胶体金的性质
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胶体金稀释液成分胶体金稀释液是一种常用的纳米材料溶液,由胶体金颗粒和稀释剂组成。
胶体金是一种具有特殊光学性质和生物相容性的纳米金属颗粒,被广泛应用于生物医学领域、光学传感器、纳米材料制备等众多领域。
其制备过程简单,应用广泛,具有极高的应用潜力。
胶体金稀释液的主要成分是胶体金颗粒和稀释剂。
胶体金颗粒是由纳米尺度的金粒子组成的胶体溶液,其粒径可以控制在几纳米至几十纳米的范围内。
这些胶体金颗粒通常具有良好的分散性和稳定性,可以在稀释液中均匀分散,并保持较长时间的稳定性。
稀释剂主要是溶解金颗粒并保持胶体金稳定性所必需的溶液,常见的稀释剂包括水、乙醇、甘氨酸等。
稀释剂的选择往往根据具体的应用需求和胶体金稀释液的使用环境而变化。
胶体金稀释液的制备过程一般分为两步:首先是合成胶体金颗粒。
合成胶体金颗粒的方法有多种,常用的方法包括化学还原法、光化学法、溶胶-凝胶法等。
这些方法通过控制反应条件和添加适当的还原剂、表面活性剂等,可以合成出具有一定形貌和粒径分布的胶体金颗粒。
其次是将合成得到的胶体金颗粒稀释到所需浓度的溶液中。
稀释的目的是为了得到适用于具体应用需求的胶体金稀释液,并确保其稳定性和分散性。
胶体金稀释液具有许多重要的应用。
在生物医学领域,胶体金被广泛用于生物分子的标记和检测、药物递送、光热治疗等。
由于其表面的可调控性和生物相容性,胶体金颗粒可用于标记和检测生物大分子,如蛋白质、核酸等,为生物医学研究提供了很多便利。
胶体金还可通过表面的修饰和功能化,实现对药物的有效封装和靶向输送,提高药物的生物利用度和治疗效果。
此外,胶体金还可以通过光热转换效应对癌细胞进行热疗,提供一种新的肿瘤治疗策略。
在光学传感器领域,胶体金的特殊光学性质被广泛应用于光学传感器的制备和检测。
由于其表面等离激元共振效应的存在,胶体金颗粒对于入射光的吸收和散射具有高度灵敏的响应。
利用这一特性,可以制备出基于胶体金颗粒的高灵敏度和高选择性的光学传感器用于检测环境中的化学物质、生物分子等。
胶体金的原理胶体金是一种纳米材料,其原理主要是基于金属纳米颗粒的特性和胶体溶液的性质。
金属纳米颗粒具有较大的比表面积和量子尺寸效应,使得其具有许多特殊的物理、化学性质,而胶体溶液则是由纳米颗粒均匀分散在溶剂中形成的。
胶体金的原理主要包括合成方法、表面修饰、物理化学性质以及应用等方面。
首先,胶体金的合成方法主要有溶剂热法、还原法、光化学法等。
其中,溶剂热法是将金盐在有机溶剂中还原得到金纳米颗粒;还原法是通过还原剂将金离子还原成金原子,形成纳米颗粒;光化学法则是利用光照射使金盐还原成金纳米颗粒。
这些合成方法可以控制纳米颗粒的形貌、尺寸和分散度,从而影响其性质和应用。
其次,胶体金的表面修饰对其性质和应用也有重要影响。
通过表面修饰可以改变纳米颗粒的表面化学性质,使其具有不同的亲疏水性、生物相容性和功能化基团,从而拓展其在生物医学、催化、传感等领域的应用。
此外,胶体金的物理化学性质也是其原理的重要组成部分。
金纳米颗粒具有表面等离子共振吸收效应,使得其在可见光范围内具有特定的吸收峰;同时,金纳米颗粒还表现出局域化表面等离子共振效应,使得其在电磁场作用下产生局域增强效应,从而被广泛应用于表面增强拉曼光谱、光热治疗等领域。
最后,胶体金在生物医学、催化、传感等领域的应用也是其原理的重要体现。
在生物医学领域,胶体金被广泛应用于生物成像、药物输送、光热治疗等方面;在催化领域,胶体金纳米颗粒具有良好的催化性能,可用于催化还原、氧化反应等;在传感领域,胶体金纳米颗粒可作为传感器的信号标记物,用于检测生物分子、环境污染物等。
