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实验技术习题

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实验技术习题

《分⼦⽣物学常⽤实验技术》课堂练习题参考答案

学号：姓名：

⼀、填空题。1.在⽤SDS分离DNA时，要注意SDS浓度，0.1%和1%的SDS作⽤是不同的，前者，

后者。2.SDS是⼀种提取DNA时常⽤的阴离⼦去污剂，它可以溶解膜蛋⽩和脂肪，使细胞膜和核膜破裂，

使核⼩体和核糖体解聚，释放出。它还可以使蛋⽩质变性沉淀，也能抑制。3.在分离DNA时，需要带⼿套操作，是因为。

4.⽤酚-氯仿抽提DNA时，通常在氯仿或酚-氯仿中加⼊少许异戊醇，这是因为有机溶剂异戊醇可

以。另外，异戊醇有助于分相，使离⼼后的上层含DNA的⽔相、中间的变性蛋⽩质相和下层有机溶剂相维持稳定。5.在分离DNA时，要⽤⾦属离⼦螯合剂，如EDTA和柠檬酸等，其⽬的是：。

6.在DNA分离过程中，造成DNA分⼦断裂的因素很多，主要有：、和

。7.在分离DNA时，常⽤酸变性、碱变性、热变性和来去除蛋⽩质。

8.⽤⼄醇沉淀DNA的原理是：。

9.⽤⼄醇沉淀DNA时，通常在DNA溶液中加⼊单价阳离⼦，如氯化钠和⼄酸钠，其⽬的

是。10.通常可在3种温度下保存DNA：4～5℃、-20℃和-70℃，其中以℃为好。

11.浓缩DNA的⽅法通常有：包埋吸⽔法、蒸发法、膜过滤法和。

12.碱裂解法和清亮裂解法是分离质粒的两种常⽤⽅法，⼆者的原理不同，前者是根

据，后者是根据。13.在技术中，DNA限制性酶切⽚段经凝胶电泳分离后，被转移到硝酸纤维素

薄膜上，然后与放射性标记的DNA探针杂交。14.SSC是氯化钠和柠檬酸钠组成的试剂，其中前者作⽤是：，后者的作⽤

是：。15.在southern杂交中，DNA转移的速度取决于、和。

16.在重蒸酚中加⼊1%的8-羟基喹啉及少量β-巯基⼄醇，不仅可以防⽌酚氧化，还可以抑制

活性以及。17.RNA分⼦经凝胶电泳后按⼤⼩不同分开，然后被转移到⼀张硝酸纤维素膜（尼龙膜）上，同⼀

放射性DNA探针杂交的技术称 _ _。18.根据Northern杂交结果可以说明 _ _。

19.cDNA技术是进⾏真核基因克隆的⼀种通⽤⽅法，因为它可以⽤为模板。

20.将含有⼀个mRNA的DNA拷贝的克隆称为⼀个，源于同⼀批RNA制备物的克隆群则

构建成了⼀个。21.受体细胞的感受态是的⽣理状态。

22.感受态细胞是可以诱导的，诱导⽅法有、和等。

23.⼈⼯感受态细胞的⼤肠杆菌在温度为℃时吸附DNA，在℃时摄⼊DNA。

24.为了提⾼重组DNA分⼦对E . coli的转化效率，通常可采取和。

25.环状质粒的转化效率很低，通常是线性双链DNA转化效率的。

26.SalⅠ是识别6个核苷酸的酶，其识别切割的理论值是每个碱基就有⼀个切点，但

在哺乳动物中⼤约300Kb个碱基才有⼀个切点。27.重组DNA技术常⽤的限制性内切核酸酶可识别某些特异碱基序列，具有结构。

28.产⽣平末端的⽅法通常有：、和。

29.在酶切反应管加完各种反应物后，要离⼼2秒，其⽬的是：和。

30.连接酶是⼀类⽤于核酸分⼦连接形成的核酸合成酶，有DNA连接酶和RNA连接酶之

分。31.为了防⽌载体DNA⾃⾝环化，可⽤脱去双链DNA的。

32.⽤于克隆的DNA⽚段，在质量上要求：1）稳定性，保持其分⼦构型；2）低蛋⽩质含量；3）

