Caspase-3参与白花败酱草皂苷诱导Hela细胞凋亡

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促凋亡蛋白Caspase-3与白血病细胞耐药的相关性

促凋亡蛋白Caspase-3与白血病细胞耐药的相关性赵新汉;田洪刚;全平;刘陕西【期刊名称】《西安交通大学学报（医学版）》【年(卷),期】2005(26)5【摘要】目的观察阿霉素(ADR)耐药的人慢性粒细胞白血病细胞株K562/AO2在ADR和雄黄作用下细胞活力、凋亡及加入Caspase-3抑制剂前后Caspase-3酶活性的变化,探讨促凋亡蛋白Caspase-3与白血病细胞耐药的关系.方法①四甲基偶氮唑盐法(MTT)测定药物作用下细胞株的细胞活力(A值);②DNA琼脂糖凝胶电泳观察凋亡细胞的DNA断裂情况;③酶显色活性分析法(CAA)测定Caspase-3活性水平的变化.结果①MTT法:K562/AO2细胞的A值与雄黄呈时间、剂量依赖关系.②雄黄作用组有凋亡发生.③未加抑制剂组Caspase-3活性明显升高(P＜0.05),对雄黄呈时间、剂量依赖关系,加入抑制剂后此关系消失,对ADR无此关系.结论Caspase-3酶活性水平的变化能显著影响药物诱导肿瘤细胞凋亡的能力,在肿瘤耐药的发生发展中起着重要的作用.【总页数】5页(P463-466,469)【作者】赵新汉;田洪刚;全平;刘陕西【作者单位】西安交通大学第一医院肿瘤内科,陕西西安,710061;西安交通大学第一医院肿瘤内科,陕西西安,710061;西安交通大学第一医院肿瘤内科,陕西西安,710061;西安交通大学第一医院肿瘤内科,陕西西安,710061【正文语种】中文【中图分类】R733.7【相关文献】1.Caspase-3和Bcl-2在白血病细胞株凋亡过程中的表达及其与多药耐药的关系[J], 赵新汉;马欣;李琳琳;李晶;刘陕西2.促凋亡蛋白Bad和细胞外调节蛋白激酶对膀胱癌多重耐药细胞的作用机制研究[J], 曾繁畅;唐正严;岑松;康新立3.半夏提取物调节Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达诱导白血病细胞凋亡 [J], 冯嘉昆; 关心; 刘伟; 李正发; 赵晓晨; 李增政; 杨同华; 赵仁彬; 胡芃; 裴强4.半夏提取物调节Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达诱导白血病细胞凋亡 [J], 冯嘉昆;刘伟;李正发;赵晓晨;李增政;杨同华;赵仁彬;胡芃;裴强;关心5.特发性血小板减少性紫癜患者T细胞周期和促凋亡蛋白Caspase-3表达的变化[J], 王宇;高清平;王琼玉;张文芳;张欣因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

超声对软骨细胞凋亡、caspase-8和caspase-3表达的影响

超声对软骨细胞凋亡、caspase-8和caspase-3表达的影响郭华;夏璐;周君;陈世菊;何成奇【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2013(000)037【摘要】背景：超声治疗能够缓解疼痛，改善膝骨关节炎患者的运动功能，但目前关于超声治疗的文献缺乏一致性。

目的：进一步验证超声治疗的膝骨关节炎有效性。

方法：24只兔子随机分为3组，正常组不干预；模型组兔行前交叉韧带离断诱导膝骨关节炎，不接受任何治疗；超声组兔建模后接受超声波治疗10 min/次，1次/d，0.3 W/cm2伊红染色进行兔关节软骨组织学观察，运用免疫印迹和 RT-PCR技术检测兔软骨中的caspases3和caspases8的表达，TUNEL技术检测兔膝骨关节软骨细胞凋亡率。

