CD5分子对套细胞淋巴瘤细胞株Jeko-1化疗敏感性的影响及其机制研究

淋巴瘤相关基因的功能及临床意义张莹;甘润良【摘要】淋巴瘤的发生、发展和其他恶性肿瘤一样,有众多的基因参与其中.某些基因与淋巴瘤的发生有关,如间变性大细胞淋巴瘤中PRF1基因突变,套细胞淋巴瘤中SOCS3基因缺失及甲基化等与淋巴细胞的恶性增殖有关;某些基因与淋巴瘤的诊断有关,如检测BCL10基因突变、CDH1基因甲基化、MALT1基因重组等有助于淋巴瘤的临床诊断或者类型的鉴别;某些基因与淋巴瘤的治疗有关,如治疗前后PIG-3基因表达出现改变,IL-10基因的不同基因型患者对同种治疗的反应不同等;某些基因与淋巴瘤的预后有关,如P15启动子甲基化、CDKN2A缺失等与生存指标有关,可作为淋巴瘤的预后指标.【期刊名称】《医学研究杂志》【年(卷),期】2016(045)001【总页数】4页(P174-177)【关键词】淋巴瘤;基因;功能;临床意义【作者】张莹;甘润良【作者单位】421001 衡阳,南华大学肿瘤研究所;421001 衡阳,南华大学肿瘤研究所【正文语种】中文【中图分类】R73恶性淋巴瘤是原发于淋巴结和结外淋巴组织的恶性肿瘤，简称淋巴瘤。

按病理组织学的不同，可分为两大类：霍奇金淋巴瘤和非霍奇金淋巴瘤。

目前发现大量的基因异常改变如突变、甲基化、缺失、易位、重组等，可能导致淋巴瘤的发生，并有助于淋巴瘤的临床诊断、治疗和提示预后。

认识这些基因的功能及其可能的临床意义，对于揭示淋巴瘤的发病机制以及临床诊疗、预后具有重要意义，本文就该领域的研究进行综述。

L20、 MAdCAM-1、CCR6基因：Takata等[1]研究十二指肠滤泡性淋巴瘤(DFL)的发生机制，用PCR和免疫组织化学分析72例组织样本，包括十二指肠滤泡淋巴瘤(DFL)，胃黏膜相关淋巴组织(MALT)淋巴瘤和淋巴结滤泡淋巴瘤(NFL)样本,3种类型淋巴瘤差异表达基因(DEG)的表达谱表明，十二指肠滤泡淋巴瘤和MALT淋巴瘤有共同的特点，CCL20和MAdCAM-1在DFL和MALT淋巴瘤中上调，但在NFL中下调，双重免疫荧光显示,CCL20和CCR6在DFL和MALT淋巴瘤中均共同表达，得出CCL20和MAdCAM-1的高表达和CCL20和CCR6的共同表达在十二指肠滤泡性淋巴瘤发生中起着重要作用。