综上所述,胶体金的原理涉及到合成方法、表面修饰、物理化学性质和应用等方面,其在纳米材料领域具有重要的地位和广泛的应用前景。
通过对胶体金原理的深入了解,可以更好地发掘其潜在应用价值,推动其在各领域的应用和研究。
胶体金免疫层析技术原理胶体金免疫层析技术是一种基于胶体金颗粒的分析方法,常用于生物医学领域的分子检测和诊断。
该技术的原理是利用胶体金颗粒与特定抗原或抗体的高度特异性结合能力,通过可视化或仪器测量的方式实现目标分子的定量或定性分析。
胶体金是一种具有特殊光学性质的纳米材料,其颗粒大小一般在10-100纳米之间。
这种材料具有高度的稳定性和生物相容性,并且在可见光范围内具有强烈的吸收和散射光谱特性。
在胶体金免疫层析技术中,胶体金颗粒表面通常被修饰上特定的抗原或抗体。
在分析过程中,样品中的目标分子与胶体金颗粒表面的抗体结合形成复合物。
这种结合通常是由于抗原与抗体之间的特异性配对引起的。
复合物的形成会导致胶体金颗粒的聚集或分散状态发生变化。
胶体金免疫层析技术通常采用纸条或膜作为载体。
样品在载体上流动时,复合物会在特定位置停留,形成可见的信号线。
这个信号线的强度与目标分子的浓度成正比。
通过测量信号线的长度、颜色强度或使用专门的仪器分析,可以确定目标分子的存在与否以及其浓度。
胶体金免疫层析技术具有以下优点:1. 高度特异性:由于抗原与抗体之间的高度特异性结合,胶体金免疫层析技术可以准确地检测目标分子,避免了其他杂质的干扰。
2. 灵敏度高:胶体金颗粒具有强烈的吸收和散射光谱特性,使得该技术能够检测到非常低浓度的目标分子。
3. 快速简便:胶体金免疫层析技术通常只需要几分钟到几小时的时间完成分析,操作简单,不需要复杂的仪器设备。
4. 可视化结果:该技术可以通过肉眼观察或简单的仪器测量获得结果,无需复杂的数据处理。
胶体金免疫层析技术在临床诊断、食品安全监测、环境污染检测等领域具有广泛应用。
例如,在临床诊断中,可以利用该技术检测血液中的肿瘤标志物、病原体和药物残留等;在食品安全监测中,可以检测食品中的致病菌和有害物质;在环境污染检测中,可以检测水体、土壤和大气中的污染物。
胶体金免疫层析技术是一种快速、准确、简便且可视化的分析方法。
胶体金层析法检测原理胶体金层析法是一种常用的分析技术,广泛应用于生物医学、环境监测和食品安全等领域。
本文将介绍胶体金层析法的检测原理及其应用。
一、胶体金层析法的检测原理胶体金层析法是基于胶体金颗粒在溶液中的特殊性质进行分析的方法。
胶体金是一种纳米级金颗粒,具有较大的比表面积和高度可调控的表面性质。
在溶液中,胶体金颗粒呈现出稳定的分散状态。
胶体金层析法的原理是利用胶体金颗粒在溶液中的聚集现象。
当存在特定的分析物时,它们会与胶体金颗粒表面的功能性分子发生相互作用,导致胶体金颗粒的聚集或分散状态发生改变。
通过观察胶体金颗粒的聚集程度或分散状态的变化,可以判断样品中目标分析物的存在与否,从而实现定性或定量分析。
二、胶体金层析法的应用1. 生物医学领域胶体金层析法在生物医学领域中得到广泛应用。
例如,可以利用胶体金层析法检测血液中的生物标志物,如蛋白质、抗体等,用于疾病的早期诊断和治疗监测。
此外,胶体金层析法还可以用于药物分析、基因检测等方面。
2. 环境监测胶体金层析法在环境监测中也具有重要应用价值。
例如,可以利用胶体金层析法检测水体中的重金属离子、有机污染物等,用于水质监测和环境污染评估。
此外,胶体金层析法还可以用于大气颗粒物的分析和土壤污染的监测等方面。
3. 食品安全胶体金层析法在食品安全领域中也有广泛应用。
例如,可以利用胶体金层析法检测食品中的农药残留、重金属、食品添加剂等有害物质,用于食品质量监控和食品安全评估。
此外,胶体金层析法还可以用于食品中的营养成分分析和食品真伪鉴别等方面。
