秦皮提取物中香豆素类成分含量测定方法研究

一、实验目的1. 了解秦皮的基本成分及药理作用。

2. 掌握从秦皮中提取香豆素类成分的方法。

3. 学习并掌握提取分离和鉴定香豆素类成分的实验技术。

二、实验原理秦皮为木犀科植物苦枥白蜡树（Fraxinus rhynchophylla Hance）的干燥枝皮或干皮，具有清热燥湿、清肝明目、止痢等功效。

秦皮中含有丰富的香豆素类成分，如秦皮甲素、秦皮乙素等，具有抗菌、抗炎、抗氧化等药理作用。

本实验通过提取分离和鉴定，旨在获得秦皮中的香豆素类成分。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：秦皮、乙醇、乙醚、氯仿、正己烷、无水硫酸钠、无水碳酸钠、氢氧化钠、氢氧化钾、硅胶、硝酸银、盐酸、硫酸、苯酚、氨水等。

2. 实验仪器：分析天平、旋转蒸发仪、磁力搅拌器、离心机、真空泵、紫外-可见分光光度计、高效液相色谱仪、薄层色谱仪等。

四、实验方法1. 秦皮提取：将秦皮粉碎，用95%乙醇回流提取3次，每次2小时，合并提取液，减压浓缩至适当浓度，加入适量水，调节pH值至7.0，静置过夜，滤过，滤液用正己烷萃取，合并正己烷层，无水硫酸钠干燥，真空浓缩得浸膏。

2. 香豆素类成分分离：将浸膏用氯仿-甲醇（体积比1:1）溶液溶解，加入适量硅胶，搅拌，静置，过滤，滤饼用氯仿-甲醇（体积比1:1）溶液洗脱，收集洗脱液，减压浓缩得香豆素类成分。

3. 香豆素类成分鉴定：采用薄层色谱（TLC）和高效液相色谱（HPLC）进行鉴定。

（1）TLC鉴定：将分离得到的香豆素类成分进行TLC分析，以秦皮甲素、秦皮乙素为对照品，观察斑点颜色和Rf值。

（2）HPLC鉴定：将分离得到的香豆素类成分进行HPLC分析，以秦皮甲素、秦皮乙素为对照品，测定峰面积和保留时间。

五、实验结果1. 秦皮提取：经过3次回流提取，得到秦皮浸膏，浸膏得率为5.0%。

2. 香豆素类成分分离：经过硅胶柱层析，分离得到香豆素类成分，总得率为 2.0%。

3. 香豆素类成分鉴定：TLC分析结果显示，分离得到的香豆素类成分与秦皮甲素、秦皮乙素的斑点颜色和Rf值一致。

秦皮提取物中香豆素类成分含量测定方法研究目的分别建立秦皮提取物总香豆素和4种主要香豆素成分紫外分光光度法（UV）和高效液相色谱法（HPLC）含量测定方法。

方法采用UV，以秦皮甲素为对照品，在334 nm测定秦皮提取物总香豆素的含量；采用HPLC，用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），以乙腈-0.01%磷酸溶液为流动相梯度洗脱，在334 nm测定秦皮提取物中秦皮甲素、秦皮苷、秦皮乙素、秦皮素4种主要香豆素成分的含量。

结果秦皮甲素的质量浓度在 5.76～23.04 μg/mL范围内线性关系良好（r=0.999 9），平均回收率为100.6%（RSD=1.8%）；4种香豆素成分秦皮甲素、秦皮苷、秦皮乙素、秦皮素的质量分别在0.055 0～3.850 0 μg（r=0.999 7）、0.053 9～3.773 0 μg（r=0.999 8）、0.060 0～0.660 0 μg（r=0.999 9）、0.056 2～0.618 2 μg（r=0.999 9）范围内线性关系良好，平均回收率分别为96.97%（RSD=1.26%）、100.80%（RSD=2.22%）、99.04%（RSD=2.47%）、98.77% （RSD=1.94%）。

