乳腺癌组织中ER、PR、cerbB-2、Ki-67表达及其意义

乳腺癌组织中ER、PR、cerbB-2、Ki-67表达及其意义

刘广岚;周士福;孟东;贾泽斌

【摘 要】目的 探讨乳腺癌组织中雌激素受体( ER)、孕激素受体( PR)、cerbB-2和Ki-67基因的表达及其临床意义.方法 采用S-P免疫组化方法,检测107例乳腺癌组织中ER、PR、cerbB-2、Ki-67的表达水平,并结合其患者的相关临床资料进行分析.结果 乳腺癌组织中ER、PR、cerbB-2、Ki-67阳性表达率分别为56.1%、82.2%、71.0%、67.3%.ER、PR、cerbB-2、Ki-67阳性表达与乳腺癌腋窝淋巴结转移和临床分期显著相关(P＜0.05).而与患者年龄、肿瘤大小无相关性(P＞0.05).相关分析结果显示ER与PR表达呈正相关(P＝0.000),与Ki-67表达呈负相关(P＝0.000);PR与cerbB-2、Ki-67表达呈负相关(P＝0.012、0.006).结论 ER、PR和cerbB-2、Ki-67与乳腺癌的发生、发展有关,联合检测ER、PR、cerbB-2和Ki-67,有助于客观评估乳腺癌的生物学行为,从而指导临床治疗和预后判断.

【期刊名称】《实用癌症杂志》

【年(卷),期】2010(025)006

【总页数】4页(P595-598)

【关键词】乳腺肿瘤;雌激素;孕激素;cerbB-2基因;Ki-67基因;免疫组织化学

【作 者】刘广岚;周士福;孟东;贾泽斌

【作者单位】214062,苏州大学附属第四医院肿瘤外科;214062,苏州大学附属第四医院肿瘤外科;214062,苏州大学附属第四医院肿瘤外科;214062,苏州大学附属第四医院肿瘤外科 【正文语种】中 文

【中图分类】R737.9

乳腺癌是严重威胁女性健康最常见的恶性肿瘤之一。近年来发病率有明显的上升趋势，肿瘤的发生、发展是多因素、多步骤的复杂过程，其预后是与多种指标有关，而研究这些指标在肿瘤细胞中的表达，有助于判断乳癌的预后和指导治疗。我们通过检测ER、PR、cerbB-2和Ki-67在乳腺癌组织的表达，以探讨其在乳腺癌发生、发展中的作用。

1 材料与方法

1.1 一般资料

选取江苏省无锡市第四人民医院2008年6月～2009年12月，行根治术的乳腺癌组织标本107例。患者均为女性，年龄23～82岁，中位年龄53岁。其中导管内癌15例，浸润性导管癌82例，乳腺鳞癌10例。腋窝淋巴结转移61例，无淋巴结转移46例。TNM分期:0～Ⅰ期36例，Ⅱ期46例，Ⅲ～Ⅳ期25例。均经两位以上病理医师分别阅片，取得一致意见后重新认定。所有标本均经4%甲醛溶液固定，石蜡包埋，4μm厚连续切片，分别行HE染色和免疫组化检测。

1.2 试剂与方法

ER、PR单克隆抗体及S-P免疫组化相关试剂盒均购自北京中山金桥生物技术有限公司。采用S-P二步法免疫组化染色。切片厚约4μm，脱蜡，梯度酒精水化，高压锅热处理5～8 min进行抗原修复，PBS冲洗，3%过氧化氢阻断过氧化物酶，马血清封闭，加用一抗，4℃冰箱孵育过夜，加生物素标记的二抗，室温下30

min后PBS充分洗涤，加入S-P复合物孵育20～30 min;PBS洗3次，每次2

min;DAB显色，苏木精复染。自来水冲洗返蓝，梯度酒精脱水，中性树胶封片。用PBS代替一抗作为阴性对照，已知阳性片作为阳性对照。

1.3 结果判定

免疫组化阳性判断标准，ER、PR、Ki-67阳性细胞:细胞核有棕黄色颗粒，凡5个高倍视野阳性细胞数＞10%为阳性，否则为阴性。CerbB-2阳性为胞膜及胞质着色:阳性细胞按无着色、阳性细胞数＜1/3、1/3～2/3和 ＞2/3分别记为0、1、2、3分;阳性细胞着色强度按无着色、黄色、棕黄色和棕褐色分别记为0、1、2、3分。以两项打分之和判断其结果，≥3分为阳性。临床评估指标包括肿瘤病理类型和大小，是否有腋窝淋巴结转移及累及数目和大小。组织学分级按照WHO乳腺癌的组织学分类(2003)，根据腺管形成、细胞分化及核分裂等3项9分的评定标准，进行组织学分级，分为Ⅰ级、Ⅱ级及Ⅲ级。乳腺癌病理分期标准为2002年第六版AJCC分期标准。结果判断均由两名高年资病理科医生统一核准。

