PCR法定性检测食用油脂中转基因成分_覃文

食品中转基因含量检测与标记方法随着人们对食品安全和健康的关注增加，对转基因食品的检测与标记方法也变得尤为重要。

转基因食品是指通过基因工程技术改变了食品中原有基因的组成，使其获得某种特定性状或产生特定功能的食品。

对转基因食品的检测与标记，对保障公众的选择权、监督食品质量与安全具有重要作用。

一、转基因食品检测方法1.1 PCR法（聚合酶链式反应法）PCR法是一种常见的转基因食品检测方法，其基本原理是通过特殊引物和DNA聚合酶的作用，使得基因的特定片段以指数级数繁殖。

该技术可以检测食品中转基因成分的存在与否，鉴定出转基因物质及其比例。

1.2 基于ELISA法ELISA（酶联免疫吸附法）是一种常用的生物化学分析方法，通过抗体与抗原的特异性结合，定量或定性测定目标物质。

对于转基因食品的检测，可以采用基于ELISA法的检测方法，利用特异性抗体与目标物质结合，通过比色或荧光等方式检测出转基因成分的存在。

1.3 残留DNA定性与定量检测传统的分子生物学方法可以通过提取食品中的DNA，利用PCR或实时荧光定量PCR技术进行定性与定量分析。

该方法的优势在于高灵敏度、高特异性和高准确性，可以检测低浓度的转基因成分。

二、转基因食品标记方法2.1 成分标记转基因食品标记的基本原则是明确食品中是否包含转基因成分，并在食品标签上进行清晰而准确的标注。

对于转基因农产品，标签上应标明是否“含转基因成分”。

对于转基因食品的配料，应清楚地标注其转基因成分含量。

这种方法通过提供相关信息，使消费者能够有意识地选择是否购买转基因食品。

2.2 标准化标志一些国家和地区通过制定相应的标准，规定食品标识中的转基因食品的标志。

例如，欧盟标准规定在食品包装上必须使用特定的转基因标签，以明确表示食品是否包含转基因成分。

2.3 二维码标记随着科技的发展，一些企业采用二维码标记的方式来提供更丰富的信息。

消费者可以通过手机扫描二维码，获取有关该产品的详细信息，包括是否含有转基因成分、遵从的标准、生产过程等。

实时荧光PCR定性定量检测混合食用油脂中的花生油成分覃文;董洁;邓鸿铃
【期刊名称】《中国油脂》
【年(卷),期】2006(031)010
【摘要】为鉴别鉴定花生油在食用油脂中的存在与否及其含量,研究了定性定量检测花生特异性基因片段的分子生物学检测方法.结果表明,生花生需加热处理后再提取DNA才能作为PCR扩增的模板,食用油脂中可提取出用于定性定量PCR的DNA,花生的Arah1基因是具有花生种属特异性的基因,采用实时荧光PCR方法检测Arah1基因片段可定性定量检测混合食用油脂中的花生油成分.
【总页数】4页(P73-76)
【作者】覃文;董洁;邓鸿铃
【作者单位】广东化工制药职工技术学院,510520;广东出入境检验检疫局,510623,广州市;广州市产品质量监督检验所,510110,广州市
【正文语种】中文
【中图分类】TS2
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1.食用油脂中DNA高效快速提取方法及实时荧光PCR检测技术的研究 [J], 栾凤侠;张洪祥;白月
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张伟;赵相鹏;姚震宇
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[19]中华人民共和国国家知识产权局[12]发明专利申请公布说明书[11]公开号CN 101358189A[43]公开日2009年2月4日[21]申请号200810167544.1[22]申请日2008.10.10[21]申请号200810167544.1[71]申请人天根生化科技（北京）有限公司地址100083北京市海淀区成府路35号北陆楼[72]发明人柯海燕 [51]Int.CI.C12N 15/10 (2006.01)C12Q 1/68 (2006.01)权利要求书 1 页 说明书 7 页 附图 3 页[54]发明名称从植物源食用油中提取用于转基因成分检测的DNA的方法[57]摘要本发明的内容是从植物来源的食用油中提取DNA ，用于转基因成分的检测。