结论2种含量测定方法简便、准确、可靠，可用于秦皮提取物总香豆素和主要香豆素成分的质量控制。

Abstract：Objective To establish a UV spectrophotometry method and an HPLC method respectively for the determination of the total content of coumarin and contents of four main constituents of coumarin in Fraxini Cortex extract. Methods UV spectrophotometry was used for the determination of the content of total coumarin in Fraxini Cortex extract. The reference substance was Aesculin，and the maximum ultraviolet absorption wavelength was 334 nm. The HPLC method was used to determine the contents of Aesculin，Fraxin，Aesculetin and Fraxetin in Fraxini Cortex extract，using gradient elution with acetonitrile-phosphate solution （0.01%）as mobile phase on Agilent ZORBAX SB-C18 chromatographic column （4.6 mm ×250 mm，5 μm）at room temperature. Results For the UV method，the linear range of the mass concentration of Aesculin was 5.76-23.04 μg/mL （r=0.999 9），and the average recovery was 100.6% （RSD=1.8%）. For the HPLC method，the linear ranges of the mass of Aesculin，Fraxin，Aesculetin and Fraxetin were 0.055 0-3.850 0 μg （r=0.9997），0.053 9-3.773 0 μg （r=0.999 8），0.060 0-0.660 0 μg （r=0.999 9），and 0.056 2-0.618 2 μg （r=0.999 9），respectively，and the average recoveries were 96.97% （RSD=1.26%），100.80% （RSD=2.22%），99.04% （RSD=2.47%），and 98.77% （RSD=1.94%），respectively. Conclusion Both of the two methods are simple，accurate and reliable，and can be used for the quality control of total coumarin and the main constituents of coumarin in Fraxini Cortex extract.Key words：Fraxini Cortex extract；coumarin；UV spectrophotometry；HPLC；content determination秦皮，《神农本草经》将其列为上品。

秦皮香豆素类成分的提制和鉴定秦皮，系木犀科植物苦枥白蜡树Fraxinus rhynchophylla Hance、白蜡树Fraxinus chinensis Roxb、尖叶白蜡树Fraxinus szaboana Lingelsh或宿柱白蜡树Fraxinus stylosa Lingelsh的干燥枝皮或干皮。

又名梣皮。

尖叶梣分布于黄河、长江流域各省，习称陕西秦皮；大叶梣分布于东北、河北、江西、河南等地；白蜡树分布于南、北各省区，商品药材习称四川秦皮。

有清热燥湿、收涩、明目的功效，用于肠炎、痢疾、白带、慢性气管炎、急性结膜炎，外用治牛皮廯。

一、主要化学成分的结构和物理性质1.七叶树苷（Esculin，又名七叶灵、七叶苷、秦皮甲素）针状体（热水），mp.204-206℃，为倍半水合物。

难溶于冷水，溶于沸水、热乙醇、甲醇、吡啶、乙酸乙酯和醋酸。

2.七叶树内酯（Esculetin，又名七叶苷元、秦皮乙素）3.棱状结晶（冰醋酸），叶状结晶（真空升华得），mp.268-270℃。

溶于稀碱显蓝色荧光，尚溶于热乙醇及冰醋酸，几乎不溶于乙醚和沸水。

3.秦皮苷（Fraxin，又名白蜡树苷、梣皮苷）水合物为黄色针状结晶，无水物为白色粉末，mp.206℃，（165℃软化）微溶于水，易溶于热水及热乙醇，不溶于乙醚。