，1 MHz，共治疗10次。

采用苏木精- 结果与结论：正常兔软骨组织软骨细胞呈柱状整齐的排列，模型中软骨层变薄，软骨细胞排列无序而少。

超声治疗后软骨细胞重新排列，趋于整齐，细胞数增加。

模型组为膝骨关节炎模型；与正常组比较，模型组和超声组改良Mankin 评分较高，模型组和超声组软骨细胞凋亡指数更高，模型组高于超声组。

与正常组比较，模型组和超声组caspase-3和caspase-8表达较高，超声治疗后两项指标表达下降。

结果表明，超声可以改善软骨组织结构、降低caspase-3、caspase -8的表达，降低软骨细胞凋亡。

提示超声治疗膝骨关节炎是有效的。

%BACKGROUND:Ultrasound therapy can relieve pain and improve the movement function in patients with knee osteoarthritis, but there lacks of consistency in the literatures of ultrasound therapy. OBJECTIVE:To further identify the effectiveness of ultrasound therapy in the treatment ofknee osteoarthritis. METHODS:Twenty-four rabbits were randomly divided into three groups:normal group, model group and ultrasound group. The rabbit in the normal group received no intervention;rabbits in the model group received anterior cruciate ligament transaction to establish the knee osteoarthritis model without any treatment;the rabbit in the ultrasound group received ultrasound therapy after modeling for 10 minutes once time, once per day, 0.3 W/cm2 , 1 MHz and treated for 10 times. Hematoxylin-eosin staining was conducted for histological observation of rabbit articular cartilage;western blot and reverse transcription PCR assessment were used to assess the expressions of caspases-3 and caspases-8 in rabbit articular cartilage, while Terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling was used to assess the ratio of chondrocytes apoptosis of rabbit knee articular cartilage. RESULTS AND CONCLUSION:The normal rabbit cartilage tissues and chondrocytes were neatly arranged in column;the middle cartilage layer of the model was thin;the chondrocytes were arranged disorderly and became less. After ultrasound therapy, the chondrocytes were rearranged neatly, and the number was increased. Compared with the normal group, the Mankin scores in the model group and ultrasound group were higher;the apoptotic rate of chondrocytes was higher in the model group and ultrasound group than in the normal group, and was also higher in the model group than in the ultrasound group. Compared with the normal group, the expressions of caspases-3 and caspases-8 were higher in the model group and the ultrasound group, while decreasedafter ultrasound therapy. The results indicate that ultrasound can improve the structure of cartilage tissues, decrease the expressions of caspases-3 and caspases-8 and reduce the apoptosis rate of chondrocytes. It is effective for the treatment of knee osteoarthritis with ultrasound therapy.【总页数】7页(P6580-6586)【作者】郭华;夏璐;周君;陈世菊;何成奇【作者单位】四川大学华西医院康复医学科，四川省成都市 610041; 四川省康复医学重点实验室，四川省成都市 610041;四川大学华西医院康复医学科，四川省成都市 610041; 四川省康复医学重点实验室，四川省成都市 610041;四川大学华西医院康复医学科，四川省成都市 610041; 四川省康复医学重点实验室，四川省成都市 610041;四川大学华西医院康复医学科，四川省成都市 610041; 四川省康复医学重点实验室，四川省成都市 610041;四川大学华西医院康复医学科，四川省成都市 610041; 四川省康复医学重点实验室，四川省成都市 610041【正文语种】中文【中图分类】R318【相关文献】1.蛋白酶体抑制剂 MG132联合顺铂对肺癌细胞凋亡及 Caspase－3、Caspase－8蛋白表达的影响 [J], 万千;方震宇;马南山;杜卓2.右美托咪定对感染性休克大鼠脾脏及胸腺caspase-3、caspase-8、caspase-9表达及淋巴细胞凋亡的影响 [J], 姬斌;秦培顺;南洋;黄葱葱;李军3.超声对软骨细胞凋亡、caspase-8和caspase-3表达的影响 [J], 郭华;夏璐;周君;陈世菊;何成奇;4.淫羊藿总黄酮含药血浆对雄兔干眼泪腺上皮细胞凋亡模型Caspase-3、Caspase-8 mRNA表达的影响 [J], 邓杰;王方;张姣姣;洪作权;万咪咪;石玉恒;胡文婧5.逍遥散对雌性兔膝关节软骨细胞凋亡基因Caspase-3与细胞色素C表达的影响[J], 戴七一;黎强;郑铁牛;阮萍;林宗汉;覃学流;谈驰;罗胤;冯彦江;王甜;詹楚宁;王永乐因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

