃±2℃、RH75%±5%；长期试验条件为：25℃±2℃，RH60%±5来考察产品的稳定性。

考察项目及检测方法1外观方法：目测法2水分、含量水分测定方法：水分滴定仪含量测定方法：电位滴定仪3.1高温试验取采用包装批号为NH-130101的样品，在60℃±2℃条件下放置10天，于第0天、第5天、第10天取样，检测相关指标。

3.2高湿试验取采用包装批号为NH-130101的样品，于25℃±2℃、RH75%±5%条件下放置10天，在第0天、第5天和第10天取样，检测相关指标。

3.3光照试验取采用包装批号为NH-130101的样品，在光强度为4500lx±500lx的光源下，距光源30cm，放置10天，在0天、5天和10天取样，测定相关指标。

3.4加速试验取采用包装的三批次样品，批号分别为：NH-130101、NH-130102、NH-130103试验条件为40℃±2℃、RH75%±5%，试验时间从2013.01.01开始，为6个月，分别于0、1、2、3、6个月取样检测。

3.5长期试验取采用包装的三批次样品，批号分别为：NH-130101、NH-130102、NH-130103，试验条件为25℃±2℃，RH60%±5,试验时间从2013.01.01开始，取样时间点为0月、3月、6月、9月、12月。

4试验结果4.1高温试验4.2高湿试验4.3光照试验4.4加速试验4.5 长期试验5、总结：通过以上实验数据，由此得出以下结论，原料药在高温、光照条件下均比较稳定，在湿度为90%的条件下，样品的水分略有提高，在温度40℃，RH75%的条件下，产品的外观、水分和含量均无明显的变化，在常温条件下，温度为25℃，RH为60%的条件下，外观、水分和含量均无明显的变化，产品质量比较稳定，因此，建议保存条件为常温条件下，密封干燥处保存。

原料药、制剂CTD资料稳定性试验内容总结稳定性试验的目的是考察原料药在温度、湿度、光线的影响下随时间变化的规律，为药品的生产、包装、贮存、运输条件提供科学依据，同时通过试验建立药品的有效期。

稳定性试验的基本要求是：(1) 稳定性试验包括影响因素试验、加速试验与长期试验。

影响因素试验用1批原料药或1批药物制剂进行。

加速试验与长期试验要求用3批供试品进行。

(2) 原料药供试品应是一定规模生产的，供试品量相当于制剂稳定性实验所要求的批量，原料药合成工艺路线、方法、步骤应与大生产一致。

药物制剂的供试品应是放大试验的产品其处方与生产工艺应与大生产一致。

药物制剂如片剂、胶囊剂，每批放大试验的规模，片剂至少应为10000片，胶囊剂至少为10000粒。

大体积包装的制剂如静脉输液等，每批放大规模的数量至少应为各项试验所需总量的10倍。

特殊品种、特殊剂型所需数量，根据情况另定。

(3) 供试品的质量标准应与临床前研究及临床试验和规模生产所使用的供试品质量标准一致。

(4) 加速试验与长期试验所用供试品的包装应与上市产品一致。

(5) 研究药物稳定性，要采用专属性强、准确、精密、灵敏的药物分析方法与有关物质(含降解产物及其他变化所生成的产物)的检查方法，并对方法进行验证，以保证药物稳定性试验结果的可靠性。

在稳定性试验中，应重视降解产物的检查。

(6) 由于放大试验比规模生产的数量要小，故申报者应承诺在获得批准后，从放大试验转入规模生产时，对最初通过生产验证的三批规模生产的产品仍需进行加速试验与长期稳定性试验。

