化学发光——杨晓林

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化学所制备出一种发光波长可调控的有机纳米粒子

化学所制备出一种发光波长可调控的有机纳米粒子
佚名
【期刊名称】《纳米科技》
【年(卷),期】2005(2)5
【摘要】在国家自然科学基金和中科院创新群体基金的资助下，中科院化学所的姚建年课题组，在前期吡唑啉有机纳米粒子研究的基础上，进一步将研究工作拓展至掺杂有机纳米粒子上，在有机纳米粒子发光颜色的调控方面取得了新进展。

该研究成果发表在近期出版的《先进材料》上。

【总页数】1页(P67-67)
【关键词】有机纳米粒子;中科院化学所;发光波长;调控;国家自然科学基金;制备;粒子研究;发光颜色;先进材料
【正文语种】中文
【中图分类】TB383;TQ324.21
【相关文献】
1.ATP适体接枝Fe3O4纳米粒子的制备及化学发光酶检测应用 [J], 严喜鸾;陈馨;高文菊;魏婷婷;林月敏;艾凡荣
2.我国研制出发光颜色可调控的有机纳米粒子 [J], 李家鸣
3.一种新型pH响应型荧光聚合物纳米粒子的制备和AIE发光性能研究 [J], 路宝翠;关晓琳;来守军
4.一种新型pH响应型荧光聚合物纳米粒子的制备和AIE发光性能研究 [J], 路宝翠;关晓琳;来守军;
5.有机配体对NaBiF4:Yb3+/Er3+上转换纳米粒子形貌和发光性能的调控研究 [J], 邵康; 汪涛; 闻莹婷; 滕渊洁; 刘会君; 潘再法
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流动注射纳米微反应器化学发光法测定盐酸多塞平

ＩＦ — Ｄ型流动注射化学发光分析仪（安瑞迈科技有限公司）ＮＤ型交流可逆电动蠕动泵（０ｒ・ｉＩ）八通阀ｌＦＬＤ西；３ｒｎ１；ａ聚
四氟乙烯管（内径０８ｍｍ，于连接阀和流路中的泵管）．用．
目前测定其含量的方法有紫外分光光度法＿、Ｌ１ＨＰＣ法［］气相色谱法【等．其能增溶、稳、善环境的ｐ值以及提高］２、。４］因增改Ｈ化学发光灵敏度和选择性，胶束纳米微反应器在化学发光分析中Ｅ益受到重视 ¨ ７．研究发现，酸性条件下，子化的反１５］经Ｉ在质
化学发光，在一定浓度范围内，学发光强度与盐酸多塞平的浓度成正比，合流动注射技术可测定盐酸多塞平的含量．且化结该法具有较高的灵敏度和选择性．
１实验部分
１１仪器与试剂．
盐酸多塞平与阴离子ＡｕＩ形成离子缔合物，离子缔合物被二氯甲烷萃取后进入以含鲁米诺的二氯甲烷和环己烷（１Ｃ￣该１：，
ｖｖ为主体溶剂所形成的氯化十六烷基三甲基铵（ＴＣ）米微反应器中，解出来的ＡｕＩ／）ＣＡ纳离Ｃ￣微反应器中的鲁米诺产生－与

铈(Ⅳ)-3,4-二羟基苯甲酸-奎宁化学发光体系的研究与应用

铈(Ⅳ)-3,4-二羟基苯甲酸-奎宁化学发光体系的研究与应用唐志华;吴迎春
【期刊名称】《分析科学学报》
【年(卷),期】2010(26)6
【摘要】实验发现,3,4-二羟基苯甲酸与铈(Ⅳ)在酸性介质中产生弱化学发光反应,奎宁存在能增强此发光,由此建立了化学发光法测定微量3,4-二羟基苯甲酸的新方法。

该方法的线性范围为8.0×10-7～1.0×10-4mol/L,检出限为5.0×10-8,对8.0×10-6mol/L的3,4-二羟基苯甲酸进行11次测定的相对偏差为3.0%。