本方法的特点是：在DNA提取之前先采用有机的乳化剂进行较长时间的乳化，把含量极低的DNA从脂溶性油脂中充分游离出来，完成成功提取的第一步，再利用自主研发的独特缓冲体系(提取缓冲液：100mM Tris.HCl，pH8.0；20mMEDTA；500mM NaCl；1.5％SDS； 4％PVP)使DNA 充分释放和聚集，有别于传统的CTAB裂解，酚/氯仿抽提，然后在carrier RNA共沉剂下经异丙醇沉淀，再经第二次异丙醇沉淀，从大离心管转移至小离心管，最大限度的获得食用油中含量极低的DNA，溶于40μl溶解缓冲液中，取9μl作为模板用于20μl的PCR反应体系。

本方法快速、便捷、安全，效率高、稳定性好，适用于以植物来源为原料的食用油的转基因成分检测。

200810167544.1权 利 要 求 书第1/1页 1.从以植物为原料的食用油中提取用以转基因成分检测的DNA的方法，由下述步骤组成：(1)样品预处理：取食用油30ml，加入等体积乳化剂，于磁力搅拌器上搅拌2-3小时；(2)取经预处理后的溶液10ml于大离心管，加5ml提取缓冲液，涡旋振荡1分钟后，室温静置10分钟；(3)加入2ml乙酸钠缓冲液，充分混匀，涡旋振荡1分钟后，室温静置10分钟；(4)10,000r p m离心10分钟，将下层水相转移至新的大离心管中；(5)向水相溶液中加入10μl Carrier RNA和0.7倍体积的异丙醇，充分混匀，10,000rpm离心10分钟，弃上清，保留沉淀；(6)向大离心管中加入700μl超纯水，涡旋振荡15秒，加入700μl 异丙醇，涡旋振荡15秒，简短离心，将溶液转移到新的小离心管中；(7)12,000rpm离心5分钟，弃上清；(8)加入700μl 70％乙醇，涡旋振荡5秒，12,000rpm离心5分钟，弃上清；(9)开盖倒置，室温放置10min，彻底晾干残余的乙醇；(10)加入40μl洗脱缓冲液TE，旋涡振荡1分钟，最终得到食用油DNA 溶液。