本稳定性试验内容总结分为两部分，第一部分为原料药，第二部分为药物制剂。

一、原料药原料药要进行以下试验：(一)影响因素试验此项试验是在比加速试验更激烈的条件下进行。

其目的是探讨药物的固有稳定性、了解影响其稳定性的因素及可能的降解途径与降解产物，为制剂生产工艺、包装、贮存条件与建立降解产物的分析方法提供科学依据。

供试品可以用1批原料药进行，将供试品置适宜的开口容器中(如称量瓶或培养皿)，摊成≤5mm厚的薄层，疏松原料药摊成≤10mm厚薄层，进行以下实验。

毛细管气相色谱法测定盐酸金刚乙胺片含量赵宇;于晓鸿【摘要】本文采用气相色谱法对盐酸金刚乙胺片中盐酸金刚乙胺的含量进行测定。

方法：石英毛细管柱（30mx0．32mmxl．00urn。

相当于SE-30），以盐酸金刚烷胺为内标物，检测器：氢火焰离子化检测~（FID），柱温：程序升温，初始温度120℃，保持5min，以CE·min。

升至210℃，保持5min。

进样器温度：260℃；检测器温度：260℃；载气：氮气，流速：1．50mL·min-1，分流比：1：50。

盐酸金刚乙胺在0．2-3．2mg·mL-1范围内呈良好的线性关系。

本实验具有较好的重现性、加样回收率、精密度。

结论：本实验表明此方法分离效果好、方法简便、准确，、专属性好，可用于盐酸金刚乙胺片中盐酸金刚乙胺的含量测定。

【期刊名称】《黑龙江科技信息》【年(卷),期】2012(000)034【总页数】1页(P35-35)【关键词】盐酸金刚乙胺片;含量;测定【作者】赵宇;于晓鸿【作者单位】哈高科白天鹅药业集团有限公司,黑龙江哈尔滨150000;黑龙江省济仁药业有限公司,黑龙江哈尔滨150000【正文语种】中文【中图分类】O657.71盐酸金刚乙胺片属片剂，为抗病毒药。

盐酸金刚乙胺片主要对A型流感病毒具有活性,可用于预防A型流感病毒株引起的感染，特别推荐用于具高老年人、免疫缺陷患者以及慢性病人。

盐酸金刚乙胺片通过抑制病毒颗粒在宿主细胞内脱壳而在病毒复制周期的早期起作用，抑制H1N1、H2N2及H3N2亚型等[1-4]。

本实验采用气相色谱法对盐酸金刚乙胺片的含量进行了测定。

1 仪器与试药1.1 仪器LM-C600超声波清洗器 (武汉朗玛恒瑞科技有限公司)；GHA-300氢空气发生器(北京汇佳精仪工贸有限公司)；XYF-H 帕恩特超低有机物型超纯水机 (北京湘顺源科技有限公司)；WP-ROL-100落地式实验室专用废水处理机(四川沃特尔水处理设备有限公司)；SOCOREX固定容量移液器(深圳诺亚迪化学科技有限公司）；Agilent 7890A气相色谱系统(昆山全丰精密仪器有限公司)；FA1004万分之一电子分析天平(上海楚柏实验室设备有限公司)1.2 色谱柱石英毛细管柱(30m×0.32mm×1.00um，相当于SE-30)。