三、总结胶体金层析法是一种基于胶体金颗粒特殊性质的分析技术,具有灵敏度高、选择性好、操作简便等优点。
它在生物医学、环境监测和食品安全等领域中得到广泛应用。
通过对胶体金颗粒的聚集程度或分散状态的观察,可以实现对目标分析物的定性或定量分析。
随着科学技术的不断发展,胶体金层析法在各个领域的应用前景将更加广阔。
胶体金免疫层析法原理什么是胶体金免疫层析法?胶体金免疫层析法是一种常用于生物医学研究和临床诊断的分析技术。
它利用胶体金颗粒与特定抗原或抗体之间的特异性反应,通过观察胶体金颗粒的聚集或分散现象来判断样品中是否存在特定的抗原或抗体。
胶体金的特性在探讨胶体金免疫层析法的原理之前,我们先来了解一下胶体金的特性。
胶体金是一种粒径很小的金颗粒,通常在10到100纳米之间。
它具有很高的稳定性、表面活性、可溶性等特点。
这些特性使得胶体金在生物学研究中具有广泛的应用。
胶体金免疫层析法的原理胶体金免疫层析法的原理可以分为两个步骤:免疫反应和观察。
免疫反应在胶体金免疫层析法中,我们首先需要将胶体金颗粒与特定抗原或抗体进行结合。
这种结合是通过将抗原或抗体与胶体金颗粒表面的配体进行共价结合实现的。
这样,在胶体金颗粒表面就存在了特定的抗原或抗体。
当与这些抗原或抗体相匹配的检测样品加入时,免疫反应就会发生。
观察观察是判断免疫反应是否发生的关键步骤。
在胶体金免疫层析法中,当样品中存在与胶体金颗粒表面的抗原或抗体相匹配的分子时,胶体金颗粒会发生聚集现象,从而改变了光学性质。
这种聚集现象可以通过肉眼观察或光谱分析来判定。
胶体金免疫层析法的应用领域胶体金免疫层析法在生物医学研究和临床诊断中具有广泛的应用。
以下是一些常见的应用领域:1.免疫诊断:胶体金免疫层析法被广泛应用于各种疾病的诊断,如感染性疾病、肿瘤标志物的检测等。
它具有快速、简便、灵敏度高等优点。
2.生物学研究:胶体金免疫层析法在细胞学、分子生物学等领域的研究中起着重要作用。
它可以用于检测细胞表面分子的表达、分析蛋白质的相互作用等。
3.药物检测:胶体金免疫层析法可以用于检测药物的含量、分布和代谢过程,对药物的研究和开发具有重要意义。
胶体金免疫层析法的优点和局限性优点•快速:胶体金免疫层析法可以在短时间内得出结果,适用于快速诊断和分析。
•灵敏度高:胶体金颗粒的粒径小,表面积大,对抗原或抗体具有高度的灵敏度,可以检测低浓度的分子。
胶体金与免疫渗滤斑点法临床应用胶体金与免疫渗滤斑点法是一种常用的临床检测方法,广泛应用于医学诊断、生物学研究以及生物分析等领域。
本文将介绍胶体金与免疫渗滤斑点法的原理、临床应用以及优势。
胶体金是一种纳米材料,具有良好的生物相容性和光学性质。
胶体金颗粒表面可以修饰不同的功能性分子,如抗体、DNA等。
免疫渗滤斑点法是一种通过胶体金与抗原或抗体的特异性结合来检测目标物质的方法。
通过在试验纸上形成胶体金-抗原或胶体金-抗体复合物,可以通过肉眼观察形成明显的颜色变化,从而判断目标物质的存在与否。
胶体金与免疫渗滤斑点法在临床应用中具有以下几方面的优势。
首先,该方法操作简单,不需要复杂的实验设备和技术。
只需将待测样品涂抹在试验纸上,加入胶体金-抗体复合物,待反应完成后观察颜色变化即可。
这种简单的操作流程使得该方法适用于各种临床实验室和基层医疗机构。
胶体金与免疫渗滤斑点法具有高灵敏度和特异性。
胶体金颗粒的表面修饰能力使得其可以与目标物质高效结合,从而提高检测的灵敏度。
同时,该方法还能通过选择合适的抗体或抗原对特定的目标物质进行检测,确保结果的特异性。
第三,胶体金与免疫渗滤斑点法具有快速的检测速度。
由于胶体金与抗原或抗体之间的结合是即时反应,因此整个检测过程可以在几分钟内完成。
这对于急诊诊断、迅速筛查和快速检测等场景非常有价值。