该法应用于测定汉江水中加入的3,4-二羟基苯甲酸,结果令人满意。

【总页数】3页(P732-734)
【关键词】化学发光;铈(Ⅳ);3,4-二羟基苯甲酸(DHBA);奎宁
【作者】唐志华;吴迎春
【作者单位】陕西理工学院化学与环境科学学院
【正文语种】中文
【中图分类】O657.39
【相关文献】
1.铈(Ⅳ)-3,4-二羟基苯甲酸-吐温40化学发光体系的研究及其应用 [J], 谢成根;李淮芬
2.流动注射化学发光测定痕量3,4-二羟基苯甲酸 [J], 李淮芬;谢成根;王家骅
3.邻苯二酚衍生物与稀土元素配位反应的研究(V)——3,4-二羟基苯甲酸与铈(Ⅲ)的
配位与转型反应 [J], 邓建成;朱美香;钟超凡;童珏
4.铈-3，4-二羟基苯甲酸配合物的极谱研究 [J], 阮湘元;邓建成;童珏
5.邻苯二酚衍生物与稀土元素的配位反应（Ⅲ）──铈（Ⅳ）与3，4－二羟基苯甲酸配位反应 [J], 邓建成;钟超凡;胡汉祥;童珏
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流动注射化学发光法测定水中的邻苯二酚

ｆｗｉｅｔｎｃｅｌｍｉｅｃｎｅｌ－ｊｃｉｈｍｉｎｓｅｃｏｎｏｕ
ＣＮｉ。ＷＡＮＪｕｃｕＺＨＥＨｕ，Ｇｉ－ｈｎ，ＨＯＵｎ，，ＭｉＭＡｎ－ｎＹｏｇｊｕ
ＣＨＥＪｎｈｉ，Ｉ－ｅＮｕ－ｕ。Ｌｊ。Ｙｕｉ
流动注射化学发光法测定水中的邻苯二酚
陈慧Ｌ，王九春周敏，，马永钧，陈俊辉。，李玉杰。
（．１西北师范大学化学化工学院，甘肃兰州 ’７０７；．西北师范大学甘肃省高分子材料重点实验室，、３００２甘肃兰州学省部共建生态环境相关高分子材料教育部重点实验室，甘肃兰州７０７）３００７０７；．３００３西北师范大
限为１００ｔｌＬ１３）相对标准偏差为１２（．ｘｌｔｏ・邻苯二酚，￣１）将该法应用于自．Ｘ１ｏ・－（，ｏ．１ｏｏｌＬＯ／－１．／－－来水、黄河水及实验室废水中邻苯二酚的测定，回收率在９．～１５３之间．７Ｏ０．同时初步探讨该发光反应的机理．
ｗａｒｓｎｅａｅｎｃｅｉｍｉｅｃｎｅｒａｔｏｆｐｒｃｔｃｏｎｇｌｎｉ— ｏａｓｕｐｒｎａａｅｓｐｅｅｔｄｂｓｄｏｈｍｌｎｓｅｃｅｃｉｎｏｙｏａｅｈｌｉａａｇｎｐｔｓｉｍｅｍａｇｎｔ－ｕｐｌｐｏｐｏｉｃｄｓｓｅ．Ｏｎｏｔｍｕｃｎｉｉｎ，ｔｅｌｅｒｒｎｅｏｔｉｅｓ２０Ｘ０－．ｏｙｈｓｈｒｃａｉｙｔｍｐｉｍｏｄｔｓｈｉａａｇｂａｎｄｗａ．ｏｎ１～１０Ｘ０１一ｍｏｌ・Ｌａｄ２０Ｘ０６５０× １ — 一ｎ。１ — —．０ｍｏｌ・Ｌ一ｅｐｃｉｅｙｆｒａｄｔｃｉｎｌｉｏ．ｒｓｅｔｖｌｏｅｅｔｏｉｔｆ１０× １ — ｏｍ００ｍｌ・Ｌ一

能发光的杨树

能发光的杨树
佚名
【期刊名称】《华东森林经理》
【年(卷),期】1995(000)002
【总页数】1页(P43-43)
【正文语种】中文
【中图分类】S792
【相关文献】
1.由AMPPD发光中尖体光致发光模拟其化学发光光谱的机理 [J], 涂浪平;孔祥贵
2.杨树产业发展前景广阔--访中国杨树委员会良种繁育基地杨树专家伍国光 [J],
3.Sr4Al14O25∶Eu2+,Dy3+长余辉发光材料发光强度巨大提升及不同温度条件下发光性能探究 [J], 肖茜;陈虹廷;任文宁
4.硅基掺铒二氧化钛薄膜发光器件的电致发光:共掺镱的增强发光作用 [J], 朱伟君;陈金鑫;高宇晗;杨德仁;马向阳
5.高效圆偏振发光的两种新策略:手性发光分子界面自组装和电荷转移态发光 [J], 韩布兴
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有趣的发光生物与奇妙的发光蛋白