暴发性肝衰竭中Fas及caspase-3与肝细胞凋亡的关系

暴发性肝衰竭中Fas及caspase-3与肝细胞凋亡的关系王玉梅;冯国和;刘德刚;窦晓光【期刊名称】《中国现代医学杂志》【年(卷),期】2007(017)009【摘要】目的研究在暴发性肝衰竭(fulminant hepatic failure,FHF)中Fas及caspase-3表达与肝细胞凋亡的关系.方法联合应用脂多糖(LPS)和D-氨基半乳糖(D-GalN)制备FHF小鼠模型;采用免疫组化方法检测肝组织Fas表达,原位杂交方法检测肝组织caspase-3表达,TUNEL法检测肝组织肝细胞凋亡;在用药后2、4、8和12 h动态观察Fas、caspase-3表达及肝细胞凋亡变化.结果在FHF模型小鼠中,用药后8 h可出现典型的肝细胞凋亡表现,12 h仍存在肝细胞凋亡.用药后2 h 开始Fas有少量表达,至8 h和12 h表达均很多,二者比较差异无显著,与2h组比较P＜0.01,与4h组比较P＜0.05.用药后2 h caspase-3少量表达,8 h达最高峰,12h较8h减少,8h与2 h比较,P＜0.01,与4h和12 h比较P＜0.05.Fas和caspase-3表达相一致.结论在FHF中,肝细胞凋亡的发生与Fas及caspase-3的表达增加有关,且Fas介导肝细胞凋亡的过程与caspase-3的激活有关.【总页数】4页(P1076-1078,1087)【作者】王玉梅;冯国和;刘德刚;窦晓光【作者单位】中国医科大学附属盛京医院,感染科,辽宁,沈阳,110004;中国医科大学附属盛京医院,感染科,辽宁,沈阳,110004;鞍山市曙光医院,医疗科,辽宁,鞍山,114031;中国医科大学附属盛京医院,感染科,辽宁,沈阳,110004【正文语种】中文【中图分类】R-332;R575.3【相关文献】1.脓毒症大鼠Fas-L、Caspase-3和NF-κB的表达与肝细胞凋亡的关系 [J], 高建芝;张建龙;王红梅;马琪;腾清蕾2.Bcl-2蛋白及caspase-3基因表达与暴发性肝衰竭肝细胞凋亡关系的研究 [J], 王玉梅;冯国和;刘德刚;窦晓光3.实验性暴发性肝衰竭中肿瘤坏死因子α与肝细胞凋亡的关系 [J], 王玉梅;冯国和;李颖;赵桂珍;乔光彦4.内毒素血症中肝细胞凋亡与Caspase-3蛋白表达的关系及阳离子A拮抗保护作用的研究 [J], 高洪;屈常林;高利波;陈利平5.鼠暴发性肝衰竭中Fas表达与肝细胞凋亡的关系 [J], 王玉梅;冯国和;黄芬;石理兰;李颖;王占英因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

软脂酸在体外激活Caspase9和Caspase3引起L02细胞凋亡

１Ｏ பைடு நூலகம்
中国兽医杂志２０１３年（第４９卷）第２期
ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅ
软脂酸在体外激活Ｃａｓｐａｓｅ９和Ｃａｓｐａｓｅ３引起Ｌ０２细胞凋亡
Ｃａｓｐａｓｅ９ｃｌｅａｖａｇｅ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｃｏｕｌｄｐｒｏｖｉｄｅｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓｔｏｔｈｅｌｉｖｅｒｉｎｊｕｒｙｓｔａｔｕｓｗｈｉｌｅｔｈｅａｎｉｍａｌｔａｋｅｈｉｇｈ－ｅｎｅｒｇｙ
２．ＨｕｎａｎＣｈａｎｇｓｈａＬｕｙｅＢｉｏ－ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙＣｏ．Ｌｔｄ．，Ｃｈａｎｇｓｈａ４１０１２８。Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＴｈｅｈｕｍａｎｌｉｖｅｒｃｅｌｌｌｉｎｅＬ０２ｗｅｒｅｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈｐａｌｍｉｔｉｃａｃｉｄａｓｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｍａｔｅｒｉａｌｓ．Ｗｅｓｔｅｒｎ
ＴＵＤｉ，ＷＵＪｉｎｇ，ＹＵＡＮＬｉ－ｙｕｎ，ＷＥＮＬｉ — ｘｉｎ１，
（１．ＨｕｎａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＣｏｌｌｅｇｅｏｆＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｃｈａｎｇｓｈａ４１０１２８，Ｃｈｉｎａ；

