鸡白细胞介素2(IL-2) 酶联免疫分析.doc
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鸡禽流感2型AIV2酶联免疫分析ELISA
鸡禽流感2型（AIV-2）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于检测鸡血清，血浆及相关液体样本中禽流感2型（AIV-2）水平。
实验原理：本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫法（ELISA）测定标本中鸡禽流感2型（AIV-2）。
用纯化的鸡禽流感2型（AIV-2）抗体包被微孔板，制成固相抗体，可与样品中禽流感2型（AIV-2）相结合，经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后再与HRP标记的禽流感2型（AIV-2）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），与CUTOFF值相比较，从而判定标本中鸡禽流感2型（AIV-2）的存在与否。
1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。
加入一定量的PBS，PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备用。
标本融化后仍然保持2-8℃的温度。
小鼠白细胞介素2IL-2酶联免疫分析
小鼠白细胞介素2（IL-2）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：96T30 ng/L -1200 ng/L使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素2（IL-2）含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠白细胞介素2（IL-2）水平。
用纯化的小鼠白细胞介素2（IL-2）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素2（IL-2），再与HRP标记的白细胞介素2（IL-2）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的白细胞介素2（IL-2）呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中小鼠白细胞介素 2 （IL-2）浓度。
试剂盒组成1 30倍浓缩洗涤液20ml×1瓶6ml×1瓶12孔×8条6ml×1瓶6ml×1瓶6ml×1/瓶789终止液6ml×1瓶2 酶标试剂标准品（2400ng/L）0.5ml×1瓶3 酶标包被板4 样品稀释液5 显色剂A液6 显色剂B液标准品稀释液 1.5ml×1瓶1份10 说明书11 封板膜12 密封袋2张1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
1200 ng/L 600 ng/L 300 ng/L 150 ng/L 75 ng/L 5号标准品4号标准品3号标准品2号标准品1号标准品150µl的原倍标准品加入150µl标准品稀释液150µl的5号标准品加入150µl标准品稀释液150µl的4号标准品加入150µl标准品稀释液150µl的3号标准品加入150µl标准品稀释液150µl的2号标准品加入150µl标准品稀释液2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。
鸡白细胞介素-2研究进展
鸡白细胞介素-2研究进展
陈吉刚;周继勇;张德勇
【期刊名称】《动物医学进展》
【年(卷),期】2001(022)004
【摘要】白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)主要是由激活的T淋巴细胞产生的一类重要的细胞因子,具有激活淋巴因子活化的杀伤细胞(LAK)和自然杀伤细胞,刺激T 辅助细胞和自然杀伤细胞产生细胞因子和促进细胞因子的繁殖以及刺激γδT细胞在体外生长等功能,因此它是免疫学研究的热点.近年来鸡IL-2基因克隆成功,使鸡IL-2的研究及应用得到一定的发展,同时也使鸡IL-2作为免疫佐剂和构建新型的基因工程疫苗呈现出一定的应用前景,本文主要对鸡IL-2研究取得的进展作一综述.【总页数】5页(P36-40)
【作者】陈吉刚;周继勇;张德勇
【作者单位】浙江大学动物预防医学研究所,;浙江大学动物预防医学研究所,;浙江大学动物预防医学研究所,
【正文语种】中文
【中图分类】S852.4
【相关文献】
1.鸡白细胞介素18研究进展 [J], 王宪文;刘兴友;王岩;杭柏林
2.鸡白细胞介素18的研究进展 [J], 梁新峰;陈书明
3.鸡白细胞介素18（IL-18）与临床疾病相关性的研究进展 [J], 方礼禄;陈书明;武
文君
4.鸡白细胞介素6研究进展 [J], 赵娜;李烨初;张小荣;吴艳涛
5.鸡白细胞介素18与临床疾病相关性的研究进展 [J], 方礼禄;陈书明;武文君因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
鸡白细胞介素-2原核表达及其活性鉴定
鸡白细胞介素-2原核表达及其活性鉴定韩顺子;黄霞;孟闯;耿士忠;康喜龙;潘志明;焦新安【期刊名称】《中国家禽》【年(卷),期】2024(46)5【摘要】试验旨在获得具有生物活性的鸡白细胞介素-2(ChIL-2)重组蛋白。
试验以克隆获得的ChIL-2基因为模板,分别构建原核重组表达菌BL21(pCold-ChIL-2)和BL21(pGEX-6P-1-ChIL-2),进行诱导表达和纯化;通过BrdU ELISA法检测重组蛋白诱导鸡脾脏淋巴细胞的增殖情况,评估其生物活性;以rHis-ChIL-2免疫小鼠制备多克隆抗体。
结果显示:成功构建了原核重组表达菌BL21(pCold-ChIL-2)、BL21(pGEX-6P-1-ChIL-2);经表达纯化后分别获得纯度较高的rHis-ChIL-2和rGST-ChIL-2蛋白,大小分别为14 ku和39.4 ku;rHis-ChIL-2和rGST-ChIL-2蛋白分别能够促进脾脏淋巴细胞显著或极显著增殖(P<0.01或P<0.001),均具有良好的生物活性;以纯化的rHis-ChIL-2免疫小鼠制备的多克隆抗体效价为5.12×105,可识别rHis-ChIL-2和rGST-ChIL-2,与真核表达的ChIL-2蛋白反应。
结果表明,原核表达的重组蛋白ChIL-2具有良好的生物活性,采用其制备的多克隆抗体可识别真核表达的ChIL-2蛋白,为后期ChIL-2的检测奠定基础。
