几株酱油米曲霉的分离和RAPD分析
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三种酱油发酵曲霉酶活力的比较谭永水;郭琳;刘新利;侯丽华【摘要】Koji making is very important for soy sauce brewing,which affects the quality of soy sauce.In this paper,the enzyme activities of Aspergillus oryzae A,Aspergillus oryzae 3.042,Aspergillus oryzae A100-8 at different koji-making time of soy sauce fermentation are studied.They are acid protease,amylase,saccharifying enzyme,cellulase,pectinase,leucine aminopeptidase,glutamine enzyme and bined with the change of enzyme activity,hydrolysis degree and later brewing pour oil,42 h is determined for ripe koji of three kinds of Aspergillus oryzae.It is found that the enzyme activity of Aspergillus oryzae A100-8 is the best when the koji is collected.%制曲对酱油酿造至关重要,影响着酱油的品质.因此,本研究对酱油制曲过程中的米曲霉A、米曲霉沪酿3.042、米曲霉A100-8 3种曲霉在不同时间的酶活力进行了研究,包括酸性蛋白酶、淀粉酶、糖化酶、纤维素酶、果胶酶、亮氨酸氨肽酶、谷氨酰胺酶、植酸酶.结合酶活力的变化趋势、原料水解度以及酿造后期淋油的综合情况,最终确定在制曲42 h对3株曲霉所制备的大曲进行收曲,比较发现米曲霉A100-8在收曲时,各种酶活表现最佳.【期刊名称】《中国调味品》【年(卷),期】2017(042)011【总页数】5页(P24-28)【关键词】酱油制曲;米曲霉A;米曲霉A100-8;米曲霉3.042;酶活【作者】谭永水;郭琳;刘新利;侯丽华【作者单位】齐鲁工业大学生物工程学院,济南250353;天津科技大学新农村发展研究院,天津300457;齐鲁工业大学生物工程学院,济南250353;天津科技大学新农村发展研究院,天津300457【正文语种】中文【中图分类】TS264.21制曲直接影响酱油酿造的原料利用及品质形成,这一过程由可分泌多种酶系的曲霉主导完成。
传统酒曲中根霉和酵母菌株的分离鉴定及产品研究郑国斌;周立学;覃先武;姚鸿【摘要】Traditional distiller’s yeast contains a large amount of Rhizopus and varieties of other microbes. Rice wine made by traditional distill-er’s yeast has mellow taste and moderate sweetness. However, the quality of microbial species in traditional distiller’s yeast is not stable and uniform. Accordingly, in this study, we made isolation and identification of traditional quality distiller’s yeast and