纯度要⾼，不含；4）不含可透析的⼩分⼦，如酒精等。33.构建基因组⽂库时连接⽅法主要是；⽽构建cDNA ⽂库，可⽤

或。34.克隆⼀个编码某种蛋⽩质的基因必须考虑其表达的三个基本条件：、

和。

⼆、判断题。1.氯霉素扩增DNA 时，加氯霉素的时间是重要的，因为加得太早，菌数不够，加⼈时间过迟，

菌龄过⽼，容易⾃溶。（）2.在DNA 贮存液中加⼀滴三氯甲烷，可防⽌真茵的污染。（）

3.DNA、RNA在pH8.5的TAE缓冲夜中电泳时，由正极向负极移动。（）

4.作为⼀个基因克隆的载体，主要由药物抗性基因、供插⼊外源DNA⽚段的多克隆位点和外源⽚

段插⼊筛选标志这3⼤部分构成。（）5.⽤pUC质粒作克隆载体克隆DNA时，⼈们⽤显⾊法筛选重组质粒，即在有IPTG和X-gal的平

板上，显⽰⽩⾊的菌落含有原始质粒，⽽显⽰蓝⾊的菌落含有重组质粒。（）6.在克隆载体pUC系列中，完整的lacZ基因提供了⼀个外源基因插⼊的筛选标记，蓝⾊的转化

菌落通常表明克隆是失败的。（）7.在克隆载体pBSK质粒中，利⽤完整的lacZ基因作为筛选标记，⽩⾊的转化菌落表明重组质粒

肯定插⼊外源⽚段。（）8.X-gal显⾊反应的基本原理是使载体与受体互补的失活。（）

9.碱法和煮沸法分离质粒DNA的原理是不同的。（）

10.根据构建⽅法的不同，基因⽂库分为基因组⽂库、cDNA⽂库等。（）11.⼀旦有了⼀套已知序列的基因组克隆，通过从⽂库中获得覆盖⽬的突变基因所在基因组区的所

有克隆，就可以进⾏染⾊体步移。（）12.核酸杂交的原理是根据分⼦间杂交。（）

13.在Northern杂交中，为了防⽌RNA形成部分发夹结构，影响迁移率，所以要⽤变性缓冲液进

⾏电泳。（）14.⽤限制性内切核酸酶BglⅡ（识别位点是A↓GATCT）酶切载体DNA，⽤BamHⅠ（识别位点是G

↓GATCC）酶切供体DNA，可以直接通过粘性末端进⾏连接。（）

15.不匹配的粘性末端可以通过部分填补或补平后进⾏连接。（）

16.单克隆抗体是淋巴细胞和瘤细胞杂交后形成的单个杂交瘤细胞经⽆性繁殖⽽⽣特异性抗体。

（）17.基因组学强调从基因组的整体⽽不是单个基因的⾓度把握⽣物体遗传变异的规律。（）

18.利⽤⾜够数量的STS标签，可确定所有DNA⼤⽚段在染⾊体或基因组中的位置。（）

19.clone contig法的原理是⾸先⽤酸⽔解法把待测基因组降解为数10万碱基对以上的⽚段，再

分别对各⽚段进⾏测序。（）20.靶标鸟枪法⾸先根据染⾊体上已知基因或遗传标签的位置来确定部分DNA⽚段的排列顺序，再

逐步确定各⽚段在染⾊体上的相对位置。（）

三、单项选择题。1.⼄醇沉淀DNA时，下列何种长度的核苷酸不能被沉淀？ _______

A、10bp；

B、100bp；

C、200bp；

D、1000bp。

2.⽤碱法分离质粒DNA的基本原理是：_______

A、染⾊体DNA断裂成碎⽚；

B、染⾊体DNA 分⼦量⼤，不能释放；

C、染⾊体DNA变性后来不及复性；

D、染⾊体DNA未与蛋⽩质分开⽽沉淀。

3.Southern杂交可检测_______：

A、⽬的基因的表达丰度

B、基因组中⽬的基因的存在

C、蛋⽩质表达

D、⽬的基因是否表达

4.蛋⽩质双向电泳中，_______决定了SDS-蛋⽩质复合物在凝胶电泳中的迁移率。

A、等电点

B、相对分⼦量C、空间结构

D、电荷量

5.粘末端连接法，不仅操作简单，⽽且 _______