doi:10.3969/j.issn.1000⁃484X.2020.14.021㊃专题综述㊃CD5及其在自身免疫性疾病中的作用研究进展①贺　欣　邢莉民　邵宗鸿　(天津医科大学总医院血液科,天津300052) 中图分类号　R593.2 文献标志码　A 文章编号　1000⁃484X (2020)14⁃1766⁃05①本文受国家自然科学基金(81770118,81970116)资助㊂作者简介:贺　欣,女,在读博士,主要从事血液系统疾病免疫功能异常方面的研究㊂通讯作者及指导教师:邵宗鸿,男,博士,教授,主任医师,博士生导师,主要从事造血系统疾病免疫功能异常方面的研究,E⁃mail:shaozonghong@㊂[摘　要]　CD5是主要分布在T 淋巴细胞及少量B 淋巴细胞表面的大分子糖蛋白,不仅参与固有免疫反应,还调控T㊁B 淋巴细胞介导的特异性免疫反应,并通过TCR 和BCR 信号通路影响T㊁B 淋巴细胞的生物学特性及功能㊂CD5在T 细胞中通过与CK2结合共同调节后续信号通路的功能及活性,而B 细胞中的B1a 细胞也可特异性表达CD5使其在免疫过程中发挥作用㊂自身免疫性疾病是机体对自身抗原发生免疫反应而导致自身组织损害而引起的疾病,研究发现CD5参与多种自身免疫性疾病过程㊂本文综述CD5及其在自身免疫性疾病中的作用的研究进展,为CD5在自身免疫性疾病的临床靶向治疗提供新观点和研究思路㊂[关键词]　CD5;自身免疫性疾病;CK2;B1a 细胞Research progress of CD5and its role in autoimmune diseasesHE Xin ,XING Li⁃Min ,SHAO Zong⁃Hong .Department of Hematology ,General Hospital of Tianjin Medical University ,Tianjin 300052,China[Abstract ]　CD5is a macromolecule glycoprotein mainly distributed on T lymphocyte and a small number of B lymphocyte.It notonly participates in innate immune response,but also regulates specific immune response mediated by T and B lymphocyte,and affectsbiological characteristics and functions of T and B lymphocyte by TCR and BCR signaling pathways.CD5regulates function and activity of subsequent signaling pathways by binding to CK2in T cells,while B1a cells in B cells can specifically express CD5and play roles inimmune process.Autoimmune disease is a kind of disease caused by autoimmune reaction to autoantigen,which results in autoimmune tissue damage.CD5has been found to be involved in pathogenesis of many autoimmune diseases.In this paper,we will review progress of CD5and its role in autoimmune diseases,and provide new ideas and research ideas for clinical targeting therapy of CD5in various autoimmune diseases.[Key words ]　CD5;Autoimmune diseases;CK2;B1a cells CD5是一种同时表达于T 淋巴细胞和B1a 淋巴细胞表面的大分子跨膜糖蛋白,作为T 淋巴细胞受体(TCR)信号通路中的共刺激分子,同时负调控B 淋巴细胞受体(BCR)信号通路[1]㊂本文对CD5参与自身免疫性疾病的发病过程综述如下㊂1　CD5概述CD5的分子量为67KD,位于人染色体11q12.2区域㊂研究发现约80%~90%CD5表达于T 细胞,10%~20%CD5表达于B1a 细胞[2]㊂小鼠树突状细胞(DC)表面表达少量CD5分子,影响DC 功能,小鼠巨噬细胞也可表达少量CD5,辅助激活固有免疫系统抵抗外界病原体[3,4]㊂富含半胱氨酸的CD5主要由347个氨基酸残基组成的胞外区和93个氨基酸残基组成的胞内区共同构成,胞外区结构中包含3个富含半胱氨酸结构域和1个疏水跨膜区,胞内区主要包含高度保守元件及潜在的酪氨酸和丝氨酸/苏氨酸磷酸化位点[5]㊂CD5的配体尚未明确,目前发现CD5可与多种糖蛋白如gp35⁃40㊁gp150和gp200等相互作用㊂作为清道夫受体家族成员之一,CD5可与真菌细胞壁的葡聚糖或丙型肝炎病毒等物质结合,提示上述分子均可能是CD5的配体[6]㊂CD5的胞质尾部具有由苏氨酸和酪氨酸残基组成的起激活作用的伪ITAM基序(免疫受体酪氨酸基激活基序),是非受体酪氨酸激酶Src家族的LcK(lymphocyte⁃specific protein tyrosine kinase)和Fyn(proto⁃oncogene tyrosine⁃protein kinase)等的结合位点㊂细胞膜近端具有起抑制作用的伪免疫受体酪氨酸基抑制基序(ITIM),与细胞内含SH2域的蛋白质酪氨酸磷酸酶1(SH2⁃containing tyrosine