【总页数】6页(P56-61)【作者】韩顺子;黄霞;孟闯;耿士忠;康喜龙;潘志明;焦新安【作者单位】扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室;扬州大学农业农村部农产品质量安全生物性危害因子(动物源)控制重点实验室;江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心【正文语种】中文【中图分类】S855.3【相关文献】1.可溶性白细胞介素15受体α亚单位的原核表达、纯化及生物学活性鉴定2.人单链白细胞介素12的原核表达和生物学活性鉴定3.鸡白细胞介素-2原核表达与生物学活性初探4.水牛白细胞介素2的原核表达与活性鉴定5.鸡白细胞介素2原核表达载体的构建及表达产物的鉴定因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
鸡白细胞介素2(IL-2)对鸡免疫功能的影响
鸡白细胞介素2(IL-2)对鸡免疫功能的影响杨发龙;岳华;贾文祥【期刊名称】《中国家禽》【年(卷),期】2005(27)19【摘要】为研究鸡IL-2对雏鸡免疫功能的影响,进行了3个方面的试验。
①对体液免疫及细胞免疫的影响。
结果表明,鸡IL-2能明显提高鸡新城疫疫苗免疫后HI水平、T淋巴细胞增殖反应及ANAE+细胞百分数;②对雏鸡腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响。
结果表明使用IL-2与否对巨噬细胞的吞噬功能没有明显的影响;③人工感染法氏囊病的防治试验。
在攻毒前后注射IL-2,均可明显降低发病率和死亡率。
本研究结果表明,鸡IL-2可明显提高特异性免疫应答能力,与疫苗共同注射可作为佐剂提高疫苗的免疫原性,对法氏囊等病毒性疾病具有一定的防治作用。
【总页数】4页(P17-20)【关键词】鸡白细胞介素2;体液免疫;细胞免疫;巨噬细胞;传染性法氏囊病;白细胞介素;免疫功能;雏鸡;鸡IL-2;腹腔巨噬细胞【作者】杨发龙;岳华;贾文祥【作者单位】四川大学基础医学与法医学院;西南民族大学生命科学与技术学院【正文语种】中文【中图分类】S852.4;S858.31【相关文献】1.鸡IL-18复合免疫增强剂对鸡IFN-γ和IL-2表达的影响 [J], 余宁;李银聚;程相朝;张春杰;吴庭才;陈慧敏2.不同营养水平对海兰白蛋鸡育成期增重及效益的影响/鹅、鸡对不同饲料养分利用率的比较/黄羽肉用仔鸡饲料中添加异麦芽低聚糖的效果试验/左旋咪唑对地塞米松预处理鸡免疫功能的影响/高血球粉低蛋白料补充Ile对仔猪的影响/环境低温及L-精氨酸对肉鸡腹水综合征的影响 [J],3.重组鸡痘病毒表达的鸡IL-1β、IL-2和髓细胞生长因子对新城疫La Sota疫苗免疫效果影响 [J], 邵卫星;卢建红;彭大新;刘秀梵4.鸡IL-1β、IL-2、IFN-γ和MGF对表达新城疫病毒HN基因的重组鸡痘病毒免疫效力的影响 [J], 邵卫星;卢建红;彭大新;刘秀梵5.重组鸡痘病毒表达的鸡IL-1β和IL-2以及cMGF对新城疫LaSota疫苗免疫效果的影响 [J], 邵卫星;卢建红;彭大新;刘秀梵因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
鸡白细胞介素2IL
鸡白细胞介素2（IL-2）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定鸡血清，血浆及相关液体样本中白细胞介素2（IL-2）的含量。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鸡白细胞介素-2（IL-2））水平。
用纯化的鸡白细胞介素-2（IL-2）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入鸡白细胞介素-2（IL-2），再与HRP标记的IL-2抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的鸡白细胞介素-2（IL-2）呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中鸡白细胞介素-2（IL-2）浓度。
试剂盒组成：样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。
加入一定量的PBS，PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备用。
大鼠白细胞介素2IL-2酶联免疫分析
大鼠白细胞介素2（IL-2）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：96T100ng/L-1800ng/L使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本白细胞介素2（IL-2）含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠白细胞介素2（IL-2）水平。
用纯化的大鼠白细胞介素2（IL-2）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素2（IL-2），再与HRP标记的白细胞介素2（IL-2）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的白细胞介素2（IL-2）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠白细胞介素2（IL-2）浓度。
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。
加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
大鼠白细胞介素2IL-2酶联免疫分析
大鼠白细胞介素2（IL-2）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清，血浆，细胞上清及相关液体样本中白细胞介素2（IL-2）的含量。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠白细胞介素2（IL-2）水平。
用纯化的大鼠白细胞介素2抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素2，再与HRP标记的羊抗鼠抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的IL-2呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠白细胞介素2（IL-2）浓度。
样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。
加入一定量的PBS，PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备用。
标本融化后仍然保持2-8℃的温度。
加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。
我国集约化家禽养殖中鸡白细胞介素-2的应用前景分析
