娄底市第三人民医院检验科
操作文件 文件编号:JZ-CZ-12
生效日期:2012年6月01日
责任部门:急诊化验室 第 1 页 共 2 页
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编写：伍海波 制定日期：2011.01.01
审核：周可成
核准：伍海波 修订日期：2012.06.01
1. 项目名称：
尿红细胞形态检查
2. 测定原理：
3. 标本要求：
a.晨尿
b.标本必须新鲜无污染
4．试剂：
5．仪器和材料：
显微镜、相差显微镜、计数板、玻片、盖玻片、吸管、试管、离心机
6．标准和质控：
7．操作程序：
7.1 相差显微镜法 去新鲜尿10ml，置刻度离心管（最好是塑料离心管）中，1500r/min
离心5min，去上清留0.2ml，充分混匀，将混匀的尿沉渣滴入血细胞计数板内，用光学显微镜计数红细胞，当红细胞数>8000个/ml时，再涂片用相差显微镜观察红细胞形态，或染色用油镜观察200个红细胞形态，并计算正常红细胞和各种变形红细胞的百分率。
7.2高倍镜法
a.新鲜血尿：报告肉眼血尿、血色深浅及有关性状。
b.尿常规检验：pH、蛋白、糖、以及沉渣有无管型、白细胞、其他细胞成分。
c.结合临床体征、症状综合判断。
d.高倍镜不染色镜检观察红细胞形态，效果优于相差显微镜。
e.取新鲜尿沉渣20 ul，置载玻片上，盖18mm*mm盖玻片，充满而不外溢，镜下无流动细胞。
f.计算出正常红细胞、变形红细胞百分率，写出完整的报告。
7.3 结果判定
a.均一性 尿中红细胞外型均一，直径7~8um，血红蛋白含量正常，微黄色，其形态与血液中红细胞相似，有时可见少数棘形和影形红细胞，整个涂片中不存在两种以上的红细胞类型，也不伴有红细胞管型。
第二章 红细胞检查
一、红细胞计数
1、检测原理：①手工显微镜法：用等渗稀释液将血液稀释一定倍数，充入血细胞计数池，在显微镜下计数一定体积的红细胞数，经换算求出每升血液中红细胞数量。②血液分析仪法：用电阻抗和(或)光散射原理。
2、参考值：成年男性(4-5.5)×1012/L；成年女性(3.5-5.0)×1012/L；新生儿(6.0-7.0)×1012/L。
3、医学决定水平：高于6.8×1012/L，应采取治疗措施；低于参考值低限，为诊断贫血界限，应寻找病因；低于1.5×1012/L应考虑输血。
4、临床意义：⑴生理性变化：①年龄与性别的差异：新生儿由于出生前处于生理性缺氧状态，故红细胞明显增高；②精神因素：可使肾上腺素增多，导致红细胞暂时增多；③剧烈体力运动和劳动：由于需氧量增加，是红细胞生成素增加，骨髓加速释放红细胞，导致红细胞增多；④气压减低：高山地区居民和登山运动员因缺氧，红细胞代偿性增生，数量增高；⑤妊娠中后期：孕妇血浆容量明显增加使血液稀释，导致红细胞减少。⑵红细胞和血红蛋白量减少，见于临床上各种原因的贫血。按病因将贫血分成①急、慢性红细胞丢失过多：各种原因出血；②红细胞寿命缩短：各种原因溶血；③造血原料不足④骨髓造血功能减退。⑶红细胞增多①绝对红细胞增多：a原发性红细胞增多，如真性红细胞增
多症，良性家族性红细胞增多症等；b继发性红细胞增多，如房室间隔缺损、法洛四联症等各种先天性心血管疾病，各种引起肺气体交换面积减少的疾病，异常血红蛋白病，肾上腺皮质功能亢进(库欣病)等；②相对性红细胞增多：如呕吐、严重腹泻、多汗、多尿、大面积烧伤、晚期消化道肿瘤长期不能进食等。
5、操作方法：①改良牛鲍计数板(血细胞计数板)每块计数板由H形凹槽分为2个同样的计数池，计数池两侧各有一条支持柱，将专用盖玻片覆盖其上，形成高0.10mm的计数池。计数池内划有长、宽各3.0mm的方格，分成9个大格，每个大格面积为1.0mm2，容积为0.1mm3(μl)。中央大方格用双线分成25个中方格，位于正中及四角的5个中方格是红细胞和血小板计数区域，每个中方格用单线分为16个小方格。四角的4个大方格是白细胞计数区域，用单线划分为16个中方格。②盖玻片：规格24mm×20mm×0.6mm。③计数操作：a准备计数板；b加稀释液2ml；c加血：10μl；d充池；e静置3-5min；f计数：先用低倍镜观察血细胞分布是否均匀，否则要重新充池，然后用高倍镜计数中央大方格内4角和正中5个中方格内的红细胞数；g计算：红细胞/L=N×25/5×10×106×200=N×1012=N/100×1012
