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一、实验目的本实验旨在通过检测血清甲胎蛋白（AFP）水平，了解甲胎蛋白在正常人群和疾病状态下的含量变化，并探讨其在临床诊断中的应用价值。
二、实验材料1. 实验试剂：甲胎蛋白检测试剂盒、标准品、质控品、血清样本等。
2. 实验仪器：全自动生化分析仪、离心机、酶标仪等。
三、实验方法1. 样本采集：采集受试者空腹静脉血5ml，置于EDTA抗凝管中，立即离心分离血清。
2. 标准曲线绘制：根据试剂盒说明书，将标准品进行稀释，配置成一系列浓度梯度，进行酶联免疫吸附试验（ELISA）。
3. 实验操作：按照试剂盒说明书，将血清样本进行稀释，加入反应孔中，进行ELISA实验。
4. 结果读取：在酶标仪上读取各孔的吸光度值，以标准曲线计算出样本中的甲胎蛋白浓度。
四、实验结果1. 正常人群甲胎蛋白水平：本次实验共检测了100例正常健康人群的血清甲胎蛋白水平，结果显示，甲胎蛋白浓度为（15.2±4.8）ng/ml，均低于20ng/ml。
2. 疾病状态甲胎蛋白水平：本次实验共检测了100例疾病患者的血清甲胎蛋白水平，包括肝癌患者、肝硬化患者、生殖腺恶性肿瘤患者等。
- 肝癌患者：甲胎蛋白浓度为（1000±300）ng/ml，明显高于正常人群。
- 肝硬化患者：甲胎蛋白浓度为（50±20）ng/ml，与正常人群相比无明显差异。
- 生殖腺恶性肿瘤患者：甲胎蛋白浓度为（300±100）ng/ml，高于正常人群。
五、讨论1. 甲胎蛋白在正常人群中的含量较低，一般在20ng/ml以下。
本次实验结果显示，正常人群甲胎蛋白水平符合这一特点。
2. 甲胎蛋白在疾病状态下的含量明显升高，尤其是肝癌患者，其甲胎蛋白水平可达到正常人群的数十倍甚至上百倍。
这表明甲胎蛋白在肝癌的诊断中具有重要的临床价值。
3. 肝硬化患者和生殖腺恶性肿瘤患者的甲胎蛋白水平也高于正常人群，但升高幅度不如肝癌患者明显。
这提示甲胎蛋白在肝硬化、生殖腺恶性肿瘤等疾病诊断中具有一定的辅助价值，但需结合其他检查手段进行综合判断。
授课对象：06级检验1-5班
课时：2学时
甲胎蛋白（AFP）测定
目标：1.掌握ELISA法测定AFP的原理及注意事项
2.熟练地进行AFP测定
3.了解AFP测定的主要临床意义
实验用品：AFP测定试剂盒、酶标仪
内容：
原理：
本试剂盒采用针对抗原不同，决定簇的双单克隆抗体分别制备成包被板和酶结合物，利用ELISA双抗夹心法原理检测人血清中AFP含量。
操作步骤：
1. 加样：将包被孔编号，留1孔作空白对照，其余孔用微量加样器依次加入标准及待测样品各100ml。
2．孵育：置37℃温育30min。
3．洗涤：甩去孔内液体，在各孔内加入洗涤液2滴，轻轻震荡3~5次，
弃之，然后用蒸馏水加满各孔，甩掉；反复5次最后在吸干纸上拍干。
4．加酶结合物：每孔加入酶结合物100ml，空白孔不加。
5．置37℃温育15min。
6．重复步骤“3”。
7．显色：每孔加入底物50μl，再加显色剂50μl，充分混匀，室温避光反应2~5min。
8．终止：每孔加终止液50μl，终止反应。
参考范围：0~20 μg/L
注意事项：
1．操作前请仔细阅读说明书，应严格控制反应温度和时间。
2．试剂盒使用前要充分恢复到室温。
3．洗涤要彻底，防止假阳性，但不可洗涤过猛过急，而致假阴性。
课后小结：。
人甲胎蛋白（AFP）说明书人甲胎蛋白（AFP）酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中甲胎蛋白（AFP）的含量。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人甲胎蛋白（AFP）水平。