phosphatase1,SHP⁃1)结合发挥作用[7]㊂2　CD5与T淋巴细胞T淋巴细胞中,CD5胞质尾部存在负向调控TCR信号通路的结构域,包括Y429㊁Y441和Y463,其中Y429和Y441酪氨酸残基在功能上属于ITIM 基序㊂CD5羧基末端的S458⁃S461结构域可与T淋巴细胞内的酪蛋白激酶2(CK2)特异性结合[8]㊂过表达CD5可通过IL⁃6抑制信号转导子和转录激活子(signal transduction and activator of transcription, STAT)3的磷酸化,增加T淋巴细胞数量并改善其功能㊂CD5抑制IL⁃4等细胞因子和PI3K/Akt等途径,调控T淋巴细胞的增殖和凋亡[9]㊂CD5和T淋巴细胞CD3交联可诱导Bcl⁃2表达,Akt下游因子在CD5介导的保护T淋巴细胞免受Fas介导凋亡过程中起重要作用㊂研究发现CD5主要依赖TCR介导多种信号通路调控CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞的增殖和活化功能,CD4+T淋巴细胞表达水平比CD8+T淋巴细胞更高,且更加依赖于TCR信号[10]㊂T淋巴细胞的激活需要CD3和TCR结合, NFAT因子或Ca2+/钙调磷酸酶启动下游NF⁃κB等核因子,促进IL⁃1和IFN⁃α等细胞因子分泌,促进T 细胞增殖和分化㊂位于CD5分子尾部的Y463也可对CD3⁃CD5连接酶进行磷酸化,促进或抑制T淋巴细胞活化[11]㊂c⁃Cbl㊁RasGAP或PI3K等TCR信号通路负调控相关蛋白均与CD5尾部包含的429㊁441或463等酪氨酸残基密切相关[12]㊂利用抗CD5单克隆抗体阻断CD5可诱导CD8+T淋巴细胞内部的Fas/FasL凋亡㊂细胞因子的刺激可下调CD5表达,促进CD8+T淋巴细胞增殖,说明CD5调节CD8+T 细胞表达并提高其抗原反应性[13]㊂CK2是丝氨酸/苏氨酸激酶,通过磷酸化途径调节T淋巴细胞免疫功能[14]㊂研究发现CK2参与STAT3和STAT5激活,是Th17细胞和Th2细胞分化的重要因子㊂CD5⁃CK2途径可通过与TCR信号相互作用启动后续激活因子,促进Th0细胞向Th2和Th17细胞极化[15]㊂CD5和CK2结合后可激活PI3K/Akt通路并负向调节ERK因子的磷酸化,敲除CD5和CK2基因可降低TCR诱导的Akt表达量[16]㊂CD5⁃CK2信号途径诱导Akt通路活化,增强Th17细胞对IFN⁃γ的抑制作用,其下游的ERK分子激活介导Th17细胞分化的mTOR通路,同时增强Th17细胞中RORγt因子进入细胞核和激活核内因子转录的功能[17]㊂因此CK2是CD5启动后调节T 细胞功能和活性的重要分子和下游信号㊂3　CD5与B淋巴细胞慢性淋巴细胞性白血病(CLL)患者的B淋巴细胞表面发现CD5表达,CD5也存在于健康志愿者的骨髓㊁脾脏和淋巴结的B淋巴细胞亚群中㊂B淋巴细胞依据表面分子分为B1细胞和B2细胞(传统B 细胞),根据其是否表达CD5又可将B1细胞分为B1a(CD5+B细胞)和B1b细胞两种亚型[18]㊂CD5+ B细胞可产生低亲和力IgM等抗体或分泌IL⁃10等细胞因子抵御病原微生物感染,还可产生类风湿因子㊁抗单链DNA抗体和抗组蛋白抗体等多种自身抗体,在特异性免疫反应中发挥作用[19]㊂B淋巴细胞中CD5通过激活肉瘤病毒相关癌基因同源物(Lyn)等关键酶参与BCR信号通路的转导,通过对BCR胞质尾部ITIM磷酸化或与细胞内SHP⁃1因子结合等方式负向调节BCR复合物[20]㊂研究发现CD5结构中的Y429和Y441酪氨酸残基参与抑制BCR信号[21]㊂转录因子E1B是专一表达于B1a细胞中CD5的mRNA外显子,可通过下调常规外显子E1A数量影响细胞表面CD5表达㊂研究发现高水平E1B因子可降低CD5对BCR复合体的抑制作用降低,进而降低B1a细胞内抗体数量和抑制其活性[22]㊂因此CD5在B1a细胞的内部活化调控过程中起关键作用㊂CD5与BCR复合物中的CD79a异源二聚体结合影响B1a细胞增殖和凋亡㊂CD5通过激活B淋巴细胞STAT3或NFAT2等,调控并改变B淋巴细胞中IgM或IL⁃10等基因表达[23]㊂研究发现PI3K/ mTOR通路主要负责调节B淋巴细胞的增殖和分化,抑制PI3K因子活性可诱导B1a细胞凋亡[24]㊂Ca2+及其通道的动员反应则可诱导转录因子NFAT2活化,与BCR共同作用使NFAT2转移至细胞核内调节IL⁃2㊁IL⁃4㊁IL⁃10㊁TNF⁃β和IFN⁃γ等多种靶基因转录[25]㊂Toll样受体(TLR)家族是非特异性免疫的重要蛋白质,尤其是TLR7和TLR9作为细胞内受体可在CD5+B细胞中直接影响细胞功能和耐受性㊂TLR7和TLR9与BCR信号相关联后,促进Myd88和NF⁃κB因子向细胞核内易位[26]㊂CD5在B1a细胞中和PI3K/mTOR㊁Ca2+/NFAT㊁TLR/ Myd88/NF⁃κB等3种信号通路均相关㊂研究发现CD5可降低BCR结合后B淋巴细胞内的Ca2+动员, CD5通过Ca2+依赖途径促进MAPK信号活化,导致ERK通路磷酸化和IL⁃10生成[27]㊂此外CD5还通过激活关键激酶促进PI3K/Akt/mTOR通路激活[28]㊂说明CD5可活化和调控B1a细胞中关键信号通路㊂4　CD5在自身免疫性疾病中的作用4.1　CD5与风湿性疾病　类风湿关节炎(RA)是以滑膜炎和软骨损伤为特征并伴有骨丢失的慢性全身炎症性疾病,CD5参与RA发病过程㊂CD5通过调节Treg细胞数量和细胞因子IL⁃10或TGF⁃β的分泌抑制骨吸收并促进破骨细胞增殖[29]㊂Moura 