测定细菌生长曲线
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细菌生长曲线的测定的实验步骤一、实验目的1. 了解细菌生长曲线特征,测定细菌繁殖的代时;2. 学习液体培养基的配制以及接种方法;3. 反复练习无菌操作技术;4. 了解不同细菌,不同接种方法在同一培养基上生长速度的不同;5. 掌握利用细菌悬液混浊度间接测定细菌生长的方法二、 实验原理将一定量的细菌接种在液体培养基内,在一定条件下培养,可观察到细菌的生长繁殖有一定的规律性,如以细菌的活菌数的对数作纵坐标,以培养时间作横坐标,可绘成一条曲线,成为生长曲线(如图一)。
图一 微生物生长曲线示意图单细胞微生物的发酵具有四个阶段,即Ⅰ调整期(延滞期)、Ⅱ对数期(生长旺盛期)、Ⅲ平衡期(稳定期)、Ⅳ死亡期(衰亡期)。
生长曲线可表示细菌从开始生长到死亡的全过程的动态。
不同的微生物有不同的生长曲线,同一种微生物在不同的培养条件下,其生长曲线也不一样。
因此,测定微生物的生长曲线对于了解和掌握微生物的生长规律是很有帮助的。
测定微生物生长曲线的方法很多,有血球计数板法、平板菌落计数法、称重法和比浊法等。
本实验采用比浊法测定,由于细菌悬液的浓度与混浊度成正比,因此,可利用分光光度计测定细菌悬液的光密度来推知菌液的浓度。
将所测得的光密度值(OD600)与其对应的培养时间作图,即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线。
注意,由于光密度表示的是培养液中的总菌数,包括活菌与死菌,因此所测定的生长曲线的衰亡期不明显。
从生长曲线我们可以算出细胞每分裂一次所需要的时间,即代时,以G 表示。
其计算公式为:2lg /)lg (lg 1212W W t t G --=式中t1和t2为所取对数期两点的时间;W1和W2分别为相应时间测得的细胞含量(g/L )或OD 。
三、 实验仪器、材料和用具1.实验材料:大肠杆菌,枯草杆菌菌液及平板;2.培养基:牛肉膏蛋白胨葡萄糖培养基3.实验仪器:取液器(5000ul, 1000ul 各一支);培养箱, 摇床,722s分光光度计;4.实验用具:无菌1000ul吸头80个;无菌5000ul吸头2个;比色皿9个+共用参比杯一个.四、实验步骤1.准备菌种:将细菌接种到牛肉膏蛋白胨葡萄糖三角瓶培养基中,37℃振荡培养18h,另外准备单菌落平板各1块2.分为三个小组:第(1)小组取1.0ml大肠杆菌菌液接种到100ml培养基, 37 ℃ 200rpm取3.0ml大肠杆菌菌液接种到100ml培养基,37 ℃ 200rpm取5.0ml大肠杆菌菌液接种到100ml培养基,37 ℃ 200rpm第(2)小组取一个大肠杆菌菌落接种到100ml培养基, 37 ℃ 200rpm取1.0ml大肠杆菌菌液接种到100ml培养基,37 ℃ 110rpm取1.0ml大肠杆菌接种到100ml培养基, 30 ℃ 200rpm第(3)小组取1.0ml枯草杆菌接种到100ml培养基, 37 ℃ 200rpm取1.0ml枯草杆菌接种到100ml培养基, 30 ℃ 200rpm取1.0ml枯草杆菌接种到100ml培养基, 37 ℃ 110rpm每培养一小时取样一次(2.5h,3.5h加测1次). 对照组测量起始pH,所有瓶子测量发酵9h结束测pH.3.测量:选用600nm波长,以蒸馏水作为参比,开始培养前测定每组培养液的OD值作为起始点。