金刚烷类药物的合成及其抗肿瘤新适应症的研究张秋实;李源;宋端正;姜明俊;周云鹏;徐利锋【摘要】以金刚烷和二甲基金刚烷为原料合成金刚烷胺、金刚乙胺和美金刚胺并对其抗肿瘤新适应症活性进行了测定,其结构经IR和1H-NMR表征.体外实验结果表明,金刚乙胺对胰腺癌和大肠癌体内生物活性较高(IC50与阳性对照药CTX相似),或超过CTX,对乳腺癌MCF7也表现出较好的生物活性.体内活性显示金刚烷胺、金刚乙胺和美金刚胺对肉瘤S180生长都有抑制作用,具有明显抗肿瘤活性.【期刊名称】《辽宁大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2018(045)003【总页数】6页(P249-254)【关键词】金刚烷胺;金刚乙胺;美金刚胺;抗肿瘤;合成【作者】张秋实;李源;宋端正;姜明俊;周云鹏;徐利锋【作者单位】辽宁利锋科技开发有限公司,辽宁沈阳110041;辽宁大学药学院,辽宁沈阳110036;辽宁大学药学院,辽宁沈阳110036;辽宁利锋科技开发有限公司,辽宁沈阳110041;辽宁大学药学院,辽宁沈阳110036;辽宁利锋科技开发有限公司,辽宁沈阳110041【正文语种】中文【中图分类】R9670 引言金刚烷及其衍生物和类似物大多具有低毒性和良好的脂溶性,并体现出独特的药理活性,他们在抗病毒药、治疗座疮药、抗帕金森综合症药、治疗肺结核药、抗抑郁药和抗糖尿病药等，在临床上已应用多年，金刚烷胺盐酸盐是应用于临床最早的抗病毒活性药物,现有的应用于临床的金刚烷药物还有金刚乙胺、多巴金刚、索金刚、曲金刚胺等.通过国内外专利和文献方面系统检索发现，上述药物除了原来的适应症外，国内外还有大量的研究发现新的适应症及其应用，这些国内外文献报道和专利发明主要集中在抗新型病毒的应用，对神经系统的活性和神经保护作用、呼吸道感染治疗、肺结核治疗、皮肤病治疗等.除此之外，上述药物在抗肿瘤活性的研究和抗肿瘤新的适应症应用鲜有报道.因此，深入研究金刚烷类药物及其衍生物的抗肿瘤活性具有重要的现实意义.本文通过合成金刚烷胺、金刚乙胺和美金刚胺，并考察了对大肠癌HT-29，胰腺癌Panc-1，肺癌NCI-H460和乳腺癌MCF7等细胞株的抑制活性，此外还进行了小鼠抗肿瘤活性的测定.1 仪器与试剂Spectrum One型红外光谱仪(KBr压片)ARX-600型核磁共振仪(DMSO-d6为溶剂，TMS为内标)X-4A型显微熔点仪(温度未矫正)各种试剂除特殊说明外,均为分析纯，其中金刚烷和二甲基金刚烷：购买于江宁民利油脂厂，纯度99.9%.2 实验方法2.1 金刚烷胺的合成2.1.1 溴代金刚烷(2)的制备在100 mL干燥的反应瓶中，取金刚烷(1)10.0 g，按金刚烷∶溴∶亚硫酸氢钠的质量比为1∶2.2∶0.56，取液溴22.0 g和亚硫酸氢钠5.6 g.将金刚烷研磨碎加入预先干燥好的烧瓶中,搅拌中慢慢滴加溴素，缓慢升温，严格控制温度1 h内从50 ℃升高到70 ℃，之后控制反应为回流状态6 h，最终温度达110 ℃，反应后放置室温过夜.次日，逐渐升温到45 ℃，滴加由亚硫酸氢钠配制成的7%的水溶液，以除去过剩的溴，过滤，滤饼水洗至pH=7，自然干燥，得溴代金刚烷粗产物，重量为13.7克，收率86.6%.2.1.2 金刚烷胺(3)的制备在100 mL干燥的反应瓶中，将10 g溴代金刚烷(2)和4.5 g尿素进行混合后研磨碎.加热至原料熔融，后至180 ℃时反应开始，同时有气体产生，温度升高至240 ℃，反应结束后.将金刚烷胺用盐酸加热充分溶解，加入与金刚烷胺质量比为0.05∶1的活性炭脱色用后过滤，滤液用氢氧化钠调节pH至碱性，有固体析出,过滤，干燥，得较纯金刚烷胺6.0 g，收率85.4%.IR(KBr,cm-1) 3 437,3 183,3 033,2 925,2 853,1 599,1 493,1 477,1 453,1 376,1 365,1 312,1 085；1H NMR(CDCl3)δ 8.19(b,2H),2.08(m,4H),1.82(m,3H),1.70(m,4H),1.57(m,4H). 