等[30]发现RA患者CD5+B淋巴细胞数量增多,并与RA的疾病严重程度呈正相关㊂通过基因定位的方法将CD5基因确定为与RA相关的遗传风险因素,同时发现CD5+B细胞数目和比例可反映RA患者的遗传背景[31]㊂目前临床治疗RA的重组人CD22等单克隆抗体主要作用于T淋巴细胞和CD5+B细胞,疗效较好[32]㊂提示CD5可能是治疗RA等自身免疫性疾病的潜在靶点㊂T㊁B淋巴细胞在系统性红斑狼疮(SLE)的发病过程中发挥重要作用,与编码T淋巴细胞中TCR相关基因的突变密切相关,CD5通过TCR信号通路调控T淋巴细胞,参与SLE发病过程[33]㊂Omar等[34]发现SLE患者体内CD5+B细胞出现凋亡,CD5数量下调[34]㊂研究发现SLE患者B淋巴细胞DNA甲基化水平降低,导致B1a细胞特异性转录因子E1B数量增加,降低CD5表达,而B淋巴细胞内IL⁃6可降低E1B因子转录[35]㊂因此抗IL⁃6单克隆抗体治疗SLE可为CD5调控B淋巴细胞活性提供证据㊂4.2　CD5与胰岛素依赖型糖尿病　胰岛素依赖型糖尿病又称1型糖尿病,主要由T淋巴细胞介导的胰岛β细胞破坏从而导致胰岛素绝对缺乏所致㊂CD5在胰岛素依赖型糖尿病发病过程中调控B淋巴细胞㊂Saxena等[36]发现1型糖尿病患者血液中检测出胰岛细胞抗体和谷氨酸脱羧酶抗体等多种自身免疫抗体,并且与CD5+B细胞数量呈正相关㊂Vonberg等[37]发现CD5在1型糖尿病患者B细胞中促进IL⁃10等免疫因子分泌㊂Schuldt等[38]发现自身免疫性糖尿病模型小鼠中CD5通过Treg细胞中TCR复合物调控胰岛β细胞数量和功能㊂抗CD5免疫疗法对T淋巴细胞介导的1型糖尿病具有一定疗效,靶向抗CD5分子的治疗方法是其潜在治疗策略,但尚需深入临床研究㊂4.3　CD5与自身免疫性血细胞减少症　自身免疫性血细胞减少症是由免疫异常㊁免疫失耐受导致的自身免疫性疾病,分为以B淋巴细胞分泌自身抗体损伤血细胞为主和T淋巴细胞分泌细胞因子损伤血细胞为主的血细胞减少㊂由B淋巴细胞引起的自身免疫性血细胞减少症包括自身免疫性溶血性贫血(AIHA)㊁免疫性血小板减少症(ITP)㊁Evans综合征和免疫相关性全血细胞减少症(IRP)等,CD5+B 淋巴细胞在此类疾病中起重要作用[39]㊂AIHA是体内免疫功能紊乱,产生自身抗体或补体吸附于红细胞表面并通过抗原抗体反应加速红细胞破坏而引起的溶血性贫血[40]㊂AIHA患者外周血中B细胞和CD5+B细胞数量增多,且CD5+B细胞数量与补体C3呈负相关,与间接胆红素呈正相关,与Evans综合征患者血小板抗体PAIgG和PAIgM均呈正相关,说明CD5+B细胞的数量与AIHA的严重程度呈正相关,与临床疗效呈负相关[41]㊂Zhu等[42]研究发现AIHA患者CD5+B细胞处于活化状态,其表面的活化分子既与CD5-B细胞不同,也与CLL克隆性CD5+B细胞不同,CD5+B细胞表面主要表达CD80和CD86,而CD40和CD69在CD5+和CD5-B细胞表达差异无统计学意义㊂Zhao等[43]发现AIHA和Evans综合征患者的CD5+ B细胞主要通过分泌免疫因子IL⁃10而不是TGF⁃β1诱导疾病发生㊂B细胞亚群BCR信号通路下游的关键分子主要为Bruton酪氨酸激酶(BTK)及磷酸化BTK(p⁃BTK),B细胞亚群内BTK表达水平无统计学差异,但是CD5+B细胞内p⁃BTK的水平明显高于CD5-B细胞,且与IgE水平呈正相关[44]㊂因此AIHA患者CD5+B细胞数量增加㊁活性异常㊁分泌IL⁃10功能增强㊁BCR信号通路异常,且CD5+B㊁CD5-B细胞存在差异㊂ITP是以血小板减少㊁骨髓巨核细胞正常或增多㊁成熟障碍且原因不明为特征的免疫性血小板减少症㊂研究发现ITP患者外周血CD5+B细胞数量和血清IL⁃10表达降低,给予大剂量地塞米松可纠正其CD5+B细胞数量及IL⁃10因子分泌能力[45]㊂Gudbrandsdottir等[46]研究发现使用利妥昔单抗和地塞米松进行联合治疗后,更加调节和改善ITP患者骨髓内CD5+B细胞的数量和功能㊂IRP是由于抗骨髓造血细胞的自身抗体抑制和骨髓造血细胞破坏引起外周血细胞降低的自身免疫性血细胞减少性疾病,Shao等[47]应用骨髓单个核细胞(BMMNC)悬液BMMNC⁃Coombs试验通过证实IRP的发病机制可能与异常免疫介导的造血细胞破坏有关㊂研究发现IRP由于体内B淋巴细胞功能亢进而分泌多种类型的针对骨髓造血功能自身抗体从而破坏或抑制骨髓造血细胞最终引起外周血细胞减少㊂CD5+B细胞数量增多且功能亢进,凋亡相关指数明显降低,说明CD5+B淋巴细胞在IRP发病机制中起关键作用[48]㊂因此诱导CD5+B淋巴细胞凋亡,或下调CD5分子活性可环节免疫性血细胞减少症患者病情㊂采用基因敲除法消除CD5+B细胞或直接敲除B细胞中的CD5分子可用于该类疾病治疗㊂CD5分子在免疫性血细胞减少症中如何对CD5+B细胞进行更深层次的调控有待进一步研究㊂5摇展望CD5作为大分子糖蛋白,可在免疫过程中促进T淋巴细胞增殖和活化,辅助T淋巴细胞发挥调节功能,并且激活B1a细胞产生细胞因子和自身抗体㊂自身免疫性疾病主要包括RA㊁SLE㊁胰岛素依赖性糖尿病和自身免疫性血细胞减少症等,与T淋巴细胞和B淋巴细胞的数量和活性密切相关㊂CD5分子既可协助T细胞调节自身免疫性疾病的多种免疫平衡,又可以在B细胞中产生自身抗体清除部分自身病理性抗原,参与各种自身免疫性疾病发病过程㊂针对CD5分子的靶向治疗药物将成为新的免疫治疗方法和研究方向㊂参考文献:[1]　Papoudou⁃Bai 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CD4+CD25+调节性T细胞与肿瘤免疫治疗的新进展======================================================================作者：翟海龙，雷丹琼，程震勇，胡敏【摘要】 CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+ regulatory T cells,CD4+CD25+ Tregs)可抑制机体对肿瘤的免疫应答，导致不利于肿瘤患者的对肿瘤的免疫耐受。