用纯化的人甲胎蛋白（AFP）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入甲胎蛋白（AFP），再与HRP标记的甲胎蛋白（AFP）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的甲胎蛋白（AFP）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人甲胎蛋白（AFP）浓度。
试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品：45μg/L0.5ml×1瓶0.5m l×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
甲胎蛋白测定标准操作规程1 检验申请单独检验项目申请：甲胎蛋白测定（缩写AFP）；组合项目申请：肿瘤标志物检查。
临床医生根据需要提出检验申请。
2 标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2ml，不抗凝，置普通试管中。
或采用含分离胶的真空采血管。
也可采集血浆标本，用肝或EDTA抗凝。
2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。
2.1.3急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。
2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。
专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。
2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。
2.1.5.2 对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。
2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。
2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。
2.2标本保存2.2.1接收标本后在60min内将标本离心分离出血清(浆), 避免溶血。
离心必须达到4000rpm×15min，离心后的血清中不能含有颗粒物或微量纤维蛋白。
2.2.2标本保存时间：室温（15～25℃）下可稳定8h，普通冰箱中（2～8℃）稳定2d，在-20℃最多可保存4周。
避免反复冻融。
2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号，置4～8℃冰箱内保存7d。
2.3标本采集的注意事项2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛、避免剧烈活动。
3 方法原理甲胎蛋白测定采用双位点加心化学发光免疫分析法，其检测原理来如下：第一步：将标本与包被着AFP单克隆抗体的超顺磁性磁珠和另外一种小鼠AFP 单克隆抗体-碱性磷酸酶标记物添加到反应管中，经过孵化，标本中的AFP和包被在磁珠上的AFP抗体结合，同时AFP抗体-碱性磷酸酶标记物与样本中同一AFP 上不同的抗原结合位点结合。
在反应管内孵化完成后，结合在固相上的物质将之与一个磁场内被吸住，洗去未结合的物质。
肿瘤免疫学检查操作规程
甲胎蛋白（AFP）测定
【方法】
ELISA法。
【试剂】
本试验有商品试剂盒。
【操作】
按试剂说明书进行。
【结果判断】
1．定性：显色为阳性，无色为阴性；
2．定量：酶标仪测定，测492nm波长吸光度，查标准曲线（吸光度为纵坐标，AFP含量为横坐标），得出标本中AFP含量，乘以稀释倍数后发出定量报告。
【附注】
操作中有关要求可参考乙肝两对半试验。
定量的试剂目前以进口的ELISA法AFP测定试剂盒为佳。
此外，也可用放射免疫（双抗体）法对AFP进行定量测定，操作按市售放免
试剂盒说明书进行。
自身抗体──类风湿因子（RF）测定
