RRLC测定发酵液中达托霉素的含量

响应面法优化达托霉素发酵培养基何美儒;金志华;胡升;张丽靖【期刊名称】《化工进展》【年(卷),期】2012(031)004【摘要】采用响应面法对玫瑰孢链霉菌发酵产达托霉素的培养基进行了优化。

首先通过Placket-Burman设计法筛选出影响达托霉素产量的4个重要因素：初始pH值、葡萄糖、L-天冬氨酸（L-Asp）、硫酸钾。

其中初始pH值的影响极为显著（p〈0.01）,因此,对初始pH值进行了单因素试验,得到最优初始pH值为8.6。

在此基础上对其余3个因素用最陡爬坡路径逼近最大响应区域后,利用响应面中心组合设计对显著因素进行优化,得到最适培养基组成为：葡萄糖13.0 g/L、L-Asp 2.6 g/L、硫酸钾4.1 g/L。

在此优化条件下,达托霉素产量达373.98 mg/L,与预测值（365.76 mg/L）非常接近,比优化前产量提高了2.25倍。

%The fermentation medium of daptomycin,produced by Streptomyces roseosporus,was optimized by response surface methodology.It was found that initial pH,glucose,L-Asp and K2SO4 affected the daptomycin production significantly in Plackett–Burman experiment,but the affection of initial pH was predominant（p0.01）.The initial pH was optimized by one-factor-at-a-time experiment and the optimal pH obtained was 8.6.Then through the steepest ascent method and central composite design（CCD）,the optimal fementation medium obtained were：13.0 g/L glucose,2.6 g/L L-Asp and 4.1 g/L K2SO4,and the daptomycin production reached 373.98 mg/L,whichwas in agreement with predicted value（365.76 mg/L）and 2.25 folds higher than that under the initial culture conditions.【总页数】6页(P873-877,937)【作者】何美儒;金志华;胡升;张丽靖【作者单位】浙江大学化学工程与生物工程系,浙江杭州310027／浙江大学宁波理工学院,浙江宁波315100;浙江大学化学工程与生物工程系,浙江杭州310027／浙江大学宁波理工学院,浙江宁波315100;浙江大学宁波理工学院,浙江宁波315100;浙江大学宁波理工学院,浙江宁波315100【正文语种】中文【中图分类】TQ927【相关文献】1.玫瑰孢链霉菌NRRL11379产达托霉素前体物A21978C的发酵培养基优化 [J], 余继叁;洪葵;林海鹏;袁干军2.用均匀设计优化达托霉素发酵培养基 [J], 刘省伟;赵德3.达托霉素发酵培养基配方及30L罐工艺优化 [J], 王秀琴;钱思宇;贾啸静;娄忻;仲伟潭;时蕾4.响应面法优化达托霉素发酵培养基的研究 [J], 宇光海;尹艳丽;张垚5.达托霉素发酵培养基的响应面法优化 [J], 祝宇松;陈国胜;吴旻;缪小亮;徐健;王旻因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

高效液相色谱法检测产绿链霉菌发酵液中肥拉霉素A的含量王旭东;赵静国【摘要】建立了产绿链霉菌发酵液中肥拉霉素A含量的测定方法.以丙酮为溶剂,经摇床振荡(200 r·min-1)提取1 h后,样品经处理后用丙酮-磷酸盐缓冲溶液(体积比7:3)重溶进行液相色谱检测.色谱条件:乙腈-0.2%(g·mL-1)磷酸二氢铵溶液(pH值3.0,50:50)为流动相,流速为1 mL·min-1,检测波长为214 nm.肥拉霉素A浓度在10～80 μg·mL-1范围内与峰面积线性关系良好,加样平均回收率为100.14%,RSD 为0.41%.HPLC法简便有效,重复性好,可作为产绿链霉菌发酵液中肥拉霉素A含量的检测方法.【期刊名称】《化学与生物工程》【年(卷),期】2009(026)011【总页数】3页(P88-90)【关键词】肥拉霉素;HPLC;发酵【作者】王旭东;赵静国【作者单位】武汉工业学院生物与制药工程学院,湖北,武汉,430023;武汉工业学院生物与制药工程学院,湖北,武汉,430023【正文语种】中文【中图分类】O657.72肥拉霉素(Avilamycin)又称卑霉素,是由绿色产色链霉菌(Streptomyce sp. Tü57)发酵产生的一种正糖霉素族寡糖类抗生素[1](Orthosomycin,又译作奥尔托索霉素)。