有趣的发光生物与奇妙的发光蛋白
林济民;王江云
【期刊名称】《自然杂志》
【年(卷),期】2011(033)005
【摘要】“生物发光”现象一直以来都吸引着科学家的好奇心,它看似神奇,但在自然界十分普遍.“生物发光”现象有着独特的生态功能和进化意义.在漫漫历史长河中,人类对生物发光现象的探索从未停止过.从用发光生物作为最原始的照明工具,到利用绿色荧光蛋白标记细胞内组分；从对生物发光机理的探究,到荧光蛋白种类的开发,科学的脚步在一步步前进,生命的秘密也在一点点被点亮.
【总页数】6页(P285-290)
【作者】林济民;王江云
【作者单位】中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所,上海200031;中国科学院生物物理研究所,北京100101
【正文语种】中文
【相关文献】
1.生物发光与生物超微弱发光 [J], 周禾;杨起简
2.超敏化学发光液稀释法降低蛋白印迹的发光强度 [J], 范才文;唐娟;罗琴;李璐;向秋
3.生物发光及化学发光在生物医学领域中应用的进展 [J], 杨晓林
4.奇妙的生物发光 [J], 方陵生（编译）
5.几种吡唑啉衍生物的光致发光和电致发光特性研究--一类蓝色的OLED发光材料[J], 张晓宏;吴世康;高志强;李振声;李述汤
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人血清脂联素竞争性酶免疫分析方法的建立及初步应用

人血清脂联素竞争性酶免疫分析方法的建立及初步应用黎明;阴津华;高珊;张葵;吴从愿【期刊名称】《中国糖尿病杂志》【年(卷),期】2007(15)11【摘要】目的建立测定人血清脂联素(APN)水平的酶免疫分析法(EIA),以评价APN水平检测的临床意义.方法采用重组人APN蛋白免疫小鼠,获得高效价的抗人APN多克隆抗体,再以APN包被塑料孔条作固相抗原,与样本中的液相抗原竞争结合限量的APN抗体,从标准曲线判读待测样本的浓度,建立人APN竞争性EIA. 结果方法的灵敏度为10 μg/L,可测范围为10～800 μg/L,批内和批间变异系数均＜10%.用本方法测得101名健康正常人的APN水平为男11.7±7.4mg/L、女16.2±6.8mg/L,女高于男;64例2型糖尿病(T2DM)患者为男4.3±2.0 mg/L、女5.9±2.5 mg/L;T2DM患者低于同性别的正常人(P均＜0.01).结论新建立的APN-EIA法具有简便准确等优点,可广泛应用于APN临床意义的研究.【总页数】3页(P693-695)【作者】黎明;阴津华;高珊;张葵;吴从愿【作者单位】100730,中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院内分泌科;山西医科大学第一医院内分泌科;首都医科大学朝阳医院京西院区内分泌科;100730,中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院内分泌科;100730,中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院内分泌科【正文语种】中文【中图分类】R9【相关文献】1.骨碱性磷酸酶(BAP)酶联免疫吸附分析方法的建立及初步应用 [J], 王蕾蕾;苏学云;李华柏;赵京超2.人心肌肌钙蛋白Ⅰ酶促化学发光免疫分析方法的建立 [J], 贾娟娟;刘一兵;张雪峰;李子颖;韩世泉3.人血清脂联素酶联免疫吸附试验测定方法的建立及临床应用研究 [J], 魏文青;赵满仓;焦娟;张艳;刘晶;付瑶;安萍4.人促甲状腺激素酶促化学发光免疫分析方法的建立 [J], 李丽波;刘一兵;官国英;刘中瑞;侯惠仁;梁瑞鹏5.人血清CYFRA21-1化学发光免疫分析方法的初步建立及应用 [J], 潘慧杰;刘红;唐磊;李嘉;杨萌萌;杨铁生;樊春红;杨晓林;孙旭东因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

