AOAC低聚半乳糖检测方法

低聚物分子量的检测低聚物是指由少于10个单体组成的分子，其分子量较小。

低聚物广泛应用于化学、材料科学、生物医学等领域。

准确测定低聚物的分子量对于确保产品质量以及研究与开发新材料具有重要意义。

本文将介绍几种常用的低聚物分子量检测方法，并进行比较与分析。

一、凝胶渗透色谱法（GPC）凝胶渗透色谱法是测定聚合物分子量常用的方法之一。

该方法利用样品在分子量较小的溶剂中溶解后，通过与凝胶填充柱相互作用，从而分离目标低聚物。

通过测定低聚物在柱中的滞留时间，结合已知分子量的标准品，可以得到待测样品的分子量。

二、质谱法质谱法可以直接测定低聚物的分子量。

常用的方法包括质谱仪的直接离子化法（MALDI-TOF）和高分辨质谱法（HRMS）。

这些方法能够准确测定低聚物的质量，并通过与标准品的对比，得到其分子量。

三、光散射法光散射法是一种基于散射现象的低聚物分子量测定方法。

该方法利用目标低聚物溶液中的分子散射光与光源的散射光的角度关系，通过多种参量计算得到分子的净分子量。

四、核磁共振法（NMR）核磁共振法可以应用于低聚物的分子量测定。

通过测定低聚物样品中的核磁共振信号，可以得到样品的分子量。

该方法对于鉴定低聚物的结构和分子量具有重要意义。

五、凝胶电泳法凝胶电泳法是一种常用于分离生物大分子的方法，也可以用于低聚物的分子量测定。

该方法将目标低聚物样品在电场中运行，通过与已知分子量的标准品进行对比，可以得到样品的分子量。

六、比色法比色法是一种简便快速的低聚物分子量测定方法。

通过与试剂发生比色反应，通过比较吸收峰的强度大小，可以推算出样品的分子量。

综上所述，方法有很多种，每种方法都有其适用的范围和优缺点。

在选择合适的测定方法时，需要考虑样品类型、分析精度要求、设备成本等因素。

随着科学技术的不断发展，新的检测方法也在不断涌现，为低聚物分子量的准确测定提供更多选择。

低聚异麦芽糖低聚果糖低聚半乳糖摘要：一、介绍低聚异麦芽糖、低聚果糖和低聚半乳糖二、分析三种糖的成分和特点三、比较三种糖的优缺点四、讨论三种糖在食品工业中的应用五、总结三种糖的价值和未来发展趋势正文：低聚异麦芽糖、低聚果糖和低聚半乳糖是三种常见的功能性低聚糖，它们在食品工业中具有广泛的应用。

