【挑战杯】(符小燕)漆酶高产菌株的筛选及产酶条件的优化

摘要为筛选高温淀粉酶高产菌株,利用淀粉酶水解圈作筛选模型,从稻田中采集土样,筛选得到产淀粉酶能力较高的菌株E10。

为提高菌株产酶能力,进行了碳源种类及浓度,氮源种类及浓度,无机盐种类及浓度,pH 值,种龄及接种量、温度、时间的单因素试验,并对发酵培养基及发酵条件进行了L 9(34)正交优化试验。

结果表明:最佳产酶发酵培养基为2.0%麸皮、0.1%硝酸钾、0.25%氯化钙,最适初始pH 值为6.0。

最适产酶条件为种龄24h ,接种量7mL ,于36℃下培养48h 。

在优化条件下,菌株产酶活力可达180.94IU/mL 。

关键词高温淀粉酶;高产菌株;筛选;发酵条件中图分类号TQ925+.1文献标识码A 文章编号1007-5739(2014)07-0240-04Screening of High-yield Strain Producing Thermostable Amylase and Optimization of Enzyme ProductionYI Zheng-xuan ZHAO Tong SHI Xuan WANG Zheng LI Li-heng *(College of Bioscience and Technology ,Hunan Agricultural University ,Changsha Hunan 410128)Abstract In order to screen a high-yield strain producing thermostable amylase ,starch hydrolysis circle was employed as a screening model.The E10strain achieved from the paddy field soil has high capacity of enzyme production.In order to improve the capability of enzyme production of E10,the single factor experiments was conducted for the kinds and concentrations of carbon source ,the kinds and concentrations of nitrogen source ,the kinds and concentrations of inorganic salt ,pH value ,seed age ,inoculate volume ,temperature and time ,then the L 9(34)orthogonal optimization test for the fermentation medium and conditions was carried out.The results showed that the best fermentation medium of the enzyme production of E10was 2.0%wheat bran ,0.1%KNO 3,0.25%CaCl 2,initial pH value of 6.0.The optimal fermentation conditions of the enzyme production of E10were 24hours of seed age ,7mL of inoculates volume ,36℃of culture temperature ,48hours of time.Under the optimized conditions ,the enzyme production of E10reached 180.94IU/mL.Key words thermostable amylase ;high-yield strain ;screening ;fermentation condition高温淀粉酶高产菌株筛选及产酶条件优化易征璇赵彤师旋王征李立恒*(湖南农业大学生物科学技术学院,湖南长沙410128)淀粉酶是水解淀粉和糖原的酶类总称,广泛分布于动物(唾液、胰脏等)、植物(麦芽、山萮菜)及微生物中,是最早实现工业生产并且迄今为止用途最广、产量最大的酶制剂品种[1]。

产纤维素酶菌种的筛选与优化一、菌种筛选的原理与方法菌种筛选的原理是通过筛选产纤维素酶活性高、产量大的菌种。

常用的菌种筛选方法有以下几种：1.传统菌种筛选：分离环境中的纤维素降解菌株，通过纤维素酶活性测定筛选产纤维素酶能力较强的菌株，再通过多次温育和活性测定，逐步筛选出高活性的菌株。

2.显性菌种筛选：利用纤维素酶结构上保守的区域设计引物，在环境DNA中扩增出纤维素酶基因片段，使用这些基因片段进行克隆构建，然后在宿主中进行表达，通过纤维素酶活性测定筛选产纤维素酶能力较强的菌株。