测定细菌生长曲线一、实验目的1.了解细菌生长曲线特征,测定细菌繁殖的代时;2.学习液体培养基的配制以及接种方法;3.反复练习无菌操作技术;4.了解不同细菌,不同接种方法在同一培养基上生长速度的不同;5.掌握利用细菌悬液混浊度间接测定细菌生长的方法;二、实验原理将一定量的菌种接种在液体培养基内,在一定的条件下培养,可观察到细菌的生长繁殖有一定规律性,如以细菌活菌数的对数做纵坐标,以培养时间做横坐标,可绘成一条曲线,称为生长曲线。
单细胞微生物发酵具有4个阶段,即调整期(迟滞期)、对数期(生长旺盛期)、平衡期(稳定期)、死亡期(衰亡期)。
生长曲线可表示细菌从开始生长到死亡的的全过程动态。
不同微生物有不同的生长曲线,同一种微生物在不同的培养条件下,其生长曲线也不一样。
因此,测定微生物的生长曲线对于了解和掌握微生物的生长规律是很有帮助的。
测定微生物生长曲线的方法很多,有血细胞计数法,平板菌落计数法,称重法和比浊法。
本实验才用比浊法,由于细胞悬液的浓度与混浊度成正比,因此,可以利用分光光度计测定菌悬液的光密度来推知菌液的菌液的浓度。
将所测得的光密度值(OD600)与对应的培养时间做图,即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线。
注意,由于光密度表示的是培养液中的总菌数,包括活菌和死菌,因此所测生长曲线的衰亡期不明显。
从生长曲线我们可以算出细胞每分裂一次所需要的时间,即代时,以G表示,其计算公式为:G=(t2-t1)/[(lgW1-lgW2)/lg2]式中t2和t1为所取对数期两点的时间,W1和W2分别为对应时间测得的细胞含量或OD。
三、实验器材大肠杆菌,枯草杆菌菌液及平板;培养基(100mL/250mL三角瓶×10瓶/大组):牛肉膏蛋白胨葡萄糖培养基;取液器(5000ul, 1000ul 各一支),无菌1000ul吸头若干,无菌5000ul吸头若干,比色皿10个及共用参比杯一个,培养箱3台,722s分光光度计;四、实验步骤1.活化菌种将细菌接种到牛肉膏蛋白胨葡萄糖三角瓶培养基中,37℃振荡培养18h,另外准备单菌落平板各1块;2.接种6人大组分为3个小组,按表1接种。
细菌生长曲线及特点细菌生长曲线及特点细菌是微生物界中数量繁多的一类生物,它们的生长规律是生物学研究的重要内容之一。
细菌的生长曲线是描述细菌在培养基中生长繁殖过程中细胞数量随时间的变化规律的图表。
通过研究细菌生长曲线及其特点,可以更好地了解细菌的生长机理、调控因素和生物学特性,对于生态学、医药学以及食品工业的微生物控制等领域有着重要的意义。
一、细菌生长曲线的基本形态细菌生长曲线通常呈现出经典的四个阶段:潜伏期、指数期、平稳期和死亡期。
1. 潜伏期(Lag phase):细菌刚转入新环境时,需要适应新的生长条件,此时细菌的生长速度较慢,细菌数量几乎不变。
细菌在此期通过合成必要的酶、蛋白质等物质来适应环境。
2. 指数期(Log phase):此阶段为快速增长期,细菌开始进入高度增殖状态。
细菌数量呈指数级增长,代表着细菌的快速繁殖。
这是因为细菌在此时处于最适合生长的温度、pH值、营养成分等条件下,利用培养基中的营养物质大量繁殖。
3. 平稳期(Stationary phase):该阶段细菌的繁殖速度逐渐减慢,细菌数量达到一个相对稳定状态。
此时细菌的分裂速度与死亡速度相互平衡,其中营养物质的消耗和废物的积累是导致生长停滞的主要原因。
4. 死亡期(Death phase):此阶段细菌数量开始逐渐减少,细菌中的死亡速度远远大于新细菌的产生速度。
营养物质的枯竭、有毒物质的积累以及母细胞的衰老等因素,都会导致细菌的死亡和生长的终止。