本文将对这三种糖进行分析，以期为食品生产提供参考。

首先，我们来了解一下这三种糖的基本情况。

低聚异麦芽糖（Isomaltooligosaccharide，简称IMO）是由α-葡萄糖分子通过α-1,6-糖苷键连接而成的低聚糖，具有清爽的甜味。

低聚果糖（Fructooligosaccharide，简称FOS）是由β-果糖分子通过β-2,1-糖苷键连接而成的低聚糖，具有水果的甜味。

低聚半乳糖（Galactooligosaccharide，简称GOS）是由β-半乳糖分子通过β-1,4-糖苷键连接而成的低聚糖，具有温和的甜味。

接下来，我们分析这三种糖的成分和特点。

低聚异麦芽糖具有较好的溶解性和稳定性，在食品中添加后，不仅能增加甜味，还能抑制食品的水分活性，延长食品的保质期。

低聚果糖具有较高的甜度，且热量较低，适合糖尿病患者食用。

低聚半乳糖在人体内可被肠道有益菌发酵，产生有益的物质，有助于维护肠道健康。

然后，我们比较这三种糖的优缺点。

低聚异麦芽糖的优点在于其稳定性好，但缺点是口感较硬。

低聚果糖的优点在于其甜度高，缺点是热量相对较高。

低聚半乳糖的优点在于其有助于肠道健康，缺点是溶解性较差。

接下来，我们讨论这三种糖在食品工业中的应用。

低聚异麦芽糖广泛应用于饮料、糕点等食品中，以增加甜味和稳定性。

低聚果糖则常用于制作糖尿病食品和保健食品。

低聚半乳糖主要用于生产婴幼儿配方奶粉和保健品，以促进肠道健康。

最后，我们来总结这三种糖的价值和未来发展趋势。

功能性低聚糖作为一种新型食品配料，具有广阔的市场前景。

随着消费者对健康食品的需求不断增加，这三种糖的应用范围将会越来越广泛。

半乳糖醛酸测定方法
半乳糖醛酸测定方法是一种用于测定样品中半乳糖醛酸含量的分析方法。

以下是一种常见的半乳糖醛酸测定方法的步骤：
1. 准备样品：将待测样品加入适量的溶剂中，使其完全溶解或悬浮。

2. 抽取样品：从样品中取出一定体积的抽样溶液。

可以使用适当的技术，如吸管、移液器、自动进样器等进行样品的抽取。

3. 处理样品：将抽样溶液进行必要的处理，如稀释、滤液、固相萃取等，以去除干扰物质。

4. 反应：将处理后的样品溶液与适当的试剂（如酶、指示剂等）加入反应容器中进行反应。

反应时间和温度应根据具体的测定方法进行控制。

5. 测定：根据具体的测定方法，使用适当的仪器或设备进行半乳糖醛酸的测定。

常见的测定方法包括光度法、电位差法、气相色谱法等。

6. 计算：根据测定结果和所用的稀释倍数，计算样品中半乳糖醛酸的含量。

进一步处理数据，如报告平均值、标准偏差、置信区间等。

需要注意的是，不同的测定方法可能会有不同的步骤和操作要求，具体的方法应根据所使用的测定方法进行调整。

第41卷2024 年 3 月应用化学CHINESE JOURNAL OF APPLIED CHEMISTRY第3期405⁃414婴配乳粉中2′-岩藻糖基乳糖和乳糖-N -新四糖含量离子色谱法检测詹胜群 葛城* 周荣杰 周钧（澳优乳业（中国）有限公司， 长沙 410200）摘要 研究了离子色谱法同时测定婴配乳粉中2′-岩藻糖基乳糖和乳糖-N -新四糖的含量及影响因素。

采用离子色谱柱分离，脉冲安培检测器检测和外标法定量分析等方法。

通过对不同净化方式、酶解处理和洗脱条件等过程进行考察和优化，比较确定色谱条件和前处理条件对分离的影响，并就线性范围进行探讨。

结果表明，优化后的方法线性关系良好， R 2＞0.999； 方法精密度好， 相对标准偏差（n =7）＜2.7%； 方法准确度好，2′-岩藻糖基乳糖回收率为95.97%~103.38%，乳糖-N -新四糖回收率为100.09%~104.01%。

该方法能对婴配乳粉中的2′-岩藻糖基乳糖和乳糖-N -新四糖同时测定， 操作简单， 具有良好的准确度和精密度， 可为婴配乳粉质量监控方法提供参考。

关键词 母乳低聚糖；离子色谱；2′-岩藻糖基乳糖；乳糖-N -新四糖；婴配乳粉中图分类号：O657.7 文献标识码：A 文章编号：1000-0518（2024）03-0405-10母乳低聚糖（HMOs ）是一种多功能聚糖，是人乳中的第三大成分［1］，其结构主要由5种基本单糖组成： 葡萄糖（Glucose ， Glc ）、半乳糖（Galactose ， Gal ）、N -乙酰葡糖氨（Nacetylglucosamine ， GlcNAc ）、岩藻糖（Fucose ， Fuc ）和N -乙酰神经氨酸（N -Acetylneuraminic acid ， NeuAc ），通常由半乳糖和葡萄糖与其它一种或多种单糖聚合形成多种结构［2］。