Caspase-3

１．广东省计划生育科学技术研究所，广东广州
５１０６００；２．广东药学院基础医学院生理学系，广东广州５１０００６
［摘要】目的探讨人胎ｊｌ，￣ｎ泡的发育形成过程中卵细胞凋亡及其调控机制。方法收集２０１３年１１２月广东省计划生育科学技术研究所妊娠２４～３２周引产的女性胎儿卵巢组织１８例，其中２４～２７周胎儿卵巢８例。２８～３２周胎儿卵巢１０例。采用免疫组织化学染色法观察胎儿卵巢卵泡发育及形成过程中凋亡因子Ｃａｓｐａｓｅ一３、ＴＮＦ一仅、
ｂｃｌ一２、ｂａｘ的表达情况。结果Ｃａｓｐａｓｅ一３表达在孕中期及孕晚期表达均为强阳性。ＴＮＦ一在卵母细胞中均表达．
胎儿卵巢内的颗粒细胞及其他间质组织细胞未见阳性表达。凋亡抑制因子ｂｃｌ一２的表达在孕中期及孕晚期均为阴性。促凋亡因子Ｂａｘ在卵母细胞及卵巢颗粒细胞内均为阳性表达。结论胎儿卵巢发育过程中，原始卵母细胞
ＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｔｈｅＣａｓｐａｓｅ－３，ＴＮＦ－ｅ￣，ｂｃｌ－２ａｎｄｂａｘｉｎｔｈｅｆｅｔａｌｏｖａｒｉａｎ
ＷＡＮＧＹｏｎｇｘｉａｌＭＡＮａ２ ‘ ＺＨＯＮＧＸｉｎｇｍｉｎｇ￣ＣＵＩＲｏｎｆＷＡＮＧＸｉａｏｔａｎｌＹＡＮＧＮＭＩＡ０Ｚｈｕｌｉｎｌ

小白菊内酯诱导结肠癌细胞凋亡及对Caspase-3Caspase-9表达的影响

小白菊内酯诱导结肠癌细胞凋亡及对Caspase-3Caspase-9
表达的影响
刘继洪;潘月龙;姚航平
【期刊名称】《中国药物与临床》
【年(卷),期】2009(009)008
【摘要】小白菊内酯（parthenolide，PN）是从菊科植物中提取的一种半萜稀内酯化合物，是野甘菊的主要活性成分。

近年来研究发现，小白菊内酯具有较强的抗肿瘤活性，在体外可抑制多种肿瘤细胞株的生长增殖，并诱导其凋亡[1，2]。

【总页数】3页(P701-703)
【作者】刘继洪;潘月龙;姚航平
【作者单位】310006,杭州市第一人民医院肿瘤科;310006,杭州市第一人民医院肿瘤科;浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所
【正文语种】中文
【中图分类】R2
【相关文献】
1.黄芩汤体外诱导人结肠癌SW620细胞凋亡及其对凋亡相关因子表达的影响 [J], 迟宏罡;赵兵;郑学宝;戴世学;李涛;于丰彦;何志巍;邹颖
2.埃克替尼诱导人结肠癌Caco-2细胞凋亡及对相关蛋白表达的影响 [J], 张秀艳;石国刚;刘秀艳;葛红娣
3.丙氨酰谷氨酰胺对结肠癌细胞FasL基因表达及诱导淋巴细胞凋亡的影响 [J], 吴
志刚;何显力;包国强;贺湘
4.丁酸钠诱导结肠癌HT-29细胞凋亡的信号通路及对AQP3基因表达影响的研究[J], 朱静;洪华容;刘晓群;周晓莉;陈建丽
5.曲古抑菌素A体外对结肠癌细胞凋亡及低氧状态下其缺氧诱导因子-1α表达的影响 [J], 石晓星;王建军;高锋
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鼠尾草酸联合他莫昔芬通过激活Caspase-3信号通路诱导乳腺癌细胞凋亡