2.2 金刚乙胺的制备2.2.1 金刚烷甲酸(4)的制备在500 mL烧瓶中，加入98.4%的浓硫酸200 mL，开动搅拌，在5～10 ℃左右,加入溴代金刚烷(2)10.1 g、正己烷25 mL，快速搅拌下，滴加甲酸22.5 mL，控制1 h滴加完毕，继续保温反应3 h.将反应液倒入750 mL冰水中，搅拌，有白色固体析出，析出完全后，过滤，干燥，固体溶于乙醚，用NaOH 50 mL洗涤3次.再用稀HCl酸化，干燥，得到白色的金刚烷甲酸8.1 g，收率95.8%.2.2.2 金刚烷甲酰氯(5)的制备在100 mL三口烧瓶中，加入金刚烷甲酸(4)9.0 g和氯化亚砜18 mL，滴加催化量的DMF，升温至80 ℃，回流反应3 h，检测原料消失，减压除去过量的氯化亚砜，用甲苯25 mL溶解，溶液直接用于下一步反应.2.2.3 金刚烷乙酮(6)的制备在100 mL三口烧瓶中，分别加入无水乙醇1 mL和甲苯11 mL，称取镁粉1.2 g、碘0.6 g，开动搅拌,缓慢升温至80 ℃，开始滴加甲苯15 mL、丙二酸二乙酯12g和无水乙醇4 mL的混合液，0.5 h滴加完毕，继续回流反应2 h，至溶液澄清后，滴加上述金刚烷甲酰氯(5)的甲苯溶液，回流反应2 h，冷却至室温，倒入200 mL的冰水中，静置分层，收集上层棕红色溶液，下层用甲苯50 mL萃取2次，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，残余物为金刚烷甲酰丙二酸二乙酯粗品，然后加入冰醋酸25 mL、水15 mL和浓硫酸2 mL，加热回流至不再有CO2气体冒出，冷却后，倒入150 mL冰水中，过滤，干燥，得浅黄色金刚烷乙酮6.3 g，两步收率 70%.2.2.4 金刚烷乙酮肟(7)的制备在250 mL反应瓶中，加入吡啶80 mL、无水乙醇80 mL，称取盐酸羟胺19 g，加热到100 ℃，溶液澄清后，加入金刚烷乙酮(6)14.2 g，回流2.5 h，减压除去溶剂后，倒入200 mL水中，有固体析出，过滤，干燥，得金刚烷乙酮(7)的粗品15.7 g，收率97%.2.2.5 金刚乙胺盐酸盐(8)的制备在压力釜中，加入金刚烷乙酮(7)9.5 g、冰醋酸200 mL和Pt/C催化剂0.5 g，在室温和0.4 MPa氢气压力下，连续反应24 h，滤去催化剂，滤液减压浓缩，加水100 mL于浓缩液中，再滴加3 mol/L的氢氧化钠溶液调pH 9～10，用二氯甲烷,60 mL萃取3次，萃取液用无水硫酸镁干燥3 h，滤除干燥剂，通入干燥的氯化氢气体,得金刚乙胺盐酸盐(8)10.2 g，收率95%.IR(KBr,cm-1) 3 438,3 031,2 905,2 851,1 603,1 504,1 450,1 393,1 374,1 341,1 263,1 207,1 190,1 078,984；1H NMR(DMSO-d6) δ7.94(b,2H),3.40(m,2H),2.76(m,1H),1.67(m,4H),1.57(m,8H),1.49(m,4H).2.3 金刚美胺的合成2.3.1 1-溴-3,5-二甲基金刚烷(10)的制备在 150 mL 的三口反应瓶中，加入1,3-二甲基金刚烷(9)16.4g(0.1mol)，缓慢加入液溴24.0g(0.15 mol).开动搅拌，并升温至回流，尾气用稀NaOH水溶液吸收.保温反应 10 h，停止搅拌.减压蒸除多余的液溴，反应液中残余的液溴再用 30%的NaHSO3分解至溶液为无色.然后用氯仿25 mL×3次提取，提取液用无水硫酸钠干燥，常压蒸出氯仿，得到 1-溴-3,5-二甲基金刚烷的粗品22.3g，产率 91.5%. 2.3.2 1-乙酰胺基-3,5-二甲基金刚烷(11)的制备在250 mL的反应瓶中，称取1-溴-3,5-二甲基金刚烷18.5g(0.8 mol)和乙腈53.0 g(1.3 mol)，降温至5～10 ℃，开动搅拌，缓慢加入140 mL浓H2SO4，滴加完毕后，室温搅拌反应12 h，得到淡黄色粘稠液体.将反应液慢慢倾倒至碎冰中，快速搅拌下，有白色的沉淀析出.抽滤得固体，用适量水洗至中性，烘干得 1-乙酰胺基-3,5-二甲基金刚胺粗品16.2 g，氯仿重结晶，得白色结晶15.6 g，产率 96%. 