obtained a quality Rhizopus strain R4 and a yeast strain Y7 suitable for mixed growth, then R4 and Y7 were used for starter-making through mixed culture, which could achieve the quality of traditional distiller’s yeast and make the production more simple and scientific.%传统酒曲中除大量根霉外,其他的微生物种类繁多,生产的米酒清香醇厚,甜度适中。
但菌种质量不稳定,不均匀。
为此,研究将优质的传统酒曲进行分离鉴定,从中找到1株优良米根霉R4,1株能混合生长的酿酒酵母Y7,混合培养制曲,达到传统酒曲的品质,使生产更简单更科学。
摘要蛋白酶是活细胞产生的生物催化剂,应用十分广泛;米曲霉具有丰富的蛋白酶系,是美国食品与药物管理局和美国饲料公司协会公布的安全微生物菌株之一,也是国内酱油等发酵食品生产的主要菌株。
因此,提高米曲霉的蛋白酶活力对于发展轻工业、提高产品质量有重要意义。
本论文利用米曲霉沪酿3.042为出发菌株,通过紫外诱变筛选出一株中性蛋白酶活力较高的菌株,命名为米曲霉UV-16。
该菌株的遗传稳定性较好,并将出发菌株的中性蛋白酶活力由1996.5 U·g-1提高到2368.0 U·g-1,蛋白酶活力提高了18.6%。
实验对米曲霉UV-16的酶系进行了研究,发现该突变株其他酶系基本没发生改变。
实验研究了基质组分和发酵条件对米曲霉UV-16产中性蛋白酶的影响,通过单因素实验,我们确定了麸皮为碳源,豆粕为氮源,豆粕添加量20%,KNO3添加量0.8%,MgSO4添加量0.07%,Na2HPO4添加量0.14%,每10g培养基接种1×108个孢子,温度28℃,加水量为原料量的85%,发酵时间70h,pH自然,并且发现FeSO4对产酶有抑制作用。
经过单因素实验,蛋白酶活提高到2707.8U·g-1,酶活力在诱变的基础上提高了14.3%。
单因素实验后,对加水量、培养温度、培养时间、豆粕添加量、KNO3、MgSO4利用响应面分析法精确找出最优条件。
通过PB实验,确定了培养时间和豆粕添加量为主要影响因素;通过最陡爬坡实验,找到了响应面实验的中心点;再通过中心组合实验,确定了最佳的培养条件:培养基加水量为87%,豆粕添加量23.37%,KNO3添加量0.7%,MgSO4添加量为0.08%,Na2HPO4添加量0.14%,每10g培养基接种1×108个孢子,培养温度为29℃,培养时间67h。
米曲霉UV-16产中性蛋白酶的能力达到2824.9U·g-1,蛋白酶活力再次提高4.3%。
酱油生产过程中微生物种类和数量变化一、酱油的生产工艺及定义1、定义:酱油是以富含蛋白质的豆类和富含淀粉的谷类及其产品为主要原料,在微生物酶的催化作用下分解熟成,并经浸滤提取的调味汁液。
2、酱油的制造工艺2.2酱油的分类按工艺分类:高盐稀态发酵酱油低盐固态发酵酱油按使用范围分类:老抽酱油生抽酱油2.3 酱油的基本加工工艺黄豆、麦仁→分别浸泡→分别蒸煮→出锅→降温→接种→分别入曲罐→保温→分别制曲→翻曲→通风培养→成曲→混合入曲→加入盐水→保温发酵→淋浇→浸出→配兑→灭菌→灌装→成品→入库酱油酿造过程,是培养米曲霉在原料上生长繁殖的过程。
也可以说酱油是曲霉、酵母及细菌等微生物综合发酵的结果,如酱油酿造中的制曲和发酵这两个主要工序就是繁殖和利用微生物的过程。
在发酵期间所发生的一系列变化是很复杂的,概括起来说酱油酿造与微生物学和生物化学有着非常密切的关系。
二、酱油生产过程中的微生物酱醅发酵靠曲霉、酵母及细菌的联合行动,在发酵过程中它们随发酵期的不同而减少或增多。
由曲子带到酱醅中的酶及菌类,往往受食盐浓度及环境的影响。
