妊娠诊断技术

早孕期检验技术早孕的实验室诊断是基于对人绒毛膜促性腺激素（human chorionic gonadotropin，hCG）的检测。

hCG是一种能刺激黄体激素分泌的糖蛋白激素，生理状态下，hCG是由妊娠滋养细胞产生，对维持妊娠黄体，进而维持早期妊娠，具有关键性的作用。

作为生物标志物，hCG是迄今为止最好的妊娠诊断标志物。

一、血hCG定量检验hCG包含α和β两条肽链，共由237个氨基酸组成，α和β肽链之间由二硫键键合。

β肽链上这部分特殊结构是hCG检测中确认hCG 的关键抗体结合靶部位。

也就是说，检测技术能否达到应有的特异性，取决于所采用的抗体是否专一针对β链C-端抗原簇。

由于不容易取得高度特异性的抗体，早期的hCG检测技术与LH（甚至FSH和TSH）有不同程度的交叉反应。

（一）检验方法学1.原理目前血hCG的定量检测是采用标记免疫学方法检测其免疫活性。

检测体系中通常有两个特异的抗hCG抗体，一个抗体包被于固相载体（如磁性微粒等），另一抗体用酶、稀土元素等标记物标记，两个抗体应与被检抗原不同的抗原部位结合，当反应体系中的被检标本中有hCG时，包被于固相载体的抗体能与hCG特异结合，标记抗体也是能与hCG产生特异结合反应，包被于固相载体的抗体和标记抗体就能夹心捕获抗原（hCG），使标记抗体通过hCG的桥梁作用而连接与固相上。

分离（如磁性分离）去除游离未结合的标记抗体，测定固相上标记抗体即可计算出被检测物的浓度。

双位点夹心法必须有足量的包被抗体与标记抗体，才能达到足够的检测量程，目前较新的定量标记免疫检测技术通常采用磁性微粒等作固相。

2.器材和试剂根据标记物的不同此类检测方法有化学发光、电化学发光等，器材和试剂及其操作可参阅有关章节。

（二）方法学评价1.灵敏度和特异性放射免疫分析技术的hCG检测灵敏度为3.1ng/ml，电化学发光、酶放大化学发光等的检测灵敏度＜1IU/ml，早孕诊断的临床灵敏度、特异性几乎接近100%。

早期妊娠与围生期检验技术-标本采集技术早期妊娠与围生期检查围绕母婴健康展开，母体的血、尿仍是实验室产前检查中最常用的临床标本，这些标本的采集与非妊娠时的标本采集并无区别。

然而，实验室产前检查有时涉及胎儿问题，有时对孕妇的标本作实验室检查，目的则是为了了解胎儿的状况，这也是产科检验诊断不同于其他临床学科的特色之一，如产前筛查、产前诊断、孕早期感染性疾病检查等均涉及胎儿的健康与安危，有时怀疑胎儿有异常，对胎儿作诊断需要通过母体进行，采集标本不同于非妊娠时，羊水的采集、绒毛采集、胎儿脐血采集等为孕期特有。

一、产前筛查血标本采集目前产前血清学筛查系指通过母体血清标志物的检测计算胎儿为唐氏综合征的风险。

产前筛查采血，由于筛查涉及后续诊断以及筛查结果受影响因素多，与一般采血有所不同。

（一）原则1.基层产前筛查采血单位必须是相应的已获省级卫生行政管理部门批准的产前诊断机构的挂钩单位，在技术上接受相应的产前诊断机构的指导并为后者认可。

筛查工作必须由经过专门培训的有资质的人员承担。

2.采血单位从事有关产前筛查的医技人员必须经过专业培训与考核，掌握有关专业知识。

3.采血单位在从事产前筛查的标本采集中，必须严格按照产前筛查采血工作程序。

4.按知情同意、孕妇自愿的原则，医务人员告知孕妇或其家属产前筛查的性质、目的及与诊断性检查相比筛查的局限性，孕妇和（或）家属签署知情同意书后方可进行筛查操作。

如果存在没有签署知情同意书的临床标本，应当追究标本采集者的责任。

（二）操作程序1.早孕期产前筛查采血于孕10～13+6周进行，最好孕10+2～11+6周进行；中孕期筛查采血于孕15～20周进行，最好于孕15+2～17周进行。

2.在产前筛查申请单逐项填写孕妇姓名、年龄、孕周、异常分娩史、家族史等，孕周不确定者，应经B超检查以确定孕周。

3.采血及血清分离工作程序（1）接到产前筛查申请单后，逐项核对医师所填项目是否有误或漏填，是否已签署了知情同意书。

E-mail:hljxmsy@Heilongjiang Xumu Shouyi2009年10月（下）1超声波诊断法主要有A 型超声波诊断仪、多普勒（Doppler ）超声诊断仪（D 型仪）和B 型超声波诊断仪。

