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腹腔注射40%四氯化碳加食用白酒制备肝硬化大鼠模型发表时间：2017-02-20T16:02:02.513Z 来源：《医药前沿》2017年1月第3期作者：陈菲1 王建美1 盛柳青1 裘颖儿2[导读] 肝硬化是临床最常见的慢性肝病，在欧美等发达国家，因肝硬化致死人数仅次于恶性肿瘤、心血管病。
（1金华职业技术学院医学院浙江金华 321000；2金华食品药品检验所浙江金华 321000）【摘要】目的：腹腔注射40%四氯化碳加食用白酒制备肝硬化大鼠模型。
方法：40只雄性SD大鼠随机分为模型组(n=30)和对照组(n=10)。
模型组按2ml/kg剂量腹腔注射40%四氯化碳食用油溶液，每周2次，连续7周，对照组注射等量生理盐水，分别于4周末和7周末检测模型组大鼠肝功能及组织病理学变化。
结果：模型组大鼠血清肝功能丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、碱性磷酸酶显著增高，至第7周时可观察到大鼠肝组织出现结节状增生的假小叶，为典型肝硬化病理表现。
模型组动物成活率为75%，造模成功率为81%。
结论：该方法可成功地建立大鼠肝硬化实验模型，可用于相关实验研究。
【关键词】四氯化碳；腹腔注射；大鼠；肝硬化；食用白酒【中图分类号】R965.3 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2017）03-0077-02肝硬化是临床最常见的慢性肝病，在欧美等发达国家，因肝硬化致死人数仅次于恶性肿瘤、心血管病、脑血管病和意外事故，居死亡原因第5位，在美国中年人中则为位居第4位的死亡原因。
国内每年死于肝硬化及并发症的患者达50万，主要原因是病毒性肝炎肝硬化导致[1-2]。
四氯化碳是重要的化工原料和有机溶剂，对肝、肾有严重损害作用，其可在体内转变为自由基，扰乱肝细胞膜上类脂质的代谢，引起肝细胞坏死，是经典的实验性肝损伤动物模型所用外源性化合物。
本实验通过腹腔注射四氯化碳加食用白酒制备肝硬化大鼠模型，以期为研究治疗肝硬化的药物提供实验动物模型。
柴胡疏肝散对四氯化碳诱导的早期大鼠肝纤维化的治疗作用杨武斌;唐金凤;米本中【期刊名称】《山西医科大学学报》【年(卷),期】2022(53)9【摘要】目的探究柴胡疏肝散对四氯化碳诱导的早期肝纤维化模型大鼠的治疗作用。
方法60只SD大鼠随机分为正常组(腹腔注射橄榄油+蒸馏水灌胃)、模型组(腹腔注射40%CCl 4橄榄油溶液+蒸馏水灌胃)、秋水仙碱组(阳性对照,腹腔注射40%CCl 4橄榄油溶液+秋水仙碱0.2 mg/kg灌胃)、柴胡疏肝散低、中、高剂量组(腹腔注射40%CCl 4橄榄油溶液+分别含柴胡疏肝散3.5,6.3,12.6 g/kg灌胃),每组10只,雌雄各半。
连续给药10周,观察各组大鼠一般情况。
末次给药后,测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)变化。
采用HE染色观察肝脏组织病理变化。
反转录-定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测转化生长因子β1(TGF-β1)、Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)和α-平滑肌激动蛋白(α-SMA)mRNA表达水平。
结果与正常组比较,模型组大鼠血清ALT、AST、TBIL、TNF-α、IL-6和IL-1β的含量均明显升高(P<0.01);HE染色显示模型组大鼠肝小叶被破坏,肝细胞不同程度的水肿、结构紊乱、明显肿胀变形;模型组大鼠肝组织TGF-β1、ColⅠ、α-SMA mRNA的表达升高(P<0.01)。
与模型组比较,秋水仙碱组和柴胡疏肝散低、中、高剂量组血清ALT、AST、TBIL、TNF-α、IL-6和IL-1β均有不同程度的下降(P<0.05或P<0.01);柴胡疏肝散高剂量组与秋水仙碱组血清ALT、AST、TBIL、TNF-α、IL-6、IL-1β含量相比差异无统计学意义(P>0.05)。
与模型组相比,柴胡疏肝散低、中、高剂量组大鼠肝组织病理损伤均得到不同程度的改善,肝细胞形状较为规则,细胞坏死减轻,肝小叶结构较完整,其中以柴胡疏肝散高剂量组的大鼠治疗效果最佳;秋水仙碱组与柴胡疏肝散高剂量组相比,肝小叶破坏和炎性因子浸润仍然存在,仅表现为破坏程度和数量减少,二者程度相当。
片仔癀对四氯化碳诱导肝纤维化大鼠肝功能及核因子-κB蛋白表达的影响郑海音1，华丽萍2，张玉琴2，王晓颖2，徐伟21.福建中医药大学中西医结合学院，福建福州 350122；2.福建中医药大学药学院，福建福州 350122摘要：目的观察片仔癀对CCl4诱导的肝纤维化大鼠肝功能和核因子-κB（NF-κB）蛋白表达的影响，探讨其作用机制。
方法将24只大鼠随机分为正常对照组、模型组、片仔癀组、秋水仙碱组，每组6只，50%CCl4灌胃8周制备肝纤维化模型。
末次给药1 h后，血清测定ALT、AST、Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原、层黏连蛋白和透明质酸含量，取肝脏计算肝指数，HE染色和VG染色观察肝组织病理形态，Western blot检测NF-κB蛋白表达。
结果与正常对照组比较，模型组大鼠肝指数及ALT、AST、Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原、层黏连蛋白、透明质酸含量和NF-κB蛋白表达明显升高（P＜0.01）；与模型组比较，各给药组大鼠肝指数及ALT、AST、Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原、层黏连蛋白、透明质酸含量和NF-κB蛋白表达均明显降低（P＜0.01）。
结论片仔癀对CCl4所致肝纤维化大鼠具有保护作用，其机制可能与抑制NF-κB的表达有关。