以降低CD4+CD25+Tregs作用，增强对肿瘤的免疫应答为新策略的肿瘤免疫治疗探索已有初步进展。

方法包括去除CD4+CD25+Tregs、单克隆抗体、蛋白分子转移、阻断Tregs的迁移和分化、逆转Tregs的分化、阻断Tregs的功能、疫/瘤苗、将Tregs调控与其他治疗模式相组合、提升抑制效应细胞的阈值。

【关键词】 CD4+CD25+调节性T细胞; 肿瘤; 免疫治疗Abstract：CD4+CD25+ regulatory T cells(CD4+CD25+ Tregs) can suppress the useful immune response against tumors, which lead to immune tolerance to tumors in tumor patients. The tumor immunotherapy based on the new strategy which decreases the function of CD4+CD25+ Tregs and enhances the immune response against tumors has been explored. The methods were consisted of the depletion ofCD4+CD25+Tregs, monoclonal antibodies, protein molecule transfer, blocking Tregs trafficking and differentiation, subverting Tregs differentiation, blocking Tregs effector functions, vaccine, combining Treg management with other treatment modalities and raising suppressed effector cell threshold.Key words：CD4+CD25+ regulatory T cells; Tumor; Immunnotherapy调节性T细胞(regulatory T cells, Tregs)包括自然Tregs(normal regulatory T cells,n Tregs)以及适应性Tregs(adaptive regulatory T cells,a Tregs)。