4.秦皮素（Fraxetin，又名秦皮亭、白蜡树内酯、Fraxetol）片状结晶（乙醇水溶液），mp.227-228℃（230-232℃）。

溶于乙醇，微溶于乙醚及沸水。

二、实验目的1.掌握回流提取秦皮香豆素类成分的方法。

2.学习脂溶性成分和水溶性成分的分离方法。

3.了解香豆素类成分的一般性质和鉴别反应。

4.学习各种实验技能:提取：回流提取分离纯化：萃取鉴识：色谱法、化学法三、实验原理因为七叶苷和七叶内酯均为香豆素类化合物，能在乙醇中溶解，故采用乙醇提取。

再利用七叶苷极性大于七叶内酯极性，用乙酸乙酯分离。

乙醇提出的脂溶性杂质，可用三氯甲烷萃取除去。

2019年执业药师考试中药化学题库：香豆素和木脂素（答案解析）一、最佳选择题1、联苯环辛烯型木脂素有很强的紫外吸收，是由于结构中含有A、环辛烯环羟基B、甲氧基C、共轭苯环D、亚甲二氧基E、酚羟基2、能与香豆素类化合物反应显蓝色的是A、Gibb反应B、Emerson反应C、碘化铋钾反应D、异羟肟酸铁反应E、三氯化铁反应3、以下具有挥发性的是A、呋喃香豆素B、吡喃香豆素C、双香豆素D、分子量小的香豆素4、以下具有强烈蓝色荧光的是A、甘草酸B、七叶内酯C、二蒽酮D、麻黄碱E、大黄素5、香豆素类化合物在碱中长时间放置A、不发生变化B、生成顺式邻羟基桂皮酸盐C、生成顺式邻羟基桂皮酸D、生成反式邻羟基桂皮酸盐E、生成反式邻羟基桂皮酸6、有强烈蓝色荧光的香豆素类化合物是A、7-羟基香豆素B、7，8-二羟基香豆素C、7-甲氧基香豆素D、7，8-二甲氧基香豆素E、6，7-二甲氧基香豆素7、属于异香豆素类化合物的是A、茵陈炔内酯B、邪蒿内酯D、香柑内酯E、茴芹内酯8、属于角型香豆素类化合物的是A、七叶苷B、补骨脂内酯C、厚朴酚D、水飞蓟素E、邪蒿内酯9、属于线型香豆素类化合物的是A、伞形花内酯B、茵陈素C、七叶内酯D、白蜡素E、美花椒内酯10、游离的香豆素A、可溶于热的NaOH溶液B、极易溶于冷的石油醚C、在浓碱溶液中长时间加热后用酸酸化可恢复为原来的化合物D、易溶于冷水E、不溶于沸水11、Gibb's或Emerson反应可用于区别香豆素母核上A、游离的酚羟基B、酚羟基的对位有无氢原子C、内酯环是否开裂D、酚羟基的对位有无甲氧基取代E、酚羟基对位的羟基是否成苷12、香豆素类化合物的基本碳架A、C6-C3-C6B、C6-C3C、C6-C2-C5D、C6-C1-C6E、C6-C413、某一香豆素苷酶水解后的苷元可溶于热的氢氧化钠水溶液，是由于结构中含有A、不饱和酮B、酮基C、酚羟基D、苯环E、内酯环14、在《中国药典》2010年版中，前胡中白花前胡甲素的含量测定应用下列哪种方法A、GCB、TLCSC、HPLCD、IRE、UV15、在《中国药典》2010年版中，秦皮的含量测定成分为A、秦皮甲素B、秦皮乙素C、总香豆素D、总多糖E、秦皮甲素和秦皮乙素16、中药五味子中所含的主要木脂素是A、简单木脂素B、单氧环木脂素C、环木脂内酯木脂素D、联苯环辛烯型木脂素E、新木脂素17、中药厚朴中含有的厚朴酚是A、双环氧木脂素类B、联苯环辛烯型木脂素类C、环木脂内酯木脂素类D、新木脂素类E、简单木脂素类18、属于木脂素类化合物的是A、花椒内酯B、邪蒿内酯C、厚朴酚D、欧前胡内酯E、仙鹤草内酯19、主要含有木脂素成分的中药A、五味子B、人参C、薄荷D、柴胡E、三七20、补骨脂内酯的基本结构属于A、异香豆素类B、简单香豆素类C、呋喃香豆素类D、吡喃香豆素类E、其他香豆素类21、含有香豆素成分的中药A、五味子B、厚朴C、补骨脂D、满山红叶22、补骨脂内酯属于哪一类的香豆素A、异香豆素类B、角型吡喃香豆素类C、线型吡喃香豆素类D、角型呋喃香豆素类E、线型呋喃香豆素类23、以下关于香豆素的说法错误的是A、游离的香豆素多数有结晶B、香豆素苷多数无香味C、香豆素中分子量大的有挥发性D、香豆素苷多数无挥发性E、香豆素中分子量小的能升华24、以下属于异香豆素的是A、茵芋苷B、补骨脂内酯C、邪蒿内酯D、仙鹤草内酯E、茴芹内酯25、呋喃香豆素大多显示的荧光颜色为A、蓝色B、淡绿色D、红色E、棕色26、《中国药典》采用高效液相色谱法测定药材中补骨脂素和异补骨脂素的总含量不得少于A、0.70%B、0.60%C、0.65%D、0.50%E、0.80%二、配伍选择题1、A.1745～1715cm-1B.