2.3.3 美金刚胺(12) 的制备在 100 mL 的反应瓶中，称取1-乙酰胺基-3,5-二甲基金刚烷(11)11.0g(0.05 mol)、乙二醇10.0 g(0.15 mol)、NaOH 10.0g和水2.6 mL，缓慢升温并搅拌使NaOH 溶解.升温至150 ℃搅拌反应12 h.停止搅拌，反应液冷却至室温后倾倒入碎冰中，快速搅拌，静置1 h，有油状物析出.用石油醚25 mL×3 提取，提取液用无水硫酸钠干燥，减压除去溶剂，得淡黄色的油状液体1-氨基-3,5-二甲基金刚烷8.9g，产率82.3%.IR(KBr,cm-1) 3 419,2 943,2 900,2 861,2 707,2 613,2 055,1 615,1 603,1 513,1 456,1 364,1 357,1 344,1 322；1H NMR(DMSO-d6) δ8.24(b,2H),2.15(m,1H),1.65(m,2H),1.45(m,4H),1.29(m,4H),1.06(m,2H),0.85(s, 6H).3 药理学活性测定3.1 体外抗癌活性测定1)细胞系选用人乳腺癌细胞系MCF7、人胰腺癌细胞系Panc-1、人肺癌细胞系NCI-H460、人大肠癌细胞系HT-29；其培养基为DMEM(Gibco BRL)，含10%胎牛血清(Gibco BRL)及2 M L-谷氨酰胺(Gibco BRL).2)测试样品:化合物3、化合物8和化合物12取上述样品溶于二甲基亚砜(美国Sigma公司产品)，用培养基倍比稀释.二甲基亚砜在培养基中的终浓度为0.5%.阳性对照药为环磷酰胺(CTX，纯度>96%，)，用培养基倍比稀释.3)方法细胞经胰蛋白酶消化后，分散成单个细胞，并使其悬浮在含青霉素(25μg/mL)和链霉素(25 μg/ mL)的上述培养基中.将细胞接种于96孔培养板(Corning Incorporated)，含5%CO2的空气，相对湿度100%，在37 ℃条件下培养24 h后.弃去培养液，加入含一系列浓度受试物的培养液，每一浓度设平行孔，培养48 h 后，弃去含受试物的培养液，代之以含噻哗蓝(MTT，美国Sigma公司产品)培养液，MTT终浓度为0.5 μg/mL，继续温育4 h后加酸化异丙醇溶解液，待紫色结晶完全溶解，在SK601型酶标仪(日本国Seikagaku公司产品) 检测570 nm/630 nm的光密度(OD).按下式计算细胞存活率：(实验组OD/对照组OD)×100%阳性对照药CTX与受试物同样处理.体外抗肿瘤细胞结果参见表1.表1 体外抗癌细胞结果3种化合物IC50(μM) 值IC50大肠癌HT-29胰腺癌Panc-1肺癌NCI-H460乳腺癌MCF7化合物318.8151.325.186.18化合物83.922.4222.012.73化合物1213.1352.9760.5234.33CTX2.262.234.300.92受试物抑制肿瘤细胞生长作用结果参见图1.图1 受试物抑制肿瘤细胞生长作用4)结果受试物为化合物3，化合物8和化合物12，筛选细胞株为乳腺癌MCF7、大肠癌HT-29、胰腺癌Panc-1、肺癌NCI-H460.以CTX为对照进行试验，试验结果表明，乳腺癌细胞、胰腺癌、与大肠癌对上述化合物敏感性好，其中化合物8对胰腺癌和大肠癌活性较高(IC50 与阳性药物CTX相似)，或超过CTX，对乳腺癌MCF7也表现出了一定的抗肿瘤活性.3.2 抗肿瘤制剂的制备分别称取1.0 g化合物3、8和12，加入二甲基亚砜(DMSO)120 mL，搅拌溶解后，加入20 mL吐温80和120 mL 1,2-丙二醇，搅拌混合均匀，加注射用水至总体积1000 mL，用0.22 μm滤膜过滤，分装，120 ℃热压灭菌30 min，检漏，全检，包装，即得10 mg/10 mL(氨瓶)，共100支.3.3 体内抗肿瘤活性测定1)材料测试样品：化合物3、化合物8和化合物12.试验动物：昆明种实验用鼠，体重18～22g，雌雄各半分组，每组10只，由中国医科大学动物中心提供.瘤株：小鼠肉瘤S180为腹水型传代，来源于北京军事医学科学院药物研究所. 