慢性氨氮胁迫对吉富罗非鱼幼鱼生长、免疫及代谢的影响

第１１卷第４期　２　０　１　５年８月　南方水产科学　Ｓｏｕｔｈ　Ｃｈｉｎａ　Ｆｉｓｈｅｒｉｅｓ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　Ｖｏ１．１１．Ｎｏ．４　Ａｕｇ．，２０１５　

ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．２０９５—０７８０．２０１５．０４．０１２　

慢性氨氮胁迫对吉富罗非鱼幼鱼生长、免疫及代谢的影响　

肖　炜，李大宇，徐　杨，邹芝英，祝璨琳，韩　珏，杨　弘　

（中国水产科学研究院淡水渔业研究中心，农业部淡水鱼类遗传育种和养殖生物学重点开放实验室，江苏无锡２１４０８１）　

摘要：以吉富罗非鱼（Ｏｒｅｏｃｈｒｏｍｉｓ　ｎｉｌｏｔｉｃｕｓ）幼鱼为对象，在养殖水体中设置０　ｍｇ・Ｌ　（Ａ。）、１．６３　ｍｇ・Ｌ　（Ａ　）、　３．２５　ｍｇ・Ｌ　（Ａ２）、６．５１　ｍｇ・Ｌ　（Ａ　）、１３．０１　ｍｇ・Ｌ　（Ａ　）共５个氨氮质量浓度，研究氨氮对幼鱼生长特性、免　疫功能及营养代谢的影响。研究发现３０　ｄ氨氮胁迫下，吉富罗非鱼增重率（ＷＧＲ）和特定生长率（ＳＧＲ）随着氨氮　质量浓度上升逐渐下降。免疫功能方面，随着氨氮质量浓度上升幼鱼白细胞逐渐增多，血红蛋白质量浓度逐渐　下降；Ａ，和Ａ　组幼鱼血清白蛋白和超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性显著低于Ａｎ组；Ａ　组幼鱼血清碱性磷酸酶　（ＡＫＰ）活性显著低于Ａ。。营养代谢方面，氨氮胁迫３０　ｄ后Ａ］和Ａ　组幼鱼血清甘油三酯活性显著低于Ａｎ组；　Ａ，～Ａ　组幼鱼血清胆固醇浓度均显著低于Ａ０组；谷丙转氨酶（ＡＬＴ）活性在Ａ３和Ａ　处理组下显著低于Ａ　和Ａ：　组；而谷草转氨酶（ＡＳＴ）活性在Ａ　处理组下显著低于Ａｎ组。研究结果表明在长期氨氮胁迫下，吉富罗非鱼幼　鱼的生长、非特异性免疫、营养代谢等均受到抑制，需要在养殖生产中密切关注水体中氨氮质量浓度的变化。　关键词：吉富罗非鱼；氨氮胁迫；生长特性；免疫功能；营养代谢　中图分类号：Ｓ　９１７．４　文献标志码：Ａ　文章编号：２０９５—０７８０一（２０１５）０４—００８２—０７　

Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｃｈｒｏｎｉｃ　ｅｘｔｅｒｎａｌ　ａｍｍｏｎｉａ　ｓｔｒｅｓｓ　ｏｎ　ｇｒｏｗｔｈ，ｉｍｍｕｎｉｔｙ　ａｎｄ　

ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ　ｏｆ　ｊｕｖｅｎｉｌｅ　ＧＩＦＴ　ｔｉｌａｐｉａ（Ｏｒｅｏｃｈｒｏｍｉｓ　ｎｉｌｏｔｉｃｕｓ）　

ＸＩＡＯ　Ｗｅｉ，ＬＩ　Ｄａｙｕ，ＸＵ　Ｙａｎｇ，ＺＯＵ　Ｚｈｉｙｉｎｇ，ＺＨＵ　Ｊｉｎｇｌｉｎ，ＨＡＮ　Ｊｕｅ，ＹＡＮＧ　Ｈｏｎｇ　（Ｋｅｙ　Ｌａｂ．ｏｆ　Ｆｒｅｓｈｗａｔｅｒ　Ｆｉｓｈｅｒｉｅｓ　ａｎｄ　Ｇｅｒｍｐｌａｓｍ　Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ　Ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ，Ｍｉｎｉｓｔｒｙ　ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ；Ｆｒｅｓｈｗａｔｅｒ　Ｆｉｓｈｅｒｉｅｓ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｃｅｎｔｅｒ，Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ａｃａｄｅｍｙ　ｏｆ　Ｆｉｓｈｅｒｙ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｗｕｘｉ　２１４０８１，Ｃｈｉｎａ）　

