粪便隐血试验
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粪便隐血检测标准操作规程1.【目的】为了规范粪便检测方法,特制定本规程2.【职责】2.1实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP,室负责人监督落实。
2.2本SOP的改动,可由任一使用本SOP的工作人员提出,并报经下述人员批准签字:室负责人、科主任。
3.【样本类型及实验前准备】3.1样本类型:标本应新鲜,注意避免污染3.2患者准备:患者处于安静状态精神、体力、情绪等因素的影响较小。
3.3容器添加剂类型:盛标本的容器应清洁、干燥、有盖,无吸水和渗漏。
3.4仪器设备:便隐血检测试剂盒(胶体金法)3.5标本的采集和保存:3.5.1采集粪便标本的方法因检查目的不同而有差别,如一般检验留取新鲜指头大小(约5克)即可,放入干燥、清洁、无吸水性的有盖容器内送检,标本容器最好用内层涂腊的硬纸盒,便于检查后焚毁。
血吸虫毛蚴孵化则留全量新鲜便(不少于30克)。
细菌检查的粪便标本应收集于灭菌封口的容器内,勿混入消毒剂及其他化学药品。
并立即送验检查。
3.5.2检查蛲虫卵需用软黏透明纸拭子,在清晨排便前由肛门四周拭取标本,也可用棉拭子拭取,但均须立即镜检。
3.5.3标本采集后一般应于1h内检测完毕,检查阿米巴滋养体,应于排便后立即检查。
冬季需采取保温措施,迅速送检。
3.5.4一般检验不应采取尿壶或便盆中的粪便标本。
若标本中混入尿液,可使柔弱的原虫致死。
粪便标本中不可混入植物、泥土、污水等,因腐生性原虫、真菌孢子、植物种子、花粉易混淆实验结果。
3.5.5粪便标本应选择其中脓血粘液等病理成分,若无病理成分,可多部位取材。
采取标本后,应在1 h内完成检查,否则可因pH及消化酶等影响,而使粪便中细胞成份破坏分解。
3.5.6检查胆石、胰石、寄生虫体及虫卵计数,应收集24小时粪便送检。
3.5.7隐血试验,应瞩患者收集标本前3日内禁食动物性食物。
连续检查3天,并选取外表及内层粪便。
收集标本后须迅速进行检查,以免因长时间放置使隐血反应的敏感度降低。
便潜血实验上消化道有少量出血时,红细胞被消化而分解破坏,由于显微镜下不能发现,故称为隐血。
[标本采集与处理]用洁静的容器,盛装小量的待检标本,立即送检。
[质量控制品]配制 3 %红细胞悬液。
[操作步骤]一、免疫学检测法(一)检测原理大便或其它液体隐血的免疫一步检验法是一个高灵敏度的夹心式酶联免疫测定法。
该法采用抗人血红蛋白的单克隆抗体和多克隆抗体,特异地针对粪便样品中的人血红蛋白。
因此,本试验不受动物血红蛋白的干扰,试验前不须禁食肉类。
(二)操作步骤取一片洁净干燥的载玻片,滴加2—3滴蒸馏水,取粪便小许,调成均匀混悬液。
取便隐血试纸条,按说明书操作,将试纸条的反应端浸湿。
在5min内观察结果。
若反应线(T)和质控线(C)同时呈蓝色色带即为阳性;若只有C线呈色为阴性;若丁线与C线均不显色,说明试验无效。
(三)质量控制1.敏感性和特异性(1)敏感性:样品中血红蛋白浓度超过0.2μg/m1,就可得到阳性结果。