地西他滨抗套细胞淋巴瘤胞株Jeko-1作用机制的研究耿梅;费爱梅;刘静静;聂瑞敏;王瑾;糜坚青【摘要】背景与目的:套细胞淋巴瘤(mantle cell lymphoma,MCL)是一种难治性的恶性肿瘤,预后差.地西他滨对骨髓异常增生综合征及难治性急性髓性白血病的治疗临床上已达成共识,但是目前鲜有地西他滨对MCL作用的报道.本文探讨地西他滨抗MCL细胞的作用机制.方法:以MCL细胞株Jeko-1作为研究对象,采用MTT 法检测地西他滨对细胞增殖的影响,Annexin V/PI双重染色法检测其对细胞凋亡的影响,采用DiOC6(3)染色/流式细胞术检测Jeko-1细胞线粒体跨膜电位的丢失,Western blot检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)及凋亡途径相关蛋白的表达,用亚硫酸氢盐测序(bisulfate sequencing PCR,BSP)技术检测地西他滨作用Jeko-1细胞前后PCDH8基因启动子CpG岛的甲基化水平变化.结果:地西他滨能有效抑制Jeko-1细胞的增殖并诱导其凋亡,凋亡率呈时间和剂量依赖性增加,并引起MCL细胞线粒体跨膜电位丢失,Cyclin D1蛋白表达水平降低,caspase 3、caspase 9表达水平增加.本研究另发现Jeko-1细胞中PCDH8基因启动子CpG岛的甲基化率为76.67%,经过0.5 μmol/L低浓度的地西他滨处理72 h后,其甲基化率下降至48.33%.结论:地西他滨在对MCL细胞的作用中,高浓度时起到细胞毒作用,低浓度时则具有去甲基化作用,为今后的临床治疗提供了新的理论依据.%Background and purpose: Mantle cell lymphoma (MCL) is one of the refractory malignant tumors with very poor prognosis.The treatment of decitabine against myelodysplastic syndrome and refractory acute myeloid leukemia has been widely applied.However, the effectiveness of decitabine against MCL cell lines has not been reported.This study was to explore the mechanisms of action of decitabine (DAC) against Jeko-1 MCL cellline.Methods: Jeko-1 cells were treated with different concentrations of DAC, cell growth rate was detected by MTT assay.Apoptosis of Jeko-1 cells treated with DAC was detected by using flow cytometry (FCM) after double staining with Annexin V-FITC/PI.The collapse of mitochondrial membrane potential of Jeko-1 cells treated with DAC was detected by FCM after staining with DiOC6(3).The expression of Cyclin D1 and apoptosis related proteins was detected by using Western blot.The CpG methylation of PCDH8 in Jeko-1 cells was detected by Bisulfite sequencing PCR (BSP).Results: Decitabine was capable of inhibiting cell growth, inducing apoptosis of MCL cells and disrupting mitochondrial membrane potential.DAC could not only decrease Cyclin D1 expression, but also increase expression of Caspase-3 and Caspase-9.The hypermethylation of PCDH8 gene (76.67％) was identified in Jeko-1 cells.After treatment with 0.5 μmol/L DAC fo r 72 h, the methylation of CpG on gene PCDH8 decreased to 48.33％.Conclusion: The mechanisms of decitabine against Jeko-1 MCL cell line was cytotoxic effect at high concentration and hypomethylation effect at low concentration.Therefore, this study provides a theory basis of new drug application for the treatment of MCL.【期刊名称】《中国癌症杂志》【年(卷),期】2011(021)003【总页数】6页(P161-166)【关键词】套细胞淋巴瘤;地西他滨;凋亡;线粒体途径;去甲基化【作者】耿梅;费爱梅;刘静静;聂瑞敏;王瑾;糜坚青【作者单位】上海交通大学医学院附属瑞金医院上海血液学研究所,医学基因组学国家重点实验室,肿瘤放化疗科,上海,200025;中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物研究所,上海,200031;上海交通大学医学院附属瑞金医院上海血液学研究所,医学基因组学国家重点实验室,上海,200025;上海交通大学医学院附属瑞金医院上海血液学研究所,医学基因组学国家重点实验室,上海,200025;上海交通大学医学院附属瑞金医院上海血液学研究所,医学基因组学国家重点实验室,血液科,上海,200025;上海交通大学医学院附属瑞金医院上海血液学研究所,医学基因组学国家重点实验室,血液科,上海,200025【正文语种】中文【中图分类】R73-36+1套细胞淋巴瘤(mantle cell lymphoma，MCL)约占非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin’s lymphoma，NHL)的6%［1］，WHO描述其最显著的遗传学特征是t(11；14)(q13；q32)易位，导致Cyclin D1的过表达［2］。