3.基因工程菌种筛选：利用已知纤维素酶的基因进行基因工程，通过载体导入宿主细胞中，通过外源表达基因，从而获得产纤维素酶菌种。

二、菌种优化的原理与方法菌种优化的原理是通过改变菌株基因组或环境条件，提高纤维素酶产量和活力。

常用的菌种优化方法有以下几种：1.自然进化优化：通过长期培养，逐渐挑选出产酶能力强、极端环境适应能力强的突变菌株。

2.诱变优化：利用物理、化学或基因工程等方法对菌株进行诱变，通过筛选获得产纤维素酶能力强、菌株稳定的变种。

3.基因工程优化：利用已知纤维素酶的基因进行基因编程，通过基因工程技术对菌株基因组进行改造，以提高纤维素酶的产量和活力。

三、未来的研究方向1.菌种筛选方法的改进与创新：应综合运用传统筛选、显性筛选和基因工程筛选等方法，发展新的高效、快速的菌种筛选方法。

2.菌种优化技术的优化与提高产量、活性：要通过生理、代谢工程的方法改造纤维素酶产生菌，提高纤维素酶的产量和活力。

3.开发新型纤维素酶菌株：从不同环境中分离筛选出产酶能力强的菌株，进一步发现和研究产纤维素酶的新菌株。

4.提高纤维素酶产量与废弃物转化率的研究：将纤维素酶应用于废弃物转化过程，提高纤维素酶产量和转化率。

综上所述，产纤维素酶菌种筛选与优化的研究是促进纤维素酶应用的关键。

通过不断改进筛选和优化方法，进一步开发新的菌种，提高纤维素酶的产量和活力，将对纤维素酶的应用产生积极的推动作用。

碱性脂肪酶高产菌株的筛选及产酶条件的优化摘要利用筛选和验证相结合的方法筛选出了产碱性脂肪酶活性较高的菌株bl1011。

经过形态观察、生理生化试验及分子生物学鉴定，结果表明该菌株为假单胞菌（pseudomonas sp.）。

运用单因素试验和均匀试验优化了bl1011菌株摇瓶产酶培养基和最佳发酵条件。

在培养基为麦芽糖2.5%，蛋白胨3.0%，大豆油0.5%，k2hpo4 0.2%，培养条件为起始ph值7.5，温度33 ℃，转速180 r/min，装液量20 ml，发酵周期为60 h的条件下，酶活力达到最高，为223 u/ml。

关键词脂肪酶；筛选；发酵优化；均匀试验中图分类号 q55 文献标识码 a 文章编号 1007-5739（2012）22-0274-03脂肪酶（lipase，e.c.3.1.1.3，又称三酰基甘油水解酶）是一种特殊的酯键水解酶，能在油水界面催化油脂水解，生成甘油和脂肪酸，具有化学选择性和底物选择性[1]。

脂肪酶被广泛应用于食品、轻纺、皮革、香料、化妆品、洗涤剂、有机合成、医药等领域[2]。

尽管自然界中产脂肪酶的微生物很多，但用于商业化生产的细菌很少，主要有伯克霍尔德氏菌（burkholderia）、无色杆菌属（achromobacter）、假单胞菌属（pseudomonas）、色杆菌属（chromobacterium）、产碱杆菌属（alkaligenes）、节杆菌属（arthrobacter）[3]。

假单胞菌产碱性脂肪酶国内外虽有研究，但酶活力均不高[4]。

该研究通过罗丹明b平板法快速筛选出一株产碱性脂肪酶能力较强的菌株，并对其产酶条件进行优化研究。

1 材料与方法1.1 试验材料1.1.1 菌株。

细菌：bl1001-1020；酵母：bl2001-2015；霉菌：bl3001-3025。

试验菌株均由郑州轻工业学校食品与生物工程学院酶分子工程研究室保藏。

1.1.2 培养基。

①种子培养基。

高产乙酸乙酯酵母菌的筛选、鉴定及发酵条件优化
冉霞;肖雨荷;蔡晶钰;刘智文;朱家豪;汪江波;余启
【期刊名称】《中国酿造》
【年(卷),期】2024(43)5
【摘要】该研究以产酯酵母为研究对象,通过气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术测定菌株的乙酸乙酯产量并筛选高产乙酸乙酯的酵母菌株,通过形态学观察和分子生物学技术对其进行菌种鉴定,并以乙酸乙酯产量为响应值,通过单因素及响应面试验对其发酵条件进行优化。

结果表明,筛选得到一株高产乙酸乙酯的酵母菌株P-3,乙酸乙酯产量为134.32 mg/L。

菌株P-3被鉴定为库德里阿兹威毕赤酵母(Pichia kudriavzevii),其产乙酸乙酯的最佳发酵条件为:发酵温度30℃,乙醇体积分数18%,发酵时间4 d,在此条件下,乙酸乙酯产量达到281.47 mg/L,比优化前提高
109.55%。

【总页数】6页(P105-110)
【作者】冉霞;肖雨荷;蔡晶钰;刘智文;朱家豪;汪江波;余启
【作者单位】湖北工业大学生物工程与食品学院工业发酵省部共建协同创新中心发酵工程教育部重点实验室工业微生物湖北省重点实验室
【正文语种】中文
【中图分类】TS262.3
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“产酶条件优化”资料合集目录一、耐低温降解纤维素菌株筛选、鉴定及产酶条件优化二、脂肪酶高产菌株筛选、产酶条件优化及脂肪酶大量纯化研究三、一株纤维素酶真菌的筛选鉴定及产酶条件优化四、纤维素酶产生菌的筛选、发酵产酶条件优化及酶学特性研究五、一株产纤维素酶的暹罗芽孢杆菌筛选及产酶条件优化六、烟草秸秆废弃物中纤维素降解菌的筛选、鉴定及产酶条件优化七、耐低温降解纤维素菌株筛选、鉴定及产酶条件优化八、产环糊精葡萄糖基转移酶的菌株分离、产酶条件优化与酶学特性研究九、脂肪酶高产菌株的筛选及产酶条件优化耐低温降解纤维素菌株筛选、鉴定及产酶条件优化随着环境问题日益严重，生物可降解材料的研究和应用变得日益重要。