主要应用于农业饲料添加剂中，可显著提高猪、肉鸡等动物日平均增重和饲料报酬率，市场前景广阔，现已在欧美、南美、东亚等地区销售使用，我国农业部于2005年批准进口使用[2]。

目前国内肥拉霉素的育种研究刚刚起步，大多集中于菌种选育阶段，关于发酵液中肥拉霉素含量的检测多采用生物检测法，此法比较费时、准确度不高。

虽然能够直观地反映肥拉霉素实际抗菌活性,但由于放线菌往往同时产生几种抗生素，所测得的效价并不完全代表目标抗生素的效价。

用生物测定法进行菌种选育，所筛选到的菌株也不一定就是需要的目标菌株。

摘要目的：研究妥布霉素滴眼液的含量测定方法，比较各种方法的优点。

方法：(一)建立高效液相色谱-蒸发光散射检测器检测法(HPLC-ELSD)测定妥布霉素滴眼液的含量。

（二）采用双波长紫外分光光度法测定妥布霉素的含量。

（三）以邻苯二甲醛(PHT)为显色剂的比色法测定妥布霉素滴眼剂的含量。

（四）比较三种方法。

结果：HPLC-ELSD方法专属性强，准确可靠，适用于妥布霉素滴眼液产品质量控制。

双波长紫外分光光度法准确简便，重现性好，可用于制剂的质量控制。

比色法具有快速、简便、准确、重现性好等优点，适合于产品中间体的质量控制和医院制剂的快速分析。

关键词妥布霉素含量测定HPLC-ELSD 含量测定比色法ABSTRACTObjective: Research the content determination of tobramycin eye drops and compare the methods.Methods:(1) To establish an HPLC - ELSD method for the content determination of tobramycin eye drops.(2)To establish the double wavelength ultravioletspectrophotometry method for the content determination of tobramycin eye drops.(3)To establish the colorimetric method use PHT as the chromogenic reagent for the content determination of tobramycin eye drops.(4) Compare various methods.Results: The HPLC-ELSD is simple accurate and reliable. It is suitable for the routine quality control of tobramycin eye drops preparations.The double wavelength ultravioletspectrophotometry method is simple, accurate, reliable, reproducible, and could be used for the routine quality control of the preparation.The colorimetric method is rapid, simple, accurate, reproducible, rapid analysis and quality control of the preparation and the hospital are suitable for intermediateKey words tobramycin content determination HPLC –ELSD content determination colorimetric method目录第1章文献综述 (1)1.1妥布霉素的发现以及应用 (1)1.2妥布霉素含量测定方法以及优缺点 (2)1.3本课题研究的内容及意义 (2)第2章高效液相色谱-蒸发光散射检测器检测法 (3)2.1仪器与试药 (3)2.1.1原料与仪器 (3)2.1.2色谱条件 (3)2.2实验方法 (4)2.2.1强力破坏试验 (4)2.2.2系统适应性试验 (4)2.2.3线性关系试验 (5)2.2.4灵敏度试验 (6)2.2.5稳定性试验 (6)2.2.6回收率试验 (6)2.2.7重复性试验 (6)2.2.8样品测定 (6)2.3结果与对比 (8)第3章双波长紫外分光光度法 (9)3.1仪器与试药 (9)3.1.1原料与仪器 (9)3.1.2处方 (9)3.2试验方法 (9)3.2.1测定波长的选择 (9)3.2.2线性关系及标准曲线的绘制 (9)3.2.3回收率试验 (10)3.2.4含量测定 (10)3.3试验结果 (10)第4章比色法 (11)4.1仪器与试药 (11)4.2实验方法与结果 (11)4.2.1邻苯二甲醛(PHT)试液的配制[18] (11)4.2.2妥布霉素衍生物吸收光谱 (11)4.2.3妥布霉素衍生物稳定性 (11)4.2.4重现性 (11)4.2.5标准曲线的绘制 (12)4.2.6样品含量测定 (12)4.2.7回收率试验 (12)4.2.8比色法与微生物法的比较 (13)4.3试验结果 (14)第5章结论 (15)5.1准确性 (15)5.2通用性 (15)参考文献 (16)致谢 (18)第1章文献综述妥布霉素属氨基糖苷类抗生素。