关键词：片仔癀；肝纤维化；核因子-κB；大鼠中图分类号：R285.5 文献标识码：A 文章编号：1005-5304(2019)04-0057-04DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2019.04.013 开放科学（资源服务）标识码（OSID）：Effects of Pien Tze Huang on Liver Function and Nuclear Factor-κB Protein Expression in Rats with Hepatic Fibrosis Induced by Carbon TetrachlorideZHENG Haiyin1, HUA Liping2, ZHANG Yuqin2, WANG Xiaoying2, XU Wei21. College of Integrative Medicine, Fujian University of Traditional Chinese Medicine, Fuzhou 350122, China2. Pharmacy College, Fujian University of Traditional Chinese Medicine, Fuzhou 350122, ChinaAbstract: Objective To investigate the protective effects of Pien Tze Huang on liver function and NF-κB protein expression in rats with hepatic fibrosis induced by CCl4; To discuss its mechanism of action. Methods Totally 24 rats were randomly divided into four groups: normal group, model group, PienTze Huang group and colchicine group, with 6 rats in each group. The liver fibrosis model was prepared by intragastric administration of 50% CCl4 for 8 weeks. After 1 hour of the last administration, serum was used to determine the contents of ALT, AST, type Ⅲprocollagen, type collagen, laminin and hyaluronic acid.ⅣLiver was taken to calculate the liver index. HE and VG staining were performed to observe the pathological damage. The expression level of NF-κB protein was determined by Western blot. Results Compared with the normal group, the levels of liver index, ALT, AST, type procollagen,Ⅲtype Ⅳ collagen, laminin, hyaluronic acid and NF-κB protein in the model group significantly increased (P<0.01). Compared with the model group, the liver index , ALT, AST, type procollagen, type collagen, laminin,ⅢⅣhyaluronic acid and NF-κB protein significantly decreased in each administration group (P<0.01, P<0.05). Conclusion Pien Tze Huang has a significant protective effect on hepatic fibrosis induced by CCl4, which may be related to the inhibition of NF-κB expression.Keywords: Pien Tze Huang; hepatic fibrosis; NF-κB; rats肝纤维化是由多种原因引起的慢性肝损伤所致的病理改变，以过度的细胞外基质（ECM）沉积和纤基金项目：国家自然科学基金（81503513）；福建省高等学校新世纪优秀人才支持计划（NCETFJ）维状结构为特征，纤维疤痕破坏正常肝结构而影响肝功能最后导致肝衰竭[1-2]。
虾青素对四氯化碳诱导的慢性肝损伤大鼠的保护作用黄铁军;余琼华;戴列军【摘要】探讨虾青素对慢性肝损伤大鼠肝功能的保护作用。
方法采用四氯化碳（CCl4）制备大鼠慢性肝损伤模型，设正常组、模型组、虾青素干预组。
通过酶联免疫法测定血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、总蛋白（TP）以及肝组织超氧化物歧化酶（ superoxide dismutase，SOD）、谷胱甘肽转移酶（ glutathione-S-transfcrase，GST）活性、谷胱甘肽（glutathione，GSH）及丙二醛（malondialdehyd，MDA）水平。
对肝组织病理切片行Masson三色染色，检测肝纤维化情况，采用RT-PCR法检测Ⅰ型胶原mRNA水平。
结果正常组大鼠肝胶原指数为（0.42±0.12），模型组大鼠肝胶原指数为（1.84±0.24，P＜0.01），虾青素治疗组肝胶原指数为（0.89±0.12）,显著低于模型组（P＜0.05）；正常大鼠肝组织Ⅰ型胶原mRNA水平为（0.12±0.02），模型组为（0.48±0.06，P＜0.01），虾青素治疗组为（0.35±0.09），明显低于模型组（P＜0.05）；正常组肝组织MDA、GST、GSH和SOD水平分别为（1.93±0.76） nmol/mg、（18.43±5.34） U/mg、（75.45±9.67） mg/g、（678.80±76.56） U/mg，模型组MDA和GST分别为（6.56±1.09）nmol/mg、（54.34±7.65）U/mg，均显著升高（P＜0.05），而GSH为（35.45±9.01） mg/g，SOD为（203.89±89.00） U/mg，均显著降低（P＜0.01）；与模型组比，虾青素治疗组MDA为（3.34±1.12）nmol/mg，GST为（30.89±4.78） U/mg，均显著低于模型组（P＜0.01），而GSH为（56.78±7.78）mg/g，SOD为（432.34±92.56） U/mg，均较模型组显著升高（P＜0.01）。