甲氧基C.3600～3200cm-1D.酚羟基E.内酯环结构<1> 、香豆素结构中α-吡喃酮引起的红外吸收峰在A、B、C、D、E、<2> 、多数香豆素在紫外光下显蓝色荧光，是因为有A、B、C、D、E、<3> 、香豆素可发生异羟肟酸铁反应呈红色，是因为有A、B、C、D、E、2、A.δ6.1～6.4B.δ7.3～7.4C.δ6.8～6.9D.δ7.5～8.3E.δ3.9～4.0<1> 、7-羟基香豆素的1H-NMR谱中H-3信号是A、B、C、D、E、<2> 、7-羟基香豆素的1H-NMR谱中H-4信号是A、B、C、D、E、3、A.δ7.60(1H，d，J=9.5Hz)B.δ6.85(1H，brs)C.δ6.26(1H，d，J=9.5Hz)D.δ3.95(3H，s)E.δ6.91(1H，s)<1> 、6-甲氧基-7-羟基香豆素的H-3信号是A、B、C、D、E、<2> 、6-甲氧基-7-羟基香豆素的H-4信号是A、B、C、E、<3> 、6-甲氧基-7-羟基香豆素的甲氧基的质子信号是A、B、C、D、E、4、A.简单香豆素类B.黄酮类C.吡喃香豆素类D.二氢黄酮类E.其他香豆素类<1> 、伞形花内酯是A、B、C、D、E、<2> 、黄檀内酯是A、B、D、E、5、A.简单香豆素B.呋喃香豆素C.新木脂素D.黄酮苷E.简单木脂素<1> 、补骨脂中主要成分的类型是A、B、C、D、E、<2> 、秦皮中主要成分的类型是A、B、C、D、E、<3> 、银杏中主要成分的类型是A、C、D、E、三、多项选择题1、以下属于新木脂素的是A、厚朴酚B、和厚朴酚C、五味子醇D、连翘苷E、五味子素2、以下哪项符合简单香豆素的取代规律A、常见的取代基团有羟基、甲氧基、异戊烯基等B、异戊烯基常连在6、8位C、异戊烯基常连在5、7位D、7位绝大多数都有含氧基团存在E、5、6、8位可有含氧基团存在3、在1H-NMR谱中，香豆素母核环上的质子信号在较低场的有A、C-5B、C-6C、C-7D、C-3E、C-44、香豆素苷类化合物的提取分离可用A、重结晶法B、升华法C、碱溶酸沉法D、系统溶剂法E、色谱法5、含酚羟基的香豆素类化合物具有的性质或反应有A、荧光性质B、异羟肟酸铁反应C、Gibb反应D、Kedde反应E、Emerson反应6、香豆素遇强碱发生开环反应A、因为其结构中有内酯环B、一般开环后生成顺式邻羟基桂皮酸盐，加酸后又环合成原来的内酯C、长时间在碱中放置或用紫外光照射可转变为反式邻羟基桂皮酸盐，加酸后不能再环合D、长时间在碱中放置可转变为反式邻羟基桂皮酸，加酸后还可环合E、7位有甲氧基的香豆素遇碱较难开环7、7，8-二羟基香豆素类化合物可与A、异羟肟酸铁试剂的反应B、Gibbs试剂呈阳性反应C、Emerson试剂呈阳性反应D、碱试液反应，用于薄层检识E、稀盐酸反应8、测定香豆素化合物的1HNMR和13CNMR波谱以及质谱要解决的问题是A、氢质子的个数B、碳原子的个数C、熔点D、质子的偶合形式E、结构特征9、五味子素含有A、联苯结构B、环辛烯结构C、四氢呋喃环结构D、苯代四氢萘结构E、双骈四氢呋喃环结构10、以下关于木质素的说法正确的是A、木脂素多数不挥发B、游离木脂素偏亲脂性，难溶于水C、新木脂素大多为白色结晶D、木脂素大多与糖结合成苷而存在E、木脂素多数为无色或白色结晶答案部分一、最佳选择题1、【正确答案】 C【答案解析】具有共轭双键(如共轭苯环)的化合物，π-π共轭效应生成大π键，大π键各能级间的距离较近电子容易激发，所以吸收峰的波长就增加、且有很强的紫外吸收。