第 50 卷第 2 期2024年 3 月吉林大学学报（医学版）Journal of Jilin University（Medicine Edition）Vol.50 No.2Mar.2024DOI：10.13481/j.1671‐587X.20240219通用转录因子2I在胶质母细胞瘤替莫唑胺化疗抵抗中的作用周建国1, 姜红建1, 朱其辉2, 张耿强2, 邓琪琳2, 齐玲2, 李凯舒2, 于洪泉1（1. 吉林大学第一医院神经肿瘤外科，吉林长春130021；2. 广州医科大学附属清远医院神经外科，广东清远511518）［摘要］目的目的：探讨通用转录因子2I（GTF2I）在胶质母细胞瘤（GBM）替莫唑胺化疗抵抗中的作用，并阐明其作用机制。

方法方法：基于转录因子预测网站（PROMO网站），生物信息学分析GBM组织中甲基转移酶1（DNMT1）、损伤特异性DNA结合蛋白1（DDB1）、染色盒同源物5（CBX5）和着色性干皮病基因组C（XPC）的共同转录因子，并基于癌症基因组图谱（TCGA）数据库进行DDB1、CBX5、XPC和DNMT1与GTF2I和甲基鸟嘌呤甲基转移酶（MGMT）的相关性分析及生存分析。

分别用小干扰序列（siRNA）转染并沉默人脑多形性成胶质细胞瘤T98细胞和人脑胶质瘤LN229细胞中MGMT及GTF2I的基因表达，采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测上述基因的mRNA表达水平。

沉默GTF2I基因后，平板克隆形成实验检测肿瘤细胞的集落形成能力，CCK-8法检测细胞对替莫唑胺的敏感性。

结果：生物信息学分析，GBM组织中DDB1、CBX5、XPC和DNMT1表达水平与GTF2I表达水平呈显著正相关关系（P<0.05），与MGMT表达水平呈负相关关系（P<0.05）；GTF2I表达水平与MGMT表达水平呈显著负相关关系（P<0.05）。

剔除未接受替莫唑胺治疗的GBM患者的生存分析，GTF2I高表达的患者总体生存时间降低。

恶性肿瘤患者化疗前后外周血淋巴细胞凋亡的变化周振英;张军妮;朱月清;吴晓柳【期刊名称】《实用癌症杂志》【年(卷),期】1998(013)002【摘要】为了探讨肿瘤化疗机理,作者采用流式细胞术单参数分析方法,检测了45例恶性肿瘤患者化疗前后外周血细胞的凋亡(Apo)、S期细胞比率(SPF)和增殖指数(PI)的变化.结果表明,肿瘤患者血细胞Apo水平明显高于正常对照(P＜0.01),化疗结束时进一步升高(P＜0.01),化疗后1个月又恢复到化疗前的水平.肿瘤患者的SPF 和PI均显著高于正常对照(P＜0.01),化疗结束时明显减低,PI尤为显著(P＜0.01),并持续到化疗后1个月.从而可见,化疗使患者血细胞Apo呈"一过性"增高,肿瘤的化疗机制主要是化疗药物使细胞增殖活性减低,细胞聚积在G0/G1期,同时药物诱导细胞凋亡增加,达到治疗肿瘤的目的.【总页数】3页(P118-120)【作者】周振英;张军妮;朱月清;吴晓柳【作者单位】江苏省肿瘤防治研究所,南京市,210009;江苏省肿瘤防治研究所,南京市,210009;江苏省肿瘤防治研究所,南京市,210009;江苏省肿瘤防治研究所,南京市,210009【正文语种】中文【中图分类】R73【相关文献】1.晚期恶性肿瘤患者化疗前后外周血T淋巴细胞亚群监测及临床意义 [J], 王勇2.晚期恶性肿瘤患者化疗前后外周血T淋巴细胞亚群监测及临床意义 [J], 袁博3.消化道恶性肿瘤患者化疗前后外周血T淋巴细胞亚群变化及其对PG-SGA评分的影响 [J], 胡琴; 殷飞; 张涛; 黄浩; 王可武4.晚期恶性肿瘤患者化疗前后外周血T淋巴细胞亚群监测及临床意义 [J], 江红; 毛红森5.晚期恶性肿瘤患者化疗前后外周血T淋巴细胞亚群监测及临床意义 [J], 江红;毛红森因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