如好气而不耐高盐度的小球菌很快会死灭,枯草杆菌也不能繁殖,而只有芽孢留存着。
与此相反的是耐盐性乳酸菌最初迅速繁殖,接着又下降,嗜盐足球菌及鲁氏酵母在酱醅中也会繁殖并发生变化。
参与酱油酿造的微生物主要有曲霉、酵母菌和乳酸菌,经过他们的一系列生化作用,共同完成酱油的发酵过程。
菌种优劣取决酱油的色、香、味以及原料利用率的重要因素。
曲霉:主要有米曲霉、黑曲霉、甘薯曲霉米曲霉的生长温度:最适温度32℃~ 35 ℃,低于28 ℃或高于40 ℃生长缓慢,42 ℃以上停止生长。
酵母:酱醪(láo)中盐含量高,能在酱醪中生长的酱油酵母为耐盐性酵母。
酵母菌与酱油的香味和气味形成有直接关系。
一般有鲁氏酵母,假丝酵母,易变球拟酵母,汉逊酵母乳酸菌:酱油中的乳酸菌是能在酱醪中生长、参与酱油成熟、可将糖类转化为乳酸菌的耐盐性细菌。
米曲霉(Aspergillus oryzae)沪酿3.042内切型纤维素酶的分离纯化与鉴定武金霞;常淑英;孙鹏;张永阔;张贺迎【摘要】The crude enzyme solution from Aspergillus oryzae Huniang 3. 042 mature Koji was extrac ted for the purpose of revealing the roles of cellulases in the process of material decomposing, and the ac tivity of exocellulase , endocellulase and β-glucosidase was analyzed by DNS method . Four Cx enzymes were identified by Congo red staining, called as Cx enzyme Ⅰ , Cx enzyme Ⅱ , Cx enzyme Ⅲ and Cx en zyme Ⅳ respectively in this article. DEAE-Cellulose-52 ion exchange chromatography was used to primari ly separate endocellulases in the crude enzyme solution, it was found that the elution peak of 0. 15 , 0. 20 , 0. 25, 0. 30 mol/L NaCl contained the active components. Then, four purified Cx enzymes were obtained by preparative electrophoresis. First three Cx enzymes were monomeric enzyme and their molecular mass were 31 800,34 000, 26 000 u respectively determined by SDS-PAGE, the last one contained four subunits ,and their molecular mass were 14 000,23 600,26 000,33 500 u respectivly. The optimal temperature of en docellulases in the crude enzyme solution was 50 ℃,and the optimal pH was 4. 0.%为了解米曲霉纤维素酶在物料分解过程中的作用,从米曲霉沪酿3.042成曲中提取粗酶液,利用DNS法分析了粗酶液中外切酶、内切酶及β-葡萄糖苷酶的活力.用刚果红染色法确定了沪酿3.042成曲粗酶液中含有4种内切型纤维素酶,分别称为Cx酶Ⅰ,Cx酶Ⅱ,Cx酶Ⅲ和Cx酶Ⅳ.