HMOs 对于婴幼儿的生长健康有着重要的意义，除了可预防感染、过敏以外，还能促进肠胃发育、增强自身免疫、预防糖尿病和心血管疾病［3-5］等。

人乳寡糖 国家 标准
人乳寡糖，也被称为低聚半乳糖或GOS，是一种存在于母乳中的益生元。

它是由两个或三个葡萄糖分子通过β-1,4糖苷键连接而成的。

人乳寡糖在婴儿的肠道中可以被益生菌分解利用，有助于维持肠道菌群的平衡，促进肠道健康。

在中国，关于人乳寡糖的国家标准是由国家标准化管理委员会制定的。

这些标准主要包括了人乳寡糖的命名和分类、要求、检验方法、检验规则、标签、包装、运输和储存等方面的内容。

例如，GB/T 29602-2013 食品添加剂 低聚半乳糖》规定了低聚半乳糖的定义、要求、检验方法、检验规则、标签、包装、运输和储存等内容。

该标准适用于以乳清为原料，通过酶法制备的食品添加剂低聚半乳糖。

此外，GB/T 30835-2014 饲料添加剂 低聚半乳糖》也规定了饲料添加剂低聚半乳糖的要求、检验方法、检验规则、标签、包装、运输和储存等内容。

该标准适用于以乳清为原料，通过酶法制备的饲料添加剂低聚半乳糖。

保健食品中异麦芽糖低聚糖、低聚果糖、大豆低聚糖的测定保健食品中异麦芽低聚糖、低聚果糖、大豆低聚糖的测定1.范围本方法规定了保健食品中异麦芽低聚糖、低聚果糖、大豆低聚糖的测定方法。

本方法适用于保健食品（糖浆、糖粉、饮料、奶粉）中异麦芽低聚糖、低聚果糖、大豆低聚糖的测定。

本方法最低检出量：异麦芽糖2μg；潘糖5μg；异麦芽三糖10μg；蔗果三糖(GF2)5μg；蔗果四糖(GF3)5μg；蔗果五糖(GF4)10μg；棉籽糖20μg；水苏糖30μg。

2.原理试样除去蛋白后，离心、脱色，用液相色谱分析，用NH2柱分离，示差检测器测定，外标法定量。

3.试剂除特殊说明，所用试剂均为分析纯。

实验用水为去离子水或同等纯度的蒸馏水。

3.1乙腈（色谱纯）。

3.2无水乙醇。

3.3麦芽糖、异麦芽糖、潘糖、麦芽三糖、异麦芽三糖、棉籽糖、水苏糖(含量≥98%)3.4低聚果糖（总含量≥96%，其中GF238%，GF351%，GF47%）。

3.5麦芽糖、异麦芽糖混合标准溶液：分别称取麦芽糖10.0mg，异麦芽糖15.0mg，潘糖9.0mg，麦芽三糖15.0mg，异麦芽三糖12.0mg，用水溶解，并定容至1.0mL。

将此溶液逐级稀释成下列浓度：标准溶液名称：麦芽糖、异麦芽糖、潘糖、麦芽三糖、异麦芽三糖（mg/mL）10.500.750.450.750.602 1.00 1.500.90 1.50 1.203 2.00 3.00 1.80 3.00 2.40410.0015.009.0015.0012.003.6低聚果糖标准溶液：精密称取含GF238%、GF351%、GF47%的低聚果糖标准品0.0500g，用水溶解并定容至2.50mL。

将此液逐级稀释成下列浓度：标准溶液名称：GF2、GF3、GF4（mg/mL）1 1.50 2.000.302 3.00 4.000.603 4.50 6.000.904 6.008.00 1.2057.5010.00 1.403.7棉籽糖、水苏糖标准溶液：精密称取棉籽糖0.0400g，水苏糖0.0600g，用水溶解并定容至4.0mL。

低聚半乳糖(Galactooligosaccharides, GOS)是一种低分子量的碳水化合物，由2-10个单糖通过β-1,4-糖苷键连接而成。

它通常以乳糖为原料，通过酶法水解得到。

还原糖是指具有还原性的糖类，可以还原斐林试剂等氧化剂，也可以在生物体内进行氧化还原反应。

常见的还原糖包括葡萄糖、果糖、半乳糖等。

低聚半乳糖是一种低聚糖，而非还原糖。

还原糖是指在分子结构中具有游离醛基或酮基的糖类，如葡萄糖、果糖等。

低聚半乳糖是一种以半乳糖为基本单元的低聚糖，其分子结构是半乳糖分子链上连接1到7个半乳糖基。

低聚半乳糖具有多种生理功能，如促进肠道有益菌增殖、调节肠道微生态平衡等。

AOAC 官方方法994.10食品中胆固醇的检测直接皂化—气相色谱法可以检出食物或食物产品中≥10mg/100g的浓度见表944.10A.原理测试液体在高温下，被KOH的乙醇溶液皂化，未被皂化的部分，含有胆固醇和其他的固醇，这些可以用甲苯来萃取。

