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Zeiss 激光扫描共聚焦显微镜操作手册目录：1 系统的组成系统组成及光路示意图实物照片说明2 系统的使用2.1 开机顺序2.2 软件的快速使用说明2.3 显微镜的触摸屏控制2.4 关机顺序3 系统的维护1 系统的组成激光扫描共聚焦显微镜系统主要由：电动荧光显微镜、扫描检测单元、激光器、电脑工作站及各相关附件组成。
系统组成及光路示意图：电脑工作站激光器电动荧光显微镜扫描检测单元实物照片说明：电动荧光显微镜扫描检测单元CO2 培养系统控制器激光器电脑工作站2 系统的使用2.1 开机顺序（1）打开稳压电源（绿色按钮）等待2 分钟（电压稳定）后，再开其它开关（2）主开关[ MAIN SWITCH ]“ON”电脑系统[ SYSTEMS/PC ]“ON”扫描硬件系统[ COMPONENTS ]“ON”（3）打开[ 电动显微镜开关]打开[ 荧光灯开关]（注：具有5 档光强调节旋钮）（4）Ar 离子激光器主开关“ON”顺时针旋转钥匙至“—”预热等待约15分钟，将激光器[ 扳钮] 由“Standby”扳至“Laser run”状态，即可正常使用（5）打开[ 电脑开关]，进入操作系统注：键盘上也具有[ 电脑开关]2.2 软件的快速使用说明（1）电脑开机进入操作系统界面后，双击桌面共聚焦软件ZEN 图标（2）进入ZEN 界面，弹出对话框：“Start System”——初始化整个系统，用于激光扫描取图、分析等。
“Image Processing”——不启动共聚焦扫描硬件，用于已存图像数据的处理、分析。
（3）软件界面：1 功能界面切换：扫描取图（Acquisition）、图像处理（Processing）、维护（Maintain）（注：Maintain仅供Zeiss专业工程师使用）2 动作按钮；3 工具组（多维扫描控制）；4 工具详细界面；5 状态栏；6 视窗切换按钮；7 图像切换按钮；8 图像浏览/预扫描窗口；9 文档浏览/处理区域；10 视窗中图像处理模块动作按钮：Single ——扫描单张图片、并在图像预览窗口显示。
激光共聚焦显微镜操作指南说明书激光共聚焦显微镜（Laser Scanning Confocal Microscope）是一种高分辨率、高对比度的显微镜，广泛应用于生物医学研究、材料科学等领域。
本操作指南将详细介绍激光共聚焦显微镜的操作流程和基本操作技巧，帮助用户正确、高效地使用该设备。
一、设备准备在开始使用激光共聚焦显微镜前，需要进行以下设备准备：1. 检查电源线和数据线是否连接正常，确保设备供电和数据传输正常；2. 检查激光源是否正常工作，激光功率是否稳定；3. 检查镜头和滤光片是否清洁，清除灰尘和污渍，确保成像质量；4. 准备适当的标本样品，并将其固定在载玻片上。
二、系统启动1. 确保设备处于待机状态，按下电源按钮，等待系统启动；2. 检查系统软件是否正常运行，若出现异常情况，及时联系维修人员进行处理；3. 检查镜头和滤光片的安装是否正确，确保成像时的光路通畅；4. 开启激光源，根据需要选择合适的激光波长和功率；5. 调节扫描镜和物镜的位置，使光线准确聚焦在样品上。
三、图像获取1. 打开激光共聚焦显微镜软件，并根据需要选择合适的成像模式；2. 调节激光功率和增益，确保图像的亮度和对比度适宜；3. 调节扫描镜的扫描速度，根据样品的要求选择合适的扫描速度；4. 调节焦距和聚焦位置，通过手动或自动对焦功能获取清晰的图像；5. 点击图像捕捉按钮，记录当前图像或录制图像序列。
四、图像处理和分析1. 通过激光共聚焦显微镜软件提供的图像处理功能，对图像进行调整和增强，以获得更好的观察效果；2. 根据需要，利用软件提供的计算和分析功能对图像进行进一步处理，如三维重建、光学切片等；3. 对图像进行定量分析时，选择合适的工具和算法，并按照要求设定参数；4. 记录和保存处理后的图像数据，以备后续分析和报告撰写使用。
五、设备关闭1. 停止图像采集和处理工作；2. 降低激光功率，关闭激光源；3. 将扫描镜和物镜返回初始位置，关闭设备；4. 断开电源和数据线，保持设备清洁干燥。
激光扫描共聚焦显微镜操作流程详解激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscope)激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscope)，英⽂简写LSCM，俗称confocal。
LSCM是⼀种⾼科技显微镜，属于最先进的细胞⽣物学分析仪器。
我们学院使⽤的是瑞⼠徕卡公司(Leica)的TCS SP5型号的LSCM。
使⽤流程1、登陆ftp://10.31.60.139 或5号楼606室公⽤电脑下载《激光共聚焦预约使⽤审核表》，打印并填写。
2、联系卢剑清（⼿机：135********）审核并签名。
3、持已签名的《激光共聚焦预约使⽤审核表》⾄5号楼610室预约使⽤时间，及领取钥匙，联系⼈：窦凯飞（⼿机：152********）。
4、在熟练使⽤者的指导下，进⾏实验。
5、实验结束，及时归还钥匙。
仪器构造和原理LSCM的基本结构主要包括荧光显微镜系统及样品台、激光发射器、扫描器、检测器、图像存储处理和输出设备、计算机控制系统。
激光光源：激光扫描束经照明针孔形成点光源, 普通显微镜采⽤的⾃然光或灯光是⼀种场光源, 标本上每⼀点的图像都会受到邻近点的衍射光或散射光的⼲扰。
⽽LSCM 以激光为光源, 激光具有单⾊性强﹑⽅向性好﹑⾼亮度﹑相⼲性好等优点, 可以避免普通显微镜的缺点。
⼀般常⽤的⽓体激光器如氩(Ar) ﹑氪(Kr) ﹑氦(He)﹑氖(Ne)。
illuminating pinhole（照明针孔）：使激光经过照明针孔后形成点光源，点光源具有光源⽅向性强、发散⼩、亮度⾼、⾼度的空间和时间相⼲性以及平⾯偏振激发等独特的优点。
且与detector pinhole(探测器针孔)及焦平⾯形成共聚焦装置。
分光镜(BeamSplitter)：点光源发出的光经分光镜反射后, 通过物镜在样品聚焦。
对标本内焦平⾯上的每⼀点进⾏扫描,Focal plane（焦平⾯）：激光点光源照射物体在焦平⾯处聚焦，激发荧光标记的样本发射荧光，形成焦点光斑。