ｓ ｃ ａ ｍｏ ｅｒ ｇｅ ｅ ｉｓ ｕｈ ｓ ｄ ｎ ｎ ｔ ａｎ ｂ ｅ ｄｎ ｃ ｄ ｒ ｅ ｉｇ，ｆ ｅ ｉｇ， ｅ ｉｅ ｉ ｐ ｅ ｅｎｉｎ ｆ ｉｅａ ｅ ｎ ｅｎ ｉ ｎ ｅ ｔ ｅ ｄｎ ｐｄ ｍ ｃ ｒ ｖ ｔ ｏ ｄｓ ｓ ａ ｄ ｏ ｖｒ ｍ ｎ ｏ ｃ ｔｏｌｎ ｎ ｏ ｏ ｅ ｐ ｃ ａ ｅ ｉ ｉａ． ｅ ａｐ ｌ ａ ｉｎ ｏ ｈｉｋ ｎ Ｉ－ ｙ ａｃ ｉｖ ｆｅ ｔ ｅ ｃ ｍ ｂｎ ｔ ｏｎｒ ｌ ｇ ｉｔ ｎ ａ ｋ ｇ ｎ Ｃｈｎ Ｔｈ ｐｉ ｔ ｆｃ ｃ ｅ Ｌ ２ ｍａ ｈｅ ｅ ｅ ｃｉ ｏ ｉ ｃ ｏ ｖ ｉａｉ ｏｎ
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第 ４ 卷 第 ２期 １
２１ ０ ０年 ２月
东
北
农业大学源自学报 ４ （ ： ４ － ５ １２ １８ １ １ ）
Ｆｅ ． ０１ ｂ２ Ｏ
Ｊ ｕ ａ ｆＮｏｔｅ ｓ ｒｃ ｌｕａ ｉｅｓｔ ｏ ｒ ｌｏ ｒｈ ａｔＡｇｉｕｔｒｌＵｎｖ ｒｉ ｎ ｙ
人白细胞介素2(IL-2)说明书
人白细胞介素2（IL-2）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：96T40pg/ml-1200pg/ml使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素2（IL-2）含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白细胞介素2（IL-2）水平。
用纯化的人白细胞介素2（IL-2）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素2（IL-2），再与HRP标记的白细胞介素2（IL-2）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的白细胞介素2（IL-2）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人白细胞介素2（IL-2）浓度。
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。
加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
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鸡白细胞介素2（IL-2）酶联免疫分析试剂盒使用说明书检测范围：6ng/L -180 ng/L使用目的：本试剂盒用于测定鸡血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素-2（IL-2）含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鸡白细胞介素-2（IL-2）水平。
用纯化的鸡白细胞介素-2（IL-2）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素-2（IL-2），再与HRP标记的白细胞介素-2（IL-2）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的白细胞介素-2（IL-2）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中鸡白细胞介素-2（IL-2）浓度。
标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。
加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟。
10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。
测定应在加终止液后15分钟以内进行。
操作程序总结：计算以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。
一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。
如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6个月RDChicken Interleukin 2FOR RESEARCH USE ONLYAssay range：15 ng/L -300 ng/L 96 determinations PurposeThis kit allows for the determination of IL-2 concentrations in Chicken serum, cell culture supernates and other biological fluidsPrinciple of the assayT he kit assay Chicken IL-2 level in the sample，use Purified Chicken IL-2 antibody to coat microtiter plate wells, make solid-phase antibody, then add IL-2 to wells, Combined antibody which With HRP labeled goat anti- chicken become antibody - antigen - enzyme-antibody complex, after washing Completely, Add TMB substrate solution,TMB substrate becomes blue color At HRP enzyme-catalyzed, reaction is terminated by the addition of a sulphuric acid solution and the color change is measured spectrophotometrically at a wavelength of 450 nm. The concentration of IL-2 in the samples is then determined by comparing the O.D. of the samples to the standard curve.Materials provided with the kitSpecimen requirements1.extract as soon as possible after Specimen collection,and according to the relevantliterature, and should be experiment as soon as possible after the extraction. If it can’t, specimen can be kept in -20 ℃ to preserve, Avoid repeated freeze-thaw cycles.2.Can’t detect the