2)方法动物模型的制备:无菌条件下吸取7 d生的肉瘤S180传代小鼠腹水，用生理盐水将肿瘤细胞悬液稀释至密度为4×107 cell·m L-1，每只小鼠接种0.2 mL肿瘤细胞悬液于右前肢腋窝皮下，接种7 d后，在造模的小鼠腋下长出大小较为一致的肉瘤，造模即为成功.为保证肉瘤细胞的活力，将肿瘤细胞悬液放于含冰的器皿中，造模整个过程应4 h内完成.将接种完24 h的小鼠，随机分组，空白对照组、阳性药环磷酰胺(CTX)对照组25mg/kg；阳性药5-氟脲嘧啶(5-FU) 对照组15 mg/kg；化合物3组25 mg/kg、化合物8组40 mg/kg、化合物12组12.5 mg/kg.各组小鼠每日给药1次，连续给药7 d，结束给药次日处死小鼠，剥取瘤块，称量瘤块及小鼠质量，计算体重变化情况及抑瘤率.抗肿瘤活性结果参见表2.表2 对肉瘤S180生长的抑制作用组别给药途径体重/g给药前给药后瘤重/g抑瘤率/%P值<Control-23.87±1.7027.05±3.982.41±1.22--CTXiv22.45±0.7928.22±2.461.04±0.3738.40 0.01∗5-FUiv21.61±1.5629.16±2.501.64±0.5033 0.05∗化合物3iv21.41±2.5227.93±3.371.27±0.5031.350.05∗化合物8iv19.35±0.9526.02±3.691.06±0.51 43.670.01∗化合物12iv21.31±1.5328.98±1.741.10±0.7742.70.05∗3)结果:化合物8和化合物12抑瘤率明显好于阳性对照组5-氟尿嘧啶和环磷酰胺.试验结果表明：化合物8(40 mg/kg)和化合物12(12.5 mg/kg)抑瘤率均超过42%.与空白组比较，当 P<0.05 为有显著性差异，P<0.01为有非显著性差异，因此化合物8和化合物12具有明显抗肿瘤活性.【相关文献】[1] 苏强.含氮杂环类金刚烷化合物的合成研究[D].广东：广东工业大学，2012.[2] E.I.du pont de Nemours.1-Aminoadamantane[J].U.S.Appl,1964,6(9):14-16.[3] 丁方华.金刚烷胺的合成[D].南京：南京理工大学，2007.[4] 蔡小华，胡薇，姚祖凤，等.金刚乙胺盐酸盐的制备工艺改进[J].中国药物化学杂志，2002,12(3):161-163.[5] 东北制药总厂.金刚烷胺盐酸盐的制备[J].医药工业,1972,5(5):19.[6] Polis J,Grava I.Preparation of rimantadine hydrochloride[P].US:3852352,1974-07-16(CA 1974,80:82246Y).[7] Stetter H,Rausher E.Preparation of adamantane methtyl ketone[J].ChemBer,1970,103(7):863.[8] Aldrich P E,Hermann E C,Meier W E,et al.Antiviral agents structure-active relation-shipof compounds related to 1-adamantanamine[J].J Med Chem,1971,14(7):535.[9] 蔡小华，刘鸿，姬明理.盐酸金刚乙胺的合成[J].中国医药工业杂志，2000,31(10):434-435.[10] 任会学，林吉茂，孙友敏，等.盐酸美金刚胺的合成及表征[J].2007,(4):1-4.[11] Arthur Scherm,Bad Homburg,Dezso Peteri.Drugs or medicines for influencing the central nervous system[P].US:4122193,1978.[12] 徐利峰.具有金刚烷药物曲金刚胺及其衍生物和类似物抗肿瘤新适应症的应用[P].中国发明专利，CN 102070481.2011-05-25.[13] 徐利峰.具有金刚烷结构药物及其衍生物和类似物抗肿瘤新适应症的应用[P].中国发明专利，CN101569617.2009-11-04.。