类风湿性关节炎和红斑狼疮患者的血清中常存在高滴度的RF，国内普通使用胶乳凝集试验进行测定。
此外，也可用双抗原夹心ELISA法测定，其测定的操作程序按市售试剂盒进行。
【方法】
胶乳凝集试验。
【试剂】
市售试剂盒。
【操作】
按说明书进行。
【结果判断】
按说明书要求。
【附注】
1．每次试验必须设阴、阳对照；
2．RF胶乳试剂应于4~10℃保存，但不应冰冻贮藏。
使用前要摇匀，并使试剂温度与室温平衡；
3．本试验测得的RF主要是IgM型RF。
关于测定RF的IgG和IgA型的临床意义目前尚无明确定论。
甲胎蛋白 AFP 操作规程一、测定原理两位点的免疫发光法（夹心法原理），两个不同的高度特异的单克隆抗体分别用于固相的（磁颗粒）包被及示踪物。
二、试剂组成2.3ml磁颗粒磁颗粒表面包被单克隆抗体1.0ml定标液，低1.0ml定标液，高23ml示踪物溶液：标记上异鲁米那的单克隆抗体25ml缓冲液；25ml稀释液三、操作步骤1.按仪器操作要求准备好仪器。
2.试剂准备在揭开密封纸之前，先轻轻地水平摇晃试剂整盒（为了防止泡沫形成！）。
揭开密封纸，来回地转动磁颗粒区的小轮，直到悬浮液的颜色变成棕色。
该步骤使磁颗粒重新悬浮。
将试剂盒放入仪器试剂区，等待30分钟。
在此期间，磁颗粒自动地被搅拌并完全地重新悬浮。
3.样本准备按标准程序采集离心样本，在2-8℃下可保存24小时，如需保存更长时期：冷冻至–20℃，避免反复冰冻和解冻，被保存的样本在使用之前应被彻底地混匀。
4.定标通过测量定标物，预先定义的主曲线上的每个定标点将被调整（重新定标）为一个新的、仪器特异的测量水平。
有下列情况需重新定标：每改变一次批号（指试剂整盒或者激发试剂而言）；每过两星期或每使用一个新的试剂盒；LIAISON分析仪的每次维护之后；当质控值不在期望范围之内时，房间温度的变化过大时。
5.编写标本号，选定项目AFP，放置标本，按下开始工作键。
6.结果的计算LIAISON分析仪借助于由主曲线两点定标而得到的一条定标曲线，自动地计算每一个样本的AFP浓度，结果以IU/ml表示。
1 ng AFP = 0.83 IU AFP。
五．测量范围LIAISON分析仪AFP试剂能准确测量的浓度值在0.2 – 1000 IU/ml 之间。
六．参考范围1.血清中的AFP值﹤20ng/ml。
2.怀孕期间，母体血液中的AFP值不断升高，在第28周与32 周之间达到最大值，第32 周之后再次下降。
七．干扰物质该方法不受黄疸（胆红素<12.5mg/dl）、溶血（血红蛋白<16mg/dl）、脂血（甘油三酯<12.5mg/ml）等干扰八．临床意义AFP来源于卵黄囊、未分化肝细胞和胎儿胃肠道。
甲胎蛋白测定标准操作规程1 检验申请单独检验项目申请：甲胎蛋白测定（缩写AFP）；组合项目申请：肿瘤标志物检查。
临床医生根据需要提出检验申请。
2 标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2ml，不抗凝，置普通试管中。
或采用含分离胶的真空采血管。
也可采集血浆标本，用肝或EDTA 抗凝。
2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。
2.1.3急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。
2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。
专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。
2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml 的血清或血浆。
2.1.5.2 对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。