二、细菌生长曲线的特点1. 不同种类细菌具有不同的生长周期和生长速度。
一般而言,细菌的生长周期可从几小时到几天不等。
某些嗜热菌能在高温下迅速繁殖,而一些室温菌对温度的要求较低。
2. 细菌生长曲线呈现出的四个阶段可以反映细菌生长的动态变化。
通过观察曲线的形态,可以判断细菌在特定环境下的适应能力以及生长特性。
3. 细菌生长曲线的特点与培养基、环境条件、温度、氧气含量等因素密切相关。
不同的培养基和环境条件对细菌的生长有直接影响,而温度和氧气含量对细菌的生长速度和类型也有重要的影响。
蜡样芽孢杆菌生长曲线的测定蜡样芽孢杆菌是一种常见的细菌,它在生物学和医学领域中都有着重要的应用。
为了更好地了解蜡样芽孢杆菌的生长规律,科学家们通常会使用生长曲线来进行测定。
本文将介绍蜡样芽孢杆菌生长曲线的测定方法和结果。
一、蜡样芽孢杆菌的生长特点蜡样芽孢杆菌是一种革兰氏阳性菌,它的生长需要一定的温度和营养物质。
在适宜的条件下,蜡样芽孢杆菌的生长速度非常快,可以在短时间内形成大量的细胞。
同时,蜡样芽孢杆菌的生长也受到环境因素的影响,如温度、pH值、营养物质等。
蜡样芽孢杆菌生长曲线的测定通常采用光密度法。
具体步骤如下:1.准备培养基:将适量的蜡样芽孢杆菌接种到含有营养物质的培养基中,使其在适宜的条件下生长。
2.测定光密度:在培养过程中,每隔一段时间就用分光光度计测定培养液的光密度。
光密度的值反映了细胞数量的变化,因此可以用来绘制生长曲线。
3.绘制生长曲线:将测定到的光密度值绘制成时间的函数图像,即可得到蜡样芽孢杆菌的生长曲线。
三、蜡样芽孢杆菌生长曲线的结果分析蜡样芽孢杆菌的生长曲线通常可以分为四个阶段:潜伏期、指数期、平稳期和衰退期。
1.潜伏期:在培养开始的早期,蜡样芽孢杆菌的生长速度较慢,此时的生长曲线呈现出一个平缓的上升趋势。
2.指数期:当蜡样芽孢杆菌适应了培养条件后,它的生长速度会迅速加快,此时的生长曲线呈现出一个急剧上升的趋势。
3.平稳期:当蜡样芽孢杆菌的生长速度达到最大值后,它的生长速度会逐渐趋于稳定,此时的生长曲线呈现出一个平缓的上升趋势。
4.衰退期:当蜡样芽孢杆菌的生长环境变得不适宜时,它的生长速度会逐渐减缓,此时的生长曲线呈现出一个下降的趋势。
通过对蜡样芽孢杆菌生长曲线的测定和分析,我们可以更好地了解蜡样芽孢杆菌的生长规律,为其在生物学和医学领域中的应用提供更加准确的数据支持。
蜡样芽孢杆菌生长曲线的测定是一项非常重要的实验技术,它可以帮助我们更好地了解蜡样芽孢杆菌的生长规律,为其在生物学和医学领域中的应用提供更加准确的数据支持。
竭诚为您提供优质文档/双击可除细菌生长曲线的测定实验报告篇一:细菌生长曲线实验九测定细菌生长曲线[实验目的]1.了解细菌生长曲线特征:2.学习液体培养基的配制以及注意事项。
3.学习液体种子和固体种子的不同接种方法和注意事项。
4.利用细菌悬液浑浊度间接测定细菌生长。
[仪器和材料]1.实验材料(1)大肠杆曲,枯草杆曲培养液及大肠杆菌平板。
(2)牛肉膏蛋门胨葡萄糖培养基(150ml/250ml三角瓶x4瓶/大组),配方:牛肉膏5g,蛋白胨10g,nacl5g,葡萄糖10g,加水至1000ml,ph7.5。
2.实验仪器取液器(5000μl,1000μl,200tμl各一支);培养箱.摇床,722s分光光度汁;1000μl无菌吸头100个;5000μl 无菌吸头2(:细菌生长曲线的测定实验报告)个;1ml或4ml 玻璃或塑料比色皿4个,共用参比杯一个。