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ　ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｃｈｒｏｎｉｃ　ｅｘｔｅｒｎａｌ　ａｍｍｏｎｉａ　ｓｔｒｅｓｓ　ｏｎ　ｇｒｏｗｔｈ，ｉｍｍｕｎｉｔｙ　ａｎｄ　ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ　ｏｆ　ｊｕｖｅｎｉｌｅ　ＧＩＦＴ　ｔｉｌａｐｉａ　（Ｏｒｅｏｃｈｒｏｍｉｓ　ｎｉｌｏｔｉｃｕｓ），ｗｅ　ｄｅｓｉｇｎｅｄ　ｆｉｖｅ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ａｍｍｏｎｉａ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ　０　ｍｇ・Ｌ一。（Ａ０），１．６３　ｍｇ・Ｌ一　（Ａ１），３．２５　ｍｇ・Ｌ一　

（Ａ２），６．５１　ｍｇ。Ｌ　（Ａ３）ａｎｄ　１３．０１　ｇ・Ｌ　（Ａ４）．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗ　ｔｈａｔ　ａｆｔｅｒ　３０一ｄａｙ　ｆｅｅｄｉｎｇ，ｔｈｅ　ｊｕｖｅｎｉｌｅｓ　ｗｅｉｇｈｔ　ｇａｉｎ　ｒａｔｅ　（ＷＧＲ）ａｎｄ　ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ｇｒｏｗｔｈ　ｒａｔｅ（ＳＧＲ）ｄｅｃｒｅａｓｅｄ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｗｉｔｈ　ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｍｍｏｎｉａ．Ｆｏｒ　ｉｍｍｕｎｉｔｙ，ｔｈｅ　ｎｕｍｂｅｒ　ｏｆ　ｗｈｉｔｅ　ｂｌｏｏｄ　ｃｅｌｌｓ（ＷＢＣ）ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｂｕｔ　ｔｈａｔ　ｏｆ　ｈｅｍｏｇｌｏｂｉｎ（ＨＧＢ）ｄｅｃｒｅａｓｅｄ　ｗｉｔｈ　ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｍｍｏｎｉａ．Ｓｅｒｕｍ　ａｌ—　ｂｕｍｉｎ（ＡＬＢ）ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ　ｄｉｓｍｕｔａｓｅ（ＳＯＤ）ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｏｆ　Ａ３　ａｎｄ　Ａ４　ｗｅｒｅ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｌｅｓｓ　ｔｈａｎ　Ａ０，ｗｈｉｌｅ　ａｌｋａｌｉｎｅ　ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ（ＡＫＰ）ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ａ４　ｗａｓ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｌｅｓｓ　ｔｈａｎ　Ａｏ．Ｆｏｒ　ｍｅｔａｂｏｌｉｚａｔｉｏｎ，ｓｅｒｕｍ　ｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅｓ（ＴＧ）ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ａ３　ａｎｄ　Ａ４　ｗｅｒｅ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｌｅｓｓ　ｔｈａｎ　Ａ０，ｗｈｉｌｅ　ｔｏｔａｌ　ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ（ＴＣ）ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ａ１～Ａ４　ｗｅｒｅ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｌｅｓｓ　ｔｈａｎ　Ａ０．Ｓｅｒｕｍ　ａｌａｎｉｎｅ　ｔｒａｎｓａｍｉｎａｓｅ（Ａ　）ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｏｆ　Ａ３　ａｎｄ　Ａ４　ｗｅｒｅ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｌｅｓｓ　ｔｈａｎ　Ａ１　ａｎｄ　Ａ２．Ｍｅａｎｗｈｉｌｅ，ｏｎｌｙ　ａｓｐａｒｔａｔｅ　ｔｒａｎｓａｍｉｎａｓｅ　（ＡＳＴ）ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｏｆ　Ａ４　ｗａｓ　ｌｅｓｓ　ｔｈａｎ　Ａ０．Ｉｔ　ｉｓ　ｒｅｖｅａｌｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｇｒｏｗｔｈ，ｎｏｎｓｐｅｃｉｆｉｃ　ｉｍｍｕｎｉｔｙ　ａｎｄ　ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ　ｏｆ　ｊｕｖｅｎｉｌｅ　ＧＩＦＴ　ｔｉｌａｐｉａ　ｗｏｕｌｄ　ｂｅ　ｉｎｈｉｂｉｔｅｄ　ｕｎｄｅｒ　ｃｈｒｏｎｉｃ　ａｍｍｏｎｉａ　ｓｔｒｅｓｓ；ｃｈａｎｇｅ　ｏｆ　ａｍｍｏｎｉａ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｔｉｌａｐｉａ　ａｑｕａｃｕｌｔｕｒｅ　ｓｈｏｕｌｄ　ｂｅ　ｐａｉｄ　ｍｏｒｅ　ａｔｔｅｎ—　ｔｉｏｎ　ｔｏ．　