其中，纤维素作为地球上最丰富的可再生资源之一，其降解和利用是当前研究的热点。

然而，纤维素的降解需要特定的微生物菌株，尤其在低温环境下，筛选和鉴定具有耐低温特性的纤维素降解菌株是当前的重要任务。

在本次研究中，我们从不同环境中收集了多种微生物，通过在低温条件下筛选，我们成功获得了一株具有良好耐低温性能的纤维素降解菌株。

该菌株可以在低温条件下有效降解纤维素，并且表现出较高的酶活性。

为了进一步了解该菌株的特性，我们采用了多种分子生物学和生理学方法对其进行了鉴定。

结果表明，该菌株属于一个名为Xylanimonas 的属，这是一个在纤维素降解方面具有良好前景的菌种。

接下来，我们对该菌株的产酶条件进行了优化。

通过单因素实验和正交实验，我们发现该菌株的最佳产酶条件为：温度20℃，pH值为6.5，在含有1%纤维素的液体培养基中培养。

在此条件下，该菌株的酶活性达到了最大值。

总的来说，我们的研究提供了一种具有耐低温特性的纤维素降解菌株，并对该菌株的产酶条件进行了优化。

这为纤维素的生物降解和利用提供了新的可能性，有助于推动生物可降解材料的发展和环保事业的发展。

脂肪酶高产菌株筛选、产酶条件优化及脂肪酶大量纯化研究一、引言脂肪酶（Lipases）是一类在生物体内起着重要作用的酶，它们能够水解脂肪，生成脂肪酸和甘油。

高温淀粉酶高产菌株筛选及产酶条件优化作者：易征璇赵彤师旋王征李立恒来源：《现代农业科技》2014年第07期摘要为筛选高温淀粉酶高产菌株，利用淀粉酶水解圈作筛选模型，从稻田中采集土样，筛选得到产淀粉酶能力较高的菌株E10。

为提高菌株产酶能力，进行了碳源种类及浓度，氮源种类及浓度，无机盐种类及浓度，pH值，种龄及接种量、温度、时间的单因素试验，并对发酵培养基及发酵条件进行了L9（34）正交优化试验。

结果表明：最佳产酶发酵培养基为2.0%麸皮、0.1%硝酸钾、0.25%氯化钙，最适初始pH值为6.0。

最适产酶条件为种龄24 h，接种量7 mL，于36 ℃下培养48 h。

在优化条件下，菌株产酶活力可达180.94 IU/mL。

关键词高温淀粉酶；高产菌株；筛选；发酵条件中图分类号 TQ925+.1 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2014）07-0240-04Screening of High-yield Strain Producing Thermostable Amylase and Optimization of Enzyme ProductionYI Zheng-xuan ZHAO Tong SHI Xuan WANG Zheng LI Li-heng *（College of Bioscience and Technology，Hunan Agricultural University，Changsha Hunan 410128）Abstract In order to screen a high-yield strain producing thermostable amylase，starch hydrolysis circle was employed as a screening model. The E10 strain achieved from the paddy field soil has high capacity of enzyme production. In order to improve the capability of enzyme production of E10，the single factor experiments was conducted for the kinds and concentrations of carbon source，the kinds and concentrations of nitrogen source，the kinds and concentrations of inorganic salt，pH value，seed age，inoculate volume，temperature and time，then the L9（34） orthogonal optimization test for the fermentation medium and conditions was carried out. The results showed that the best fermentation medium of the enzyme production of E10 was 2.0% wheat bran，0.1%KNO3，0.25% CaCl2，initial pH value of 6.0. The optimal fermentation conditions of the enzyme production of E10 were 24 hours of seed age，7 mL of inoculates volume，36 ℃ of culture temperature，48 hours of time. Under the optimized conditions，the enzyme production of E10 reached 180.94 IU/mL.Key words thermostable amylase；high-yield strain；screening；fermentation condition淀粉酶是水解淀粉和糖原的酶类总称，广泛分布于动物（唾液、胰脏等）、植物（麦芽、山萮菜）及微生物中，是最早实现工业生产并且迄今为止用途最广、产量最大的酶制剂品种[1]。