草酸酯—过氧化氢—荧光体体系的化学发光研究

草酸酯—过氧化氢—荧光体体系的化学发光研究
杨振华;金钟声
【期刊名称】《发光学报》
【年(卷),期】1979(0)Z1
【摘要】化学发光是伴随着化学变化而发光的现象。

象人们很早就熟习的萤火虫、海萤、朽木等动植物的发光,以及在墓地里看到的“鬼火”,均属化学发光。

化学发光的研究工作很早就开始了,并且在化学分析以及探讨生物发光机理等方面获得了
广泛的应用。

但由于这种发光的强度弱、寿命短,长期来不能用作实用照明光源。

近十几年来,由于实验技术的进步和量子化学研究方法的进展,使得人们对激发态知识有了较深刻认识结果,促进了有机化
【总页数】6页(P250-255)
【作者】杨振华;金钟声
【作者单位】长春应化所化学发光组;长春应化所化学发光组
【正文语种】中文
【中图分类】G6
【相关文献】
1.鲁米诺-过氧化氢-Fe(Ⅲ)-8-羟基喹啉化学发光体系的研究及其应用 [J], 李梦耀;钱会
2.具有发绿光的过氧草酸酯类化学发光体系的研究 [J], 支在良
3.碳点在鲁米诺和草酸酯化学发光体系中的研究进展 [J], 沈成龙;娄庆;单崇新
4.CdTe纳米棒-过氧化氢化学发光体系的研究 [J], 陈志兵;史洪伟;王红艳
5.过氧草酸酯类化学发光体系的研究进展 [J], 支正良;于山江;华万森;陈守文;杨绪杰;陆路德;江信
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光泽精流动注射化学发光法测定呋喃西林的含量

第３期
叶瑞洪等：光泽精流动注射化学发光法测定呋喃西林的含量
・２４１・
１０－３ｍｏｌ／Ｌ的溶液备用．呋喃西林精粉：购于哈尔滨市洁宝水族用品有限公司．氢氧化钠（ＡＲ，广东光华化学厂有限公司）；过氧化氢溶液（ａｒｔ，国药集团化学试剂有限公司），实验时配制；实验用水为三蒸水．
中图分类号：Ｏ６５７－３文献标识码：Ａ文章编号：２０９５．２４８１（２０１３）０３．０２４０．０５
呋喃西林（ＮＦＺ）分子式ｃＨＮ４０，分子量为１９８．１４，是硝基呋喃类药物之一，因其具有广谱抗菌作用
和促生长作用曾广泛应用于畜牧养殖业和水产养殖业中，但此药物及其代谢物在动物源性食品中的残留可以通过食物链传递给人类，长期摄人会引起各种疾病，对人体有致癌、致畸胎等副作用【１１．我国农业部及世界各国均禁止硝基呋喃类药物在所有食品动物养殖中使用．由于此类药呋喃西林的含量
叶瑞洪，林谦，卢贵文，吴琳
３５０３００）
（福建师范大学福清分校化学系，福建福清
摘要：基于光泽精在碱性条件下可以被过氧化氢氧化产生化学发光，结合流动注射技术建立了一种直接测定呋喃西林的流动注射化学发光新方法．该方法的最佳测定条件：Ｈ２０：的浓度为０．０２０ｍｏｌ／Ｌ，ＮａＯＨ的最佳浓度为Ｏ．０８０ｍｏｌｌＬ，光泽精浓度为１．０￣１０－Ｔｍｏｌ／Ｌ，负高压为８００Ｖ，蠕动泵主泵运行１０ｓ后副泵运行３０ｓ，接着主泵继续转动

流动注射化学发光体系自动测定异烟肼的溶出度!