收稿日期：２０１４－１０－２１；修回日期：２０１４－１２—１６　资助项目：现代农业人才支撑计划项目（２１３０１０６）；现代农业产业技术体系建设专项资金（ＣＡＲＳ－４９）；中央级公益性科研院所基本科研业务　费项目（２０１３ＪＢＦＭ０１）；罗非鱼原良种保种选育　作者简介：肖炜（１９８２一），男，硕士，助理研究员，从事罗非鱼健康养殖研究。Ｅ—ｍａｉｌ：ｘｉａｏｗ＠ｆｉｒｅ．ｃｎ　通信作者：杨弘（１９６６一），男，研究员，从事鱼类遗传育种研究。Ｅ－ｍａｉｌ：ｙａｎｇｈ＠ｆｆｒ

ｃ．ｃｎ　８２　南方水产科学　第１１卷　

Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ＧＩＦＴ　ｔｉｌａｐｉａ；ａｍｍｏｎｉａ　ｓｔｒｅｓｓ；ｇｒｏｗｔｈ　ｔｒａｉｔｓ；ｉｍｍｕｎｅ　ｆｕｎｃｔｉｏｎ；ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ　

吉富罗非鱼（Ｏｒｅｏｃｈｒｏｍｉｓ　ｎｉｌｏｔｉｃｕｓ）是由国际水　

生生物资源管理中心（ＩＣＬＡＲＭ）利用４个非洲品系　尼罗罗非鱼和４个亚洲品系尼罗罗非鱼混合选育获　

得的品种，相比其他罗非鱼养殖品种，吉富罗非鱼　

具有生长速度快、抢食凶猛、群体产量高等诸多优　

点　，是目前中国罗非鱼养殖的主要品种之一。　

目前，吉富罗非鱼的养殖发展由于追求数量、轻管　

理，人工集约化养殖密度过大，残饵、粪便等有机　物的快速积累易导致水体中氨氮浓度上升　Ｊ，罗　

非鱼在氨氮胁迫下生长特性、免疫指标均可能发生　变化＿３－４ｊ，因而影响罗非鱼的养殖效益；同时氨氮　

浓度偏高易造成养殖生态系统失衡，加剧水体中病　

原微生物的爆发和蔓延，易导致罗非鱼病害频　发　。　，甚至威胁到商品鱼的质量安全。　

水体中的氨氮由离子氨（ＮＨ４＋）和非离子氨　

（ＮＨ　）组成，由于ＮＨ，不带电荷且具有较强的脂　

溶性，容易穿透鱼鳃的脂质性生物膜，对鱼鳃表皮　

细胞造成损伤，而ＮＨ４＋以一种大的水合离子形式　

存在，不能轻易的穿透鱼鳃的脂质性生物膜的疏水　性微孑Ｌ进入生物体内　Ｊ，氨氮胁迫影响鱼类正常　

的生长发育，严重时甚至导致死亡。作为一个重要　

的水环境因子，氨氮对罗非鱼的生理生化指标影响　

的研究备受重视。陈家长等　研究了不同作用时　

间（０　ｈ、２４　ｈ、４８　ｈ、９６　ｈ和１２０　ｈ）下不同质量浓　

度氨氮对吉富罗非鱼血清超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、　

碱性磷酸酶（ＡＫＰ）、溶菌酶和补体ｃ３活性的影响　

以及海豚链球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ　ｉｎｉａｅ）的易感性变化；　韩春艳等¨　将奥尼罗非鱼（０．ｎｉｌｏｔｉｃｕｓ×０．ａｒｅｕｓ）　