经DEAE-Cellulose-52离子交换层析,0.15,0.20,0.25,0.30 mol/L NaCl洗脱峰均测得内切型纤维素酶活性,制备电泳纯化得到4个内切型纤维素酶组分,SDS-PAGE结果显示,Cx酶Ⅰ,Cx酶Ⅱ,Cx酶Ⅲ为单体酶,分子质量分别为31 800,34 000,26 000 u,Cx酶jV含有4个亚基,分子质量分别为14 000,23 600,26 000,33 500 u.粗酶液中内切型纤维素酶的最适反应温度为50℃,最适反应pH值为4.0.【期刊名称】《河北大学学报(自然科学版)》【年(卷),期】2012(032)001【总页数】7页(P68-74)【关键词】米曲霉;内切型纤维素酶;刚果红染色;离子交换层析;制备电泳【作者】武金霞;常淑英;孙鹏;张永阔;张贺迎【作者单位】河北大学生命科学学院,河北保定071002;河北大学生命科学学院,河北保定071002;河北大学生命科学学院,河北保定071002;河北大学生命科学学院,河北保定071002;河北大学生物技术研究中心,河北保定071002【正文语种】中文【中图分类】Q814.1;Q556.2米曲霉是一种丝状真菌,因其生长过程中能够产生丰富的水解酶系,被广泛应用于食品、饲料、酿酒等行业[1].米曲霉沪酿3.042是应用于国内酱油酿造行业的主要菌株之一,其生长环境粗放,适应性强,生产纤维素酶产量高,稳定性好,而且其产生的纤维素酶是胞外酶,发酵完成后,纤维素酶容易与菌体分离纯化得到所需的酶.纤维素酶(cellulase)是分解纤维素的一类酶, 包括内切葡聚糖酶(endo-1,4-β-D-glucanase EC 3.2.1.4)、外切葡聚糖酶(exo-1,4-β-D-glucanase,EC3.2.1.91)和β-葡萄糖苷酶(β-1,4-glucosidase,EC3.2.1.21)[2-3],这些酶组分协同作用将纤维素分解为葡萄糖.在酿造过程中纤维素酶可以分解物料细胞壁,增加细胞内含物的溶出,有利于蛋白酶充分作用于大豆蛋白,从而提高原料的利用率和氨基酸态氮生成率[4].有报道酱油生产中添加纤维素酶或提高菌株的纤维素酶活力,有利于提高酱油质量和出油率[5].本实验室曾初步以刚果红染色法检测出米曲霉3.042含有2种内切型纤维素酶组分[6],本研究拟进一步鉴定并纯化米曲霉沪酿3.042菌株的内切型纤维素酶组分,研究其酶学性质,为进一步了解纤维素酶在酿造过程中的具体作用,以及与其他酶的协同机制提供理论基础.1.1 材料1.1.1 菌种米曲霉(Aspergillus oryzae)沪酿3.042(本实验室保藏).1.1.2 培养基m(豆粕)∶m(麸皮)∶m(水)=6∶4∶10.1.1.3 主要实验仪器HWS型智能恒温恒湿箱(宁波东南仪器有限公司),SH-5磁力搅拌器(BeiDe),GL 20A高速冷冻离心机(中国湘西仪器厂),数显恒温水浴锅(金坛市医疗仪器厂),BG-Power 600电泳仪(BAYGENE), 721型分光光度计(上海第三分析仪器厂).1.2 方法1.2.1 米曲霉纤维素酶粗酶液的制备称取5 g成曲,充分研磨后加20 mL 0.05 mol/L Tris-HCl缓冲液(pH 7.2),磁力搅拌15 min,4 ℃ ,10 000 r/min离心15 min,上清液即为粗酶液,分装后放置于-20 ℃冰箱备用.1.2.2 葡萄糖标准曲线制作采用DNS法[7]制作葡萄糖标准曲线.1.2.3 粗酶液纤维素酶的酶活测定1.2.3.1 内切型纤维素酶活力测定将粗酶液稀释10倍,取3支刻度试管,分别加入0.1 mL稀释酶液,再分别吸取1.9 mL 10 g/L的羧甲基纤维素钠(CMC)(pH 5.0,0.05 mol/L Na2HPO4-柠檬酸缓冲液配制)溶液,50 ℃水浴保温30 min;空白样用煮沸灭活的稀释酶液 0.1 mL 代替样品,同样50 ℃水浴保温30 min.