秦皮中香豆素实验报告心得简介香豆素是一种常见的天然化合物，广泛存在于植物中。

秦皮，即常见的代表性中药材柴胡的根皮，据研究表明含有香豆素。

本次实验旨在通过提取秦皮中的香豆素，并通过色谱法进行定性分析。

通过本次实验，我对香豆素的提取和分析方法有了更深的了解，也加深了我对实验操作的熟练度。

实验方法本次实验分为两个步骤：提取秦皮中的香豆素和色谱法分析。

首先是提取步骤。

我们先将秦皮样品研磨成粉末，然后用乙醇对其进行提取。

接下来是色谱法分析。

我们将提取得到的香豆素样品进行柱层析分离，然后通过紫外检测器检测样品的吸收峰。

结果与讨论通过本次实验，我们成功提取到了秦皮中的香豆素，并通过色谱法进行了定性分析。

在柱层析过程中，我们观察到了香豆素在柱层析时的吸收峰，并根据峰的位置和形状判断了我们提取到的物质的香豆素。

实验结果显示，秦皮中香豆素的含量相对较低，这可能是因为我们选择的样品中含量较少或者提取过程中存在一定的损失。

此外，我们也发现，在柱层析分析中，香豆素的吸收峰在特定波长下有良好的分离度，这为定性分析提供了可靠的依据。

通过本次实验，我深刻认识到了提取和分析过程中的一些关键因素对实验结果的影响。

例如，在提取过程中，选择合适的溶剂和提取时间对提取效果有重要作用。

在色谱法分析中，选择合适的柱和检测器以及优化流动相的组成可以有效提高分离和检测效果。

实验心得本次实验让我更加了解了香豆素的提取和分析方法。

通过亲身操作，我对实验过程中的注意事项和操作技巧有了更深入的了解。

我发现实验中的每一个步骤都至关重要，任何一个环节出现差错都会导致实验结果的不准确。

同时，通过本次实验，我也学到了很多技术操作上的细节。

例如，在制备工作液的过程中，要准确称量试剂和加溶剂时要注意量筒的容量线和滴定管的放置角度；在柱层析分析过程中，要注意样品的进样量和流动相的流速等。

这些小细节对于实验结果的准确性和重复性起着重要的作用。

此外，本次实验也锻炼了我的团队合作和沟通能力。

09级18班4组黄意来200940874香豆素类化合物药理和毒理作用的研究进展摘要：香豆素类化合物是自然界重要的一类天然有机化合物，存在于不同种属的植物中，具有广泛的用途。

