实验三 茎尖培养技术 2017
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2.1.2 植物细胞工程的实际应用1.简述微型繁殖技术。
(重点)2.理解掌握利用植物组织培养的技术培养脱毒苗和人工种子。
(重、难点) 3.理解植物组织培养技术在细胞产物的工厂化生产领域的应用。
(重点)植物繁殖的新途径1.微型繁殖(1)概念:快速繁殖优良品种的植物组织培养技术。
(2)特点⎩⎪⎨⎪⎧①无性繁殖,保持优良品种的遗传特性②高效快速地实现种苗的大量繁殖③可实现工厂化生产2.作物脱毒(1)选材部位:植物的分生区附近。
(2)选材原因:分生区附近的病毒极少,甚至无病毒。
(3)实例:目前采用茎尖组织培养技术来脱除病毒,在马铃薯、草莓、甘蔗、菠萝、香蕉等主要经济作物上已获得成功。
3.人工种子(1)概念:以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料,经过人工薄膜包装得到的种子。
(2)特点①后代无性状分离。
②不受季节、气候和地域限制。
(3)实例:我国已成功地把芹菜、花椰菜、桉树和水稻的胚状体制备成了人工种子。
[合作探讨]探讨1:植物组织培养可以进行快速繁殖的原因是什么?提示:植物组织培养到愈伤组织的阶段,细胞进行有丝分裂,细胞分裂速度较快,从而获得大量的组织细胞,然后不断地分割、移瓶、诱导再分化形成新植株。
植物组织培养在实验室进行,受季节、气候等条件限制较小。
探讨2:作物培养过程中为什么要进行作物脱毒,如何进行作物脱毒?提示:对于无性繁殖的作物,病毒在作物体内逐年积累,就会导致作物产量降低、品质变差。
而植物分生区附近的病毒极少,甚至无病毒,因此切取一定大小的茎尖进行组织培养,再生的植物就有可能不带病毒,从而获得脱毒苗。
探讨3:根据种子发育所需的营养物质,分析人工种皮内应含有哪些有效成分?提示:适宜的养分、无机盐、有机碳源以及农药、抗生素、有益菌等。
[思维升华]1.微型繁殖(1)本质:微型繁殖实际上是一种无性繁殖,能保持亲本的一切优良性状,这项技术只运用了植物组织培养技术,因此该过程只涉及有丝分裂,不涉及减数分裂。
外植体茎尖组培实验报告最近我们老师在给我们讲外植体茎尖组培实验报告,今天学习了如何做外植体茎尖组培。
首先要准备好材料,还有工具。
现在就开始吧!第一步:处理组织培养用的材料(1)人工培养的材料是利用常规栽培的幼苗进行的培养称为组织培养。
(2)脱毒后的材料用无病毒或菌系少而优良的材料作外植体材料,能使大量不定芽增殖。
此类培养多采用小块培养,这样可以获得大量不定芽和愈伤组织,供生产应用。
外植体是离体的完整的植物器官,它直接吸收营养而成长繁殖;本发明的一个目的是提供含丰富碳源的茎尖材料和促进萌发的培养条件,为重新培育成完整的植株奠定基础。
利用茎尖培养基进行诱导,是一种快速培养植物细胞、组织、器官的技术手段,也是快速繁殖大量试管苗的技术手段之一。
其方法简单易行,又容易成功,所需培养基为化学试剂,因此它既适宜于繁殖无性系,又适合于繁殖有性系。
利用该技术可以迅速地从多倍体植物体内获取纯系培养物,克服杂交育种难以繁殖纯系品种的缺点,同时,还为筛选农作物品种,解决动、植物的濒危保护等提供了一条崭新的途径。
茎尖形态学研究表明,当高度分化成熟后茎尖的细胞已经全部脱分化成熟,并且没有其他的增殖潜力。