第四,胶体金与免疫渗滤斑点法还具有成本低、易于批量生产等优势。
胶体金颗粒的制备相对简单,成本较低。
同时,胶体金与免疫渗滤斑点法可以批量生产,满足大规模临床检测的需求。
胶体金与免疫渗滤斑点法在临床应用中有着广泛的应用。
例如,在感染性疾病的诊断中,可以利用该方法检测病原微生物或其相关抗体的存在。
此外,胶体金与免疫渗滤斑点法还可用于肿瘤标志物的检测、药物残留的监测以及食品安全等领域。
胶体金与免疫渗滤斑点法作为一种简单、灵敏、特异性高且具有快速检测速度的方法,在临床应用中具有广泛的应用前景。
随着纳米技术和生物技术的不断发展,相信胶体金与免疫渗滤斑点法将在临床诊断和生物分析领域发挥更大的作用。
胶体金法免疫层析法胶体金法免疫层析法是一种常用于生物分析和生化检测的方法。
它通过将胶体金颗粒与特定抗体结合,实现对特定分子的高灵敏度和高选择性检测。
胶体金是一种具有独特光学性质的材料,其颗粒大小一般在10-100纳米之间。
胶体金颗粒具有良好的稳定性和分散性,能够产生明亮的红色光谱吸收峰。
这些特性使得胶体金成为生物分析中理想的探针。
在胶体金法免疫层析法中,首先需要制备与目标分子相应的抗体。
抗体可以通过动物免疫或基因工程技术获得。
接下来,将胶体金颗粒与抗体进行共价结合,形成胶体金-抗体复合物。
这种复合物能够在目标分子存在的条件下发生聚集,从而改变胶体金颗粒的光学性质。
在实际操作中,通常将待测样品与胶体金-抗体复合物混合。
如果待测样品中含有目标分子,那么目标分子将与复合物竞争结合,导致复合物解离。
这种解离会使得胶体金颗粒发生聚集,进而引起红色光谱吸收峰的变化。
通过测量吸收光谱的变化,可以间接检测到目标分子的存在。
胶体金法免疫层析法具有许多优点。
首先,胶体金颗粒具有较大的比表面积和高度的可调控性,因此可以实现高灵敏度的检测。
其次,胶体金颗粒具有良好的生物相容性和稳定性,不易发生聚集或沉淀。
此外,胶体金法免疫层析法操作简便,结果可视化,无需复杂的仪器设备。
胶体金法免疫层析法在生物医学领域得到广泛应用。
例如,在临床诊断中可以用于检测肿瘤标志物、病原微生物和药物残留等。
此外,胶体金法免疫层析法还用于食品安全监测、环境污染检测和生物学研究等领域。
然而,胶体金法免疫层析法也存在一些限制。
首先,胶体金颗粒的稳定性受到环境pH值、离子强度和温度等因素的影响,因此需要严格控制实验条件。
其次,胶体金法免疫层析法对于复杂样品的处理较为困难,可能存在干扰物质造成的误判。
此外,胶体金法免疫层析法的灵敏度受到胶体金颗粒的大小和抗体的亲和力等因素的影响,需要进行优化和改进。
胶体金法免疫层析法是一种重要的生物分析方法。
它通过胶体金颗粒与特定抗体的结合实现对目标分子的高灵敏度和高选择性检测。
胶体金用途胶体金是指以胶体形式存在的金颗粒,其直径一般在1到100纳米之间。
由于其特殊的物理化学性质,胶体金在许多领域具有广泛的应用。
本文将从医学、生物学、电子学和材料科学等角度介绍胶体金的用途。
一、医学应用1. 癌症诊断与治疗:胶体金纳米颗粒具有良好的生物相容性和可调控的光学性质,可以用于癌症的早期诊断和治疗。
例如,将胶体金标记的抗体注入人体,可以通过红外光谱技术检测出癌细胞的存在,并且利用胶体金的光热效应可以破坏癌细胞。
2. 生物传感器:胶体金纳米颗粒的表面积大、电子性质可调控,可以用于制备高灵敏度和高选择性的生物传感器。
例如,将胶体金修饰在电极上,可以用于检测生物分子的存在和浓度变化,实现快速、准确的生物分析。
3. 药物传递:胶体金纳米颗粒可以作为药物的载体,通过调控其表面性质和形状,可以实现药物的靶向输送和控释。
这种纳米级的药物传递系统可以提高药效、减少副作用,并且可以通过表面修饰实现多药联合治疗。
