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预习交流 3
萌发的种子长成一个完整的植株属于植物组织培养吗?为什么? 提示:不属于。只有离体的组织或细胞培养成一个完整植株的过程才是 植物组织培养,而幼苗是个体,其培养过程不属于植物组织培养。
课题1
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菊花的组织培养
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KETANG HEZUO TANJIU
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菊花的组织培养
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三、实验操作
1.制备 MS 固体培养基 分为配制各种母液、配制培养基和灭菌三步。 2.外植体消毒 在外植体消毒中所用的消毒剂有洗衣粉、体积分数为 70%的酒精和质 量分数为 0.1%的氯化汞溶液等。 3.接种 植物组织培养中,外植体的接种需要在无菌条件下进行;在每个培养瓶 中插入 6~8 块外植体。
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4.培养 培养过程要在无菌箱中进行,培养温度为 18~22℃,每天光照 12 h。 5.移栽 试管苗在移栽前,首先打开封口膜,在培养间生长几日。 然后用流水清洗 根部培养基,将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段 时间,待其长壮后再移栽到土壤中。 6.栽培 试管苗移栽到土壤中后,每天观察并记录幼苗生长情况,适时浇水和施 肥,直至开花。
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预习交流 1
植物细胞具有全能性是植物组织培养获得成功的前提和基础 ,不同类 型的细胞全能性不同。 (1)细胞具有全能性的原因是什么? 提示:几乎所有的细胞(个别细胞例如哺乳动物成熟的红细胞除外)都含 有本物种生长发育所需的全套遗传物质,储存的遗传信息在一定的条 件下可以表达出来。 (2)在完整的植物体内,已分化植物细胞的全能性能表达吗?为什么? 提示:不能表达。因为细胞分化具有不可逆转性。 (3)从细胞结构角度分析,什么样的真核细胞才具有全能性?为什么? 提示:具有细胞核的细胞。 因为真核细胞的 DNA 主要储存在细胞核里。 (4)你能说出不同细胞全能性的大小关系吗? 提示:①受精卵>生殖细胞>体细胞;②植物细胞>动物细胞;③分裂能力 强的细胞>分裂能力弱的细胞;④全能性最高的细胞是受精卵。
一、植物组织培养的基本过程
活动与探究 1 1.在生物体内,细胞并不表现出全能性,而是分化为不同的组织、器官的 原因是什么? 提示:细胞全能性表达的基本条件之一是离体状态。 例如,植株上的分生 组织细胞在体内只能进行分裂分化,形成不同的组织,但不能表达出全 能性,这是生物体内基因程序性表达的结果。
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2.愈伤组织有何特点?什么叫脱分化? 提示:愈伤组织具有细胞排列疏松而无规则、细胞壁薄、高度液泡化而 呈无定形状态等几个特点。由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组 织的过程,称为植物细胞的脱分化,或者叫做去分化。 3.什么叫再分化?你能用流程图表示植物组织培养的生物学过程吗? 提示:脱分化产生的愈伤组织继续培养,重新分化成根或芽等器官的过 程叫做再分化。植物组织培养的生物学过程可表示为 : 离体的植物组织或细胞(外植体) 植物体 愈伤组织 根、芽
专题 3
植物的组织培养技术
课题 1 菊花的组织培养
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1.说出植物组织培养的基本原 理。 2.记住植物组织培养的基本技术。 3.进行菊花或其他植物的组织培养。
课题1
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预习交流 2
植物组织培养需要配制的 MS 培养基中各营养物质的作用是什么? 提示:微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐;蔗糖提 供碳源,同时维持细胞的渗透压;甘氨酸、维生素等物质,主要是满足离 体植物细胞的特殊营养要求。
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菊花的组织培养
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一、植物组织培养的基本过程
1.理论基础:植物细胞的全能性。当植物细胞脱离了原来所在植物体的 器官或组织而处于离体状态时,在一定的营养物质、激素和适宜的其他 外界条件的作用下,就可能表现出全能性。 2.细胞分化:在植物的个体发育过程中,细胞在形态、结构和生理功能上 出现稳定性差异的过程。 3.植物组织培养过程 离体的植物组织或细胞(又称为外植体)→脱分化形成愈伤组织→再分化 形成根、芽→培养形成试管苗→移栽到地里发育成完整植株。 (1)愈伤组织:由离体的植物组织或细胞经脱分化形成的一团排列疏松 而无规则、高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。 (2)脱分化:又叫去分化,是由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织 的过程。 (3)再分化:愈伤组织继续培养,重新分化成根或芽等器官的过程。
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二、影响植物组织培养的因素
1.内部因素 不同的植物组织,培养的难易程度差别很大;同一种植物材料,材料的年 龄、保存时间的长短等也会影响实验结果。 2.外部因素 (1)营养成分:常用的一种培养基是 MS 培养基,主要成分包括: 大量元素,如 N、P、K、Ca、Mg、S 等; 微量元素,如 B、Mn 等; 有机物,如甘氨酸、维生素、蔗糖等。 (2)植物激素:启动细胞分裂、 脱分化和再分化的关键性激素是生长素和 细胞分裂素,二者的使用浓度、使用的先后顺序及比例等都会影响实验 结果。 (3)其他因素:pH、温度、光照等。