实验九卵磷脂的提取和鉴定

鉴定卵磷脂的方法
鉴定卵磷脂的方法根据具体目的和应用可以有不同的方法，以下是几种常用的方法：
1. 二维薄层色谱法：将卵磷脂样品在二维薄层色谱上分离出单个成分，并通过化学反应或物理测量对其进行定量和鉴定。

2. 毛细管电泳法：通过毛细管电泳技术将卵磷脂成分分离，并用检测方法对其进行鉴定和定量。

3. 液相色谱法：使用高效液相色谱技术对卵磷脂进行分离和纯化，然后对纯化的卵磷脂进行质量鉴定和定量。

4. 胶体金标记法：使用胶体金或其他金属标记技术对卵磷脂样品进行标记，然后用光学或电化学技术进行检测和鉴定。

5. 质谱法：使用质谱技术对卵磷脂进行鉴定和定量，可以通过质量分析或其他分析手段对卵磷脂进行结构和组成分析。

综上所述，鉴定卵磷脂的方法需要根据具体需求选择，常用的方法包括二维薄层色谱法、毛细管电泳法、液相色谱法、胶体金标记法和质谱法。

实验五：蛋黄中卵磷脂的提取、纯化与鉴定一、实验目的⏹掌握从鲜鸡蛋中提取卵磷脂的方法与原理。

⏹卵磷脂鉴定的方法与原理。

⏹加深了解磷脂类物质的结构和性质。

二、实验内容磷脂是一类含有磷酸的脂类，机体中主要含有两大类磷脂，由甘油构成的磷脂称为甘油磷脂（phosphoglyceride）；由神经鞘氨醇构成的磷脂，称为鞘磷脂（sphingolipid）。

其结构具有由磷酸相连的取代基团（含氨碱或醇类）构成的亲水头（hydrophilic head）和由脂肪酸链构成的疏水尾（hydrophobic tail）。

在生物膜中磷脂的亲水头位于膜表面，而疏水尾位于膜内侧。

磷脂是重要的两亲物质，它们是生物膜的重要组分、乳化剂和表面活性剂。

磷脂依照氨基醇的不同可分：（1）磷脂酰胆碱（卵磷脂）（PC），分布：植物主要有大豆等，动物主要有脑、精液、肾上腺、红细胞，蛋卵黄（8-10%）。

其主要作用是控制肝脂代谢，防止脂肪肝的形成；（2）、磷脂酰乙醇胺（脑磷脂）（PE），参与血液凝结；（3）、磷脂酰丝氨酸（PS）；（4）、磷脂酰肌醇（PI）；（5）、磷脂酰甘油（PG）；（6）、二磷脂酰甘油（心磷脂）。

蛋黄磷脂属动物胚胎磷脂，含有大量的胆固醇和甘油三酯及许多人体不可缺少的营养物质和微量元素。

卵磷脂是生命的基础物质，人类生命自始至终都离不开它的滋养和保护。

卵磷脂存在于每个细胞之中，更多的是集中在脑及神经系统、血液循环系统、免疫系统以及肝、心、肾等重要器官。

卵磷脂也被誉为与蛋白质、维生素并列的“第三营养素”。

蛋黄卵磷脂可将胆固醇乳化为极细的颗粒，这种微细的乳化胆固醇颗粒可透过血管壁被组织利用，而不会使血浆中的胆固醇增加。

三、实验原理、方法和手段原理一：卵磷脂是生物体组织细胞的重要成分，主要存在于大豆等植物组织以及动物的肝、脑、脾、心、卵等组织中，尤其在蛋黄中含量较多(10%左右)。

卵磷脂和脑磷脂均溶于乙醚而不溶于丙酮，利用此性质可将其与中性脂肪分离开；卵磷脂能溶于乙醇而脑磷脂不溶，利用此性质又可将卵磷脂和脑磷脂分离。

卵磷脂的提取卵磷脂的提取一、实验原理卵磷脂为两性分子，既具有脂溶性，又具有亲水性，其等电点为6.7。

纯净的卵磷脂为淡黄色，液态，有清淡柔和的风味和香味。

卵磷脂溶于乙醇、甲醇、氯仿等有机溶剂中，也能溶于水中成为胶体状态，但不溶于丙酮，且不同的磷脂在有机溶剂中的溶解度不同，故可用这些有机溶剂来提取分离卵磷脂。

卵磷脂的提取方法有有机溶剂法;无机盐复合沉淀法；乙酸乙酯纯化法；超临界Co2萃取法；色谱法和酶法等。

有机溶剂法：根据蛋黄中各组分在溶剂中的溶解度不同而进行分离的，该方法提取卵磷脂具有分离效率高，生产周期短，易实现自动化等优点，但所得卵磷脂纯度不高。

本实验采取有机溶剂法对卵磷脂进行粗提取，再进一步纯化。

二、试验材料的依据三、操作步骤1、原蛋液处理原料蛋去壳，蛋内容物搅拌、过滤，取培养皿称量原蛋液2g于50~55℃的真空干燥器中烘干，磨成粉末。

2、原料粉浸泡用乙醇和甲醇1：1的混合液浸泡，混合液的用量为原料粉的2倍，浸泡时醇液以高出粉面30~35cm为原则：先将混合醇液倒入烧杯中，然后边搅拌边加入原料粉，持续搅拌到醇浸液为金黄色，用倾泻法（即将沉淀上澄清液沿玻棒小心倾入漏斗,尽可能使沉淀留在杯中。