用A 型超声波诊断仪对奶牛妊娠60天以后才能做出诊断。

在20世纪70年代A 超技术曾备受青睐，目前已很少应用。

D 型超声波诊断仪可通过测定胎儿和母体血流量、胎动等做较早期的诊断。

将A 型和D 型仪联合使用，可得到既早又准确的结果。

B 型超声波诊断仪可通过探查胎体、胎水、胎心搏动及胎盘等来判断妊娠阶段、胎儿数、胎儿性别及胎儿状态等。

对牛可在配种后24天探测到胚胎。

2乳胶珠凝集抑制试验乳胶珠凝集抑制试验（LAIT ）是—种免疫测定法，可用来快速定性测定奶牛乳中或尿中类绒毛膜促性腺激素（hCG-like ）。

此法是根据奶牛胚泡的绒毛膜滋养层细胞和胎盘子叶都能分泌hCG-like 来进行早期妊娠诊断的。

其原理是将hCG 吸附于聚苯乙烯乳胶珠上作为抗原，与hCG 免疫血清配套作为试剂，供早期妊娠诊断使用。

优点是诊断时间早、准确率高、反应快速（10分钟可检出结果）、设备简单、操作简便，便于在生产中推广应用。

3外源性生殖激素探试法（1）雌激素探试法。

奶牛妊娠后在体内起主导作用的是孕酮，它可以对抗适量的外源性雌激素，使奶牛不表现发情反应。

可在奶牛配种后18～20天，肌肉注射合成雌激素（苯甲酸雌二醇、己烯雌酚）2～3毫克，注射后5天不出现发情者为妊娠。

（2）三合激素探试法。

对配种后30～40天的奶牛肌肉注射三合激素制剂5毫升，如果一周内不出现发情征状，即可诊断为妊娠阳性。

（3）促性腺素释放激素-A （LRH-A ）探试法。

在奶牛配种后第21～27天后注射LRH-A 200～500微克，然后观察配种后35天内奶牛的返情情况，不返情母牛为妊娠。

准确率可达91.9%。

4血清酸滴定法奶牛在妊娠后胚胎快速生长的过程中，机体产生产一种特有的免疫球蛋白，这种球蛋白具有在酸性环境中与其他蛋白质形成低溶性复合物（絮状物）的特性，据此可对奶牛做出早期妊娠诊断。

hcg化学发光法和免疫学法
HCG化学发光法和免疫学法在临床诊断中的应用。

HCG（人绒毛膜促性腺激素）是一种早期妊娠的生物标志物，对
于妊娠的早期诊断和监测非常重要。

在临床实践中，HCG的检测通
常采用化学发光法和免疫学法。

这两种方法在妊娠诊断中发挥着重
要作用，下面我们将分别介绍这两种方法的原理和临床应用。

HCG化学发光法是一种高灵敏度、高特异性的检测方法。

其原
理是利用化学发光物质与HCG结合后发出光信号，通过检测光信号
的强度来确定HCG的浓度。

这种方法具有快速、准确、灵敏的特点，适用于早期妊娠的检测和监测。

免疫学法则是利用抗体与HCG结合的原理进行检测。

通过将样
本与特定的抗体反应，然后通过化学或光学方法来检测抗体与HCG
结合的程度，从而确定HCG的浓度。

免疫学法具有成本低、易操作
等优点，适用于大规模的妊娠筛查。

在临床应用中，这两种方法通常结合使用，以确保妊娠的准确
诊断和监测。

化学发光法的高灵敏度和准确性使其适用于早期妊娠
的检测，而免疫学法的成本低、易操作的特点使其适用于大规模的妊娠筛查。

同时，这两种方法也在其他领域有着广泛的应用，如肿瘤标志物的检测等。

总之，HCG化学发光法和免疫学法在临床诊断中发挥着重要作用，它们的高灵敏度、准确性和易操作性使其成为了妊娠诊断和监测的重要工具。

随着技术的不断进步，相信这两种方法在临床诊断中的应用将会更加广泛和深入。

中国畜禽种业2019.03作者简介：王斐(1989.11-），女，辽宁省开原市人，兽医师，研究方向：预防兽医及动物疫苗研制。

奶牛早期妊娠诊断技术简述王斐（黑龙江省齐齐哈尔市畜牧总站161000）摘要：随着人民生活水平的提高，我国畜牧养殖业飞速发展，人们对牛奶的需求量大增，奶牛养殖业得到蓬勃发展。