A、产⽣新切点；

B、易于回收外源⽚段；

C、载体不易环化；

D、影响外源基因表达。

6.下⾯哪⼀种不是产⽣限制性内切酶星号活性的主要原因：_______

A、酶切反应体系中酶浓度过低；

B、⽢油含量过⾼；

C、酶切反应体系中含有有机溶剂；

D、含有⾮镁离⼦的⼆价阳离⼦。

7.关于cDNA 的最正确的提法是：( )

A、同mRNA互补的单链DNA ；

B、同mRNA 互补的双链DNA；

C、以mRNA为模板合成的双链DNA；

D、以上都正确。

8.在分离mRNA的溶液中，Mg2+离⼦的浓度不能低于0.5m mol/L，因为低了_______

A、mRNA会降解；

B、mRNA会沉淀；

C、核搪体解体；

D、mRNA会变性。

9.关于Ⅱ类限制性内切酶的作⽤，下列不正确的是：_______

A、识别序列长度⼀般为4-6bp；

B、识别序列通常具有回⽂结构；

C、识别和切割双链DNA分⼦；

D、只能切割⾮甲基化序列。

10.有关PCR的描述下列哪项不正确？_______

A、是⼀种酶促反应；

B、引物决定了扩增的特异性；

C、扩增的对象是DNA序列；

D、扩增的对象可以是氨基酸。

11.PCR试验的特异性主要取决于：_______

A、DNA聚合酶的种类；

B、反应体系中模板DNA的量；C、引物序列的长度和结构；

D、PCR buffer中的镁离⼦浓度

12.蓝⽩斑试验筛选时，加⼊IPTG的作⽤是： _______

A、诱导ω肽的合成；

B、作为酶作⽤的底物；

C、诱导α肽的合成；

D、作为显⾊反应指⽰剂。

13.基因敲除（knock out）⽅法主要⽤来阐明： _______

A、基因的结构；

B、基因的调控；

C、基因的表达；

D、基因的功能。

14._________利⽤单链⼩RNA⾼效、特异性降解细胞内同源mRNA，从⽽阻断体内靶基因表达，使

细胞出现靶基因缺失的表型。A、RNA⼲扰技术；

B、原位杂交技术；

C、RACE技术；

D、点突变技术。

四、名词解释。1.载体：

2.限制性核酸内切酶：

3.cDNA：互补DNA，指以mRNA为模板反转录得到的DNA。

4.聚合酶链反应（polymerase chain reaction, PCR）：

5.RT-PCR (reverse transcription PCR)：以mRNA为模板先逆转录合成cDNA，再以cDNA为模

板进⾏聚合酶链式反应。6.Real-time PCR：

7.cDNA⽂库（cDNA library）：

8.基因⽂库（gene library）：

9.定点突变技术（site-directed mutagensis）：

10.酵母单杂交系统（yeast one-hybrid system）：提⽰：该系统⽬的：⽤于鉴定DNA和蛋⽩质之

间的相互作⽤。11.酵母双杂交系统（yeast two-hybrid system）：提⽰：该系统⽬的：鉴定反式作⽤因⼦之间的

相互作⽤对真核基因转录调控的影响。12.凝胶阻滞试验（electrophortic mobility shift assay, EMSA; gel retardation）：

13.RACE（Rapid amplification of cDNA End）技术：

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临床分子生物学检验技术模拟练习题(附答案)

