高中生物选修一 DNA的粗提取与鉴定
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高中生物实验:DNA的粗提取与鉴定
DNA的粗提取与鉴定实验原理
粗提取原理:在NaCl溶液浓度低于0.14mol/L时,DNA的溶解度随NaCl溶液浓度的增加而降低;在0.14mol/L时,DNA的溶解度最小;当NaCl溶液浓度继续增加时,DNA溶解度又增大。
扩展资料
纯化原理:DNA不溶于酒精,但细胞中的.某些蛋白质溶于酒精。
鉴定DNA原理:在沸水浴条件下,DNA遇二苯胺会被染成蓝色。
实验材料的选择及处理
(1)不选择猪血等哺乳动物的血液,因为哺乳动物成熟的红细胞无细胞核。
(2)需要在鸡血中加入抗凝剂——柠檬酸钠溶液,防止血液凝固。
(3)需除去鸡血中的血浆,因为血浆中无DNA。
特别提醒:不同生物的组织中DNA含量不同在选取材料时,应本着DNA含量高、材料易得、便于提取的原则。
高中生物选修一
1 专题5 DNA和蛋白质技术
课题1 DNA的粗提取与鉴定
[基础巩固]
1.下列关于DNA在NaCl溶液中的溶解度的叙述,正确的是
( )
A.随着NaCl溶液浓度的增大,DNA在NaCl溶液中的溶解度也增大
B.随着NaCl溶液浓度的减小,DNA在NaCl溶液中的溶解度也减小
C.DNA在NaCI溶液中的溶解度与NaCl溶液的浓度呈正相关
D.当NaCl溶液的浓度为0. 14 mol/L时,DNA的溶解度最低
[解析] DNA在NaCI溶液中的溶解度具有两重性。在0.14 mol/L的NaCl溶液中,DNA的溶解度最低;高于或低于此浓度,DNA的溶解度都将升高。
[答案] D
2.提取含杂质较少的DNA所用的溶液是
( )
A.NaCl溶液
B.冷却的体积分数为90%的酒精溶液
C.加热的体积分数为95%的酒精溶液
D.冷却的体积分数为95%的酒精溶液
[解析] 一些杂质在冷却的、体积分数为95%的酒精溶液中易溶解。
[答案] D
3.若从植物细胞中提取DNA,发现实验效果不好,如看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定时不显示颜色反应等。其可能的原因是
( )
①植物细胞中DNA含量低 ②研磨不充分 ③过滤不充分 ④体积分数为95%冷酒精的量过大
A.①② B.③④ C.①④ D.②③ 高中生物选修一
2 [解析] 研磨不充分会使细胞核内的DNA释放不完全,提取的DNA量变少;过滤不充分,也会导致提取的DNA量过少;若用于沉淀DNA的酒精量过少,也会导致DNA的沉淀量少,影响实验效果。
[答案] D
4.下列图示中能正确反映DNA溶解度与NaCl溶液浓度之间关系的是
(
)
[解析] 在质量浓度为0.14 mol/L的NaCl溶液中DNA的溶解度最小。
[答案] C
5.下表有关“DNA粗提取和鉴定”的相关操作中所选取的试剂,不正确的是
( )
相关操作 选取的试剂
教 案
课题 DNA的粗提取与鉴定
教材分析 本实验既是对组成细胞化合物的验证,也是加强学生对细胞中化合物的提取原理、方法、技巧的理解掌握,同时还是历年来各种考核的热点。
教材首先介绍了该实验的“实验原理”。教材接着说明了DNA的粗提取与鉴定的目的要求。教材第三部分清楚地列出了该实验的材料用具。教材第四部分更为详细地介绍了该实验的方法和步骤。
学情分析 通过必修2《遗传与进化》的学习,学生已经了解了证明DNA是主要的遗传物质的实验证据,知道生物体的形状之所以能够遗传给后代,是由于生物体内具有DNA或RNA这些遗传物质。通过本课题的学习,使学生对DNA有一定的感性认识。