(2)特异性:便潜血免疫一步检验法是特异对人体血红蛋白的检验,样品中若含有如下干扰物,实验结果不会受影响:鸡血红蛋白 500μg/ml牛血红蛋白 500μg/m1马血红蛋白 500μg/ml猪血红蛋白 500μg/m1羊血红蛋白 500μg/m1兔血红蛋白 500μg/m1辣根过氧化酶 200μg/m1 2.试验局限性(1) 本法可以帮助医生早期发现胃肠道病变,然而,由于家族性息肉或直肠癌可能不出血,或间断性出血,或出血在粪便中分布不均匀,都可造成阴性结果。
(2) 本法对正常人检验有时也会得到阳性结果,这是由于某种刺激胃肠道的药物造成便潜血所至。
(3)本检验法只能作为筛选或辅助诊断用,不能替代胃镜、直肠镜、内窥镜和X光检查。
3.室内质量控制:每天用质量控制品进行同步检验一次,以确保试剂质量。
二、试带法国内外生产以四甲基联苯胺为显色基质的隐血试验试带,使用方便,患者也可自留标本检测。
三、邻甲联苯胺法(一)检测原理血红蛋白中的亚铁血红素有类似过氧化物酶的活性,能催化过氧化氢,放出新生态氧,将受体邻甲苯胺氧化成邻甲偶氮苯而显蓝色。
隐血试验名词解释
隐血试验是一种检测尿液或粪便中是否存在隐血的常规临床检查方法。
隐血试验可帮助医生判断出血源的位置,对于早期发现消化系统出血及肿瘤的病变具有非常重要的临床价值。
隐血试验包括两种常见的方法:潜血尿试验和潜血粪便试验。
潜血尿试验是通过检测尿液中的隐血来判断是否存在泌尿系统病变。
正常情况下,尿液中不含有红细胞,如果尿液中存在隐血,则可能是泌尿系统疾病的信号。
尿液隐血试验通常是通过免疫层析法或化学反应法来进行检测。
若尿液隐血试验结果阳性,还需进一步进行尿常规、尿细胞学检查等进一步排查泌尿系统病变。
潜血粪便试验是通过检测粪便中的隐血来判断是否存在消化系统病变。
消化系统的疾病如胃癌、结肠癌等常常伴随着微量的隐血,通过粪便隐血试验可以早期发现这些病变,提高治疗成功率。
常见的粪便隐血试验方法有免疫层析法、化学反应法和免疫化学法等。
在进行潜血粪便试验前,应注意避免食用含有血红素的食物,如红肉、胡萝卜等,以避免产生假阳性结果。
尿液和粪便中的潜血试验是一种简便、快速、无创伤的检查方法,但其结果可能受到多种因素的干扰,如近期食用某些特定食物、特殊药物的影响,也可能存在假阳性或假阴性的情况。
因此,当结果呈阳性时,需要进一步进行其他检查来确定出血的原因和位置。
总之,隐血试验是一种重要的临床检查方法,能够帮助医生发现一些内脏病变,尽早进行治疗。
同时,在进行隐血试验时,需要注意避免一些可能干扰结果的因素,以确保结果的准确性。
化学法和免疫法检测大便隐血的比较和应用摘要】粪便隐血试验是诊断消化道出血性疾病的一个重要指标,对早期发现和诊断消化道出血性疾病有重要意义。
本文对化学法隐血试验和免疫法隐血试验进行了比较。
化学法隐血试验受饮食、铁剂和还原性物质等干扰,易形成假阳性或假阴性结果。
免疫法隐血试验有较高的敏感性和特异性。
【关键词】隐血化学法隐血试验免疫法隐血试验大便检测是体液检测中一个比较简单的项目,虽然简单但意义却重大。
人体的大便主要由消化后未被吸收的食物残渣,消化道分泌物,大量细菌和无机盐及水分等组成。
通过大便检测可以了解消化道有无炎症,出血,寄生虫,恶性肿瘤等。
而其中粪便隐血检测对消化道出血的诊断有重要价值。
消化道溃疡粪便隐血阳性率可达40%-70%,呈间断性阳性,胃癌,结肠癌等消化道肿瘤粪便隐血阳性率可达95%呈持续性阳性。
药物性胃粘膜损伤,肠结核,溃疡性结肠炎,结肠息肉,钩虫病等引起的消化道出血可以用粪便隐血实验检测。
目前临床上各种原因消化道出血的病人比较多,临床要求做大便隐血检测的病人也比较多,检验科是否准确的出报告将影响临床医生的诊断。