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一、单选题（共100题，每题1分，共100分）

1、检测TB的实验室技术中，被认为是目前最先进的一种检测TB及其耐药性的方法是

A、PCR技术

B、荧光定量 PCR技术

C、PCR-RFLP技术

D、全自动结核杆菌检测技术

E、DNA 测序技术

正确答案：D

2、属于微小缺失综合征的不包括

A、Wilms瘤

B、着色性干皮病

C、Angelman 综合征

D、Prader-Willi综合征

E、WAGR综合征

正确答案：B

3、淋病奈瑟菌耐青霉素的分子机制与以下哪组基因有关

A、katG和inhA

B、gyrA和parC

C、penA和ponA

D、gyrA和gyrB

E、rrs和rpsL

正确答案：C

4、下列不是影响DNA复性因素的是

A、DNA浓度

B、DNA的分子量

C、温度

D、碱基组成

E、DNA 的来源

正确答案：E

5、硝酸纤维素和 PVDF膜结合蛋白主要靠

A、疏水作用

B、氢键作用 C、离子键作用

D、盐键作用

E、酯键作用

正确答案：A

6、下列不能用于核酸转移作固相支持物的是

A、NC膜

B、尼龙膜

C、化学活性膜

D、滤纸

E、PVC膜

正确答案：E

7、有关多重PCR的描述正确的是

A、同一个模板，多种不同的引物

B、相同的引物，多种不同的模板

C、多个模板，多种引物

D、引物的Tm值、反应时间和温度、反应缓冲液等尽量不一致以区分不同产物

E、同一反应内各扩增产物片段的大小应尽可能相同或接近

正确答案：A

8、Western 印迹过程中若转移<20kD的蛋白质时应采用何种硝酸纤维素膜

A、0.2μm

B、0.3μm

C、0.4μm

D、0.5μm

E、0.6μm

正确答案：A

9、双向电泳的样品制备目的不包括的是

A、还原

B、氧化

C、变性

D、去除蛋白质杂质

E、溶解

正确答案：B 10、寡核苷酸探针的Tm简单计算公式为

数学实验习题

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实验1 MATLAB基本特性与基本运算

1． 求解方程02cbxax的根。其中

（1）3,2,1cba （2）3,2,1cba

（提示：运用求根公式。结果为（1）ix212,1，（2）3,12,1x）

2． 已知圆的半径为15，求圆的周长和面积。

3． 输入例1-6中语句，计算三角形的面积并修改边长值重新计算三角形的面积。

4． 查询表1-4中部分常用函数的功能与用法。

5． 设0220,2112BA，求矩阵方程XBAAX2的解。

6． 画出231xxy和22)1ln(xxz在区间[-5,5]上的图形（提示：用 .^ 和 ./ 运算）。

7． 画出xexexfxxsincos)(cos2sin2在区间[-5,5]上的图形。

8． 设xexexfxxsincos)(cos2sin2，试在[-5,5]上求出函数的零点及极大、极小值。

9． 求方程0d)cos32(

0 3sttetxt当s1、11、21时的根。

10． 已知1

0 214dxx(试证明)，试用不同的积分命令求其近似值(pi=3.14159265358…)。

11．设||sin12)(/1xaxexfx，试求当)(lim1xfx存在时a的大小以及极限值。

12．设)cossin()(xxxxf，求)(xf在]4,0[上的极值、拐点。

13．计算积分（1）dxxxsin；（2）dxxx102)1ln(。

实验2 MATLAB绘制二维、三维图形

1． 在圆域122yx上画出上半球面221yxz的图形。

2． 画出椭球面11241222zyx的图形。

3． 在矩形域[-2,2]×[-2,2]区域上画出函数)(22yxxez的图形。

4． 为探测一河床横断面结构，在河面上等距离测量深度如下，试绘图表示。

2014最新医学实验技术-复习题

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名词解释：

1、 Ct值（用于在荧光定量PCR 结果判断）

C代表Cycle，t代表threshold（阈值，临界值），Ct值的含义是：每个反应管内的荧光信号到达设定阈值时所经历的循环数

2、 血液分析仪的校准

血液分析仪主要是用于检测人体血液标本，是能对血液中有形成分进行定性、定量分析，并提供相关信息的仪器。在规定的条件下,为确定血液分析仪所指示的量值,与对应的由标准所复现的量值之间关系的一组操作称为血液分析仪的校准。