［#， B］于药物的分析测定 * 化学发光分析结合流动注射技术具有了能应用于药物溶出过程研究的特点，能准
确、方便地对药物的快速溶出过程进行监测 * 目前所报道的用化学发光法测定异烟肼的方法主要是基于鲁
［A K L］［A，［&$］ L］米诺体系及高碘酸钠体系利用 +O2 （+ K 溴代琥珀酰亚胺）直接氧化异烟肼产生化 * M0)<03N97 等人［&&］学发光的方法对其进行测定，但灵敏度较低，张淑蓉等人利用荧光素对 +O2P异烟肼化学发光体系的增
（ "?） ?@A+ 及 D3 #E 1 溶液作载流进行试验，结果表明以水作载流时的信噪比最大，因此，本实验选择水作载（采样体流；同时实验了流路参数对发光的影响，结果表明，当流通管内径为 4:; 77，采样管长度为 0, <7 积为 14 ! ，阀池距为 1 <7，总泵速为 3:4 7$ ’ 7NR 时，可以获得最大的信噪比 = $）
［0， 0,］
（ "?） @: D3 #E G: ?@A+；<: +, A；H: 样品；5: 循环管； 1； 7: 搅拌器；I: 恒温水浴；J: 在线过滤器；K0 ， K, : 蠕动泵； L: 八通阀；#: 流通池；M: 废液；8: 检测器；K" 微型计算机 :
图0 #N>:0
异烟肼溶出度的流动
注射化学发光分析示意图 )<OE7@IN< 8N@>5@7 BJ IOE #(%"$ )PHIE7 规定的方法 JB5 8NHHBCQINBR *EHINR> BJ (HBRN@SNT *@GCEIH
［&］溶出度系指药物从片剂或胶囊剂等固体制剂在规定溶剂中溶出的速度和程度 * 溶出度测定能反映主

化学发光——杨晓林89页PPT

谢谢！
89
化学发光——杨晓林
21、静念园林好，人间良可辞。 22、步步寻往迹，有处特依依。 23、望云惭高鸟，临木愧游鱼。 24、结庐在人境，而无车马喧；问君何能尔？心远地自偏。 25、人生归有道，衣食固其端。
▪
26、要使整个人生都过得舒适、愉快，这是不可能的，因为人类必须具备一种能应付逆境的态度。——卢梭
▪
27、只有把抱怨环境的心情，化为上进的力量，才是成功的保证。——罗曼·罗兰
▪
28、知之者不如好之者，好之者不如乐之者。—抵得上武器的精良。——达·芬奇
▪
30、意志是一个强壮的盲人，倚靠在明眼的跛子肩上。——叔本华

淋巴细胞化学发光的研究

淋巴细胞化学发光的研究
张亚松
【期刊名称】《战创伤参考资料》
【年(卷),期】1996(025)004
【摘要】淋巴细胞安光（Ｌｙ－ＣＬ）是淋巴细胞活化的早期事件之一。

Ｌｙ－ＣＬ的产生依赖于胞浆游离Ｃａ＾２＋浓度的增加，通过激活ＮＡＤＰＨ氧化酶，导致ＯＲ的产生及ＣＬ的产生。

Ｌｙ－Ｃｌ的测定采用人烁计数器发光光度计，具有用血量少、敏感、恒温等优点。

目前，Ｌｙ－ＬＣ的测定不仅用于基础医学中淋巴细胞早期活化，药物、病毒或其它分子，细胞与淋巴细胞相互作用机制的研究，而且成为临床上淋巴细胞活性或功能检测的有效手段。

【总页数】4页(P19-22)
【作者】张亚松
【作者单位】第三军医大学大坪医院
【正文语种】中文
【中图分类】R329.2
【相关文献】
1.肿瘤坏死因子β诱导淋巴细胞化学发光及其增殖的研究 [J], 俞越汉;丁鸣;马志章;王君晖;钱凯先;丁仁瑞
2.人外周血淋巴细胞化学发光的实验研究 [J], 司传平;李华
3.淋巴细胞化学发光液闪光辐射探测方法研究与临床应用 [J], 李天星;胡波;邓少丽
4.正常人淋巴细胞化学发光（Ly—CL）测定的研究 [J], 苏枭;茅子均
5.麻风病人外周血中性粒细胞和淋巴细胞化学发光“功能”的研究 [J], 黄林邦;张志渊
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增强剂（Enhancer）
OH R
N
R B OH
OH
R
OH
S
商业化产品中常见的化学发光系统
O
O OCH 3
O
AP
O OCH 3
OPO32-
OOCH3
AMPPD及其衍生物的化学发光系统
O
O
*
光子(477nm)
+
O-
商业化产品中常见的化学发光系统
CH3 N+ CH3 N CH3 N + H2O
吖啶酯化学发光系统
主要不足
工作曲线随时间漂移低端斜率呈非线性下移
试剂成本高、发光时间短测量方式复杂（积分法）需原位进样(In Situ Injector)仪器成本及维护费用较高试剂成本较高
时间分辨荧光
铕（Eu）、镝(Dy)、灵敏度较高、试剂较钐（Sm）、铽稳定（Tb）、等络合物脉冲光源激发
钌(Ru)的络合物脉冲电场激发
均相法（Homogeneous）
非均相法（Heterogeneous）
均相法（Homogeneous）
免疫凝集法：自然凝集：血型测定肥达氏反应；敏化凝集：血球凝集法凝胶（微粒）比浊法免疫扩散法；免疫电泳法近场液闪法，