实验研究发现香豆素具有抗HIV、抗肿瘤、抗氧化、抗炎等多种药理活性，在临床上广泛用于抗凝血和淋巴管性水肿的治疗。

近年来的研究发现，香豆素类化合物在啮齿类动物中存在着明显的毒性作用，且具有种属和位点特异性，这与其代谢途径和CYP2A6酶的多态性有关。

另外，毒性作用还与给药剂量和给药途径密切相关，口服和高剂量给药更容易产生毒性反应。

该文综述了近年来有关香豆素及其衍生物在药理和毒理方面的研究进展，以期为香豆素类化合物的研发和临床应用提供帮助。

关键词：香豆素；香豆素类化合物；药理活性；遗传毒性；肝脏毒性香豆素类化合物是广泛存在于自然界的一类芳香族化合物，分布于许多植物和香料中，包括芸香科、伞形科、菊科、豆科、瑞香科、茄科等高等植物，在动物及微生物代谢产物中也有存在，是一种重要的香味增强剂，广泛应用于香水、化妆品、去污剂等行业中。

根据环上取代基及其位置的不同，香豆素可分为简单香豆素、呋喃香豆素、吡喃香豆素和其他香豆素等。

研究表明，香豆素类化合物具有多种生物学活性如：抗艾滋病、抗癌、对心血管系统的影响、抗炎、抗凝血等，同时在高剂量应用时也存在一些毒性反应，具有种属和位点特异性，如遗传毒性，肝脏毒性等。

由于香豆素类化合物具有分子量小，合成简单，生物利用度高，药理作用广泛，毒性小等特点，近年来已经成为许多药物研发工作的研究重点。

为了进一步研究开发新的香豆素类化合物并指导其在临床上的应用，本文将对此类化合物的药理及毒理作用进行综述。

1 药理作用天然和合成的香豆素类化合物具有多种生物活性，其作为抗凝剂和抗血栓药已被人们所够抑制脂质过氧化，清除自由基，松弛血管，调节心血管功了解。

一些衍生物被报道具有光敏化，抗HIV，降脂、抗炎、抗肿瘤和抗氧化的作用，能能。

秦皮质量控制方法研究秦皮是木犀科植物苦枥白蜡树Fraxinus rhynchophylla Hance.、白蜡树Fraxinus Chinensis Roxb.、尖叶白蜡树Fraxinus szaboana Lingelsh.和宿柱白蜡树Fraxinus stylosa Lingelsh.的干燥枝皮或干皮，为临床常用中药。

《中国药典》记载其具有清热燥湿、收涩、明目的功能，用于治疗多种炎症、细菌性痢疾等疾病。

简单香豆素是秦皮中的一类主要活性成分，具有抗癌、抗炎、抗病毒等作用。

目前秦皮质量控制仅限于少数几种成分的含量测定，且对于其4种品种的区分及混淆品的鉴别多限于理化鉴定，难以对其进行全面质量控制。

本研究即采用液质联用技术（HPLC-MS/MS），对秦皮化学成分进行了定性鉴别和定量测定，并建立了其指纹图谱分析方法，为更科学有效控制秦皮质量提供参考。

第一部分液质联用技术联合响应曲面法优化提取条件同时定量秦皮及其混淆品中11种化学成分目的：采用响应曲面法（RSM）优化提取条件，建立HPLC-MS/MS方法同时测定秦皮中11种化学成分（秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮素、秦皮苷、莨菪亭、异莨菪亭、橄榄苦苷、毛柳苷、丁香苷、6-羟基-7,8-二甲氧基香豆素、8-羟基-6,7-二甲氧基香豆素），用于秦皮及其混淆品的质量控制。