在奶牛养殖中，繁殖技术是奶牛养殖业的重中之重，奶牛早孕诊断一直是奶牛养殖业亟待解决的问题，本文简述常规奶牛早孕诊断技术手段，以期为奶牛产业繁殖效率提高提供参考。

关键词：奶牛；养殖；妊娠；诊断20世纪90年代以来，中国乳牛的存栏量大增，奶牛养殖量不断增加。

高效养牛模式是目前养殖场追求的方式，早期妊娠诊断可提高奶牛繁殖率，从而提高奶牛养殖的经济效益。

近年来，奶牛早孕诊断技术出现了很多新的方法与技术。

1奶牛的早期妊娠诊断主要技术1.1早孕因子诊断法早孕因子是一种妊娠相关蛋白复合物，通过抑制雌性动物的细胞免疫，使胎儿能正常存活，从而达到避免母体免疫排斥的目的。

早孕因子的诊断方法主要是确定早孕因子的含量，以此作为早孕诊断的重要指标[1]。

1.2乳胶凝集抑制试验当精子和卵子结合形成合子时，胚胎和胎盘在母牛体内发育，绒毛膜促性腺激素是由绒毛膜滋养细胞和囊胚子叶分泌出来的，通过乳胶凝集抑制试验测定怀孕雌性动物的尿液和奶中的激素可作为早期妊娠诊断的方法[2]。

1.3超声波诊断法超声波有A 超、B 超、D 超，其中多普勒超声被广泛应用。

其原理是利用超声波对动物子宫扫描，根据信号判断动物是否怀孕[3]。

我国运用超声波在动物早孕的诊断进行大量研究。

邓甘珍等在2004年用B 超检测了137只处于不同妊娠阶段的雌性动物，在交配后第30天的诊断准确率为89%，在交配后31～35d 的诊断准确率为97%，35d 以上的诊断准确率为100%。

1.4宫颈-阴道黏液电导率测定法有研究者通过测定宫颈-阴道黏液电导率在妊娠早期和发情周期有规律的变化发现，健康奶牛发情时导电性水平较低，从发情开始逐渐上升到发情后期逐渐下降；在发情后受精过程中，孕牛的电导率变化与空牛不同。

2024异位妊娠的诊断要点（附图表）异位妊娠（EP）是孕早期孕产妇死亡的主要原因，占所有妊娠相关死亡的5%-10%。

由于腹痛和阴道出血等临床表现和非特异性症状，EP诊断仍存在挑战。

目前EP诊断标准包括超声成像和β-人绒毛膜促性腺激素（β-hCG）监测等。

确诊EP后的治疗选择包括内科、外科和期待治疗。

本文整理了当前EP的相关诊断方法，以飨读者。

异位妊娠类型及高危人群1.类型输卵管EP是最常见的类型，破裂时孕产妇发病率和死亡率很高。

其他会发生EP的部位如表1 所示。

表1 EP类型2.危险因素在诊断为EP的患者中，约有一半的患者无已知的危险因素。

危险因素包括既往EP、输卵管损伤、既往盆腔手术、上行盆腔感染并发症、既往输卵管手术或病理、不孕、吸烟、年龄＞35岁、盆腔炎性疾病、子宫内膜异位症、生殖系统解剖结构变异、在放置宫内节育器（IUD）的情况下怀孕或使用辅助生殖技术（ART）。

未发现口服避孕药的使用、提前终止妊娠、紧急避孕失败、剖宫产和流产与EP风险增加有任何显著关联。

异位妊娠的症状及体征EP患者可能出现多种症状，常见症状包括腹痛或盆腔痛、闭经或停经、阴道出血伴或不伴凝块；其他报告的症状包括乳房压痛、胃肠道症状、头晕、昏厥或晕厥、肩部疼痛、泌尿系统症状、排便时直肠压力或疼痛等。

常见体征包括盆腔压痛、附件压痛、腹部压痛；其他还可能出现宫颈举痛、反跳痛或腹膜刺激征、苍白、腹胀、子宫增大、心动过速（每分钟超过100次）或低血压（低于100/60 mmHg）、休克或昏倒、直立性低血压。