sample which contain NaN3, because NaN3 inhibits HRP active. Assay procedure1.Dilute and add sample:Dilute Original density Standard as follow table:2.add sample：Set blank wells separately (blank comparison wells don’t add sample and HRP-Conjugate reagent, other each step operation is same). testing sample well. add Sample dilution 40μl to testing sample well, then add testing sample 10μl (sample final dilution is 5-fold), add sample to wells , don’t touch the well wall as far as possible, and Gently mix.3.Incubate: After closing plate with Closure plate membrane ,incubate for 30 min at 37℃.4.Configurate liquid: 30-fold wash solution diluted 30-fold (or 20-fold) with distilled water and reserve.5.washing：Uncover Closure plate membrane, discard Liquid, dry by swing, add washing buffer to every well, still for 30s then drain, repeat 5 times, dry by pat.6.add enzyme：Add HRP-Conjugate reagent 50μl to each well, except blank well.7.incubate：Operation with 3.8.washing：Operation with 5.9.color：Add Chromogen Solution A 50ul and Chromogen Solution B to each well, evade the light preservation for 15 min at 37℃10.Stop the reaction：Add Stop Solution50μl to each well, Stop the reaction(the blue colorchange to yellow color).11.assay：take blank well as zero , Read absorbance at 450nm after Adding Stop Solution andwithin 15min.Steps descriptionCalculateTake the standard density as the horizontal, the OD value for the vertical ,draw the standard curve on graph paper, Find out the corresponding density according to the sample OD value by the Sample curve, multiplied by the dilution multiple, or calculate the straight line regression equation of the standard curve with the standard density and the OD value ,with the sample OD value in the equation, calculate the sample density, multiplied by the dilution factor,the result is the sample actual density.Important notes1.The kit takes out from the refrigeration environment should be balanced 15-30 minutes inthe room temperature, ELISA plates coated if has not use up after opened, the plate should be stored in Sealed bag.2.washing buffer will Crystallization separation, it can be heated the water helps dissolvewhen dilute . Washing does not affect the result.3.add Sample with sampler Each step, And proofread its accuracy frequently, avoids theexperimental error. add sample within 5 min, if the number of sample is much , recommend to use Volley .4.if the testing material content is excessively higher (The sample OD is bigger than the firststandard well ),please dilute Sample (n-fold), Please diluente and multiplied by the dilution factor.（×n×5）.5.Closure plate membrane only limits the disposable use, to avoid cross-contamination.6.The substrate evade the light preservation.7.Please according to use instruction strictly, The test result determination must take themicrotiter plate reader as a standard.8.All samples, washing buffer and each kind of reject should according to infective materialprocess.9.Do not mix reagents with those from other lots.Storage and validity1．Storage：2-8℃.2．validity：six months.。