3、 血液分析仪的校准验证

将用于校准验证的校准物充分混匀,在仪器上重复检测11次。去除第1次结果,计算第2次~11次检测结果的均值,再次与血细胞分析校准的判定标准表对照。如各参数（WBC、RBC、Hb、Hct、MCV、Plt、）的差异全部等于或小于规定的数值（1.5%,1.0%,1.0%,2.0%,1.0%,3.0%）,证明校准合格，如达不到要求,须请维修人员进行检修。

4、 流式细胞术

流式细胞术是对悬浮于流体中的微小颗粒进行计数和分选，可用于对流过光学或电子检测器的一个个细胞进行连续的多种参数分析。利用流式细胞仪（flow cytometer）对血液、各种体液、骨髓 、活检以及动植物的单细胞悬液、石蜡包埋组织中的有形成分包括细胞、血小板、细胞器、精子、微生物以及人工合成微球等的多种生物和物理、化学特性进行计数和定量分析，并能对特定细胞群体加以分选的细胞参量分析技术。

5、 FSC 和SSC

FSC：前向散射光，

SSC：侧向散射光

在流式细胞术中，一束单色光（通常是激光）照到流体力学聚焦的一股流体上，若干个检测器瞄向流束和激光相交的这个点，和激光在同一直线上的称为前散射光(FSC)，其它几个和激光垂直的称为侧向散射光(SSC)

6、 细胞因子

细胞因子是由免疫原、丝裂原或其他因子刺激细胞所产生的低分子量可溶性蛋白质，为生物信息分子，具有调节固有免疫和适应性免疫应答，促进造血，以及刺激细胞活化、增殖和分化等功能。包括白细胞介素、干扰素家族、肿瘤坏死因子超家族、集落刺激因子、趋化因子家族等。

机能实验试题(含答案)

机能实验试题(含答案)

《机能实验学》习题一

一．填空题:

1. 家兔重2.4千克，耳缘静脉注射1%盐酸吗啡15mg/kg，应注( 3.6 )毫升

2. 肺水肿家兔肺的特点是(大量白色或粉红色泡沫样痰,表面饱满光滑，红白相间)、(切面有白色或粉红色泡沫流出)、(有握雪感)，兔的特点 (肠内哮鸣音 )、(呼吸浅快)、(口唇粘膜青紫)。

3. 将沾有利多卡因的小滤纸贴附神经干上，利多卡因通过(阻断Na+通道 ) 作用使动作电位( 传导受阻) 。

4.家兔静脉麻醉最常用药物(乌拉坦)，浓度及给药量分别为(20%) 、(5ml/kg)。

5. 小鼠缺氧实验中复制低张性缺氧动物模型时，在广口瓶中加入钠石灰的作用是(吸收二氧化碳)，复制血液性缺氧动物模型的方法有(一氧化碳中毒)和(亚硝酸钠中毒)。

6. 常用的两栖类动物的生理代溶液是(任氏液) ，其主要成份为(Nacl) 、(Cacl2) 、(Kcl) 和 (NaHCO3)。其所含阳离子有维持细胞的兴奋性和 (收缩性) 的功能；阴离子有维持细胞的 (酸碱平衡) 的功能。

7. 在心电图描记中，P波反映 ( 两心房去极化过程化所经历的时间)、QRS波群反映(两心室去极化过程) 、T波反映(心室复极化过程)、PR间期反映 (兴奋由心房传导至心室的时间) 、ST段反映(心室各部分心肌细胞均处于动作电位平台期) 、QT间期反映(从心室开始去极化到完全复极) 。

8. 在血管插管试验中肝素化的目的是( 抗凝，防止血液堵塞管口)， 插管后进行的三步结扎法是指第一步结扎(远心端结扎)，第二步结扎(近心端结扎)，第三步(远心端和近心端对扎) 。

9. 运动对血压的影响是使(收缩压) 升高，主要原因是 (交感肾上腺髓质系统活动增加)。

10. 在抗B血清上滴加受试者血液，数分钟后出现凝集，抗A血清未发生凝集，受试者的血型为(B) 型。

11. 失血性休克的治疗原则(扩容)、(纠酸) 、(解痉)。