临床输血中检出不规则抗体的分析

临床输血检出不规则抗体分析

临汾市人民医院 杭海 041000

【摘要】目的 对我院输血患者中不规则抗体检出情况进行回顾性总结, 探讨不规则抗体筛检及抗体鉴定在临床输血中的意义。为预防和治疗免疫性输血反应提供依据。方法 收集在我院2006年11月～2007年9月输血治疗的患者标本3115例,应用盐水法、RhD初筛试验聚凝胺法检测不规则抗体,发现抗体筛检阳性者进一步做鉴定，分析抗体特异性，统计输血反应例数，总结各抗体出现频率。结果 检出不规则抗体24例，占总检测量的0.77%，发现其中抗-E抗体占20.8%，抗-c抗体25.0%，抗-D抗体占16.7%，抗-P1抗体占12.5%，抗-Jkb占29.2%，抗-Fya占4.2%。阳性标本中Rh系统占62.5%，其它系统占37.5%。结论 输血前对受血者进行常规的抗体筛查试验,对预防溶血性输血反应，提高临床用血的安全性和有效性具有重要意义。

【关键词】血型 抗体筛选 安全输血 有效输血

由于多次、大量输血及妊娠等，可产生免疫性抗体，据报道,由血型抗原抗体免疫因素引起的输血反应在我国占12.6%,其中溶血反应为2.56%,高于西方发达国家的发生率,相当于美国20世纪80年代水平[1],随着我国成分输血率的不断提高以及输血前免疫血液学检查技术的全面展开那些不需要输注的血液成分已经较好地被堵住流入受血者体内,但是由于红细胞血型有29个系统，400多个血型抗原,每一种血型抗原都有都可能产生相对应的抗体,这些特异性抗体是引起输血不良反应、血型鉴定困难以及疑难配型等的主要原因之一。轻者引起过敏性输血不良反应，重者引起溶血性输血反应，血红蛋白下降，导致无效输血，严重者可能造成患者死亡。故输血前不规则抗体检测能有效预防溶血反应的发生，对临床安全输血，有效输血具有重要意义。

1材料与方法

1.1 病例标本 所有病例标本3115例均为我院2006年11月～2007年9月输血治疗的患者，从中检出不规则抗体24例，男11例，女13例，年龄13～80岁不等；病种为血液病5例，妇产科5例，肿瘤患者7例，其他患者7例。

1.2 材料

1.2.1 抗体筛检细胞，抗体筛检用抗人球蛋白卡，专用孵育箱和离心机，由长春博讯生物技术有限责任公司提供。

1.2.2 血型鉴定试剂长春生物制品研究所提供的抗A、抗B血清试剂,ABO红细胞悬液(本院制备),IgM型抗D试剂由上海血液生物医药有限责任公司提供。

1.2.3 聚凝胺试剂由珠海贝索生物技术有限公司提供。

1.3 方法

1.3.1 受血者红细胞经3次洗涤后，配成4%的红细胞悬液，用标准抗-A、抗-B血清作正定型。

1.3.2 受血者血清与ABO红细胞悬液做反定型。

1.3.3 受血者红细胞与IgM型抗D试剂做RhD初筛检查。

1.3.4 受血者红细胞与血清分别与献血者血清与红细胞做盐水介质交叉配合试验。

1.3.5 受血者红细胞与血清分别与献血者血清与红细胞混合后加入聚凝胺试剂作抗体筛检和交叉配合试验。

1.3.6 同时用抗体筛检细胞，与患者血清在微柱凝胶抗人球蛋白卡做抗体筛检，根据反应结果，按照筛检细胞反应格局表进行分析。

2 结果

抗体阳性患者资料及不规则抗体筛检情况见表1。

2.1聚凝胺法抗体筛检 在3115例标本中，共检出不规则抗体22例，占检测总量的0.71%。

2.2微柱凝胶抗人球蛋白法 应用微柱法筛检，检出阳性结果24例，占检测总量的0.77%。筛检抗体类型发现，其中抗-E抗体占20.8%，抗-c抗体25.0%，抗-D抗体占16.7%，抗-P1抗体占12.5%，抗-Jkb占29.2%，抗-Fya占4.2%。阳性标本中Rh系统占62.5%，其它系统占37.5%。

2.3抗体筛检阳性的24例输血患者中，血液病患者5例、妇产科5例、肿瘤患者7例、其他患者7例。其中1例“急性淋巴细胞白血病”患者，聚凝胺法配血阴性，输注200ml全血后出现过敏反应，全身瘙痒，皮肤散在红色丘疹，经微柱法筛检抗-E阳性；另1例“血小板减少性紫癜”患者，输注200ml悬浮红细胞后也出现相同情况，经微柱法筛检抗-P1阳性。其他22例阳性患者，寻找相合的血源，输注后未发生输血不良反应，临床效果满意。