1.4 统计学分析

应用SPSS 13.0统计软件分析，样本率的比较采用χ2检验，相关性分析采用Spearman检验。

2 结果

2.1 ER、PR、cerbB-2和 Ki-67表达与乳腺癌组织临床病理特征的关系

ER、PR、cerbB-2和 Ki-67阳性表达率分别为56.1%、82.2%、71.0%和

67.3%;ER、PR 阳性表达与乳腺癌患者年龄、病理组织学类型、肿瘤大小无相关性，与淋巴结转移和临床分期相关。cerbB-2和Ki-67与有无淋巴结转移和肿瘤pTNM分期显著相关(P均＜0.05)，见表1 和表2。

2.2 ER、PR和Ki-67与cerbB-2表达的关系

ER与PR表达呈正相关，P=0.000;与Ki-67表达呈负相关，P=0.000。PR与

cerbB-2、Ki-67表达呈负相关，P 均 ＜0.05。

表1 ER、PR和cerbB-2、Ki-67表达与乳腺癌临床病理特征的关系(例，%)临床病理特征 例数 ER表达+－P值 PR表达+－P 值年龄(岁)≤45 28 12(42.9) 6(57.1)

0.101 23(82.1) 5(17.9) 0.987＞ 45 79 48(60.8) 31(39.2) 65(82.3) 14(17.7)肿块大小(cm)≤2 73 41(56.2) 32(43.8) 0.978 61(83.6) 12(16.4) 0.601＞2 34

19(55.9) 15(44.1) 27(79.4) 7(20.6)TNM分期0 ～ Ⅰ期 36 25(69.4) 11(30.6)

0.013 34(94.4) 2(5.6) 0.020Ⅱ期 46 27(58.7) 19(41.3) 37(80.4) 9(19.6)Ⅲ ～ Ⅳ期 25 17(56.1) 8(43.9) 17(68.0) 8(32.0)组织学分级Ⅰ级 27 16(59.3) 11(40.7)

0.839 25(92.6) 2(7.4) 0.124Ⅱ级 64 36(56.2) 28(43.8) 52(81.2) 12(18.8)Ⅲ ～

Ⅳ级 16 8(50.0) 8(50.0) 11(82.2) 5(17.8)淋巴结转移有61 29(47.5) 32(52.5)

0.041 47(77.0) 14(23.0) 0.105无46 31(67.4) 15(32.6) 41(89.1) 5(10.9)

表2 ER、PR和cerbB-2、Ki-67表达与乳腺癌临床病理特征的关系(例、%)临床病理特征 例数 cerbB-2表达+－P值 Ki-67表达+－P 值年龄(岁)≤45 28 21(75.0)

7(25.0) 0.590 20(71.4) 8(28.6) 0.672＞ 45 79 55(69.6) 24(30.4) 53(67.1)

26(32.9)肿块大小(cm)≤2 73 54(74.0) 19(26.0) 0.325 46(63.0) 27(37.0) 0.090＞2 34 22(64.7) 12(35.3) 27(79.4) 7(20.6)TNM分期0 ～ Ⅰ期 36 19(52.8)

17(47.2) 0.012 16(44.4) 20(55.6) 0.000Ⅱ期 46 37(80.4) 9(19.6) 34(73.9)

12(26.1)Ⅲ ～ Ⅳ期 25 76(71.0) 31(29.0) 23(68.2) 2(31.8)组织学分级Ⅰ级 27

18(66.7) 9(33.3) 0.521 15(55.6) 12(44.4) 0.246Ⅱ级 64 48(75.0) 16(25.0)

47(73.4) 17(26.6)Ⅲ ～ Ⅳ级 16 10(62.5) 6(37.5) 11(68.2) 5(31.8)淋巴结转移有61 49(80.3) 12(19.7) 0.015 53(86.9) 8(13.1) 0.000无46 27(58.7) 19(41.3)

20(43.5) 26(56.5)