食品中转基因成分的检测方法与限量标准研究引言：随着人们对食品安全的关注度不断提高，转基因食品备受争议。

为了保护消费者权益，监管部门一直致力于开发食品中转基因成分的检测方法，并制定相应的限量标准。

本文将对现有的检测方法及限量标准进行研究。

一、食品中转基因成分检测方法1. PCR检测方法PCR（聚合酶链式反应）是一种常用的检测转基因成分的方法。

通过匹配转基因重要基因的DNA序列，PCR可以检测到极低浓度的转基因成分。

然而，由于PCR方法对样品的处理过程较为繁琐，且存在较高的假阳性率，因此在实际应用中需要进一步改进。

2. 实时荧光PCR检测方法实时荧光PCR是基于PCR技术的一种改进方法。

它可以实时监测PCR过程中的荧光信号，准确判断转基因成分的存在与否。

相比传统PCR方法，实时荧光PCR具有高灵敏度和高特异性的优势，然而其设备和试剂的成本较高，限制了其在实际应用中的推广。

3. 基因测序方法基因测序方法是一种直接检测转基因成分的手段。

通过对食品中所有DNA序列的测序，可以准确判断是否存在转基因成分。

基因测序方法在理论上能够提供最准确的结果，但由于其高昂的费用和时间成本，目前在大规模应用中还存在一定的困难。

二、食品中转基因成分的限量标准1. 限量标准的制定依据食品中转基因成分的限量标准制定依据包括食品安全评估、转基因成分检测方法的可行性和社会公众意见等。

在制定限量标准时，应综合考虑科学研究和实际情况，确保转基因食品不会对人体健康产生不良影响。

2. 不同国家的限量标准差异不同国家对转基因成分的限量标准存在一定的差异。

例如，欧盟规定，食品中转基因成分的含量超过0.9%时，必须标示出来。

而美国则没有明确的限量标准，而是采取了一种“合理衡量”的方式，需要食品生产者自行决定是否标识转基因成分。

3. 限量标准的争议与改进转基因食品的限量标准一直备受争议。

一方面，部分人认为限量标准过于宽松，难以真正保护消费者权益；另一方面，也有人认为限量标准过于严苛，对农业发展造成不利影响。

食品中转基因成分检测方法的研究进展3陈　颖1　葛毅强2　苏　宁1　徐宝梁11(中国进出口商品检验技术研究所,北京,100025)2(科技部中国农村技术开发中心,北京,100045)摘　要　随着各国政府和有关食品监督机构对转基因食品检测的日益重视,转基因食品检测方法的研究进展十分迅速。

这篇文章就目前国内外常用的2种转基因食品检测方法进行了概述。

关键词　食品,转基因食品,检测方法　第一作者:博士,高级工程师(通讯作者:葛毅强)。

3科技部社会公益研究资金项目　收稿时间:2003-01-09 2001年度全球的转基因作物种植面积估计已达5260万km 2,随着转基因作物商业化生产的不断发展,大量的转基因农产品已经直接或间接地被制作成为人类消费的食品,转基因食品的份额在食品市场中正不断加大,进入人们的食物链。

这一方面展示出先进科学技术在生产上的巨大应用前景,另一方面也引发了转基因作物对人体健康和生态环境影响的争论。

为满足广大消费者的选择权和知情权,以及出于国际贸易的需要,转基因食品的检测越来越引起各国政府和有关食品监督机构的重视。

目前,国内外对转基因食品的检测主要有2种,第一种是建立在以核酸为基础的PCR 检验方法,如检测特异插入功能基因DNA 的PCR 方法、巢式PCR 方法、核酸杂交方法,检测特异插入基因表达RNA 的R T 2PCR 方法和核酸杂交方法;第二种是检验外源基因的表达产物2蛋白质的方法如EL ISA 、免疫层析试纸条方法,检测插入基因表达蛋白功能的生化活性检测方法等。

目前以PCR 方法灵敏度最高,适用范围最广。

1　以核酸为基础的检测方法111　核酸的提取提取出一定数量的高质量DNA ,是进行以核酸为基础的PCR 检测的前提条件。

由于食品成分复杂,除含有多种原料组分外,还含有盐、糖、油、色素等食品添加剂,此外,加工过程中的煎、炸、煮、烤等工艺使原料中的DNA 会受到不同程度的破坏,因此,食品中转基因成分的检测特别是食品中DNA 的提取具有其特殊性。

食用油脂中转基因植物成分实时荧光PCR定性检测方法（三）实时荧光PCR反应体系见表2。

表2 实时荧光 PCR反应体系 7.5.2 实时荧光PCR反应参数实时荧光PCR反应参数见表3。

用法不同实时荧光PCR仪，可对参数作适当调节。

表3 实时荧光PCR反应参数 7.5.3 仪器检测通道的挑选设置PCR反应管荧光信号收集条件，应与探针标志的报告基团全都。

详细设置办法可参照仪器用法解释书。

7.6 结果分析、推断和表述 7.6.1 基线和闭值的设置实时荧光PCR反应结束并分析结果时，应设置基线和闽值。

基线范围设置在3个～15个循环。

基线闭值设置在基线刚好超过正常阴性目标DNA对比扩增曲线最高点且Ct=40，通常状况下可以采纳仪器默认的基线阂值，即采纳3个～15个循环的阴性目标DNA对比的10倍标准差作为阈值。