异常红细胞检查
摘要】 各型贫血，红细胞的形态和着色可有不同程度的改变，观察外周血红细胞的形态和着色，有助于贫血的诊断和鉴别诊断。外周血无核红细胞变化有以下几种类型：
【关键词】 红细胞 异常 检查
大小异常
正常红细胞大小较为一致，直径6～9μm。凡直径<6μm者称小红细胞；>10μm者称大红细胞；>15μm者称巨红细胞。在缺铁性贫血时，小红细胞多见；在急性溶血性贫血时，大红细胞常见，同时也可出现巨红细胞。在缺乏维生素B12及叶酸所致的巨幼细胞性贫血和肝脏疾病时，常见巨红细胞。
形态异常
球形红细胞
细胞中心区血红蛋白比正常细胞多，通常直径<6μm，厚度>2．6μm。红细胞直径缩短呈小球形状，常见于遗传性球形红细胞增多症、自身免疫性溶血性贫血、异常血红蛋白病(Hbs及Hbc)等。
椭圆形红细胞
红细胞呈椭圆形，长径增大，横径缩短，甚至呈长柱状，两端钝圆，这是由于红细胞膜蛋白有某种缺陷所致。正常人血液中也可见到椭圆形红细胞，但最多不超过15％。椭圆形红细胞增多见于遗传性椭圆形红细胞增多症，一般要超过25％～50％才有诊断价值；大红细胞性贫血可达25％；其他各种贫血均可有不同程度的增多。
靶形红细胞
大小正常或稍大，比正常红细胞扁薄，中心部着色较深，外周为乏色素性苍白区，在近细胞边缘处着色又较深，形如射击之靶。常见于地中海贫血、严重缺铁性贫血、某些血红蛋白病(血红蛋白C、D、E、S病)、阻塞性黄疸、肝病、脾切除后等。
镰形红细胞
细胞两端尖锐，狭长似镰刀，亦可呈麦粒状或冬青叶样，主要见于遗传性镰形红细胞增多症及Hbs病(Hbs病主要见于黑色人种)。
口形红细胞
红细胞淡染区呈裂口状狭孔犹如鱼口，正常人<4％，增多见于遗传性口形细胞增多症、急性乙醇中毒、弥散性血管内凝血(DlC)等。
教 案（首页）课 程
名 称 实验诊断学 总计： 32 学时
课 程
类 别 公共基础课 学分 2 讲课： 16 学时
实验： 16 学时
上机： 学时 任 课
教 师 职称
授课对 象
基要本参教考材资和料主 基 本 教 材：诊断学（人卫出版社，第八版）
主要参考资料：临床检验基础（人卫版，第四版）
临床血液学与检验（人卫版，第四版）
临床生物化学与检验（人卫版，第四版）
教和学要目求的 掌握临床各类标本检测指标的正常值及临床意义；
掌握各类血细胞的形态学特点；
熟悉各类标本检测方法及原理；
熟悉各类标本采集方法及注意事项。
教学难点重 点 重点：
1. 血液学，分泌物及体液检查指标及参考值范围；
2. 血液学，分泌物及体液检查结果异常的临床意义；
3. 各类血细胞的形态学特点。
难点：
1. 各类血细胞的形态学特点；
2. 凝血系统（APTT、PT、TT等）指标检测参考值及临床意义。
注：课程类别：公共基础课、专业基础课、专业必修课、专业选修课、集中实践环节、实验课、公共选修课
实验诊断学 课程教案
课次 第1次课
授课方式
（请打√） 理论课□√ 讨论课□ 实验课□ 习题课□ 其他□ 课时
安排 2课时
授课题目（教学章、节或主题）：
第一章概论/第二章第一节血液一般检查：红细胞检查
教学目的、要求（分掌握、熟悉、了解三个层次）：
1、掌握红细胞计数， 血红蛋白测定的正常参考值及临床意义。
2、 熟悉贫血的形态学分类、血细胞比容、红细胞平均值、红细胞分布宽度(RDW)的正常参考值及临床意义
3、了解网织红细胞计数及血沉测定，掌握正常参考值和临床意义。
教学重点及难点：
1. 重点：
（1）红细胞计数，血红蛋白的正常参考值和临床意义。
（2）血细胞比容测定的方法，正常参考值和临床意义。