[实验原理]将一定量的细菌接种在液体培养基内.在一定的条件下培养,可观察到细菌的生长繁殖有一定规律性,如以细菌活菌数的对数作纵坐标,以培养时间作横坐标,可绘成一条曲线,称为生长曲线(图91)。
单细胞微生物发酵具有4个阶段,即调整(迟滞期)、对数期(生长旺盛期)、平衡期(稳定期)、死亡期(衰亡期)。
生长曲线可表示细菌从开始生长到死亡的全过程动态。
不同微生物有不同的生长曲线,同一种微生物在不同的培养条件下,其生长曲线也不一样。
因此,测定微生物的生长曲线对于了解和掌握微生物的生长规律是很有帮助的.测定微生物生长曲线的方法很多,有血细胞计数法,平板菌落计数法,称重法和比浊法等。
本实验采用比浊法测定,由于细菌悬液的浓度与浑浊度成正比,因此,可以利用分光光度计测定菌悬液的光密度来推知菌液的浓度。
将所测得的光密度值(测oD550或oD620或oD600或oD420,可任选一波长)与对应的培养时间作图,即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线。
注意,由于光密度表示的是培养液中的总菌数,包括活菌与死菌,因此所测生长曲线的衰亡期不明显。
实验酵母菌等单细胞微生物生长曲线的测定1 目的要求(1)了解酵母菌、细菌等单细胞微生物生长曲线的特点及测定原理;(2)学习用血球计数板计数法和比浊法分别测定酵母和细菌的生长曲线。
2 基本原理生长曲线是单细胞微生物在一定环境条件下于液体培养时所表现出的群体生长规律。
测定时一般将一定数量的微生物纯菌种接种到一定体积的已灭菌的适宜的新鲜培养液中,在适温条件下培养,定时取样测定培养液中菌的数量,以菌数的对数为纵坐标,生长时间为横坐标,绘制得到生长曲线。
不同的微生物其生长曲线不同,同一微生物在不同培养条件下其生长曲线亦不同。
但单细胞微生物的生长曲线规律基本相同,生长曲线一般分为延迟期、对数期、稳定期和衰亡期四个时期。
测定一定培养条件下的微生物的生长曲线对科研和实际生产有一定的指导意义。
测定生长曲线时需要对生长的单细胞微生物定时取样计数,对于酵母细胞和比较大的细菌细胞可采用血球计数板计数法计数,亦可采用比浊法计数,但对于小的细菌细胞一般采用比浊法。
比浊法是根据培养液中菌细胞数与混浊度成正比,与透光度成反比的关系,利用光电比色计测定菌悬液的光密度值(OD值),以OD值来代表培养液中的浊度即微生物量,然后以培养时间为横坐标,以菌悬液的OD值为纵坐标绘出生长曲线。
此方法所需设备简单,操作简便、迅速。
血球计数板法是利用一块血球计数板来进行计数的。
血球计数板是一块特制的厚玻璃片,中央平台比两边平台低0.1mm,上有两个被精细刻化为400个小方格的格网,面积为1mm2,加盖盖玻片后即构成0.1 mm3体积的计数室。
血球计数板有两种规格:一种是将1 mm2面积的网格划分为25个大格,每个大格再分成16个小格,既25´16;另一种为16´25。
计数时只需无菌操作将稀释到适宜浓度的菌悬液取一滴从盖玻片一侧渗入到计数室,待静置平衡后于显微镜高倍镜下计数,用下面公式算出菌液中细胞数。
单细胞微生物细胞数/mL=5个中格内细胞数¸5´25(或16)´104´菌液稀释倍数3 实验材料3.1 菌种酵母菌和大肠杆菌。
[精品]细菌生长曲线的测定细菌生长曲线的测定是细菌学中的一项重要实验。
它可以帮助我们了解细菌的生长繁殖规律及其影响因素,为控制细菌繁殖提供理论依据。
本次实验将介绍如何通过外观观察、菌落计数及测定细菌生物量的方法,获得细菌在液体培养基中的生长曲线。