二、生物学应用1. 细胞成像:胶体金纳米颗粒具有较高的光学透明度和稳定性,可以用于细胞的成像和跟踪。
通过将胶体金标记在生物分子上,可以实现对细胞结构和功能的高分辨率观察。
2. 基因工程:胶体金纳米颗粒可以通过表面修饰实现与DNA、RNA等生物分子的特异性结合,从而用于基因工程和基因治疗。
例如,通过将胶体金修饰在DNA探针上,可以实现对基因突变的高灵敏度检测。
3. 组织工程:胶体金纳米颗粒可以作为生物材料的组成部分,用于构建人工组织和器官。
其可调控的形状和表面性质可以实现对组织工程材料的力学、生物学和光学性能的调控。
三、电子学应用1. 传感器:胶体金纳米颗粒可以作为传感器的敏感元件,用于检测环境中的气体、湿度、温度等参数。
通过调控胶体金的形状和尺寸,可以实现对传感器灵敏度和响应速度的调控。
2. 光电器件:胶体金纳米颗粒具有优异的光学性能,可以用于制备光电器件,如太阳能电池、光电探测器等。
通过调控胶体金的尺寸和形状,可以实现对光电器件的能带结构和光学吸收特性的调控。
胶体金的原理
胶体金是一种应用广泛的纳米材料,具有许多独特的物理化学性质,因此在生物医学、光学、电子学等领域有着重要的应用价值。
胶体金的制备方法多种多样,其中最常见的方法是通过还原金盐溶液来制备胶体金。
在这个过程中,金离子被还原成金原子,形成纳米级的金颗粒悬浮在溶液中,形成胶体溶液。
胶体金的独特性质主要源于其纳米级尺寸和表面等离子共振效应。
首先,由于其纳米级尺寸,胶体金表现出与宏观金材料完全不同的物理化学性质。
其比表面积大大增加,使得其在催化、传感、生物学等领域有着独特的应用优势。
其次,胶体金的表面等离子共振效应使得其在可见光范围内呈现出鲜艳的颜色,这一性质被广泛应用于生物标记、光学材料等领域。
胶体金的制备方法和性质使得其在生物医学领域有着广泛的应用。
首先,胶体金纳米颗粒具有良好的生物相容性,可以作为药物载体用于药物输送。
其次,在生物分子检测和诊断中,胶体金纳米颗粒的表面等离子共振效应使得其可以作为生物标记物,用于生物分子的检测和成像。
此外,胶体金还可以用于光热治疗、光学成像等领域。
除了在生物医学领域,胶体金还在光学、电子学等领域有着广泛的应用。
在光学领域,胶体金的表面等离子共振效应使得其可以用于制备纳米光学材料,用于传感、光学信息处理等领域。
在电子学领域,胶体金的纳米尺寸和良好的导电性使得其可以用于制备纳米电子器件,用于传感、储存等应用。
总之,胶体金作为一种重要的纳米材料,在生物医学、光学、电子学等领域有着广泛的应用前景。
通过深入研究其制备方法和性质,可以进一步拓展其在各个领域的应用,推动纳米技术的发展与创新。
胶体金的性质、制备及其在医学中的应用胶体金溶液是指分散相粒子直径在l—150 nm之间的金溶胶,属于多相不均匀体系,颜色呈桔红色到紫红色.胶体金作为标记物用于免疫组织化学始于1971年,Faulk等应用电镜免疫胶体金染色法(IGS)观察沙门氏菌,此后他们把胶体金与多种蛋白质结合.1974年Romano等将胶体金标记在第二抗体(马抗人IgG)上,建立了间接免疫胶体金染色法。
1978年geoghega发现了胶体金标记物在光镜水平的应用。
胶体金在免疫化学中的这种应用,又被称为免疫金.之后,许多学者进一步证实胶体金能稳定又迅速地吸附蛋白质,而蛋白质的生物活性无明显改变.它可以作为探针进行细胞表面和细胞内多糖、蛋白质、多肤、抗原、激素、核酸等生物大分子的精确定位,也可以用于日常的免疫诊断,进行免疫组织化学定位,因而在临床诊断及药物检测等方面的应用已受到广泛的重视.目前电镜水平的免疫金染色(IGS),光镜水平的免疫金银染色(IGSS),以及肉眼水平的斑点免疫金染色技术日益成为科学研究和临床诊断的有力工具.