少量是为防止洗涤后溶液太多,多次是为是清洗的更干净）吸取金黄色醇浸液，沉淀物倒入细纱布中，压出余下的浸泡液，移至前浸液中。

3、蒸馏浓缩甲醇的沸点为66.78℃，乙醇的沸点为78.4℃，故将醇浸液加热至78~80℃时醇变成气体，由分馏柱进入冷凝管;再变成液体而积存于接受瓶中。

当蒸馏出2/3的醇液时，便可升高蒸馏温度达80~85℃，继续蒸馏至烧瓶中残液已呈浊厚油状物，而冷凝管中已不再滴下回收醇液时，即可停止蒸馏，准备进行沉淀净化。

沉淀净化是用丙酮进行。

方法是将平底（或圆底）大烧杯中残余的油状物倒出，加入油状物2倍量的丙酮，以便净化沉淀。

加丙酮时应用玻璃棒搅拌，静置，待其沉淀分层。

将上层浑浊的丙酮洗液倾出，加入同量的丙酮搅拌洗净，放入已干燥、称重且标记了的离心管中，4000r/min离心10min，这样重复两三次。

实验二、卵磷脂提取、鉴定及乳化特性试验一、目的要求 学习提取卵磷脂的方法，了解卵磷脂的乳化特性性质。

二、实验原理磷脂是分子中含磷酸的复合脂，分为磷酸甘油脂和鞘氨醇磷脂类，其醇类物质分别为甘 油和鞘氨醇。

磷脂酰胆碱属磷酸甘油脂，俗名为卵磷脂，在生物体内以及食品工业应用中起着重要的作用。

卵磷脂是一种在动、植物中分布及广的磷脂，如植物的种子、动物的卵、脑及神经组织 均含有之，其中大豆中含量约为2.0%、卵黄中含量高达8%—10%、。

卵磷脂在细胞中以游离态或与蛋白质结合成不稳定的化合物存在，易溶于乙醇、乙醚、氯仿等有机溶剂，不溶于丙酮。

本实验采用乙醇提取蛋黄中的卵磷脂。

纯卵磷脂为白色的蜡状物，与空气接触后，因结构含不饱和脂肪酸被氧化后而呈黄色至黄棕色，粗制品中色素的存在可使之呈淡黄色。

卵磷脂中的胆碱基在碱性条件下可分解成三甲胺，三甲胺有特异的鱼腥味，利用此性质可鉴别卵磷脂。

在生物体中的作用是保持细胞膜的通透性，控制动物体内脂肝代谢，防止脂肪肝的形成。

在食品工业中广泛充当乳化剂、抗氧化剂和营养添加剂。

使互不相溶的两种液体中的一种呈微滴状分散在另一种液体中的作用称为乳化剂。

这两种不同的液体称为“相”，在体系中量大的称为连续相，量小的为分散相，能使互不相溶的两相中的一相分散在另一相中的物质称为乳化剂。

由卵磷脂的分子结构可知：CH 2O C OR 1CH O C OR 2CH 2O PO OH O CH 2CH 2N OH CH 33卵磷脂分子中的R 1脂肪酸为硬脂酸或软脂酸，R 2脂肪酸为油酸、亚油酸、亚麻酸及花生四烯酸等不饱和脂肪酸。

脂肪酸残基端具有憎水性，其胆碱残基端具亲水性，因此是一种天然的乳化剂。

在乳化过程中，当少量的油与乳化剂一起在大量水中用高速搅拌混合机混合，油滴将以微滴状分散在水相中，在细滴的表面上乳化剂以亲油的非极性端相对，而以其亲水的极性端伸向水中。

由于极性相斥，体系中微滴之间的斥力比相互间的引力要大，因而形成稳定的乳浊液。

从大豆中卵磷脂的提取简介“卵磷脂”由希腊文“Lekiths”派生出来，意指“蛋黄”。

1844年法国人Gohley从蛋黄中发现卵磷脂（蛋黄素），并以希腊文命名为Lecithos（卵磷脂英文名为Lecithin）也自此揭开了卵磷脂神秘的面纱。

因为自开始是从卵黄中提取的，所以，最开始命名的“卵磷脂”中实际包含有以下几个成分：磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺，磷脂酰肌醇等。

我们首先明确一个概念：现在商业上的“卵磷脂”就是各种磷脂的混合物质，而不是提纯后的“卵磷脂”，为了区别二者，我们把前者成为“Phospholipid”，中文名称为“磷脂”；后者，称为“phosphatidylcholine”，中文名称“卵磷脂”。

“化学名称：“磷脂酰胆碱”。

其隶属关系如下表：总称磷脂其中包含卵磷脂phosphatidylcholine脑磷脂phosphatidylethanolamine磷脂酰肌醇phosphatidylinositol一般上商业上都习惯磷脂类的产品都称谓“lecithin"。

也就是我们经常叫的“卵磷脂”。

这个只是历史的误会，现在暂时无法去改变，就像有些地方把餐桌上的“米”也称为“饭”一样。

商业上，磷脂按照原料的不同分为：大豆磷脂，菜籽磷脂，蛋黄磷脂等。

他们的组成有很大区别，由于产地不同，品种不同，同类品种也有很大区别。

大豆卵磷脂与蛋黄卵磷脂的区别：自然界中各种油料中都含有磷脂，但其含量并不相同，在几种常见的油料种子中，以大豆和棉籽最多，油菜籽次之。

可以形成工业化生产的是以大豆为主，所以，就有了“大豆磷脂”或者“大豆卵磷脂”这一名词。

大豆磷脂的一般组成是：磷脂酰胆碱PC（卵磷脂）25-32%、磷脂酰乙醇胺PE（脑磷脂）15-22%、磷脂酰肌醇PI（肌醇磷脂）15%左右、磷脂酰甘油PG（神经鞘磷脂）16%左右、磷脂酸PA4%左右、其他磷脂8%左右。

蛋黄磷脂与大豆磷脂主要区别是：磷脂酰胆碱高达70%，磷脂酰肌醇只有0.6%。