实验步骤:一、准备实验材料和试剂1、选取一种细菌菌株,本次实验选择了大肠杆菌(Escherichia coli);2、配置好液体培养基,一般为普通营养琼脂培养基、肉汤培养基等;3、消毒好实验室的工作台面及实验仪器;4、准备好移液管、试管、比色管和加热消毒的线圈镊子等实验用具。
二、制备不同浓度的菌液1、挑选一根菌棒,从培养基上接入一些带有细菌的菌落,将菌落均匀涂抹于培养基表面;2、将含有细菌的培养基放置在恒温摇床中,在适宜的温度下进行培养;3、当细菌生长至一定程度(一般在对数生长期)时,用无菌的移液管,在培养基中取出一定量的菌液;4、分别将不同体积的菌液加入到含有培养基的试管中,制备成不同浓度的菌液。
三、测定不同浓度菌液对应的OD600值1、将制备好的不同浓度菌液放入洗涤过的比色管中;2、由于细菌太小,肉眼观察不能得出其数量的增多或减少,因此需要使用分光光度计在600nm处测量各个浓度的菌液的吸光度(OD)值;3、重复测量3次,取平均值计算OD600;4、根据OD600值和菌液中细胞数量的线性关系,可通过OD600值推算出细胞数。
2、每隔2-3个小时,取出一定量的菌液,测量其OD600值,记录下菌液对应时间的值;3、采用计数培养法,每隔一定时间取出一定体积的菌液,进行菌落数的计数;4、利用OD600值曲线和菌落数曲线绘制出细菌生长曲线。
实验注意事项:1、实验期间需在无菌条件下操作,防止细菌的外界感染对实验结果的影响;2、实验者需佩戴适当的防护手套及实验服,以免对人体造成伤害;3、制备好菌液后需要及时放置在摇床中,防止菌落外的细菌感染进去;4、测量OD600值时比色管必须清洗干净,用甲醇或无菌去离子水。
细菌的生化实验报告细菌的生化实验报告细菌是微生物界中最为常见的一类生物,它们以其微小的身躯和巨大的生物活动而闻名。
在本次实验中,我们旨在探索细菌的生化特性和其在环境中的作用。
通过实验,我们对细菌的生长、代谢和适应能力有了更深入的了解。
实验一:细菌的生长曲线在这个实验中,我们选择了大肠杆菌作为研究对象。
我们将大肠杆菌接种在培养基上,并在一定时间间隔内记录细菌的生长情况。
通过测量培养液中的细菌数量,我们绘制了细菌的生长曲线。
结果显示,细菌的生长曲线呈现出典型的“S”形曲线。
在实验初期,细菌数量增长较为缓慢,这是由于适应期的存在。
随着时间的推移,细菌进入了指数增长期,细菌数量迅速增加。
然而,随着培养基中营养物质的消耗和代谢产物的积累,细菌的生长速率逐渐减缓,进入了平台期。
这是由于细菌的生长受到了环境条件的限制。
实验二:细菌的代谢特性在这个实验中,我们研究了细菌的代谢特性,特别是其对碳源的利用能力。
我们选择了葡萄糖、乳糖和蔗糖作为碳源,通过测量细菌在不同碳源下的生长情况,评估了细菌对不同碳源的利用能力。
结果显示,大肠杆菌对葡萄糖的利用能力最强,其次是乳糖,而对蔗糖的利用能力较弱。
这表明细菌对碳源的利用能力存在差异,可能与其代谢途径和酶的分布有关。
此外,我们还观察到在不同碳源条件下,细菌的生长速率和产生的代谢产物也有所不同。
这提示我们,在实际应用中,选择合适的碳源可以促进细菌的生长和代谢活性。
实验三:细菌的适应能力在这个实验中,我们研究了细菌的适应能力,特别是其对环境压力的响应。
我们将大肠杆菌分别接种在不同的培养基中,其中一组培养基中添加了抗生素,另一组培养基中添加了高温。
结果显示,添加抗生素的培养基中,细菌的生长受到了明显的抑制。
抗生素通过抑制细菌的代谢活性和细胞分裂,从而阻碍了细菌的生长。
而在高温条件下,细菌的生长速率明显减慢,部分细菌甚至无法生存。
这表明细菌对环境压力的适应能力有限,过高的温度和抗生素的存在可能对细菌产生不可逆的影响。