1.免疫胶体金技术的基本原理
氯金酸(HAuCl4)在还原剂作用下,可聚合成一定大小的金颗粒,形成带负电的疏水胶溶液。
由于静电作用而成为稳定的胶体状态,故称胶体金。
胶体金颗粒由一个基础金核(原子金Au)及包围在外的双离子层构成,紧连在金核表面的是内层负离子(AuC12-),外层离子层H+则分散在胶体间溶液中,以维持胶体金游离于溶胶间的悬液状态。
胶体金颗粒的基础金核并非是理想的圆球核,较小的胶体金颗粒基本是圆球形的,较大的胶体金颗粒(一般指大于30nm以上的)多呈椭圆形。
在电子显微镜下可观察胶体金的颗粒形态。
胶体金标记,实质上是蛋白质等高分子被吸附到胶体金颗粒表面的包被过程。
吸附机理可能是胶体金颗粒表面负电荷,与蛋白质的正电荷基团因静电吸附而形成牢固结合。
用还原法可以方便地从氯金酸制备各种不同粒径、也就是不同颜色的胶体金颗粒。
这种球形的粒子对蛋白质有很强的吸附功能,可以与葡萄球菌A蛋白、免疫球蛋白、毒素、糖蛋白、酶、抗生素、激素、牛血清白蛋白多肽缀合物等非共价结合,因而在基础研究和临床实验中成为非常有用的工具。
免疫金标记技术(Immunogold labelling techique) 主要利用了金颗粒具有高电子
密度的特性,在金标蛋白结合处,在显微镜下可见黑褐色颗粒,当这些标记物在相应的配体处大量聚集时,肉眼可见红色或粉红色斑点,因而用于定性或半定量的快速免疫检测方法中,这一反应也可以通过银颗粒的沉积被放大,称之为免疫金银染色。
2.胶体金的特性
2.1胶体性质胶体金颗粒大小多在1~100nm,微小金颗粒稳定地、均匀地、呈单一分散状态悬浮在液体中,成为胶体金溶液。
胶体金因而具有胶体的多种特性,特别是对电解质的敏感性。
电解质能破坏胶体金颗粒的外周永水化层,从而打破胶体的稳定状态,使分散的单一金颗粒凝聚成大颗粒,而从液体中沉淀下来。
某些蛋白质等大分子物质有保护胶体金、加强其稳定性的作用。
2. 2呈色性微小颗粒胶体呈红色,但不同大小的胶体呈色有一定的差别。
最小的胶体金(2~5nm)是橙黄色的,中等大小的胶体金(10~20nm)是酒红色的,较大颗粒的胶体金(30~80nm)则是紫红色的。
根据这一特点,用肉眼观察胶体金的颜色可粗略估计金颗粒的大小。
3.近10多年来胶体金标记已经发展为一项重要的免疫标记技术.胶体金免疫分析在药物检测、生物医学等许多领域的研究已经得到发展,并越来越受到相关研究领域的重视.光吸收性胶体金在可见光范围内有一单一光吸收峰,这个光吸收峰的波长(λmax)在510~550nm范围内,随胶体金颗粒大小而变化,大颗粒胶体金的λmax偏向长波长,反之,小颗粒胶体金的λmax则偏于短波长,表1所列为部分胶体金的λmax。
表1 四种粒径胶体金的制备及特性
胶体金粒径(nm)
1%柠檬酸三钠
加入量(ml)*
胶体金特性
呈色λmax
16 2.00 橙色518nm
24.5 1.50 橙红522nm
41 1.00 红色525nm
71.5 0.70 紫色535nm
3.胶体金的制备
胶体金有多种制备方法,常用的有:柠檬酸三钠还原法、柠檬酸三钠-鞣酸混合
还原法、白磷还原法、抗坏血酸还原法、乙醇超声波还原法等。
但制备中的一些细节问题极大的影响着胶体金的质量,应予以注意:
(1)氯金酸易潮解,应干燥、避光保存。
(2)氯金酸对金属有强烈的腐蚀性,因此在配制氯金酸水溶液时,不应使用金属药匙称量氯金酸。