用Y-参比法测定发酵液中林可霉素的含量
吴兆亮;李瑸;胡滨
【期刊名称】《中国抗生素杂志》
【年(卷),期】2003(028)011
【摘要】研究发酵液中林可霉素的分光光度测定方法.根据分光光度法测定林可霉素的原理,研究林可霉素的测定影响因素和规律,得出最佳测定波长为 380nm、络合反应时间为 30min、浓度为 0.02mol/L的络合剂 PdCl2剂最佳用量为 0.5ml、林可霉素浓度在 20～300μ g/ml范围内吸光度 A与林可霉素浓度 C有线性关系.根据 Y-参比法,建立了测定发酵液中林可霉素的含量的有效方法.
【总页数】3页(P666-668)
【作者】吴兆亮;李瑸;胡滨
【作者单位】河北工业大学生物工程系,天津,300130;河北工业大学生物工程系,天津,300130;河北工业大学生物工程系,天津,300130
【正文语种】中文
【中图分类】R917
【相关文献】
1.HPLC法测定西洋参果浆及其发酵液中人参皂苷—Rg3、Rh2的含量 [J], 刘桂艳;刘墨祥;于连贵;杨献文;张春红
2.紫外分光光度法测定盐酸林可霉素葡萄糖注射液半成品中林可霉素的含量 [J], 蔡春阳
3.反相离子对高效液相色谱法测定盐酸林可霉素注射液中乙二胺四乙酸二钠的含量
[J], 屈蓉;钱桂英;陈佳
4.高效毛细管电泳法测定发酵液中林可霉素的含量 [J], 孟娜;薛正莲;项驷文;李婉珍;王卫军;吴丁柱
5.HPLC法测定盐酸林可霉素注射液中林可霉素的含量 [J], 包爱情;陆春波;林仙军;陈晓林;蔡文金
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

中华人民共和国国家标准GB/T×××××-202×饲料中泰乐菌素、泰万菌素、替米考星的测定液相色谱-串联质谱法Determination of tylosin,tylvalosin and tilmicosin in feeds—Liquid chromatography-tandem mass spectrometry编制说明（征求意见稿）主要完成单位：四川省饲料工作总站《饲料中泰乐菌素、泰万菌素、替米考星的测定液相色谱-串联质谱法》国家标准制订编制说明（征求意见稿）一、工作简况（一）任务来源本标准的制定任务来源于国家标准化管理委员会，计划号合同编号为T-NY-2021-101-03，计划号为20203789-T-469，任务名称为《饲料中泰乐菌素、泰万菌素、替米考星的测定液相色谱-串联质谱法》。

本标准的技术归口单位是全国饲料工业标准化技术委员会，主要起草单位是四川省饲料工作总站和西南民族大学。

参考国内外相关检测方法，结合试验结果起草本标准。

（二）制定背景大环内酯类药物（MALs）是多由链霉菌产生的弱碱性抗生素，对革兰氏阳性菌和支原体具有良好的抗菌活性，临床上广泛用于治疗畜禽动物敏感菌引起的呼吸道、消化道和泌尿生殖系统感染[1-3]。

MALs 为无色弱碱性化合物，多呈负的旋光性由其整体结构决定，MALs易溶于有一定极性的有机溶剂，如甲醇、乙腈、乙酸乙酯、氯仿、乙醚等，在水和弱极性溶剂中微溶。

MALs在干燥状态下相当稳定，但其水溶液稳定性差。

在酸性条件(pH＜4)下，苷键易发生水解，氨基糖苷结构较中性糖苷稳定的多，正常水解碱性糖苷的条件往往导致大环结构分解；在pH6.8的水溶液中相对较稳定，此时水溶性下降，抗菌活性最高。