实验七 测定细菌生长曲线一、实验目的1. 了解细菌生长曲线特征,测定细菌繁殖的代时;2. 学习液体培养基的配制以及接种方法;3. 反复练习无菌操作技术;4. 了解不同细菌,不同接种方法在同一培养基上生长速度的不同;5. 掌握利用细菌悬液混浊度间接测定细菌生长的方法二、 实验原理将一定量的细菌接种在液体培养基内,在一定条件下培养,可观察到细菌的生长繁殖有一定的规律性,如以细菌的活菌数的对数作纵坐标,以培养时间作横坐标,可绘成一条曲线,成为生长曲线(如图一)。
图一 微生物生长曲线示意图单细胞微生物的发酵具有四个阶段,即Ⅰ调整期(延滞期)、Ⅱ对数期(生长旺盛期)、Ⅲ平衡期(稳定期)、Ⅳ死亡期(衰亡期)。
生长曲线可表示细菌从开始生长到死亡的全过程的动态。
不同的微生物有不同的生长曲线,同一种微生物在不同的培养条件下,其生长曲线也不一样。
因此,测定微生物的生长曲线对于了解和掌握微生物的生长规律是很有帮助的。
测定微生物生长曲线的方法很多,有血球计数板法、平板菌落计数法、称重法和比浊法等。
本实验采用比浊法测定,由于细菌悬液的浓度与混浊度成正比,因此,可利用分光光度计测定细菌悬液的光密度来推知菌液的浓度。
将所测得的光密度值(OD600)与其对应的培养时间作图,即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线。
注意,由于光密度表示的是培养液中的总菌数,包括活菌与死菌,因此所测定的生长曲线的衰亡期不明显。
从生长曲线我们可以算出细胞每分裂一次所需要的时间,即代时,以G 表示。
其计算公式为:2lg /)lg (lg 1212W W t t G --=式中t1和t2为所取对数期两点的时间;W1和W2分别为相应时间测得的细胞含量(g/L )或OD 。
三、 实验仪器、材料和用具1. 实验材料:大肠杆菌,枯草杆菌菌液及平板;2. 培养基:牛肉膏蛋白胨葡萄糖培养基3.实验仪器:取液器(5000ul, 1000ul 各一支);培养箱, 摇床,722s分光光度计;4.实验用具:无菌1000ul吸头80个;无菌5000ul吸头2个;比色皿9个+共用参比杯一个.四、实验步骤1.准备菌种:将细菌接种到牛肉膏蛋白胨葡萄糖三角瓶培养基中,37℃振荡培养18h,另外准备单菌落平板各1块2.分为三个小组:第(1)小组取1.0ml大肠杆菌菌液接种到100ml培养基, 37 ℃200rpm取3.0ml大肠杆菌菌液接种到100ml培养基,37 ℃200rpm取5.0ml大肠杆菌菌液接种到100ml培养基,37 ℃200rpm第(2)小组取一个大肠杆菌菌落接种到100ml培养基,37 ℃200rpm取1.0ml大肠杆菌菌液接种到100ml培养基,37 ℃110rpm取1.0ml大肠杆菌接种到100ml培养基,30 ℃200rpm第(3)小组取1.0ml枯草杆菌接种到100ml培养基,37 ℃200rpm取1.0ml枯草杆菌接种到100ml培养基,30 ℃200rpm取1.0ml枯草杆菌接种到100ml培养基,37 ℃110rpm每培养一小时取样一次(2.5h,3.5h加测1次). 对照组测量起始pH,所有瓶子测量发酵9h结束测pH.3.测量:选用600nm波长,以蒸馏水作为参比,开始培养前测定每组培养液的OD值作为起始点。
开始培养后,每小时吸取测定一次OD值。