在工作的过程中经常听到医生说我的病人明明有出血为什么检验科出的隐血报告却是阴性,或着明明病人没有出血有时隐血报告又是阳性,到底是怎么回事?现在我把检测大便隐血方法的原理及优缺点比较一下。
便于大家更好的了解。
大便隐血检测的方法我们一般采用化学法隐血试验和免疫法隐血试验。
化学法隐血试验常用方法有:邻联甲苯胺法、还原酚酞法、联苯胺法、匹拉米洞法、无色孔雀绿法、愈创木脂法等。
各种化学方法原理基本相同,均是利用血红蛋白中的含铁血红素部分有催化过氧化物分解的作用,催化试剂中的过氧化氢,分解,释放新生态的氧,氧化各种色原物质而呈色,呈色的深浅反映了血红蛋白的多少,亦即出血量的大小。
从原理可以看出化学法隐血试不仅对人体自身的上下消化道出血可以检测的到,外源性动物食品中的血红蛋白,肌红蛋白和其它含有过氧化物酶的食物也可使实验呈阳性。
隐血试验免疫学检测的原理隐血试验是一种常见的免疫学检测方法,用于检测人体样本(如粪便、尿液等)中是否存在隐血。
该方法通过检测特定的抗体与血液中的血红蛋白结合来实现。
血红蛋白是红细胞中的主要成分之一,当血液与硬便、尿液等发生接触时,如果存在出血情况,血红蛋白就会释放进入粪便或尿液中。
在隐血试验中,我们采用了一种叫做免疫层析法的技术来检测血液中的血红蛋白。
具体的实验步骤如下:首先,我们需要获得待检测样本,例如患者的粪便样本。
其中可能包含了一小部分隐血。
为了提高检测的灵敏度,通常需要将样本进行稀释处理,以便更好地检测出罕见的隐血。
接下来,我们将稀释后的样本滴加在特定的试纸上。
该试纸有两个区域:试纸的上部是一个检测区,含有一种特异性抗体,可以识别和结合血红蛋白。
试纸的下部是一个控制区,含有另外一种特定抗体,可以用来确认试纸是否正常工作。
在样本滴加到试纸上后,血红蛋白(如果存在)就会与试纸上的第一种抗体结合。
如果样本中存在隐血,试纸上的检测区就会出现一个可见的颜色条带。
如果样本中不存在血红蛋白,试纸上的检测区就不会出现颜色条带。
最后,我们进行结果的观察和判断。
如果试纸的控制区出现颜色条带,说明试纸正常工作。
如果试纸的检测区也出现了颜色条带,说明样本中含有血红蛋白,即为阳性反应。
如果试纸的检测区没有颜色条带出现,说明样本中没有血红蛋白,即为阴性反应。
总而言之,隐血试验的原理是利用特异性抗体与血红蛋白结合的免疫层析技术来检测样本中是否存在血红蛋白。
通过观察试纸上是否出现颜色条带,可以判断样本中是否存在隐血。
这种方法简单、快速、灵敏度较高,被广泛应用于临床实验室和家庭诊断中。
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粪便隐血试验(胶体金法)
原理:应用胶体金免疫检测技术,双抗体夹心法。在检验试纸条的检
测线包被有抗人血红蛋白抗体,质控线包被有羊抗鼠IgG抗体,在检
测试纸条加样的一端固定有另一抗人血红蛋白单克隆抗体标记的胶
体金颗粒。经收集处理的标本与胶体金颗粒混合后,如存在人血红蛋
白时,样品有Hb会与和胶体金上的抗体结合,可在检测线上出现红
色色带。
标本要求:新鲜粪便标本。标本应取自粪便的不同部位。标本须 1 小
时内测定完毕,因为标本留取时间较长血红蛋白会被细胞分解。检测
后的标本不保存。
试剂:粪便隐血试纸条。蒸馏水使用万华普曼生物工程有限公司生产
的“消康保”牌便隐血胶体金检测试纸。 规格:条型:1人份/条