再吸取DNS试剂2 mL,充分摇匀后具塞,沸水浴反应10 min,冷却至室温后用去离子水定容至15 mL,上下摇匀,用空白调零点,于550 nm 下测定OD值.根据标准曲线求出对应葡萄糖产量,计算出粗酶液中内切型纤维素酶活力(U/mL).每小时由底物生成1 μmol葡萄糖所需的酶量定义为1个酶活力单位(U).计算公式:A:OD值在标准曲线上对应的葡萄糖量(mg);D:酶液的稀释倍数;t:反应时间(min).1.2.3.2 外切型纤维素酶活力测定采用DNS法,以脱脂棉为底物[8].1.2.3.3 β-葡萄糖苷酶活力测定采用DNS法,以水杨素为底物[9].1.2.4 蛋白质含量测定采用Folin-酚法[10]测定蛋白质含量,以标准酪蛋白溶液做标准曲线.1.2.5 PAGE检测粗酶液中蛋白质组成浓缩胶质量浓度为45 g/L,分离胶质量浓度为100 g/L,浓缩胶电压120 V,分离胶电压150 V,室温电泳结束后考马斯亮蓝染色15 min,用体积分数为7.0%的冰乙酸脱色至条带清晰.1.2.6 CMC-PAGE检测粗酶液中内切型纤维素酶组分参照文献[6]稍做改进.配制质量浓度为100 g/L的PAGE分离胶,加入1 g/LCMC溶液(pH 5.0 Na2HPO4-柠檬酸缓冲液配制)0.4 mL,再配制质量浓度为45 g/L的浓缩胶,用不同浓度粗酶液点样,浓缩胶120 V,分离胶150 V,4 ℃低温电泳.电泳结束后,将胶切成2部分,一部分考马斯亮蓝染色,另一部分置于50 ℃预热的0.1 g/L刚果红染色液(用0.05 mol/L pH 5.0的Na2HPO4-柠檬酸缓冲液配制)中,50 ℃恒温水浴3 h后移至1 mol/L NaCl脱色液中,常温脱色至条带清晰.1.2.7 DEAE-Cellulose-52离子交换层析初步分离内切型纤维素酶将DEAE-Cellulose-52离子交换柱用pH 7.2,0.01 mol/L Tris-HCl缓冲液充分平衡后,取10 mL粗酶液上样,然后以NaCl浓度依次为0.10,0.15,0.20,0.25,0.30,0.35,0.40,0.60 mol/L的pH 7.2,0.01 mol/L Tris-HCl缓冲液进行分步洗脱(3.5 mL/min).收集各洗脱峰,将各洗脱峰透析、浓缩后以天然-PAGE电泳检测蛋白组分[11].1.2.8 制备电泳分离纯化内切型纤维素酶组分参照刚果红染色图谱切胶,95 W,30 V,25 mA进行回收电泳[12].将所得的酶组分进行酶活力和分子质量测定.酶活力测定过程中,将回收的纯酶冻干浓缩成酶粉后加入100 μL蒸馏水溶解,作为稀释酶液,空白样加入蒸馏水,其余操作同1.2.3.1.1.2.9 粗酶液中内切型纤维素酶最适反应温度和最适反应pH值的测定配制含有10 g/L CMC的0.05 mol/L,pH 5.0的Na2HPO4-柠檬酸缓冲液,测定20~80 ℃内切型纤维素酶的最适反应温度;配制含有10 g/L CMC的0.05 mol/L,pH 3.0~8.0的Na2HPO4-柠檬酸缓冲液,测定50 ℃时内切型纤维素酶的最适反应pH值[8].2.1 米曲霉3.042纤维素酶分泌曲线图1显示,制曲时间为35 h时内切型纤维素酶酶活最高,此时粗酶液蛋白质质量浓度为19.26 mg/mL,纤维素酶系中不同酶组分的酶活力如表1.2.2 刚果红染色法鉴定内切型纤维素酶组分配制PAGE分离胶时加入内切型纤维素酶的底物CMC,使其均匀分布在胶内,电泳结束后经过水浴,如果样品液中含有内切型纤维素酶则会将CMC长链的纤维素分子降解为纤维寡糖, 刚果红能将长链的纤维素分子染成红色,却不能将纤维寡糖染色,因此水浴后的凝胶经刚果红染色后未着色的透明区域即为内切型纤维素酶的位置.由图2 a和图2 b可知,分离胶内添加一定质量的CMC,会造成各个蛋白条带的相对迁移率都减小,但各个条带的相对位置不变.