酶--辅酶（亚基）配位法
荧光偏振法，荧光共振法吖啶酯水解法，生物传感器
对于患者来讲，最佳的参考值是自己以往的测定数据，即自身对照；因此积累病人的基础数据非常重要。
FSH
尤其是性激素、生长激素、胰岛素等具有周期性分泌或释放规律的激素。
某一患者变化规律（无排卵峰）正常人平均值变化规律
正常参考值范围
时间卵泡期排卵期黄体期月经期
检验医师必须牢记检验医师给临床所提供的一切服务仅限于
Hook(前滞)效应
线性范围
待测物浓度（X）
竞争法的原理
待测物
标记抗原包被抗体
固相支持物表面
竞争法的剂量--反应关系曲线
信号强度（ Y ）
分析灵敏度（最低检测限）（95%可信度）： S0-2SD在该曲线上所对应的浓度值功能灵敏度：测定误差（变异）≤20%的最低可检测浓度线性范围：（分析）功能灵敏度---变异≤20%的最高检测浓度相关系数≥0.99的曲线范围
化学发光（Chemiluminescence）
由于化学反应（通常是氧化）产生电子能级处于激发态的物质，后者通过跃迁释放能量产生光子，从而导致的发光现象。
生物发光和化学发光均属于冷光，即发光不是由于发光体温度升高所至，发射波长也与其温度无关
化学发光的分类
按化学反应类型
酶促化学发光：
这些发光检测技术的灵敏度及线性范围都已经接近了免疫反应的极限。
片面宣扬检测技术灵敏度和线性范围的强弱，不仅毫无意义，而且也是荒谬的。
灵敏度的瓶颈在于抗体亲合力和干扰免疫反应的因素，而不是检测技术。
筛选抗体、屏蔽干扰，生产工艺、管理水平和技术服务是试剂生产的关键
例如：电化学发光TSH检测试剂的分析灵敏度为0.005mIU/L
程控高压
样品运动/定位装臵原位注射泵控制器Fra bibliotek计算机
程控自动门锁及检测装臵
发光仪执行模块
发光仪控制模块
光生物学技术的应用范围
军事侦测公安稽查卫生检疫药物筛查医学诊断环境检测航天遥感生命科学 ……
已成为现代生物技术最活跃的领域之一
光生物学检测技术的优越性

所使用的内建标准曲线结合校正的方法不尽完善。
部分产品不显示原始数据，无法监控其准确性。
免疫分析结果的干扰因素
本底物质防腐剂金属离子
温度
杂质氧化剂还原剂磁场光线
同一干扰因素对不同检测方法的不同影响
洗涤祛除离心沉降
免放或发光法
放免法
待测物 TBG
标记抗原包被（结合）抗体以甲状腺素结合蛋白（TBG）干扰竞争法测定T3为例
辣根过氧化物酶系统
碱性磷酸酶系统黄嘌呤氧化酶系统
按发光持续时间
闪光（Flash）:
发光时间在数秒内，如吖啶酯
以原位进样(In Situ Injector) 和时间积分法测量