3 讨论

乳腺癌是1种多因素疾病，在其发生、发展过程中伴随多种基因和蛋白的改变。相关研究［1，2］表明，乳腺癌与生物分子标志物 ER、PR、CerbB-2等有相关性。这些生物分子标志物在乳腺癌的发生发展中发挥作用，对判断肿瘤的预后及指导内分泌治疗有重要的临床意义［1，2］。通过对这些生物标志物的研究，可以更深入地认识乳腺癌的生物学行为。这些生物学指标如ER、PR、CerbB-2、Ki-67等阳性表达率文献报道不一［3］。目前将乳腺癌的生长和增殖受性激素调控的，称激素依赖性乳腺癌即ER(+)、PR(+);如果癌细胞丢失了受体，该乳腺癌的生长和增殖不再受性激素调控，则称非激素依赖性乳腺癌即 ER(－)、PR(－)［4］。ER作为1种蛋白质对雌激素有高度亲和力。ER可以反映乳腺癌细胞对雌激素的敏感性，ER阳性乳腺癌分化相对较高，预后好，对内分泌治疗敏感。雌激素与受体结合诱导产生了PR，因此，ER、PR可作为临床常用的内分泌治疗的指标。较多的临床报道显示乳腺癌内分泌治疗的有效率仅为20% ～30% ，很少能达到完全缓解(CR)。进一步研究证实，受体状况不明的乳腺癌患者，其内分泌治疗的有效率仅为30%;ER阳性患者有效率达到50% ～60%，而ER阴性患者的有效率为5% ～8%;ER、PR均为阳性者其内分泌治疗的有效率为70%［5］。本组107例乳腺癌患者的激素受体测定结果，ER阳性表达率56.1%、PR阳性表达率82.2%，经统计学分析显示ER、PR阳性表达与乳腺癌患者年龄、病理组织学类型、肿瘤大小无相关性，而两者阳性表达率与肿瘤淋巴结转移和临床分期相关。另外，相关分析显示，ER、PR与cerbB-2、Ki-67是呈负相关的。

cerbB-2基因作为乳腺癌常用基因标志之一，是1种跨膜糖蛋白，其分子量是185 kD［6］，该蛋白与表皮生长因子受体(EGFR)具有高度的同源性，故又称为人类表皮生长因子相关基因［7］，cerbB-2过表达会激活癌基因，癌变细胞内癌基因数量、性质从而发生改变。体内外研究显示cerbB-2过度表达可促进肿瘤发生［8，9］。有研究表明，cerbB-2高表达提示乳腺癌细胞的高转移潜能，表现出较强的侵袭性临床病理特征，cerbB-2也可使细胞整合素和黏合素功能异常，增强癌细胞转移能力。目前cerbB-2已被公认为是与乳腺癌发生发展密切相关的原癌基因，参与调控细胞的生长、增殖及分化，其产物过度表达常提示恶性程度高、预后差。Slamon等认为乳腺癌患者cerbB-2阳性细胞越多，染色越强，死亡、复发和转移的几率也越高。本实验研究显示，cerbB-2在乳腺癌组织中阳性表达率为71%，其阳性表达与腋窝淋巴结转移、临床病理分期显著相关，相关分析显示，cerbB-2阳性与腋窝淋巴结转移、临床病理分期呈显著正相关，可以说明cerbB-2与淋巴结转移相关，其阳性表达率越高者，淋巴结转移率越高，这与Learn报道［10］的相似。cerbB-2与乳腺癌患者年龄、肿块大小、组织学分级无相关性。

Ki-67是目前较为肯定的核增殖标记物，它开始表达于细胞周期的G1期，在S期及G2期表达增强，至M期达高峰，在细胞分裂晚期很快消失。由于其半衰期短，故已成为检测肿瘤细胞增殖活性最可靠的指标。研究表明Ki-67表达能可靠而迅速地反映恶性肿瘤增殖率，与多种恶性肿瘤的发展、转移及预后有关［11，12］。本组结果示，Ki-67与乳腺癌患者年龄、肿块大小、组织学分级无相关性，而与肿瘤病理分期、淋巴结转移呈显著正相关。相关研究［13］对68项研究进行meta分析，发现早期乳腺癌淋巴结阳性者Ki-67高表达比例增高，预后较差，提示Ki-67有促使肿瘤向淋巴结转移的能力。Ki-67增殖指数高低与多种肿瘤的分化程度、浸润、转移及预后密切相关。