MALs的盐或酯较游离形式稳定。

大环内酯类药物达100多种，发展到现在共有3代，第一代有红霉素、泰乐菌素、北里霉素(吉他霉素)等；第二代有替米考星、阿齐霉素等；第三代有乙酰异戊酰基泰乐菌素（泰万菌素）、泰拉霉素（瑞可新）等。

HPLC法测定红曲霉发酵液中洛伐他汀含量【摘要】目的建立测定红曲霉发酵液中洛伐他汀含量的方法。

方法采用HPLC法，以甲醇作溶剂、摇床振荡（150 r/min）3 h提取洛伐他汀，色谱条件：以甲醇18 mmol/L磷酸溶液（体积比为80∶20）为流动相，流速为1.0 mL/min，检测波长为237 nm。

结果洛伐他汀在5～50 μg/ mL质量浓度范围内与峰面积线性关系良好，加样平均回收率为100.75%，RSD为0.87%。

结论本方法简便有效，重复性好，可作为红曲霉相关产品的质量控制方法。

【关键词】高效液相色谱法；红曲霉；洛伐他汀Abstract:Objective To establish an HPLC method for determining the content of lovastatin in fermentation broth of Monascus. Method Lovastatin could be completely extracted from the fermentation broth by methanol under shaking for 3 h with 150 r/min. Then, samples were analyzed on the HPLC column using methanol18 mmol/L phasphate(80∶20) as mobile phase under the flow rate of 1.0 mL/min. The detection wavelength was 237 nm. Result The method had good linearity over the concentration of 5～50 μg/mL for lovastatin. The average recovery was 100.75% and RSD 0.87%.Conclusion The method is convenient, effective and accurate, which is suitable for the quality control of Monascus products.Key words:HPLC; Monascus; lovastatin红曲霉的应用在我国已有近两千年的历史，红曲霉的早期研究主要集中在其所产的红曲色素和各种酶类，如淀粉酶、葡萄糖淀粉酶、糖化酶、蛋白酶、果胶酶等，因此早期红曲霉主要用于食品着色、酿酒、食品发酵等［1,2］。

发酵液中红霉素的含量测定
张宇;龚文静;沈以凌;苗秀珍
【期刊名称】《中国酿造》
【年(卷),期】2011(000)005
【摘要】建立了红霉素的含量测定方法-初筛用紫外分光光度法(UV),复筛用高效液相色谱法(HPLC).UV法确定磷酸浓度10mol/L,反应温度80℃,反应时间3min,测定波长485nm;确定HPLC法柱温50℃,检测波长210nm.此种方法针对性好,适用于大批量的红霉素发酵液的检测.
【总页数】4页(P137-140)
【作者】张宇;龚文静;沈以凌;苗秀珍
【作者单位】南京工业大学,生物与制药工程学院,江苏,南京,210009;南京工业大学,生物与制药工程学院,江苏,南京,210009;北京市射线应用研究中心,北京,100012;南京工业大学,生物与制药工程学院,江苏,南京,210009
【正文语种】中文
【中图分类】TQ927
【相关文献】
1.红霉素发酵液中污染细菌的分离与鉴定及其对红霉素发酵的影响 [J], 曹文伟;蔡妙英
2.猴头菇菌丝体和发酵液中多糖的含量测定 [J], 刘晓明;闫云宇;毕华;高振强
3.细脚拟青霉发酵液中核苷类物质的HPLC分析及脂肪酸成分含量测定 [J], 曹新界;葛飞;陶玉贵
4.高效液相色谱法测定发酵液中的柔红霉素含量 [J], 秦建萍
5.丁香假单胞菌发酵液中的冠菌素含量测定方法及其应用 [J], 于春欣;刘少金;谭伟明;李召虎;段留生
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。