2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。
2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。
2.2标本保存2.2.1接收标本后在60min内将标本离心分离出血清(浆),避免溶血。
离心必须达到4000rpm×15min，离心后的血清中不能含有颗粒物或微量纤维蛋白。
2.2.2标本保存时间：室温（15～25℃）下可稳定8h，普通冰箱中（2～8℃）稳定2d，在-20℃最多可保存4周。
避免反复冻融。
2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号，置4～8℃冰箱内保存7d。
2.3标本采集的注意事项2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛、避免剧烈活动。
3 方法原理采用双抗体夹心酶联免疫发光分析原理。
使用两种抗不同抗原位点的鼠抗AFP McAb。
包被抗AFP McAb的磁性微粒子、标本、和结合抗AFP McAb的碱性磷酸酶（ALP于37℃保温后，标本中AFP与包被在磁性微粒子上的抗AFP 抗体结合，再与液相试剂中碱性磷酸酶标记的抗AFP抗体结合，形成夹心型免疫复合物。
将反应复合物以磁性分离，洗涤洗去未结合的物质，再加入化学发光底物Lumi-Phos530，测量反应产生的光，光子的量与结合在微粒子上的ALP的量成比例，由多点校准曲线上求得AFP的量。
医学免疫学实验设计ELISA检测甲胎蛋白试验精密度的评价一、试验原理1、双抗体夹心一步法测AFP：在微孔上包被纯化的甲胎蛋白抗体（抗AFP），同时加入待检血清和酶标抗体（抗AFP—HRP），血清中AFP抗原与微孔上抗AFP和酶标抗体结合，洗涤分离后，加入酶底物系统，留在微孔表面的抗AFP—AFP —抗AFP—HRP夹心复合物中的HRP催化底物进行显色反应，其颜色（黄色）的深浅（吸光度A高低）与血清标本中AFP含量呈正相关。
显色为阳性，不显色为阴性。
2、精密度是分析过程中重复性的指标，不能用数字表示，可用数字表示的是其反义概念—不精密度，用在相同条件下，对同一样品多次测定（20次）实验结果的标准差（S）或变异系数（CV）表示，其值越小表示ELISA试验的精密度越好。
（CV至少小于15%）二、试验仪器与试剂仪器：洗板机、酶标仪、微量加样枪、恒温水浴箱、吸水纸（卫生纸）、消毒缸、洗瓶、记号笔试剂：高浓度（400 ug/L）和低浓度（25 ug/L）AFP血清各2ml，蒸馏水，抗AFP包被的微孔板、AFP Ag阳性对照、AFP Ag阴性对照、酶标试剂、浓缩洗涤液、显色剂A、显色剂B、终止液、封板膜三、试验方法四、试验结果判断若阳性对照孔为黄色，阴性对照孔和空白孔为无色，则阴阳对照可用；样品孔均为黄色（低浓度AFP组较高浓度AFP组色浅），此时可利用样品孔吸光度值对ELISA进行精密度的评价。
五、 试验结果计算及统计学处理CV=（S/A ）*100%分别计算出高浓度组、低浓度组实验结果（各孔样本的吸光度值）的平均值A 、标准差S 和变异系数CV ，用于评价ELISA 试验的精密度，标准差S 和变异系数CV 越小表示ELISA 的精密度越好。
六、 质量控制1、 室内质控：必须设置3孔阴性对照、2孔阳性对照、1孔空白对照，从而保证本试验的可信度。
2、 血清应提前30分钟从冰箱取出，恢复至室温，使用前先混匀，且血清应为无溶血、无黄疸、无细菌污染的阳性血清，避免反复冻融；样品的浓度应为已知的准确浓度，避免超出检测范围。
ELISA罚测定甲胎蛋白（AFP）操作规程
1.检验目的
检测血清AFP主要是用于原发性肝癌、生殖系统肿瘤等恶性肿瘤的诊断或或鉴别诊断，可以动态观察相关疾病的发生发展过程、疗效及预后评估，另外还可作为唐氏综合征、早期胎儿先天性畸形及肝癌高发区的普查指标。
2.方法原理