产脂肪酶菌株C7828-5的筛选、鉴定以及产酶条件的优化麻琼丽;张家明
【期刊名称】《工业微生物》
【年(卷),期】2010(0)6
【摘要】以花生油为唯一碳源,从海口市各地被油脂污染土样中分离筛选出1株中温碱性脂肪酶菌株C7828-5.形态学、生理生化特征和分子生物学鉴定结果表明,该菌株为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa).该菌所产脂肪酶的最适温度为37 ℃,最适pH为8.0.优化了菌株的产酶条件,最适产酶培养基(g/L)为:蔗糖5、牛肉膏20、(NH4)2SO4 1、MgSO4·7H2O 0.5、CaCl2 0.5,聚乙烯醇花生油乳化液120 mL,发酵72 h,获得高达8.08 U/mL的脂肪酶表达量.
【总页数】6页(P39-44)
【作者】麻琼丽;张家明
【作者单位】中国热带农业科学院,热带生物技术研究所,海南,海口,571101;海南大学,农学院,海南,海口,571101;中国热带农业科学院,热带生物技术研究所,海南,海口,571101;海南大学,农学院,海南,海口,571101
【正文语种】中文
【中图分类】Q93
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果胶酶高产菌株筛选发酵条件优化以及酶学性质的研究果胶酶是一种重要的工业酶，具有广泛的应用前景。

为了提高果胶酶的产量，本研究旨在筛选果胶酶高产菌株，并优化其发酵条件，同时对其酶学性质进行研究。

首先，我们从自然环境中采集了一系列样品，包括土壤和水体样品。

然后，将这些样品进行稀释并接种到含有果胶为唯一碳源的培养基中。

经过连续传代和筛选，最终从中获得了一株具有较高果胶酶活性的菌株A。

接下来，为了优化菌株A的发酵条件，我们设计了一系列实验。

首先是培养基的优化。

我们通过改变碳源、氮源和矿物盐等成分的浓度和组合，最终确定了一种最适合菌株A生长和果胶酶产量的培养基配方。

然后，对于菌株A的培养条件进行了进一步的优化。

我们调整了温度、pH值、培养时间和初始菌体浓度等参数，并通过检测果胶酶活性来评估不同条件下的产酶效果。

最终，找到了最适宜的发酵条件，菌株A在这种条件下果胶酶的产量显著提高。

接下来，我们对菌株A产生的果胶酶进行了酶学性质的研究。

首先是酶活温度和酶活pH的测定。

我们利用不同温度和不同pH值下的底物降解实验，确定了菌株A产生的果胶酶的最适活性温度和最适活性pH。

然后，对菌株A产生的果胶酶进行了酶动力学性质的研究。

我们通过测定果胶酶对果胶的降解效果，建立了不同底物浓度下果胶酶的反应速率曲线，并利用Michaelis-Menten方程对其进行了分析。

最后，我们对菌株A产生果胶酶的产酶机制进行了初步探究。

通过基因组测序和蛋白质组学技术的应用，我们发现菌株A产生果胶酶的基因和调控机制，为进一步提高果胶酶产量和改良菌株奠定了基础。

总结而言，本研究通过筛选果胶酶高产菌株并优化发酵条件，成功提高了果胶酶的产量。

同时，对果胶酶的酶学性质进行了深入研究，探究了其最适工作温度、pH值以及底物浓度对酶活性的影响。

通过对产酶机制的初步探究，为今后果胶酶的应用及菌株改良提供了一定的参考依据综上所述，本研究通过对菌株A产生的果胶酶进行了全面的酶学性质和酶动力学性质的研究，同时对其产酶机制进行了初步探究。

漆酶产生菌初筛条件的优化研究
王宜磊;朱陶
【期刊名称】《唐山师范学院学报》
【年(卷),期】2003(025)002
【摘要】运用不同底物,不同浓度,不同基础培养基进行了漆酶产生菌初筛条件的优化,找到了愈创木酚、邻联甲苯胺、联苯胺三种较好的底物,及其他们的最适使用浓度和最佳观察时间.
【总页数】3页(P26-27,81)
【作者】王宜磊;朱陶
【作者单位】菏泽师范专科学校,生物系,山东,菏泽,274015;菏泽师范专科学校,生物系,山东,菏泽,274015
【正文语种】中文
【中图分类】Q936
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