五、实验结果及分析1.实验数据:表一三个小组时间-OD数据开始取样时间10:55 12:01 12:39 13:17 13:53 结束取样时间9:55 11:01 12:09 12:47 13:23 13:59 发酵时间0 1 2 2.5 3 3.5ODt 大肠杆菌单菌落0.004 0.024 0.027 0.027 0.025 0.036 37℃110rpm -0.010 0.049 0.164 0.255 0.312 0.327 30℃200rpm -0.010 0.043 0.088 0.158 0.242 0.3611.0mL 0.010 0.070 0.158 0.266 0.372 0.4363.0mL 0.039 0.096 0.257 0.373 0.420 0.4515.0mL 0.067 0.134 0.302 0.361 0.334 0.456 枯草杆菌37℃200rpm 0.008 0.023 0.076 0.132 0.184 0.254 30℃200rpm 0.013 0.032 0.052 0.088 0.091 0.125 37℃110rpm 0.007 0.017 0.098 0.130 0.230 0.253OD=ODt-OD0 大肠杆菌单菌落0.004 0.020 0.023 0.023 0.021 0.032 37℃110rpm -0.010 0.059 0.174 0.265 0.322 0.337 30℃200rpm -0.010 0.053 0.098 0.168 0.252 0.3711.0mL 0.010 0.060 0.148 0.256 0.362 0.4263.0mL 0.039 0.057 0.218 0.334 0.381 0.4125.0mL 0.067 0.067 0.235 0.294 0.267 0.389开始取样时间 14:29 15:35 16:43 17:50 18:57 19:07 20:12结束取样时间 14:35 15:43 16:50 17:57 19:09 20:07 21:12 发酵时间 45 6 7 8 9 10 ODt 大肠杆菌 单菌落0.065 0.267 0.395 0.454 0.457 37℃110rpm 0.3330.340 0.342 0.360 0.362 30℃200rpm 0.4390.566 0.570 0.588 0.586 1.0mL0.464 0.446 0.446 0.458 0.440 3.0mL0.487 0.470 0.457 0.483 0.458 5.0mL0.469 0.457 0.464 0.482 0.478 枯草杆菌37℃200rpm 0.3370.428 0.517 0.590 0.686 0.711 0.711 30℃200rpm 0.1710.261 0.370 0.540 0.628 0.606 0.652 37℃110rpm 0.2950.302 0.305 0.305 0.352 0.352 0.378 OD=ODt-OD大肠杆菌 单菌落0.061 0.263 0.391 0.450 0.453 37℃110rpm 0.3430.350 0.352 0.370 0.372 30℃200rpm 0.4490.576 0.580 0.598 0.596 1.0mL0.454 0.436 0.436 0.448 0.430 3.0mL0.448 0.431 0.418 0.444 0.419 5.0mL0.402 0.390 0.397 0.415 0.411 枯草杆菌37℃200rpm 0.3290.420 0.509 0.582 0.678 0.703 0.703 30℃200rpm 0.1580.248 0.357 0.527 0.615 0.593 0.639 37℃110rpm 0.2880.295 0.298 0.298 0.345 0.345 0.3712. 作图、简要分析及代时计算:1) 取一个大肠杆菌菌落接种到100ml 培养基, 37 ℃ 200rpm图一 单菌落大肠杆菌生长曲线这条曲线属于比较标准的“S ”形曲线,很容易看出调整期和对数期,由于单菌落菌较少,而且从固体培养基转移至液体培养基环境变化较大,所以出现了长达4小时的调整期,但可以看出,调整期之后这瓶菌都生长良好。