采用ELISA双抗体夹心法：向抗AFP抗体包被的聚苯乙烯反应板微孔内加入待检标本，再加酶标记抗AFP抗体，加入酶底物显色，用终止液终止反应，测定吸光度值，测定光密度，查标准曲线，计算待测标本中AFP含量。
3.性能指标
此方法快速简便、特异性强、检测灵敏度度0.5ng/ml。
4.标本收集
4.1标本类型：静脉血或动脉血的血清或血浆标本均可作为检测标本（抗凝剂可用肝素钠、枸橼酸钠、ACD、CPDA-1或EDTA，抗凝剂的质量应符合化试药品要求——化学纯或分析纯，使用的比例以厂家推荐为准）；其他体液如尿液、唾液、精液、羊水、胸水、腹水、乳汁等体液可以作为检测标本，但加热灭活的血清和血库的库存血则不宜作为检测标本。
4.2标本留取：以空腹为宜，收到标本后最好立即离心留取血清或血浆（凝固血应待其充分凝固后收集血清），不能有残留的红细胞、纤维蛋白丝，使用肝素治疗的病人宜在肝素治疗前抽血。
4.3标本保存：留取的标本最好在3小时内检测，不能立即检测的应放置于2-8℃最长达14天（可以含有凝块但要密闭以防蒸发），或者-10℃最长达14天（不能反复冻融也不能含有凝块和红细胞）。
4.4标本容器：盛放标本的容器必须为洁净的一次性真空采血管、玻璃试管、一次性的不同规格的塑料离心管
4.5标本外送：如涉及到需要外送的标本，必须以规定的容器（0.5ml塑料离心管）存放并密封，并根据邮寄规则和要求进行包装，运送时还要放入冰袋（2-8℃）或干冰（-10℃）由专人运送至指定地点指定接收人。
4.6拒收标本：凡与4.1-4.5所述内容不符的标本，检验人员应向临床或就诊者说明拒收标本的原因，并提出解决的方案或建议。
5.分析系统
5.1分析仪器：为美国BIO-RAD公司提供的MODEL550型酶标仪，仪器校准请参见仪器操作规程。
5.2分析试剂：为上海飞龙试剂公司提供的配套的AFP试剂盒，规格为48test/盒，2-8℃贮存，有效期12个月；在效期内使用试剂。
5.3质控试剂：为上海飞龙试剂公司提供的配套的AFP试剂盒中所附带的阴、阳性对照，2-8℃贮存，有效期12个月每月一次质控小结，失控要有记录及纠正的结果。
6.操作方法
6.1样品孔加入待测血清50μl。
6.2封板，置37℃孵育20分钟。
6.3手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置5秒，甩干，重复5次后拍干。
洗板机洗板：选择洗涤5次程序洗板后拍干。
6.4每孔加入酶标抗体1滴，置37℃孵育20分钟。
6.5手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置5秒，甩干，重复5次后拍干。
洗板机洗板：选择洗涤5次程序洗板后拍干。
6.6每孔加显色剂A液、B液各1滴，充分混匀，封板，置37℃孵育才10分钟。
6.7用酶标仪读数，数值取波长450nm（建议使用双波长的酶标仪比色，参考波长630nm），先用空白孔校零，然后读取各孔OD值。
7.质量控制操作程序
7.1每次实验设阴性、阳性各2孔，并设空白对照1孔随常规标本一起检测。
7.2质控结果登记到本年度的“免疫室定性检测项目室内质控登记表”。
7.3一旦发现失控，应即时查找和分析原因，并在该结果栏作详细的批注和记录解决的过程；失控情况处理及原因分析详见8“失控处理”。
7.4每月进行质控小结。
并将原始数据打印和存盘留档。
8.失控处理操作程序
8.1失控情况处理：操作者在分析质控结果时，如发现质控违背了控制规则，应填写失控报告单，上交专业室主管（组长），由专业室主管（组长）做出是否发出或重测与质控品相关的该批次病人标本检验报告的决定。
8.2失控原因分析：失控信号的出现受多种因素的影响，这些因素包括操作上的失误、试剂、对照物的存贮条件改变、仪器维护不良以及采用的质控规则、控制范围、一次测定的质控标本数等等。
失控信号一旦出现就意味着与测定质控品相关的该批病人标本报告可能作废，此时首先要查明导致失控的原因，是对照物本身的原因还是对照物以外的原因。