苯丁酸氮芥联合伊布替尼对套细胞淋巴瘤Jeko-1细胞株的作用及相关机制蔡妮娜;刘婉艺;刘志强;龚佳惠;林艺玲;王泽川;黄月琴;郭健欣【期刊名称】《中国实验血液学杂志》【年(卷),期】2024(32)1【摘要】目的:探讨苯丁酸氮芥联合伊布替尼对套细胞淋巴瘤Jeko-1细胞株的抑制作用及相关机制。

方法:分别将不同浓度的苯丁酸氮芥、伊布替尼单药及两药联合作用于Jeko-1细胞株,采用CCK-8检测细胞增殖情况,同时采用Western blot 检测细胞中BCL-2、caspase-3、PI3K、AKT、P-AKT蛋白表达的变化。

结果:分别用苯丁酸氮芥(3.125、6.25、12.5、25、50μmol/L)及伊布替尼(3.125、6.25、12.5、25、50μmol/L)单药处理Jeko-1细胞株24、48和72 h后,细胞增殖均受到抑制,且抑制作用呈时间及剂量依赖性,两药联合时抑制作用更明显(均P<0.05)。

与对照组相比,苯丁酸氮芥(3.125、6.25、12.5、25、50μmol/L)及伊布替尼(3.125、6.25、12.5、25、50μmol/L)单药组细胞凋亡率增加,呈剂量依赖性;与相应剂量(3.125、6.25、12.5μmol/L)单药组比较,两药联合应用组Jeko-1细胞株的凋亡率明显增加(均P<0.05)。

与单药组相比,两药联合时可产生协同作用,Jeko-1细胞的caspase-3表达明显增强,BCL-2、PI3K、p-AKT/AKT表达明显减弱(均P<0.05)。

结论:苯丁酸氮芥及伊布替尼能够促进套细胞淋巴瘤Jeko-1细胞株的凋亡,两药联合应用可以产生协同作用,其主要是通过AKT相关信号通路发挥作用。

【总页数】6页(P132-137)【作者】蔡妮娜;刘婉艺;刘志强;龚佳惠;林艺玲;王泽川;黄月琴;郭健欣【作者单位】福建医科大学附属第二医院血液科【正文语种】中文【中图分类】R733.1【相关文献】1.培门冬酶抗人套细胞淋巴瘤细胞株Jeko-1细胞作用机制的研究2.硼替佐米联合阿霉素对套细胞淋巴瘤细胞株Jeko-1的杀伤作用及机制研究3.苯丁酸氮芥抗套细胞淋巴瘤细胞株Jeko-1作用机制的研究因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

免疫性血细胞减少症中CD5+B淋巴细胞的研究进展朱红丽【期刊名称】《国际输血及血液学杂志》【年(卷),期】2015(038)004【摘要】根据是否表达CD5分子B淋巴细胞可分为CD5+B淋巴细胞与CD5-B 淋巴细胞2个亚群,CD5+B淋巴细胞以其争议性的来源、独特的表型、分泌多样性抗体,以及在免疫性血细胞减少症中所起的作用与CD5-B淋巴细胞有显著区别.笔者拟就CD5+B淋巴细胞的结构、功能、活性及活化通路、其与免疫性血细胞减少症的关系进行综述.%According to the expression of CD5 molecule,B lymphocyte can be divided into CD5+ and CD5-lymphocyte.CD5+ B lymphocyte has controversial origin and characteristic phenotype,and secrets auto-antibodies evolved in autoimmunic cytopenia.This article reviews literatures on the structure,function,activity and signaling pathway of CD5+ B lymphocyte,and the relationship of CD5+ B lymphocyte and autoimmunic cytopenia.【总页数】5页(P330-334)【作者】朱红丽【作者单位】300052 天津医科大学总医院血液科【正文语种】中文【相关文献】1.CD5+B淋巴细胞与自身免疫性疾病2.免疫相关性全血细胞减少症(IRP)B淋巴细胞及其CD5+B数量检测的临床意义3.淋巴细胞亚群异常在原发免疫性血小板减少症发病机制中的研究进展4.慢性淋巴细胞白血病合并自身免疫性血细胞减少症的诊断与治疗进展5.慢性淋巴细胞白血病并发自身免疫性血细胞减少症7例因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。