异位妊娠的诊断方法目前，EP的诊断方法主要依赖于血清β-hCG水平监测与经阴道超声（TVUS）或经腹部超声（TAUS）。

诊断的复杂性取决于EP的类型。

早期、具体的EP诊断有助于降低孕产妇死亡率。

1.超声➤与TAUS相比，在早期EP的诊断中TVUS更准确、更灵敏。

三维TVUS 联合彩色多普勒超声，在诊断早期CSP方面，较常规三维超声更有效。

妊娠诊断名词解释
1.妊娠测试：妊娠测试是通过检测一种特殊的蛋白（hCG）来鉴定的，常常是用尿液或血液来做，可以在准确的情况下判断患者是否处于妊娠状态。

2. 超声波检查：超声波检查，也称超声波子宫检查，是用超声波检测腹部或阴道以诊断妊娠和孕妇的胎儿健康状态的一种常用技术。

3. 胎儿心率：指孕妇胎儿的心率，它可以通过超声波检查或宫腔镜检查来测量。

4. 胎位：指胎儿在母亲子宫内的位置，可以在妊娠期间用胎位检查来检查，以确定胎儿的位置和发育情况。

5. 胎动检查：指通过母亲腹部触摸或用超声波检查来监测胎儿的活动情况，以确定胎儿的健康状况。

6. 膝关节折叠检查：也称双膝关节反跳检查，可以在膝关节发出一种特定的声音时，用于诊断胎儿存在脊柱畸形等先天性疾病的可能性。

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母猪早期妊娠诊断作者：张凤仁来源：《兽医导刊》 2017年第8期妊娠诊断是母猪繁殖管理上的一项重要内容。

配种后，越早确定妊娠对生产越有利，可以及时补配，防止空怀。

这对于保胎，缩短胎次间隔，提高繁殖力和经济效益具有重要意义。

一般情况下，母猪妊娠后性情温驯，喜安静、贪睡、食量增加、容易上膘，皮毛光亮和阴户收缩。

一般来说母猪配种后，过一个发情周期没有发情表现说明已妊娠，到第二个发情期仍不发情就能确定是妊娠了。

近年来较成熟、简便，并具有实际应用价值的早期妊娠诊断技术主要有以下几个：（一）母猪早期妊娠诊断方法1. 超声诊断法超声诊断法是利用超声波的物理特性，将其和动物组织结构的声学特点密切结合的一种物理学诊断法。

其原理是利用孕体对超声波的反射来探知胚胎的存在、胎动、胎儿心音和胎儿脉搏等情况来进行妊娠诊断。

目前用于妊娠诊断的超声诊断仪主要有A 型、B 型和D 型。

（1）B 型超声诊断仪。

B 型超声诊断仪可通过探查胎体、胎水、胎心搏动及胎盘等来判断妊娠阶段、胎儿数、胎儿性别及胎儿状态等。

具有时间早、速度快、准确率高等优点，但价格昂贵、体积大，只适用于大型猪场定期检查。

（2）多普勒超声诊断仪（D 型）。

该仪器可通过测定胎儿和母体血流量、胎动等做较早期诊断。

有实验证明，利用北京产SCD- Ⅱ型兽用超声多普勒仪对配种后15 ～ 60 d 母猪检测，认为51 ～ 60 d 准确率可达100%。

（3）A 型超声诊断仪。

这种仪器体积较小，如手电筒大，操作简便，几秒钟便可得出结果，适合基层猪场使用。

据报道，这种仪器准确率在75% ～ 80%。

试验表明，用美国产PREG －TONE Ⅱ PLUS 仪对177 头次母猪进行检测，结果表明，母猪配种后，随着妊娠时间增长，诊断准确率逐渐提高，18 ～ 20 d时，总准确率和阳性准确率分别为61.54% 和62.50%，而在30 d 时分别提高到82.5% 和80.00%，75 d 时都达到95.65%。

奶牛妊娠诊断技术目录1外部观察法 (1)2直肠检查法 (1)3听诊法 (3)4宫颈—阴道黏液诊断法 (3)5超声波诊断法 (3)奶牛妊娠诊断技术奶牛妊娠与否直接影响着奶牛的产乳量与养殖生产的经济效益。

通常而言，奶牛需要进行两次妊娠检查：第一次是在配种后20～45天进行早期诊断；第二次在临近干奶时，目的是防止第一次检查的失误，或中途遇到胚胎死亡、流产及木乃伊化等情况。