鼠尾草酸联合他莫昔芬通过激活Caspase-3信号通路诱导乳腺癌细胞凋亡贺文煜;袁昌劲【摘要】目的探讨鼠尾草酸联合他莫昔芬对乳腺癌细胞的影响及作用机制.方法将乳腺癌细胞株MCF-7、T47D分为4组,对照组加入PBS,CA组加入鼠尾草酸,TAM组加入他莫昔芬,CA+TAM组加入鼠尾草酸和他莫昔芬.MTT增殖实验检测细胞增殖能力,集落形成实验检测细胞集落形成能力,Transwell小室实验检测细胞侵袭能力,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,免疫印迹法检测各组细胞Caspase-8、Caspase-3、PARP蛋白表达.结果在0~20 μmol/L药物浓度时,CA、TAM、CA+TAM呈剂量依赖性抑制乳腺癌细胞增殖,但药物浓度为20 μmol/L与50μmol/L对细胞增殖影响差异无统计学意义(均P>0.05).CA+TAM组增殖抑制率明显高于CA组和TAM组(均P<0.05).MCF-7和T47D细胞中,CA组、TAM组、CA+TAM组集落形成率、侵袭细胞数、细胞迁移率显著低于对照组(均P<0.05);CA+TAM组集落形成率、侵袭细胞数、细胞迁移率显著低于CA组和TAM组(均P<0.05),CA组和TAM组集落形成率、侵袭细胞数、细胞迁移率比较差异均无统计学意义(均P>0.05).在2种乳腺癌细胞株中,对照组、CA组、TAM组、CA+TAM组cleaved Caspase-8蛋白表达差异无统计学意义(均P>0.05),CA组、TAM组、CA+TAM组cleaved Caspase-3、cleaved PARP蛋白表达显著高于对照组(均P<0.05),CA+TAM组cleaved Caspase-3、cleaved PARP蛋白表达显著高于CA组和TAM组(均P<0.05),CA组和TAM组cleaved Caspase-3、cleaved PARP蛋白表达差异无统计学意义(均P>0.05).结论鼠尾草酸联合他莫昔芬能够抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,其作用机制可能与激活Caspase-3/PARP信号通路有关.%Objective To explore the effect of carnosic acidcombined with tamoxifen on breast cancer cells and themechanism.Methods Breast cancer cell lines MCF-7,T47D were divided into 4 groups:PBS was given to control group,carnosic acid(CA)was added to CA group,tamoxifen(TAM)was added to TAM group,and CA+TAM group was treated with carnosic acid and tamoxifen.The proliferation ability was measured by MTT assay,the colony formation capacity was measured by colony formation assay,the invasion ability was measured by Transwell chamber assay,the migration ability was measured by wound-healing assay,the expression of Caspase-8,Caspase-3 and PARP protein were measured by Western blotting.Results CA,TAM and CA+TAM suppressed breast cancer cell proliferation with a dose-dependent pared with CA group and TAM group,the proliferation inhibitory rate of CA+TAM group was significantly increased(P<0.05).In MCF-7 and T47D celllines,compared to control group,the rate of colony fromation,number of invasive cells and cell migration rate of CA,TAM,CA+TAM groups were significantly decreased(all P<0.05).These indexes mentioned above inCA+TAM group were significantly lower than those in CA group and TAM group(all P<0.05),but there were no significant differences between CA group and TAM group (all P>0.05).In two breast cancer cell strains,the expression of cleaved Caspase-8 protein between control,CA,TAM andCA+TAM groups was not significantly different(P>0.05).Compared to control group,the expression levels of cleaved caspase-3,cleaved PARP protein in CA,TAM and CA+TAM groups were significantlyincreased(P<0.05),and these protein levels were significantly higher inCA+TAM group than in CA and TAM group(all P<0.05).But there were no significant differences between CA group and TAM group(allP>0.05).Conclusion Carnosic acid combined with tamoxifen can suppress the proliferation,invasion and migration of breast cancer cells,and its mechanism may be related to the activation of Caspase-3/PARP signaling pathway.【期刊名称】《华中科技大学学报（医学版）》【年(卷),期】2017(046)004【总页数】6页(P404-409)【关键词】鼠尾草酸;乳腺癌;他莫昔芬;侵袭;迁移;增殖;信号通路【作者】贺文煜;袁昌劲【作者单位】华中科技大学同济医学院附属武汉市中心医院中西医结合肿瘤科,武汉 430014;华中科技大学同济医学院附属武汉市中心医院中西医结合肿瘤科,武汉430014【正文语种】中文【中图分类】R737.9乳腺癌发病率位居女性恶性肿瘤首位[1]，尽管近20年来乳腺癌的诊疗技术得到了极大的提高，但其远期生存率依然不容乐观，其中放化疗抵抗是导致乳腺癌治疗失败的主要原因[2]。