四氯化碳诱导肝纤维化早期大鼠肝窦内皮细胞及基底膜形态改变的动态研究黄月红;郭杞兰;陈治新;陈运新;张莉娟;王小众【摘要】目的：探讨四氯化碳诱导肝纤维化早期大鼠肝窦毛细血管化的形成过程。
方法：清洁级雄性SD大鼠采用随机数字表法随机分为2组：正常对照组（N组，6只）和肝纤维化模型组（ M组，32只）。
M组大鼠腹腔注射50％四氯化碳蓖麻油混合液，N组大鼠腹腔注射生理盐水，剂量为2 mL/kg，每周2次，共4周。
分别于造模第3天、1周、2周和4周处死大鼠，HE染色和Masson染色观察肝脏组织炎症及纤维化的改变，透射电镜观察肝窦内皮细胞（LSECs）窗孔与基底膜（BM）的改变，免疫组织化学检测LSECs 表面标志物CD31及基底膜成分IV型胶原（Col IV）和层黏连蛋白（LN）的改变。
结果：HE及Masson染色显示四氯化碳造模4周早期肝纤维化已形成。
肝组织透射电镜显示四氯化碳造模第3天后开始出现LSECs窗孔直径变小及数目减少，随着造模时间的延长，LSECs失窗孔现象逐步严重，至第4周时局部内皮下可见连续的基底膜。
免疫组化染色显示LSECs表面标志物CD31表达随着LSECs窗孔数目的减少而逐渐增强；基底膜成分Col IV于造模第2周时表达开始显著增强并随着造模时间延长表达逐渐增强，LN于造模第4周时表达开始显著增强。
结论：肝纤维化早期大鼠局部肝组织可见典型的肝窦毛细血管化形成；肝窦壁内LN沉积是肝窦毛细血管化时形成连续基底膜的关键因素。
%[ABSTRACT]AIM:Toexplorethedevelopmentofhepaticsinusoidalcapilla rizationintheearlystageofliverfi-brosis induced by carbon tetrachloride (CCl4) in rats.METHODS:Clean SD rats were randomly divided into normal con-trol group (group N, n=6) and liver fibrotic model group (group M,n=32).The rats in group N were intraperitoneal in-jected with saline and the rats in group M were intraperitoneal injected with CCl 4(2 mL/kg, twice a week for 4 weeks).At the end of the 3rd day and the 1st, 2nd and 4th weeks, all rats were killed and then the samples were collected .The patho-logical changes in the livers were observed by HE staining and Masson straining .The development of hepatic sinusoidal capillarization was observed by transmission electron microscopy (TEM) and immunohistochemical staining .The cell sur-face expression of vascular endothelium-associated marker CD31, collagen type Ⅳ(Col IV) and laminin (LN) was deter-mined.RESULTS:HE and Masson staining showed the formation of liver fibrosis after treatment with CCl 4 for 4 weeks. TEM showed that the fenestrate diameter of liver sinusoidal endothelial cells (LSECs) grew down, the fenestrate numbers of LSECs were decreased along with the development of liver fibrosis , and the consecutive basement membrane was formed at the end of the experiment .The expression of CD31 was significantly increased along with the development of defenestration , and the expression of Col IV and LN was significantly increased after the treatment with CCl 4 for 2 weeks and 4 weeks , re-spectively .CONCLUSION:The typical hepatic sinusoidal capillarization was detected in the early stage of liver fibrosis , and the deposition of LN in the liver sinusoidal walls was the mainly factor of formation of the consecutive basement mem -brane .【期刊名称】《中国病理生理杂志》【年(卷),期】2014(000)008【总页数】6页(P1501-1505,1531)【关键词】大鼠;肝纤维化;肝窦毛细血管化;肝窦内皮细胞;基底膜【作者】黄月红;郭杞兰;陈治新;陈运新;张莉娟;王小众【作者单位】福建医科大学附属协和医院消化内科，福建福州350001;福建医科大学附属协和医院消化内科，福建福州350001;福建医科大学附属协和医院消化内科，福建福州350001;福建医科大学附属协和医院消化内科，福建福州350001;福建医科大学附属协和医院消化内科，福建福州350001;福建医科大学附属协和医院消化内科，福建福州350001【正文语种】中文【中图分类】R575肝窦是肝细胞与血浆之间进行物质交换的场所。