由图2 c 可知,米曲霉沪酿3.042成曲浸提液含有4个内切型纤维素酶组分,分别称为Cx酶Ⅰ,Cx酶Ⅱ,Cx酶Ⅲ 和Cx酶Ⅳ,从透明区带的范围初步认为Cx酶Ⅱ,Cx酶Ⅲ具有较高的活力,而Cx酶Ⅰ和Cx酶Ⅳ活力较低.2.3 DEAE-Cellulose-52离子交换层析用DEAE-Cellulose-52离子交换层析初步分离米曲霉粗酶液,280 nm下核酸蛋白检测仪测得不同NaCl浓度的pH 7.2,0.01 mol/L的 Tris-HCl缓冲液各洗脱下一个蛋白峰(图 3).经DNS法测定酶活和天然-PAGE电泳检测可知,0.15,0.20,0.25和0.30 mol/L NaCl洗脱下的蛋白峰含有内切型纤维素酶组分(图4 ).其中0.15 mol/L NaCl的洗脱峰含有Cx酶Ⅲ,虽然杂蛋白较多,但迁移率与Cx酶Ⅲ相差较大.0.2 mol/L NaCl浓度下的洗脱峰含有Cx酶Ⅰ,但杂蛋白含量较多.0.25 mol/L NaCl 洗脱峰含有Cx酶Ⅰ,Cx酶Ⅱ,Cx酶Ⅳ3个目标组分,且杂蛋白较少.0.3 mol/L NaCl洗脱峰含有Cx酶Ⅳ,杂蛋白也相对较少.米曲霉粗酶液中蛋白质组分较多,由于一些蛋白质的荷电性质及分子质量相近,导致多条目标条带和其他杂蛋白混杂在一起,仅采用离子交换层析不能有效地将单个纤维素酶组分纯化.因此分别将上述不同NaCl浓度洗脱液冻干浓缩,以制备电泳切胶回收4个内切型纤维素酶组分.2.4 制备电泳分离纯化内切型纤维素酶组分及分子质量测定图5 a和图5 b显示制备电泳纯化的Cx酶Ⅰ,Cx酶Ⅱ,Cx酶Ⅲ 和Cx酶Ⅳ4个组分,DNS法测定其酶活分别为61.77,6.11,44.93,72.03 U/mL,因此可以确定纯化到的酶组分为目标组分,后经SDS-PAGE 电泳测得Cx酶Ⅰ,Cx酶Ⅱ,Cx酶Ⅲ的分子质量分别是31 800,34 000 u(图5 c)和26 000 u(图5 d);Cx酶Ⅳ含有4个亚基,分子质量分别为14 000,23 600,26 000,33 500 u(图5 d).2.5 粗酶液中内切型纤维素酶的最适反应温度和最适反应pH值米曲霉(A.oryzae)沪酿3.042成曲粗酶液中内切型纤维素酶的最适反应温度为50 ℃(图6),最适反应pH值为4.0(图 7).米曲霉固体发酵产纤维素酶的最佳收获期是35 h,其纤维素酶系中包含有外切型和内切型纤维素酶以及β-葡萄糖苷酶.经离子交换层析、制备电泳纯化到4个内切型纤维素酶组分.SDS-PAGE结果表明,Cx酶Ⅰ,Cx酶Ⅱ,Cx酶Ⅲ为单体酶,Cx酶Ⅳ为多亚基酶,这种现象可能与不同种类内切纤维素酶的分子组成有关:纤维素酶的各组分大多是糖蛋白,含糖的比例各不相同;糖和蛋白质之间的结合方式也不同,有的是通过共价键连接,有的是可解离的复合物[13-14].在酱醅发酵中,纤维素酶能起到崩溃豆饼、小麦、麸皮中的纤维素及将其分解成糖的作用,我国酱油酿造中多采用低盐固态发酵工艺,发酵温度较高(一般控制在40~45 ℃),酱醅pH值较低,米曲霉产纤维素酶的最适温度和pH值分别为50 ℃和4.0,这一特性与酱醅发酵条件一致.因此,在酱油制备过程中米曲霉纤维素酶能发挥其最大作用,提高物料的利用率.【相关文献】[1] LIANG Yanchang, 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酒曲中根霉的分离酒粬,一般写作酒曲。
在经过强烈蒸煮的白米中,移入曲霉的分生孢子,然后保温,米粒上便会茂盛地生长出菌丝,此即酒曲。
曲霉产生的淀粉酶会糖化米里面的淀粉,因此,自古以来就有把它和麦芽同时作为原料糖,用来制造酒、甜酒和豆酱等。
用麦类代替米者称麦曲。
传统小曲的生产流程:陈酒药水米粉辣蓼草末→拌料→打实→切块→滚角→接种→入缸保温培养→入匾培养,换匾,并匾→装箩,出箩→晒干。
传统小曲生产流程传统的麦曲,完全采用天然接种微生物的方式。
小曲的接种在宋代以前,也不例外。
但在<<北山酒经>>中则记载了一种人工接种的方式,即:“团成饼子,以旧曲末逐个为衣”。