固醇被转化成三甲基硅基醚，之后用气谱定性。

B.仪器（a）离心管—15mL,Pyrex no.13。

硅烷化反应试管用以下处理方法：用10%氢氟酸充满离心管，静止10分钟，用水清洗试管，之后再用无水甲醇清洗。

用氮气吹干离心管,之后充满10%的六甲基二硅胺甲苯溶液让其静止一小时，用甲苯清洗离心管，之后用无水甲醇清洗，用之前在100℃的烘箱中烘干。

其它商业化的硅烷化反应试剂也可以用。

每次重复利用之前要用蒸馏水，乙醇，正己烷和甲苯清洗，之后放入100℃烘箱烘干备用。

离心管如果不用强碱洗的话，可被重复利用与非硅烷化的反应。

（b）气相色谱配有氢火焰检测器，毛细管柱，分流，25m×0.32mm×0.17μm膜厚度，固定液是5%苯基95%甲基聚硅氧烷或甲基硅胶（例如：HP-5,Ultra 2.或HP-1；www.chem.agilent.c om）操作条件：温度—进样口250℃，检测器300℃，柱子：190℃保持2min，以20℃/min 升至230℃保持3min；再以40℃/min升至255℃，保持25min。

流速：氦气—柱流速：2mL/ min,分流口30mL/min，净化口：3mL/min，辅助补充气：20mL/min；氢气-35mL/min;空气-280mL/min.(c):旋转蒸发仪-在浓缩瓶和金属杆之间配有玻璃冷凝管。

（d）能加热磁搅拌-能够调节不同转速和加热温度（e）微量移液器-能转移100μL和200μL的液体，金属材质。

（f）试管混合器（g）分析天平-精确至0.0001g。

（h）玻璃仪器-具塞三角瓶，125mL和250mL，容量瓶，移液管，500mL分液漏斗，量筒。

测定饲料添加剂α-半乳糖苷酶活力的常用方法之一是分光光度法。

下面是一个基本的分光光度法测定步骤的概述：
材料和试剂：
1. α-半乳糖苷酶底物（一般为对硝基苯基-α-D-半乳糖苷）。

2. 可能需要的缓冲液和辅助试剂，具体根据实验需求确定。

步骤：
1. 准备试样：将待测饲料添加剂样品制备成适当浓度的溶液。

如果需要，可以进行适当的稀释。

2. 准备标准曲线：准备一系列已知浓度的标准溶液，可用于构建α-半乳糖苷酶活力的标准曲线。

3. 反应体系的组装：在试管或微量板中，将一定量的饲料添加剂样品或标准溶液与α-半乳糖苷酶底物混合，加入适当的缓冲液和辅助试剂，确保反应体系的稳定和适宜的pH 值。

4. 反应时间：将反应体系放置在适当的温度下，通常为37°C，反应一定的时间（一般为15-60分钟），以使底物被酶催化水解。

5. 反应终止：通过加入适当的反应终止剂，如酸性试剂或其他试剂，来停止反应。

6. 分光光度测定：使用分光光度计在特定波长下测定反应体系的吸光度或发光强度。

具体波长取决于所使用的底物和产物。

7. 标准曲线分析：根据已知浓度的标准溶液的吸光度或发光强度，绘制α-半乳糖苷酶活力的标准曲线。

8. 求取样品活力：根据样品的吸光度或发光强度，使用标准曲线进行
插值或计算，得到饲料添加剂样品中α-半乳糖苷酶的活力。

请注意，实际的实验步骤和条件可能会因具体的分光光度仪器和试剂的不同而有所变化。