7.6.2 质量控制7.6.2.1 平行样品的设置每个样品举行实时荧光PCR检测时应设置起码2个平行。

7.6.2.2 对比设置实时荧光PCR检测过程中应设置PCR 扩增试剂对比、PCR扩增阴性目标DNA对比、PCR扩增阳性目标DNA对比，并对DNA提取和纯化过程中设置的核酸提取空白对比同时举行实时荧光PCR检测，详细方式根据GB/T 19495.2中相关规定。

试验中设置的各种对比PCR检测结果应符合7.6.2.3～7.6.2.5。

否则，任一种对比假如浮现非下述正常结果，应重做试验。

7.6.2.3 核酸提取空白对比和PCR扩增试剂空白对比外源基因检测结果Ct≥40，内源基因检测结果Ct≥40。

7.6.2.4 PCR扩增阴性目标DNA对比外源基因检测结果Ct≥40，内源基因检测结果20≤Ct≤36。

7.6.2.5 PCR扩增阳性目标DNA对比外源基因检测结果Ct≤36。

7.7 结果推断和表述7.7.1 待测样品外源基因2个平行样检测结果Ct≥40，内源基因检测20≤Ct≤36并浮现典型的扩增曲线，同时各种试验对比结果正常，此时可以判定该样品未检出xxx基因，结果表述为未检出xxx基因。

植物油DNA提取和基因检测研究进展齐玲倩;刘秀;丁梦璇;刘远远;柯润辉;尹建军【摘要】Methods for gene detection have been widely used in the authentication and GMO detection for vegetable oils because of their rapidity, efficiency, sensitivity and accuracy. While, as for vegetable oils, the low quantity and integrity of DNA caused by being refined increase the difficulties of DNA extraction and gene detection. In this paper, we review the progress of DNA extraction and gene detection for vegetable oils and make some respect for their future , so as to provide theoretical reference for the researchers in some degree.%基因检测方法以其快速、高效、灵敏、准确的特点而广泛应用在植物油真实性和转基因成分鉴定中。

但植物油大都经过精制加工，DNA含量极少且完整度低，这对植物油的基因提取和检测造成了极大的困扰。

本文对植物油DNA提取和基因检测进展进行了综述，并对以后的发展进行了展望，以期为研究者提供一定的理论参考。

【期刊名称】《食品研究与开发》【年(卷),期】2016(000)001【总页数】5页(P220-224)【关键词】植物油;DNA提取;基因检测【作者】齐玲倩;刘秀;丁梦璇;刘远远;柯润辉;尹建军【作者单位】中国食品发酵工业研究院，北京100015;中国食品发酵工业研究院，北京100015;中国食品发酵工业研究院，北京100015;中国食品发酵工业研究院，北京100015;中国食品发酵工业研究院，北京100015;中国食品发酵工业研究院，北京100015【正文语种】中文植物油是人类日常生活的重要组成部分，但是近年来植物油市场出现了较多的掺假植物油和转基因植物油，例如掺杂大豆油、棕榈油的花生油，掺杂榛子油、杏仁油、玉米油的橄榄油和转基因大豆油，转基因菜籽油等[1-2]，这严重损害了消费者的利益，侵犯了消费者的知情权和选择权。

植物加工产品中转基因成分的检验方法技术内容篇一《植物加工产品中转基因成分检验的那些事儿——从食用油说起》咱平时做饭啊，那食用油可是少不了的东西。

就说咱家里常吃的某品牌花生油吧，有一回我就琢磨起来了，这油里头会不会有转基因成分呢？这可不是瞎操心，现在市面上各种植物加工产品五花八门的，谁知道这里头藏了啥猫腻。