也就是说把新制成的曲团在陈曲粉末上滚动一下,陈曲末便粘在新曲团的表面,陈曲末中有大量的根霉孢子,可以在曲团上迅速繁殖,形成生长优势。
由于可以人为地选择质量较好的陈曲作为曲种,这就可以择优汰劣。
通过年复一年的人工选育,自然淘汰,质量优越的曲种(实际上是微生物菌种)就保留下来了。
而天然接种的酒曲,酒曲中微生物的来源主要是水源,原料本身所带入,或者制曲场所及用具。
性能优良的菌种无法代代相传,酒质也就无法恒定。
小曲中的微生物主要是根霉,据有关科技工作者分离鉴定,在分离到的828株毛霉科的霉菌中,其中根霉占643株。
根霉不仅具有糖化作用,还具有酒化酶,故具有酒化作用。
小曲中还有许多其它微生物,现代工业微生物从中得到不少有益的菌种,继续为人类做出贡献。
大曲的发展元代以来,蒸馏烧酒开始普及,很大一部分麦曲用于烧酒的酿造。
因而传统的麦曲中分化出一种大曲,虽然在原料上与黄酒用曲基本相同,但在制法上有一定的特点。
到了近现代,大曲与黄酒所用的麦曲便成为两种不同类型的酒曲。
明清时期,河南,淮安一带成了中国大曲的主要生产基地。
大曲是从麦曲中分化出来的,故在古代酒的文献资料中大曲的概念并不明确。
一般指曲的形体较大的麦曲。
这里所说的大曲,是指专门用于蒸馏酒酿造所用的麦曲。
酱油生产中高产蛋白酶菌株米曲霉UF366发酵条件的研究傅力;章运;艾乃吐拉;赵艳雪;钱启龙;雷鸣【期刊名称】《食品科学》【年(卷),期】2008(029)009【摘要】对高产蛋白酶菌株UF366米曲霉的种子培养基、制曲培养基以及发酵条件进行研究.结果表明:最适的种子培养基为麸皮、面粉和水,其比例为4∶1∶4,产生的孢子数最多,达到了167亿个/g;最适的制曲培养基为豆粕、麸皮、水,其比例为6∶4∶5;最佳发酵条件为培养温度33℃、培养时间32h、翻曲2次、接种量4‰,蛋白酶活力达到了1084U/g.【总页数】4页(P427-430)【作者】傅力;章运;艾乃吐拉;赵艳雪;钱启龙;雷鸣【作者单位】新疆农业大学食品科学学院,新疆,乌鲁木齐,830052;新疆维吾尔自治区食品药品监督管理局,新疆,乌鲁木齐,830002;新疆农业大学食品科学学院,新疆,乌鲁木齐,830052;新疆农业大学食品科学学院,新疆,乌鲁木齐,830052;新疆农业大学食品科学学院,新疆,乌鲁木齐,830052;新疆七一酱园酿造食品有限责任公司,新疆,乌鲁木齐,830063【正文语种】中文【中图分类】TS264.2【相关文献】1.保靖酱油高产蛋白酶米曲霉菌种选育及产酶条件研究 [J], 黄伟;麻成金;黄群;王敬敬;逯与运2.米曲霉高产蛋白酶菌株的选育及在酱油酿造中的应用研究 [J], 傅力;章运;涂振东;叶凯3.米曲霉固体发酵生产中性蛋白酶产酶条件研究 [J], 苏龙;陈显玲;李家洲4.一株高产蛋白酶的米曲霉在酱油酿造中的发酵性能对比研究 [J], 黄艳;王静;高庭;童星5.高产蛋白酶米曲霉菌株的选育及对酱油风味生成的影响 [J], 樊嘉训;刘松;陆信曜;陈坚因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
茅台酒酒曲中5株真菌的分离、纯化、鉴定初报
刘洪伟
【期刊名称】《酿酒》
【年(卷),期】2009(036)006
【摘要】实验对责州茅台酒酒曲中5株真茵(茵种编号为R1、R2、R3、R4,R5)进行了分离、纯化培养,旨在为贵州茅台酒酒曲的微生物组成进行深入研究提供基础实验依据.通过观察茵落形态与个体形态,参照Klich M A、Raper K B和张纪忠的方法对5株真菌进行了·鉴定.鉴定结果表明:霉菌茵株R1为米曲霉(Aspergillus Oryzae),R2为红色红曲(Monascus),R3黑曲霉(AspergiUus Niger),R4为炭黑曲霉(Aspergillus carbonadus),R5为米根霉(Rhizopus Oryzae).