因此在一般情况下,把多个花药连同多个花粉粒置于分散状态的胚珠内,并不会促进花粉的正常发育与受精。
但如果将这些花药或花粉粒经过培养以后,通过培养基将原来分散的细胞集中起来,则有可能促进胚珠内的细胞团(胚囊)向球形成长,甚至达到100倍的体积。
这就意味着由这些“胚珠”长成“胚乳”或者说“子房”——试管苗。
根据植物激素的测定结果,结合花药、花粉粒细胞团大小差异比较小,不易产生嵌合现象等特点,可以推论:“胚珠”细胞团大小相差很大,呈嵌合体结构,那么在某种程度上说,也存在着类似的“胚乳”的存在。
茎尖培养脱毒的原理茎尖培养是将植物茎尖作为外植体在无菌条件下进行培养的技术。
这种技术可以用于脱毒、繁殖、遗传改良等方面。
在进行茎尖培养时,需要采用无菌的培养基,包括营养盐和植物生长因子,以支持植物的生长和分化。
虽然茎尖培养可以提高植物繁殖率,促进遗传改良,但植物在自然环境中存在各种病毒和微生物的感染,如果不加以处理,这些感染会对植物生长产生不良影响。
因此,为了保证繁殖的品质和数量,需要进行脱毒处理。
茎尖培养脱毒的原理是通过对植物进行体细胞培养和细胞选择,帮助植物去除体内的病毒和微生物。
茎尖培养可以分为四个步骤:外植物质的选择、外植物的消毒、外植物体的消化和茎尖的培养。
第一步是外植体的选择。
首先需要选择健康的植物组织作为外植体进行培养,最好是从没有感染过病毒和微生物的植株中选取。
要选择完整、无损伤、新生的芽或茎尖,以保证外植体的健康和完整性。
第二步是外植体的消毒。
在消毒前需要将外植体剪成适当大小并于无菌实验室中进行操作。
将外植体浸泡于含有消毒剂的溶液中,如70%酒精、0.1%汞溴素、0.1%过氧化氢等,在消毒前也需要去除外植体的表层污垢。
消毒的目的是避免残留的病毒和微生物在培养培养过程中再次感染植株,从而保证培养过程的无菌。
第三步是外植体的消化。
在消毒后,外植体的细胞壁依然存在,需要进行消化,使得细胞易于分离和重新生长。
可采用不同的消化酶,如植物生长调节剂,酶解作用可以促进外植体的细胞分离。
这种操作可以改变细胞壁的结构,使得外植体的细胞容易分离和重新生长。
消化过程中要慎重,避免过度消化。
第四步是茎尖的培养。
在消化完成后,取出外植体中的营养组织或茎尖,置于培养基上进行培养和分化。
在培养的过程中要注意维护培养基的无菌和营养条件,以支持茎尖生长和分化。
茎尖要发生新的细胞分化,从而产生更多的细胞,从而最终保证植株生长健康。
总之,茎尖培养脱毒是一种重要的技术。
它可以将健康的植物组织进行体细胞培养和细胞选择,清除体内的病毒和微生物。
第1篇一、实验目的1. 掌握茎段培养的方法和技术,理解茎段培养形成幼苗的基本原理。
2. 学习并操作茎尖剥离的技巧,认识茎尖生长点的形态特征。
3. 了解不同植物激素对茎段生长的影响。
二、实验材料与仪器1. 材料:某植物幼嫩茎段、茎尖、愈伤组织诱导培养基、再生培养基、植物激素(生长素、赤霉素等)。
2. 仪器:无菌操作台、剪刀、镊子、解剖针、显微镜、培养箱、天平、酒精灯、高压灭菌锅等。
三、实验方法1. 茎段培养(1)选取健康的某植物幼嫩茎段,剪成约1-2cm长的切段。
(2)将切段放入75%酒精中消毒30秒,再用无菌水冲洗3次。
(3)将切段接种到愈伤组织诱导培养基中,置于培养箱中培养。