３．２使用一次性输液器，有助于克服从输液器具带人热原现象。

本次实验穿刺４次后的输液经输液器终端过滤装置过滤，模拟了注射液从包装容器经一次性使用输液器到达人体静脉之前微粒数的变化情况。

实验结果提示，注射液经穿刺后微粒数符合药典要求，１０ｐｉｎ以上的微粒数虽有所减少，但某些组样品中２，５，１０／ａｎ的微粒数大于过滤前微粒数。

原因可能有以下两种：一是操作过程中带入；二是输液器管路中微粒污染所致。

在洁净工作室中，实验人员穿着洁净工作服在层流净化工作条件下操作，使用洁净安瓿接取滤液，所以操作过程中带入微粒的可能性较小。

实验使用输液器也均为有效期内质量合格输液器。

笔者认为可能是药液在输液器管道流动过程中冲走了管道表面附着的微粒，这些冲出的微粒与药液中原有微粒叠加造成了滤液的微粒增大。

人眼可看见的粒径一般大于５０ｔａｎ，医护人员在临床用药的实际操作中只能通过眼睛观察注射剂的澄明度，５０ｙｍ以下的微粒则不能检查出来。

为切实保障临床静脉给药的质量和用药安全，药品和医疗器械生产企业应建立严格的产品质量标准（包括１０脚以下的微粒的检测标准），以保证注射液及一次性输液器的质量。

建议有关医疗器械监管部门制定相应的微粒检测标准，以保证一次性使用输液器的质量。

由于一次性使用输液器的质量受生产过程、灭菌过程、包装、运输及储存等多因素的影响。

因此只有严格把握进货渠道，妥善储存，才能保证输液器质量，减少因输液管道污染引起微粒增加的现象。

（收稿日期：２００５．０１—３０）复方盐酸金刚乙胺胶囊的药理学研究傅红兴１，邱利焱１，金一１＊，祝慧娟２，汪成发３（１．浙江大学药学院，杭州３１００３１；２．浙江大学医学院毒理研究室，杭州３１００３１；３．浙江康裕制药有限公司，浙江东阳３２２１１８）中图分类号：Ｒ９６９文献标识码：Ａ文章编号：１００１—２４９４（２００６）１１—０８７４—０３盐酸金刚乙胺（ｒｉｍａｎｔａｄｉｎｅｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）为新一代抗病毒药，抗Ａ型禽流感病毒效果优于金刚烷胺，是目前预防和治疗Ａ型流感最安全有效的合成药物之一。

毛细管气相色谱法测定复方盐酸金刚乙胺胶囊中的盐酸金刚乙
胺
韩加怡;傅红云
【期刊名称】《色谱》
【年(卷),期】2005(23)6
【摘要】复方盐酸金刚乙胺胶囊为一新的复方制剂，其主要成分为盐酸金刚乙胺、对乙酰氨基酚、盐酸伪麻黄碱和马来酸氯苯那敏，国内外均未上市，其生产工艺及处方正在申请专利。