及早对奶牛进行妊娠诊断，可避免漏配，减少奶牛空怀时间，提高奶牛繁殖率，缩短繁殖周期，有利于提高奶牛产奶量及经济效益。

本文现对常用的奶牛妊娠诊断技术总结如下，以供参考。

1外部观察法配种后的奶牛在下一个发情期到来时，如不发情，表明可能已经妊娠。

但这并不完全可靠，因为有的奶牛虽然未妊娠，但在发情时征状不明显（如安静发情）或不发情，而有些奶牛虽已受胎但仍有表现发情（如假发情）。

奶牛妊娠后，其性情、食欲、膘情及动作行为等会发生一系列变化。

进食量和饮水量增加，在妊娠前半期膘情明显好转，被毛变得光亮、润泽，在妊娠后性情安静、温顺。

行动迟缓、谨慎，喜静恶动，常躲避追逐和角斗，放牧或驱赶运动时，常落在牛群后面。

妊娠中期以后，腹部两侧大小不对称，孕侧（多为右侧）下垂突出，肋腹部凹陷，泌乳牛产奶量下降；妊娠6个月后，可在右侧腹壁触到或看到有突起的胎动。

育成奶牛在妊娠4～5个月后，乳房发育加快，乳房体积明显增大，经产奶牛的乳房多在妊娠的最后l～4周才明显增大和水肿。

奶牛的脉搏、呼吸次数也会明显增加。

外部观察法在妊娠中后期观察比较准确，但在妊娠早期较难做出确切诊断，需要与其他方法综合诊断确定。

2直肠检查法直肠检查法是奶牛妊娠诊断中最基本最可靠的方法，在整个妊娠期均可采用，并能判断妊娠的大致时间，奶牛的假发情、假妊娠，以及一些生殖器官疾病及胎儿的死活。

妊娠20～25天，排卵侧卵巢上有突出于表面的妊娠黄体，卵巢的体积大于另一侧，两侧子宫角无明显变化，触摸时可感到子宫壁厚而有弹性。

畜禽生产与疾病防治畜禽繁殖与改良一、基本信息二、具体模块填写表妊娠母畜阴道粘膜（三）直肠检查法对于大家畜早期（20天后可初诊，40天后可确诊）妊娠诊断最准确可靠的方法之一。

1.牛的直肠检查﹙1﹚检查的步骤、方法及注意事项母牛保定清洗消毒。

人员剪磨指甲清洗消毒和润滑。

检查方法：手伸入骨盆腔中部寻找子宫颈、再角间沟，再次是子宫角，沿子宫颈大弯感触卵巢，失去目标从头再来。

注意事项⑴手臂要缓慢前伸，不能用力过猛或急速前伸，在向直肠深部深入时，可将手握成拳头，以防止损伤肠壁；⑵如果母牛努责，遇到肠管蠕动收缩或扩张，应停止活动，待肠壁收缩波越过手背，肠道松驰后再进行触摸，必要时还要随着收缩波后退，待蠕动停止时再向前伸检查，以防直肠损伤或破裂；⑶如果少数牛持续收缩久不停止时，可用手指或其他物体在牛背中线上压迫刺激，这样可促使肠壁松驰。

⑷检查完毕，手上有少量带血的黏液，则无关紧要，若有鲜红的血液，则停止触摸，进行治疗。

为检查人员的安全应注意：①检查人员应注意保暖防寒措施，防止感冒；手臂如有伤口时不应操作，一般要求使用长臂手套。

②保定架的后两柱之间不能架设横木，以免母畜滑倒下卧，损伤检查人员手臂。

③检查过程中提防母畜踢蹴，检查结束后要用消毒剂洗涤手臂，并涂以皮肤滋润保护剂。

为被检母畜的安全应注意：①检查人员指甲必须剪断、磨光。

②检查人员的手臂必须涂以滑润剂，切忌用干涩的后臂向母畜肛门硬插，并且在探摸生殖器官时只允许用指肚，切不能用于指甲乱抠、乱抓、乱划。

③检查动作应轻缓，以免造成流产。

（2）检查要点：早期：子宫角形态、质地和卵巢有无黄体存在，同时注意有无胚泡存在及其大小、形状、位置和性状等。

后期：子宫位置、肺泡或胎儿状态，同时注意卵巢位置变化和触诊子宫动脉的波动情况。

牛直肠检查模式图。