教学目标 1、知识目标
理解DNA的理化特性及根据其理化特性而提取和鉴定的原理。
2、能力目标
(1)初步掌握DNA的粗提取和鉴定的方法。
(2)在对实验原理、步骤的理解和分析过程中发展学生的科学思维。
3、情感、态度、价值观
在科学实验过程中培养学生严谨比较细致、实事求是的科学态度。
教学重点 DNA的粗提取与鉴定方法及其相关原理
教学难点 DNA的粗提取与鉴定方法及其相关原理
教学资源 相关图片、视频
教学过程
教学阶段 教师活动 学生活动 设计意图 时间
引入 这节课,我们一起学习“DNA的粗提取与鉴定”技术。
板书:DNA的粗提取与鉴定
DNA的提取技术是整个基因工程技术基础。基本上,不论是出于何种目的的分子生物学实验,大到被称为“人类阿波罗计划”的人类基因组计划,小到今天已经被我们熟知的亲子鉴定,DNA提取技术都是其中基础的基础。而其他诸如RNA的提取,质粒的提取等实验,都可以说是参考这一技术改进,或者重新设计出来的。 倾听 开门见山,使学生明白DNA提取技术的重要性,引发学生的学习兴趣
DNA的粗提取实验材料的选这节课,我们一起学习DNA的粗提取与鉴定技术。
首先,我们应该选取合适的实验材料。
与鉴定 择 问题:教材中列举了很多中材料,请你从中选出2-3种。
新人教版高中生物选修一《实验DNA的粗提取与鉴定》
实验原理:
一.DNA在氯化钠溶液中的溶解度,是随着氯化钠的浓度的变化而改变的。当氯化钠的物质的量浓度为0.14 mol/L时,DNA的溶解度最低。利用这一原理,可以使溶解在氯化钠溶液中的DNA析出。
二.DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少的DNA。
三.DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。
目的要求:
初步掌握DNA的粗提取和鉴定的方法,观察提取出来的DNA物质。
材料用具:
鸡血细胞液①(5 ~10 mL)。
铁架台,铁环,镊子,三角架,酒精灯,石棉网,载玻片,玻璃棒,滤纸,滴管,量筒(100 mL,1个),烧杯(100 mL,1个,50 mL、1 000 mL各2个),试管(20 mL,2个),漏斗,试管夹,纱布。
体积分数为95%的酒精溶液(实验前置于冰箱内冷却24 h),蒸馏水,质量浓度为0.1
g/mL的柠檬酸钠溶液,物质的量浓度分别为2 mol/L和0.015 mol/L的氯化钠溶液,二苯胺试剂。
方法步骤
实验前需要制备鸡血细胞液(由教师完成),制备的方法是:
取质量浓度②为0.1 g/mL的柠檬酸钠溶液(抗凝剂)100 mL,置于500 mL烧杯中。将宰杀活鸡流出的鸡血(约180 mL)注入烧杯中,同时用玻璃棒搅拌,使血液与柠檬酸钠溶液充分混合,以免凝血。然后,将血液倒入离心管内,用1 000 r/min(转每分)的离心机离心2 min,此时血细胞沉淀于离心管底部。实验时,用吸管除去离心管上部的澄清液,就可以得到鸡血细胞液。(如果没有离心机,可以将烧杯中的血液置于冰箱内,静置一天,使血细胞自行沉淀。)
1.提取鸡血细胞的细胞核物质
将制备好的鸡血细胞液5 ~10 mL,注入到50 mL烧杯中。向烧杯中加入蒸馏水20 mL,同时用玻璃棒沿一个方向快速搅拌5 min,使血细胞加速破裂。然后,用放有纱布的漏斗将血细胞液过滤至1 000 mL的烧杯中,取其滤液。 2.溶解细胞核内的DNA