盐酸金刚乙胺是盐酸金刚烷胺的类似物，抗A型流感病毒活
性比后者强，而中枢神经毒性比后者小。

本文以盐酸金刚烷胺为内标，对样品先碱化后提取，然后采用气相色谱法（GC）测定其中的盐酸金刚乙胺含量。

【总页数】1页(P683-683)
【作者】韩加怡;傅红云
【作者单位】浙江省药品检验所,浙江,杭州,310004;浙江大学,浙江,杭州,310009【正文语种】中文
【中图分类】O658
【相关文献】
1.盐酸金刚乙胺有关物质的测定方法及定性分析 [J], 王春梅;张雪雁;陈长荣
2.液相色谱-串联质谱同时测定禽肉组织中盐酸金刚烷胺、盐酸金刚乙胺、地塞米松、替米考星及喹乙醇代谢物的残留量 [J], 易锡斌;裘立群;刘世琦;黄晓琴
3.毛细管气相色谱法测定鱼油软胶囊中ω-3酸乙酯含量 [J], 谢强胜;李启艳;刘春
霖;高天阳;孙铜;
4.毛细管气相色谱法测定盐酸金刚乙胺片含量 [J], 赵宇;于晓鸿
5.毛细管气相色谱法测定复方莪术油软胶囊中莪术醇 [J], 巩克民;任洁;唐淑含;唐百灵;赵怀清;金明月
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SHH-250SD型药品稳定性试验箱验证报告（设备编号：HYS-WDX-01 ）1、验证目的SHH-250SD型药品稳定性试验箱于2010年初购买，主要用来考察原料药或药物制剂在温度、湿度影响下随时间变化的规律，为药品生产、包装、贮存、运输条件提供科学依据，同时可通过试验建立药品的有效期。

通过验证，以文件形式记录所确认SHH-250SD药品稳定性试验箱在安装、运行、性能确认方面的要求、可接受标准；证实并描述该设备的使用目的，运行正常；成功地完成确认，证明此设备能满足稳定性试验的要求。

2 验证实施概要2.1验证所需仪器和设备2.2 验证步骤2.2.1 安装确认2010年3月5日，购进重庆永生试验仪器厂制造的型号为SHH-250SD型药品稳定性试验箱一台，放置在化验室药品稳定性试验室。

2010年3月9日，验证小组对该设备的外观、安装环境及资料进行确认。

确认结果如下：2.2.2运行确认2.2.2.1 运行确认过程2010年3月5日，验证小组对SHH-250SD型药品稳定性试验箱进行了通电测试、断电测试，记录如下：2010年3月9日至3月13日，对SHH-250SD 型药品稳定性试验箱的温度、相对湿度进行比对，比对记录见附件1，比对结果满足可接受标准。

2010年5月5日，由南京市计量监督检察院现场对SHH-250SD 型药品稳定性试验箱进行校准，2010年5月12日，对该设备的校准报告进行检测结果评价，满足稳定性试验要求。

校准报告及评价报告见附件2、附件3。

2010年5月5日，对SHH-250SD 型药品稳定性试验箱进行空载测试，空载测试项目包括温湿度偏差试验、温湿度均匀度试验、波动度试验。

将试验箱温度、湿度分别设置到40.0℃、75%RH 后，将型号为DR020B 的数字温度巡回检测仪按以下点布置 ：温度测试点9个用0～8表示，湿度测试点3个用甲、乙、丙表示。

在设备工作室内上、中、下布置9个温度测量点和3个湿度测量点，中点为0点，上下层各布4个点；各点距工作室内壁的距离为对应边长的10%；详细位置如下图：26待DR020B 的数字温度巡回检测仪数值稳定后开始读数，每2min 记录所有点的温湿度一次，在连续30min 内共测试15次温度、相对湿度并记录，见表2-5空载测试记录。