(3)用于制备胶体金的蒸馏水应是双蒸馏水或三蒸馏水,或者是高质量的去离子水。
(4)是以制备胶体金的玻璃容器必须是绝对清洁的,用前应先经酸洗并用蒸馏水冲净。
最好是经硅化处理的,硅化方法可用5%二氯甲硅烷的氯仿溶液浸泡数分钟,用蒸馏水冲净后干燥备用。
4.胶体金的鉴定
胶体金的制备并不难,但要制好高质量的胶体金却也并非易事。
因此对每次制好的胶体金应加以检定,主要检查指标有颗粒大小,粒径的均一程度及有无凝集颗粒等。
肉眼观察是最基本也是最简单和方便的检定方法,但需要一定的经验。
良好的胶体金应该是清亮透明的,若制备的胶体金混浊或液体表面有漂浮物,提示此次制备的胶体金有较多的凝集颗粒。
在日光下仔细观察比较胶体金的颜色,可以粗略估计制得的金颗粒的大小。
当然也可用分光光度计扫描λmax来估计金颗粒的粒径。
结制备的胶体金最好作电镜观察,并选一些代表性的作显微摄影,可以比较精确地测定胶体金的平均粒径。
5.胶体金的稳定性及免疫胶体金的贮存
胶体金具有很高的动力学稳定性,在稳定因素不受破坏时自身凝聚极慢,可放置数年不发生凝聚。
影响稳定的因素主要有电解质、溶胶浓度、温度、非电解质等。
金溶胶必须有少量电解质作稳定剂,但浓度不宜过高。
高浓度亲水性非电解质能剥去胶粒外面的水化膜使其凝聚。
少量的高分子物质促使溶胶凝聚,但一定量的高分子物质反而可增加溶胶稳定性,如蛋白质、葡萄糖、PEG20000等的加入有良好的稳定效果。
当金溶胶吸附蛋白质后,溶胶的稳定性随溶液pH而变化,而这种变化又取决于吸附蛋白质的等电点,如ConA,过氧化物酶等,当pH较低时保持稳定,提高pH
则显得不稳定,接近等电点或略高时又变得稳定了。
标记后的胶体金溶液可用0.2~0.5mg/ml PEG20000 作为稳定剂。
在4~10℃贮存数月有效,不宜冰冻。
贮存中可能会发生程度不同的凝聚,可离心除去。
6.胶体金的应用
6.1胶体金在电镜水平的应用
胶体金应用电镜水平的研究最早,发展最快,应用最广泛。
其最大优点是可以通过应用不同大小的颗粒或结合酶标进行双重或多重标记。
直径为3~15nm 胶体金均可用作电镜水平的标记物。
3~15nm 的胶体金多用于单一抗原颗粒的检测,而直径15nm 多用于检测量较多的感染细胞。
胶体金用于电镜水平的研究,主要包括:细胞悬液或单层培养中细胞表面抗原的观察。
单层培养中细胞内抗原的检测。
组织抗原的检测。
6.2胶体金在光镜水平的应用
胶体金同样可用做光镜水平的标记物,取代传统的荧光素、酶等。
各种细胞涂片、切片均可应用。
主要用于:用单克窿抗体或抗血清检测细胞悬液或培养的单层细胞的膜表面抗原。
检测培养的单层细胞胞内抗原,组织中或亚薄切片中抗原的检测。
6.3凝集试验:单分散的免疫金溶胶呈清澈透明的溶液,其颜色随溶胶颗粒大小而变化,当与相应抗原或抗体发生专一性反应后出现凝聚,溶胶颗粒极度增大,光散射随之发生变化,颗粒也会沉降,溶液的颜色变淡甚至变成无色,这一原理可定性或定量地应用于免疫反应。
此外,胶体金在流式细胞仪,免疫印痕技术,免疫层析快速诊断技术中也有很广泛的应用。
7.结语近10多年来胶体金标记已经发展为一项重要的免疫标记技术.胶体金免疫分析在药物检测、生物医学等许多领域的研究已经得到很好的发展。
可以预见,随着纳米技术的不断发展,胶体金必将越来越受到相关研究领域的重视。