枯草杆菌37℃200rpm 0.0080.015 0.068 0.124 0.176 0.246 30℃200rpm 0.0130.019 0.039 0.075 0.078 0.112 37℃110rpm 0.0070.0100.0910.1230.2230.246计算代时:取培养4小时到5小时之间的数据(对数生长期)来计算代时。
由代时计算公式,t 2-t 1=1h W 1=0.061 W 2=0.263 代时2lg /)lg (lg 1212W W t t G --=h h474.02lg /)061.0lg 263.0(lg 1=-=2) 取1.0ml 大肠杆菌菌液接种到100ml 培养基,37 ℃ 110rpm图二 大肠杆菌菌生长曲线(取1.0ml 大肠杆菌接种到100ml 培养基,37 ℃110rpm )接种后几乎没有调整期出现,大肠杆菌很快适应了新的环境并开始呈指数增长,估计是新的培养环境和原有环境较一致,而且在培养最初的时候溶氧和酸碱度都较为适宜,但是这瓶菌是稳定期OD 最小的,估计是培养基最初分装不均产生的。
计算代时:取培养2小时到2.5小时之间的数据(对数生长期)来计算代时。
由代时计算公式,t 2-t 1=0.5h W 1=0.174 W 2=0.265 代时2lg /)lg (lg 1212W W t t G --=h h824.02lg /)174.0lg 265.0(lg 5.0=-=3) 取1.0ml 大肠杆菌菌液接种到100ml 培养基,30 ℃ 200rpm图三 大肠杆菌生长曲线(取1.0ml 大肠杆菌接种到100ml 培养基,30 ℃ 200rpm ) 可以看出温度对大肠杆菌适应环境产生了一定的影响,使它在调整期滞留了较长的时间,且在对数期增长较慢,应该是酶活性对细胞复制的影响所致。
计算代时:取培养2.5小时到3.5小时之间的数据(对数生长期)来计算代时。
由代时计算公式,t 2-t 1=1h W 1=0.168 W 2=0.371 代时2lg /)lg (lg 1212W W t t G --=h h875.02lg /)168.0lg 371.0(lg 1=-=4) 取1.0ml 大肠杆菌菌液接种到100ml 培养基, 37 ℃ 200rpm图四 大肠杆菌生长曲线(取1.0ml 大肠杆菌接种到100ml 培养基, 37 ℃ 200rpm ) 这是大肠杆菌培养的最适调节,可以看出其生长良好,调整期较短,对数期较长。
计算代时:取培养2小时到3小时之间的数据(对数生长期)来计算代时。
由代时计算公式,t 2-t 1=1h W 1=0.148 W 2=0.362代时2lg /)lg (lg 1212W W t t G --=h h775.02lg /)148.0lg 362.0(lg 1=-=5) 取3.0ml 大肠杆菌菌液接种到100ml 培养基,37 ℃ 200rpm图五 大肠杆菌生长曲线(取3.0ml 大肠杆菌接种到100ml 培养基,37 ℃ 200rpm ) 接种量的增加没有产生太大的影响,生长曲线没有太大变化。