方法：以样品量、甲醇浓度、提取时间3个因素为自变量，秦皮中11种化学成分的含量为因变量，采用BB设计（Box-Behnken design,BBD）设计3因素3水平共17个试验点的响应曲面分析实验，进行多元线性回归和二项式拟合，Derringer’s满意度函数综合11组实验数据，优化萃取提取条件，并进行预测分析。

采用多反应监测（MRM）正、负离子切换模式进行HPLC-MS/MS定量分析，将同一个分析周期分为3段，分别采用负-正-负离子切换模式检测，11种化学成分在16min内即可被HPLC-MS/MS全部检测。

HPLC法同时测定秦皮中四种成分含量的研究李晓尧;张丹;汤丽芝;史亚军;王昌利【摘要】目的：建立同时测定秦皮中秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮素、秦皮苷的HPLC法，为秦皮的质量评价提供定量方法基础。

方法：色谱柱：Betasil‐C18（250mm ×4．6mm ，5μm ，LOT ：13697），流动相：乙腈‐0．1％磷酸水溶液（13∶87），检测波长：334nm ，柱温：30℃，流速：1ml／min。

结果：秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮素、秦皮苷分别在0．3090～3．0900μg、0．1275～1．2750μg、0．0276～0．2760μg、0．0540～0．5400μg （ r＝0．999）呈线性关系。

结论：本法简单、快速，重现性好，准确度高，色谱峰分离度好。

%Objective:To establish a simultaneous determinationaesculin ,aesculetin ,fraxin ,fraxetin of HPLC method ,provide a quantitative method for quality evaluation of fraxini cortex .Methods:Chromatographic column :Beta‐sil‐C18 (250 mm × 4 .6 mm ,5μm ,the LOT :13697) ,mobile phase:acetonitrile‐0 .1% phosphoric acid aqueous solu‐tion(13∶87) ,detection wavelength:334 nm ,column temperature:30℃ ,the flow rate:1ml/min .Results:Aesculin , aesculetin ,fraxin ,fraxetin in0 .3090~3 .0900μg ,0 .1275~1 .2750μg ,0 .0276~0 .2760μg ,0 .0540~0 .540 0μg (r=0 . 999) have a good linear relationship .Conclusion:This method is simple ,rapid ,good reproducibility ,high accuracy , good chromatographic peak separation .【期刊名称】《陕西中医》【年(卷),期】2016(037)009【总页数】3页(P1238-1240)【关键词】色谱法,高压液相;秦皮【作者】李晓尧;张丹;汤丽芝;史亚军;王昌利【作者单位】陕西中医药大学药学院咸阳712046;陕西中医药大学药学院咸阳712046;陕西中医药大学药学院咸阳712046;陕西中医药大学药学院咸阳712046;陕西中医药大学药学院咸阳712046【正文语种】中文【中图分类】R681.5Objective:To establish a simultaneous determination aesculin , aesculetin, fraxin, fraxetin of HPLC method, provide a quantitative method for quality evaluation of fraxini cortex . Methods: Chromatographic column: Betasil - C18 (250 mm×4.6 mm, 5μm，the LOT: 13697), mobile phase: acetonitrile - 0.1% phosphoric acid aqueous solution (13∶87) , detection wavelength: 334 nm, column temperature:30℃, the flow rate: 1ml/min. Results: Aesculin, aesculetin , fraxin , fraxetin in 0.3090～3.0900μg, 0.1275～1.2750μg, 0.0276～0.2760μg, 0.0540～0.5400μg (r=0.999) have a good linear relationship. Conclusion: This method is simple, rapid, good reproducibility, high accuracy, good chromatographic peak separation.秦皮来源为木犀科植物苦枥白蜡树、白蜡树、尖叶白蜡树或宿柱白蜡树的干燥枝皮或干皮。