败酱草

【化学成分】主要含三萜类成分：黄花败酱皂苷A~F，常春藤皂苷，齐墩果酸等；黄酮类成分：木犀草素，槲皮素，芦丁，异荭草苷，异牡荆苷等；香豆素类成分：东莨菪内酯，七叶内酯等；还含挥发油、环烯醚萜类、甾醇类等。

【药理毒理】本品具有抗病原微生物、镇静、抗肿瘤等作用。

1.抗病原微生物作用体外研究表明败酱草提取物及其制剂可抑制多种病原菌，但不同来源的败酱草抑菌谱有所差异，如岩败酱草对大肠杆菌、绿脓杆菌和痢疾杆菌无作用。

败酱草对流感病毒、呼吸道合胞病毒也有一定的抑制作用，从黄花败酱种子中分得的三萜类化合物显示可抑制HIV。

另外研究表明败酱草提取物可直接破坏细菌内毒素，对LPS刺激肝枯否细胞分泌TNF、IL-1、IL-6、GM-CSF、等细胞因子具有显著的抑制作用，且随培养时间延长、药物浓度增高而增强。

2.免疫增强作用败酱草总环烯醚萜苷元能显著提高小鼠胸腺指数和脾指数，促进ConA诱导的脾淋巴细胞增殖和小鼠血清溶血素水平，提高小鼠NK细胞活性及腹腔巨噬细胞的吞噬活性。

3.镇静作用黄花败酱醇提取物干浸膏及酊剂灌胃给予均可降低小鼠自发活动，延长戊巴比妥钠睡眠时间，进一步研究表明其中所含挥发油为镇静作用的主要有效成分，尤其是占挥发油含量2/3的败酱烯和异败酱烯。

白花败酱、异叶败酱、粗叶败酱等亦均显示一定的镇静或中枢抑制作用。

4.抗肿瘤作用败酱草对多种肿瘤动物模型具有治疗作用，体外研究显示其可直接抑制多种肿瘤细胞。

异叶败酱总苷对艾氏腹水癌和S180肉瘤均有明显的抑制作用，并明显提高荷瘤小鼠单核吞噬细胞功能，体外可诱导人大肠癌细胞凋亡，其机制可能与促进移植瘤 caspase-3表达及增大Bax/bcl-2表达比率有关。

黄花败酱可延长荷S180肉瘤或艾氏腹水癌小鼠生命，抑制体内肿瘤生长；其根提取物能显著抑制肝癌细胞生长，对JTC26癌细胞的抑制率为98.2%，而对正常细胞的促进增殖率为100%。