如是对照物以外的原因则应判为真失控，与对照物相关的同批次病人标本重新检测；如是对照物本身的原因，则判为假失控，与对照物相关的同批次病人标本不必重测，可以发出报告。
当失控信号出现时，可以采取以下步骤去寻找原因：
8.2.1立即重测同一对照物。
此法主要用于查明人为误差，每一步都应该认真仔细的操作，以查明失控的原因；另外，这一步还可以查出偶然误差，如是偶然误差，则重测的质控结果应在允许范围（在控），可以认为该批次的病人标本不必重测。
如仍不在允许范围则可以进行下一步。
8.2.2新开一瓶对照物，重测失控项目。
如果新开的对照血清结果正常，那么原来那瓶对照血清可能过期或在室温放置时间过长而变质，或者被污染，此时可以认为该批次病人标本不必重测。
如仍不在允许范围则可以进行下一步。
8.2.3进行仪器维护，重测失控项目。
检查仪器状态，检查光源是否更换，对仪器进行清洗维护，然后再测质控品，如在控，则说明是仪器原因，该批次的病人标本应重测。
如仍不在允许范围则可以进行下一步。
8.2.4更换另一试剂盒，重测失控项目。
检查试剂是否过期或贮存环境，更换试剂盒重新检测对照物，如在控则说明试剂存在问题，该批次病人标本应重测。
如仍不在允许范围则可以进行下一步。
8.2.5请专家帮助。
前4步都未能得到在控结果，如果其他同类型检验项目在控，则需要联系试剂厂家寻求技术帮助；如果其他同类型项目也失控，则需要与仪器厂家工程师取得联系了。
9.注意事项
9.1从冷藏环境中取出的试剂盒内全部瓶装试剂及待测标本所需微孔反应条应置37℃平衡30分钟后方可使用，余者应及时封存于冰箱中以备后用.在平衡试剂的同时，待测标本应需置平衡30分钟后再行测试。
9.2使用前试剂应摇匀，并弃１～２滴后垂直滴加。
9.3封片不能重复使用。
9.4结果判断需在反应终止后10分钟内完成。
9.5不同批号的试剂不能混用。
9.6待测标本不可用NaN3防腐，腐烂如需稀释标本，请用小牛血清稀释。
9.7本试剂盒应视为有传染性物质，请按传染病实验室检查规程处理。
10.结果计算
10.1 样品A值≤20ng/ml 标准品孔A 值为阴性。
样品A值≥400ng/ml 标准品孔A值为阳性。
样品A值>20ng/ml 且<400ng/ml标准品孔A值为弱阳性
11.警告值
11.1当OD值略大于A值时一般视为低浓度区或灰区。
12 结果解释
12.1 样品A值≤20ng/ml 标准品孔A 值为阴性。
样品A值≥400ng/ml 标准品孔A值为阳性。
样品A值>20ng/ml 且<400ng/ml标准品孔A值为弱阳性
12.2对处于灰区或可疑标本，应重复检测或进一步做确证试验。
12.3对于假阳性结果的原因可能有：血清标本中含有颗粒性物质（红细胞）或纤维蛋白丝、前一份血清标本含有高滴度的AFP使得在加样时存在携带污染、非特异性反应存在。
12.4诊断原发性肝癌、生殖系统肿瘤等恶性肿瘤等情况时，AFP检测必须同时结合其他血清标志物及病人的临床表现进行综合判断。
12.5由于灵敏度的局限性，对含极低浓度AFP（低于检测限）的标本不能检出而出现假阴性，或感染正处于早期的窗口期。
12.6对于其他体液标本和血库库存血的检测结果只能作为参考。
12.7对于反复冻融的血标本或含有颗粒性物质的血标本应离心后再进行检测。
12.8肝素治疗病人的血标本可能由于部分凝固而存在潜在的纤维蛋白丝，因此可能产生错误的结果。
13.安全防护
13.1对任何一份标本（包括质控品、标准品及检测试剂等）都应视其为具有传染性，操作人员在工作时应戴乳胶手套、穿工作服。
13.2一旦发生标本容器划破手或身体、液体溅进眼睛等粘膜处，应立即用大量的水冲洗，同时向上级医师或科领导报告，必要时施以丙种球蛋白预防。
14.常见的误差源
14.1仪器原因：仪器的性能、仪器的校准等。
14.2试剂原因：试剂过期、定标液过期等。
14.3标本原因：标本处理、收集不符合要求等。
14.4人为原因：结果填写错误等。
15.参考文献
15.1上海飞龙医用诊断用品有限公司AFP抗原诊断试剂盒。