于是我决定了解一下这植物加工产品中转基因成分的检验方法。

首先啊，得知道现在常用的一个技术叫PCR检测法。

啥是PCR呢？简单来说，就像是给基因做个“放大镜”，把里头那些微小的转基因片段给找出来。

想象一下，那些基因片段就像一群小小的“调皮蛋”，藏在一堆正常的基因当中。

PCR检测呢，就像是带着个超厉害的“探测镜”，能把这些“调皮蛋”一个一个揪出来。

比如说检验这花生油里头有没有转基因成分吧。

研究人员会从油的原材料也就是花生那里取样。

他们要把花生的DNA给提取出来，这过程就像是从一个装满各种东西的仓库里，把那些写着基因“密码”的小纸条找出来。

然后把提取出来的DNA放到一个小试管里，再加入一些特殊的试剂，就好像给这些小纸条加上了魔法药水。

接着呢，就是PCR仪大显身手的时候啦。

这玩意儿就像一个超级智能的小烤箱，通过不断地加热和降温，让DNA不断地复制。

就仿佛是在复印机里一次次复印那些“密码纸条”，这样哪怕那转基因的“调皮蛋”藏得再深，数量也会变得越来越多，最后就很容易被检测出来啦。

不过啊，这PCR检测也不是万能的。

有时候啊，样本被污染了，就像那仓库进了小偷，把东西都打乱了，那检测结果可能就不准确啦。

所以啊，为了保证检测的准确性，还得配合其他方法，像什么核酸杂交法之类的。

咱老百姓啊，虽然不太懂那些高科技的检测方法，但了解了解也能让咱吃得更放心不是？以后买油的时候，说不定还能念叨念叨这些转基因检测的事儿，感觉自己也像个小专家似的。

篇二《一探植物加工产品转基因成分检测的奇妙世界——以玉米制品为例》要说这植物加工产品啊，玉米制品那可是相当常见的。

食品中的转基因成分检测方法转基因技术是现代生物技术领域的一项重要技术，通过在食品作物中引入外源基因，可以提高作物的产量、抗病虫害能力以及改善其品质。

然而，随着转基因食品的广泛应用，人们对于食品中是否存在转基因成分的关注与日俱增。

因此，开发准确可靠的转基因成分检测方法成为食品安全监管和消费者权益保护的重要任务之一。

一、PCR方法PCR（聚合酶链式反应）是一种常用的转基因成分检测方法。

它通过扩增目标DNA片段，然后进行特定基因的检测，以确定食品样品中是否存在转基因成分。

PCR方法的原理是利用DNA聚合酶在模板DNA的引导下，不断扩增目标基因区段，最终可以从食品样品中获得足够数量的转基因 DNA 片段。

PCR方法具有高灵敏度、高特异性、操作简便等优点，因此被广泛应用于转基因食品的检测领域。

二、荧光定量PCR方法荧光定量PCR是PCR方法的一种改进形式。

通过引入特定的荧光探针，可以实现对转基因成分的快速、准确的定量检测。

该方法利用特定荧光探针与目标DNA结合，产生荧光信号，并通过荧光实时监测的方式，定量检测样品中的转基因成分含量。

荧光定量PCR方法具有灵敏度高、准确性强、操作简单快速等优点，被广泛应用于食品安全监管和质量控制。

三、基因芯片技术基因芯片技术是一种高通量、高灵敏度的转基因成分检测方法。

该技术通过将大量的特异性的探针固定在芯片上，可以同时检测多个基因。

食品样品的DNA与芯片上的探针发生特异性的杂交反应，然后通过荧光或其他信号检测出转基因成分的存在和含量。

基因芯片技术具有多重检测、高通量、高灵敏度等特点，能够更全面、准确地检测食品中的转基因成分。

四、下一代测序技术下一代测序技术是近年来快速发展的高通量测序技术。

它可以对DNA样本进行高效、全面的测序，并通过比对分析，检测出其中存在的转基因成分。

相较于传统的PCR方法，下一代测序技术具有高通量、高灵敏度、高分辨率等特点，能够准确检测出转基因成分的存在和含量，对于食品检测具有重要的应用前景。