非酶促化学发光：
吖啶酯系统草酸酯系统三价铁-鲁米诺系统

辉光（Glow）:
发光时间在数十分钟以上，如：
HRP-Luminol系统
流动池检测方式示意图
冲洗液干燥空气检测器负压泵
四通阀计量泵
检测池
废液
氧化剂
样品管
原位进样泵
使用商品化发光免疫分析产品可能遇到的几个问题
与以往方法（放免等）在检测指标的正常值及临床意义上的差异。如：免疫源性胰岛素与真胰岛素、HCG、性激素等采用不同的单抗或多抗时检测结果也有较大差异。（单抗特异性好，受干扰小，因此测值低）不同厂家产品测定结果之间一致性差（未与国家标准品比对）。
发光免疫分析基本操作步骤（一步法）
待测样品标记抗体或抗原
包被抗体或抗原的反应管反应30-60分钟洗涤去除未结合的反应物
反应0-5分钟发光底物仪器检测
发光免疫分析基本操作步骤（二步法）
待测样品包被抗体或抗原的反应管反应30-60分钟标记抗体或抗原
洗涤去除未结合的反应物
反应30-60分钟洗涤去除未结合的反应物
第四代化学发光TSH检测试剂的分析灵敏度为0.001mIU/L
原因在于抗体的亲合力，而不是检测技术。
发光技术—— 临床免疫分析划时代的进步
普通放免功能灵敏度1-2mIU/L 基本无法测到正常值下限以下的血清TSH浓度对甲亢的诊断意义不大固相放免功能灵敏度 0.1-0.2mIU/L 发光免疫功能灵敏度 0.01-0.02mIU/L 发光免疫功能灵敏度 0.001-0.002mIU/L 一系列新的临床现象改写了垂体甲状腺轴的调控状态
测量方式复杂（脉冲激发、间歇式测量、流动池）仪器成本及维护费用高环境及样品中同类元素可导致本底干扰
电化学发光
时间分辨荧光（也称时间延迟光致发光）：Time Resolved Fluorescence （Time Delayed Photoluminescence）解离增强荧光免疫分析（DEFIA）电化学发光（也称场致发光）：Electrochemiluminescence（Electroluminescence）化学发光：Chemiluminescence
彻底消除了放射性危害无半衰期限制，试剂稳定性和有效期大大延长容易实现连续、动态、重复测定适合于复合标记系统进行多指标并行测定操作简单，反应速度快，容易实现自动化灵敏度和线性范围超过以往技术
几种标记/检测技术灵敏度的比较
灵敏度(mol/L)
10-18
10-15
单光子计数器是目前高灵敏度发光分析仪的核心部件
激发光阴极产生光电子在各打拿极之间得到能量和数目的倍增
在阳极上形成较强信号
发光样品产生光子
光电倍增管高压高速分频器高速比较器高速放大器
相对发光单位数字脉冲(RLU)
脉冲信号
单光子计数式发光检测仪
单光子计数器计数/贮存器
打印机
20,000
0
放免
酶标
发光
三种免疫测定技术的成本及费用三种免疫测定技术的成本及费用
免疫分析技术基本原理
利用抗原、抗体之间的特异性结合来测定、分析特定物质的方法抗原：可诱导动物免疫系统产生免疫应答的物质。
抗体：由动物免疫系统产生，可特异性结合某种物
质的球蛋白。
免疫测定技术分类
反应结束后是否需要分离
保证检验结果准确性的对该检验项目或其检验结果普遍意义的解释
AP-AMPPD系统黄嘌呤氧化酶系统无须原位进样、以速率法测量。
闪光与辉光及其测量方式的差别
闪光尖峰发光信号
积分法测量
辉光坪区
速率法测量
原位进样
时间
商业化产品中常见的化学发光系统
鲁米诺及其衍生物的增敏化学发光系统
O
H 2 O2 +
NH2 O
NH HRP NHOHN2 NH2
CO2+Photon (425nm) CO2-
发光免疫检测技术的临床应用及其应注意的问题
杨晓林博士
北京大学医学部研究员中国生物物理学会光生物学专业委员会副主任委员国际生物发光和化学发光学会( ISBC）学术理事 Council member of scientific advisory board of International Society on Bioluminescence & Chemiluminescence
使用商品化发光免疫分析产品必须做好的几个工作
在厂家提供的数据基础上，自行建立正常参考值系统。明确各个试剂盒的特异性及交叉反应情况如：小分子激素之间，以及与自身前体或代谢物之间的交叉
胰岛素与C-肽、胰岛素原之间的交叉
FSH、LH、HCG之间的交叉。充分利用现有国标参考品校正结果（注意防腐剂干扰）（可以从国家药品生物制品检定所或临床检验中心得到）自行建立多点质控（2-3点）监控每次实验的准确性。
反应0-5分钟发光底物仪器检测
发光免疫分析技术的现状及应注意的问题
目前已商品化的光生物学标记检测技术整体性能比较
技术类型标记、反应体系
酶促化学发光非酶促过氧化物酶、鲁米诺、氧化剂、增强剂等螺旋金刚烷环氧化物、碱性磷酸酶吖啶酯、过氧化氢