×100条/盒 批准文号:国药准字S19980076 .储存条件和有效期
原包装应储存于4-30摄氏度,阴凉干燥处,有效期24个月。切忌冷
冻或在已过有效期后使用。试剂应在铝箔袋撕口后1小时内尽快使
用。
操作步骤: 待测样品、检测试纸或其他检测用材料等均在室温10
摄氏度~30摄氏度平衡后取出。 .1 取一次性小样品杯,将样品杯标
记后放在样品架上; .2 用采样棒取火柴头大小标本放于杯内,
并置装有蒸馏水的小试管中,搅拌 均匀。 .3 混匀后折断采便
器尖端滴加于样品杯内即可; .4 将试纸条箭头所指的一端浸入
标本溶液中,标本液面不要超过MAX标记线,等待紫红色条带出现。
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测试结果应在 5 分钟时读取,10 分钟后判断结果无效。
结果判读:阳性:控制线(C)及反应线(T)位置各出现一条色带,
表明标本中有隐性 出血。 阴性:仅控制线(C)出现一条色带,
表明标本中无隐性出血。 无效:控制线(C)及反应线(T)或仅在
反应线(T)出现一条色带,表明试 验无效。请用新检测试纸重试。
参考值 :能检测出人血红蛋白不低于100mg/ml的样本
临床意义:适用于消化道的溃疡病、恶性肿瘤、结核、寄生虫病、炎
症、痔疮等的早期发现和诊断。
操作性能:1.灵敏度:本品灵敏度0.2ug/ml。检测范围0.2ug/ml—
2000ug/ml,且不受食物因素的影响,无需禁食。 2、特异性:具有
高度特异性,且不受动物血红蛋白和辣根过氧化物酶等干扰,也不受
新鲜蔬菜、铁剂、维生素C的干扰。3、快速简便,安全性高,灵敏
度适中。
注意事项:正常人便隐血检测结果呈阳性,可能是由某些药物刺激胃
肠道造成的隐性出血。 2. 在粪便形成的过程中,少量的消化道出
血不一定与之混合均匀,而且消化道出血具有间断性,所以需连查三
次以获得更准确结果,只要有一次结果为阳性,就可认为有隐性出血
存在。 3. 如果处于月经期或有尿血、口鼻腔出血都可能会引起试验
的假阳性结果。 4. 出现柏油样便时,血红蛋白浓度超出2000ug/ml
检测范围可能会因为前滞反应出现假阴性结果,此时需要充分稀释便
样后在进行检测。此时应增加样本浓度检测或再连续检测2—3次,
并结合临床进行判断。 5. 由于和操作上可能出现的失误,同时也
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由于标本存在干扰物质,试验结果有可能错误。对可疑的结果应作进
一步检查,并进行连续监测。 6. 如其他检测方法一样,便隐血检
测试纸(胶体金法)不能对胃肠道出血性病变做结论性诊断,只能作
为筛选或辅助诊断用,单不能代替临床内窥镜、V线和其他检查。对
于阳性那个结果,应结合临床做进一步的检查。
方法局限性:只能定性不能定量。抗原抗体反应受温度影响较大。某
些正常人服用刺激胃肠道的药物可出现假阳性。上消化道出血患者有
时可因为血红蛋白经过肠道消化酶降解变性而不具有原来的免疫原
性,抗体与抗原不匹配,出现假阴性。过量的血红蛋白会导致反应体
系中抗原过剩,出现前带现象而出现假阴性结果,且血红蛋白浓度过
低也会出现假阴性结果。
参考文献:1万华普曼FOB试剂盒使用说明 2.《全国临床检验操作
规程》(第三版)
(学习的目的是增长知识,提高能力,相信一分耕耘一分收
获,努力就一定可以获得应有的回报)