幼鱼暴露于不同质量浓度的氨氮溶液中，并测定０　

ｈ、１２　ｈ、２４　ｈ、４８　ｈ和７２　ｈ肝脏总抗氧化能力（Ｔ－　

ＡＯＣ）及相关抗氧化酶活力、血清溶菌酶等非特异　

性免疫相关指标。上述研究中氨氮胁迫对罗非鱼的　

影响研究主要集中在短时间不同氨氮浓度下罗非鱼　

成活、免疫机制等方面，长时间低浓度氨氮胁迫对　

罗非鱼生长及免疫影响的研究尚少见。该研究以吉　

富罗非鱼幼鱼为对象，通过不同质量浓度氨氮胁迫　

处理，研究３０　ｄ的氨氮胁迫环境对吉富罗非鱼幼　鱼生长及血常规参数、酶活性的影响，初步揭示氨　

氮胁迫对幼鱼生长以及反映鱼体免疫力的生理生化　

机制的影响，为吉富罗非鱼的科学养殖提供理论依　

据。　１材料与方法　

１．１实验用鱼及投喂方式　

实验用鱼取自中国水产科学研究院淡水渔业研　

究中心农业部罗非鱼遗传育种中心保种基地，在循　环水养殖系统中养殖约１４　ｄ，以人工配合颗粒饲料　

投喂，日投喂量为鱼体质量的５％～６％，每日投　

喂２次（０７：００，１７：００），每次达到饱食。选择规　

格、体质量基本一致的健康尼罗罗非鱼３００尾，个　

体初始体质量约为（２１．３±０．２）ｇ，随机分为５个　

组，每组３个平行，每个平行放养实验鱼２０尾。　

实验容器为１５０　Ｌ圆形塑料桶，盛放１２０　Ｌ养殖水　体。　

１．２饲养管理　

吉富罗非鱼在循环水养殖系统驯化１４　ｄ后进　行氨氮胁迫实验，通过预实验得知吉富罗非鱼９６　ｈ　

半致死质量浓度（９６　ｈ—ＬＣ　。）为１３０．１　ｍｇ・Ｌ～，安　

全质量浓度（ＳＣ）＝０．１　Ｘ　９６　ｈ—ＬＣ　：１３．０ｌ　ｍｇ・　

Ｌ～，等比例设计５个浓度组：氨氮质量浓度分别　为对照组０　ｍｇ・Ｌ　（Ａｏ）、１．６３　ｍｇ・Ｌ。。（Ａ　）、３．２５　

ｍｇ・Ｌ　（Ａ２）、６．５１　ｍｇ・Ｌ　（Ａ３）、１３．０１　ｍｇ・Ｌ　

（Ａ　），饲养３０　ｄ。实验中每天采用纳氏试剂法¨１＿　

测定水体中氨氮质量浓度，然后通过１０　ｇ・Ｌ　

ＮＨ　Ｃ１母液进行调节，实验用水为经充分曝气且除　氯的自来水，实验期间水温为（２６．０±Ｉ．０）ｏＣ，ｐＨ　

维持在７．７０　４－０．１０，溶解氧质量浓度维持在５．５～　

６．０　ｍｇ・Ｌ～，此时５组ＮＨ　质量浓度分别为０　ｍｇ・　

Ｌ　（Ａ。）、０．０５　ｍｇ・Ｌ　（Ａ　）、０．１０　ｍｇ・Ｌ　（Ａ　）、　

０．１９　ｍｇ・Ｌ　（Ａ３）和０．３８　ｍｇ・Ｌ　（Ａ　）。在实验过　程中，每天饱食投喂试验鱼２次（０７：００，１７：００），