(4)观察并记录愈伤组织的形成和生长情况。
2. 茎尖剥离(1)选取健康的某植物茎尖,用解剖针剥离出茎尖生长点。
(2)将茎尖生长点放入75%酒精中消毒30秒,再用无菌水冲洗3次。
(3)将茎尖生长点接种到再生培养基中,置于培养箱中培养。
(4)观察并记录茎尖生长点的生长情况。
3. 植物激素对茎段生长的影响(1)将茎段接种到含有不同浓度生长素和赤霉素的培养基中。
(2)置于培养箱中培养,观察并记录茎段生长情况。
四、实验结果与分析1. 茎段培养结果经过一段时间的培养,愈伤组织诱导培养基中的切段逐渐形成愈伤组织,并逐渐生长。
2. 茎尖剥离结果经过一段时间的培养,再生培养基中的茎尖生长点逐渐生长,形成新的植株。
3. 植物激素对茎段生长的影响(1)生长素对茎段生长的影响:低浓度生长素能促进茎段生长,高浓度生长素则抑制茎段生长。
(2)赤霉素对茎段生长的影响:赤霉素能促进茎段生长,其促进作用随浓度增加而增强。
五、实验结论1. 通过茎段培养实验,掌握了茎段培养的方法和技术,理解了茎段培养形成幼苗的基本原理。
2. 通过茎尖剥离实验,学习了茎尖剥离的技巧,认识了茎尖生长点的形态特征。
3. 通过植物激素对茎段生长的影响实验,了解了生长素和赤霉素对茎段生长的促进作用及其浓度依赖性。
实验名称:茎尖培养实验课程名称:植物组织培养学学院:生命科学学院专业班级:植物科学专业姓名:[你的姓名]小组成员:[小组成员姓名]日期:[实验日期]指导老师:[指导老师姓名]一、实验目的1. 掌握植物组织培养技术的基本原理和方法。
2. 熟悉无菌操作技术,提高实验操作技能。
3. 观察茎尖在培养基上的生长和分化过程,了解植物细胞全能性及再生机制。
4. 分析影响茎尖培养的因素,为植物繁殖和育种提供理论依据。
二、实验原理1. 植物组织培养技术:通过在无菌条件下,将植物器官、组织或细胞等在人工培养基上进行培养,使其再生出完整植株的过程。
2. 茎尖培养:利用茎尖细胞的全能性,将其接种到含有植物激素的培养基上,诱导其分化成完整植株。
3. 植物激素:植物激素在植物生长和发育过程中起着重要作用,如生长素、细胞分裂素等。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜植物茎尖、无菌水、70%酒精、无菌滤纸、无菌手术刀、镊子、培养皿、培养箱、显微镜等。
2. 试剂:MS培养基、生长素、细胞分裂素、琼脂、葡萄糖等。
四、实验步骤1. 材料准备:选取新鲜植物茎尖,用70%酒精消毒后,用无菌滤纸吸干水分。
2. 茎尖接种:将消毒后的茎尖用无菌手术刀切成约0.5cm长的小段,接种到含有生长素和细胞分裂素的MS培养基中。
3. 培养条件:将接种后的培养基放入培养箱中,保持温度25℃、光照12小时/天。
4. 观察记录:定期观察茎尖的生长和分化情况,记录生长速度、叶片颜色、根系发育等。
5. 数据分析:对实验数据进行统计分析,分析不同处理对茎尖培养的影响。
五、实验结果与分析1. 茎尖生长:接种后3-5天,茎尖开始生长,出现明显的芽点;接种后7-10天,芽点逐渐增多,茎尖高度达到1-2cm。
2. 茎尖分化:接种后10-15天,茎尖分化出叶片,叶片颜色逐渐变绿;接种后20-25天,茎尖分化出根系,根系发达。
3. 影响因素分析:生长素和细胞分裂素浓度对茎尖培养有显著影响。