【总页数】3页(P35-37)
【作者】刘洪伟
【作者单位】四川农业大学食品学院,四川,雅安,625014
【正文语种】中文
【中图分类】TS262.33;TS261.1
【相关文献】
1.泰国甜酒曲中优势真菌的分离鉴定初报 [J], 曾令琴;葛毅强;周传云;廖兴华
2.茅台酒大曲中3株耐高温霉菌的分离纯化及鉴定 [J], 武晋海;于亮;王昌禄;陈勉华;张民;周贤;张爱琳;郭坤亮;季克良
3.茅台酒酒曲中5株真菌的分离、纯化、鉴定初报 [J], 刘洪伟;邬应龙
4.陕北传统米酒曲中优势菌种的分离、纯化及鉴定 [J], 郝莹;王卫卫;王莉娟;官小
明;董静;孙军
5.云南牛干巴(腊牛肉)中真菌的分离与鉴定初报 [J], 肖蓉;徐昆龙
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酱香大曲中3株放线菌的分离筛选及挥发性成分分析罗小叶;王晓丹;邱树毅【期刊名称】《中国酿造》【年(卷),期】2018(037)008【摘要】为探究酱香大曲中放线菌的种类及功能,建立了一种有效的放线菌分离筛选方法,并通过此方法在28℃培养条件下,从茅台大曲中分离出了3株放线菌,对其进行形态学特征、生理生化实验及分子生物学鉴定,并对菌株的产酶、产香特性进行了研究.结果表明,FBKL4.001、FBKL4.002鉴定为可可链霉菌(Streptomyces cacaoi)、FBKL4.003鉴定为沙阿霉素链霉菌(Streptomyces zaomyceticus),3株菌产果胶酶能力较为突出,分别为299.66 U/g、216.52U/g、294.86 U/g,其固态发酵挥发性成分以酯类物质为主,分别占62.80%、59.23%、46.77%,且均能产生吡嗪类物质.【总页数】6页(P62-67)【作者】罗小叶;王晓丹;邱树毅【作者单位】贵州大学酿酒与食品工程学院,贵州贵阳550025;贵州大学贵州省发酵工程与生物制药重点实验室,贵州贵阳550025;贵州大学酿酒与食品工程学院,贵州贵阳550025;贵州大学贵州省发酵工程与生物制药重点实验室,贵州贵阳550025;贵州大学酿酒与食品工程学院,贵州贵阳550025;贵州大学贵州省发酵工程与生物制药重点实验室,贵州贵阳550025【正文语种】中文【中图分类】TS261.1【相关文献】1.酱香型大曲中高温放线菌的筛选及风味成分分析 [J], 李豆南;黄魏;王晓丹;罗小叶;邱树毅2.酱香型大曲中具产酶功能霉菌的分离筛选 [J], 班世栋;王晓丹;陈孟强;胡宝东;陆安谋;梁芳;邱树毅3.酱香型郎酒高温大曲、酒酷和窖泥中细菌群落结构分析 [J], 沈毅; 陈波; 王西; 甘浪飞; 张亚东4.酱香型大曲中挥发性成分与微生物代谢关系 [J], 张小龙;邱树毅;王晓丹;何宗杰;李玉德;曾超;班世栋5.茅台镇不同主酿区域酱香型白酒酿造大曲中细菌菌群结构分析 [J], 任爱容;黄永光因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。