3 讨论

在美国食品和药品管理局(FDA)报道的因输血死亡的患者中,溶血性输血反应占55.5%,而其中的14%是由不规则抗体引起的。他们的死亡既可由急性溶血性反应引起(发生在输血后24h内),也可由迟发性溶血性反应引起(发生在输血后2～21天内)； 表 1 抗体阳性患者资料及不规则抗体筛检

另外,临床不明原因的贫血、血红蛋白持续降低等也可由不规则抗体引起[2]。为此,临床输血常规工作中血液相合的概念已由单纯指ABO系统的相合,而扩展为包括ABO、Rh在内的多种血型系统的血型相合。常规配血工作也由单纯的规则抗体检测,改进为规则抗体和不规则抗体同时检测,并增加了受血者的抗红细胞不规则抗体筛选试验。其目的是预先了解患者的血型抗体产生情况,为不规则抗体阳性者提前准备相合血液,降低输血不良反应的发生。

3.1从表1 24例不规则抗体阳性的结果来看，62.5%为Rh系统的抗体,说明Rh系统的不规则抗体是除ABO系统抗体以外引起溶血性输血反应的主要原因。Rh阴性个体经抗原刺激产生抗-D的几率为70.9%［3］，产生的抗体其效价在体内会逐渐下降，甚至常规试验会漏检。本文2例聚凝胺法配血阴性患者，输注红细胞后出现过敏反应，经筛检一例抗-E阳性。有学者报道，凝聚胺在测定某些抗体时比酶法、传统抗球蛋白法受干扰因素较多[4]。在试验中采用盐水法加凝聚胺法交叉配血未能检出阳性结果，可能是该抗体效价减弱，或操作未规范使之漏检,凝聚胺法漏检尚需进一步证实。

3.2我们在输血前应用凝胶柱技术对3115例标本进行筛选，阳性检出率为0.77％，与不规则抗体在正常人群中检出率为0.3～2％文献报道相符[5]，

3.3据报道每输一个单位血使受血者致敏的风险为1％～1.6％，多次输血产生同种抗体的几率为15％～20％。D抗原致敏性最强，Rh阴性个体输注一个Rh阳性的血液，80％在2～5个月内产生抗-D[6、7]。妊娠亦可产生免疫应答，故女性产生同种抗体及发生溶血反应的机会大于男性。我们检出的6例不规则抗体均为Rh血型抗体，且2例为女性，均有免疫史。提示我们在工作中要特别注意多次输血患者和需要输血的女性患者，对于非D抗原引起的同种抗体要引起临床重视。

综上所述,输血科应同时具备多种方法和手段，根据需要联合应用之，如用凝聚胺法、抗人球微柱法筛查不规则抗体；用盐水法、凝聚胺、抗人球微柱凝胶、酶法等方法交叉配血，起到相互印证，取长补短的作用，最大限度保证患者的用血安全。

【参考文献】 患者 性别 年龄(岁) 输血和(或)妊娠史 抗体特异性 凝聚胺 微柱抗人球 病症

1 女 37 有输血及妊娠史 抗-c + + 先兆子痫剖宫产

2 女 74 有输血及妊娠史 抗-Jkb + + 结肠癌

3 男 35 有输血史 抗-P1 + + 多发性骨折

4 女 23 有输血史 抗-c + + 先兆子痫剖宫产

5 男 42 有输血史 抗-e + + 腰椎骨折伴脊髓损害

6 女 72 有输血及妊娠史 抗-P1 + + 胃癌

7 男 32 有输血史 抗-Jkb + + 脑挫伤

8 男 18 有输血史 抗-D + + 小腿创伤性切断

9 女 16 有输血史 抗-E + + 股骨颈骨折

10 女 40 有输血及妊娠史 抗-E + + 风湿性心脏病

11 女 52 有输血及妊娠史 抗-Jkb + + 子宫癌

12 男 72 有输血史 抗-Jkb + + 肾间质细胞瘤

13 女 45 有输血及妊娠史 抗-D + + 子宫平滑肌瘤

14 男 75 有输血史 抗-Jkb + + 再生障碍性贫血

15 男 25 有输血史 抗-D + + 急性非淋巴细胞性白血病

16 女 48 有输血及妊娠史 抗-c + + 卵巢囊肿

17 女 71 有输血及妊娠史 抗-c + + 脑出血

18 男 30 有输血史 抗-P1 - + 特发性血小板减少性紫癜

19 女 38 有输血及妊娠史 抗-c - + 盆腔脓肿

20 男 60 有妊娠史 抗-E+抗-Fya + + 肝癌

21 男 80 有输血史 抗-Jkb + + 胃癌

22 男 55 有输血史 抗-c + + 肝癌

23 女 18 有输血史 抗-E + + 大细胞性贫血

24 女 13 有输血史 抗-D+抗-Jkb + + 急性非淋巴细胞性白血病 [1]刘达庄,朱俊,朱自严,等.免疫性输血反应的调查及预防研究，中国输血杂志,2002,(3):159-161.

[2]田兆蒿.临床输血学.第二版,北京:北京人民卫生出版社,2002.234.

[3]吕鹏.最新输血技术学.第一版，北京：人民卫生出版社，1994，55-56.