亦有报道认为1g/L的败酱草提取物可杀伤肝癌细胞，但10mg/L则对肝癌细胞具有促生长作用。

Caspase-3在乙醇致睾丸损伤中的表达及意义的开题报告

Caspase-3在乙醇致睾丸损伤中的表达及意义的开
题报告
背景：
乙醇是一种常见的毒性物质，长时间饮酒会导致睾丸损伤，进而影
响生殖能力。

Caspase-3是一种重要的凋亡相关蛋白，在生物体内对于正常细胞凋亡起着重要作用，过度表达会引起组织细胞死亡。

在乙醇致睾
丸损伤中，Caspase-3的表达情况及其意义尚未被深入研究。

目的：
本文旨在分析Caspase-3在乙醇致睾丸损伤中的表达情况及其意义，为研究乙醇对雄性生殖系统的影响提供理论依据。

方法：
选取实验小鼠分为对照组和乙醇组，分别灌胃生理盐水和10%乙醇，连续灌胃两周。

采取Western blot和免疫荧光染色等方法检测睾丸组织
中Caspase-3的表达情况，并观察组织形态学改变。

结果：
结果显示，与对照组相比，乙醇组的睾丸组织中Caspase-3明显上调，伴随着组织细胞的明显凋亡和结构损伤。

结论：
Caspase-3在乙醇致睾丸损伤中的表达上调，可能是乙醇导致睾丸损伤的重要机制之一。

因此，Caspase-3在预防和治疗乙醇引起的生殖系统损伤中具有重要的应用价值。

石花菜提取物对宫颈癌细胞凋亡及Caspase-3活性的影响

ｄａａｅＪ．Ｔａｓｌｎａｏ，１７，８１：７— ０ｒｉｇ［］ｒｎｐａｔｔｎ９９２（）４５．ｎｉ［］ＴＡＡＭ，ＭＩＡＫＡＡ．Ｍａｔｎｃｆｅｆｏ５ＡＮＫＹＥＹ，ＳＮＯＫｉｅａｅｏｌ—ｔｌｎｎｓ－ｅａｅｙａｏｔｔｅｌｌａａｃ［］ｒｎｉｓｉ２０，１：ｒｅｂｐｐｏｉｃｌｃｅｎｅＪ．ＦｏｔＢｏｅ，０８３ｎｃｒ
探讨石花菜提取物对宫颈癌ＨＬ细胞凋亡及Ｃｓａ一ｅａａｓ３活性的影响。方法不同浓度石ｐｅ
石花菜提取物以时间及剂量依赖性的方式抑制ＨＬｅａ细胞的生长增殖，降低细胞活性。石花菜乙酸乙酯提取物可抑制宫颈癌ＨＬ细胞生长增ｅａ
参考文献
『］ＧＥＣＲＲＯ１ＡＮＭＧ．ＡＴＮＧ，ＧＲＮＫ，ｅａ．Ｌｃｌｅｗ— ＩＩＳＹＴｔ１ｏａｉｄｌｚｏ
ｄｓａｉｔｅａｙｆｒｆｌｉｕａｙｈｍａ：ｈｓｏｙｌｉａｅｕｔ，ｏｅｒｄｏｈｒｐｏｌｌｒｍｐｏｏｃｌｉｒ，ｃｉｃｒｓｌｔｎｌｓ
１１细胞与试剂．
广东医学２１年９月第３卷第１期Ｇａｇｏｇｄｃｌｏｒ￣Ｓｐ２１，ｏ３，ｏ８０１２８ｕｎｄｎＭｅｉｕｎａＪｅ．０１Ｖ１２Ｎ．１．
・
２８・３９
１４Ｈｅｈｔ测细胞凋亡细胞爬片后，别含不．ｏｃｓ检分同浓度石花菜乙酸乙酯提取物（、．、、０ｍ／Ｌ０２５５１ｓｍ）的ＲＭ６０培养基（２ＰＩ４１含％小牛血清）培养２，，４ｈ后４多聚甲醛固定，．％Ｔｔ％０２ｉｎＸ一１０渗透１ｉ，ｏｏ００ｍｎＨ．ｅｈｔ３５染色液，ｃｓ２８３染色５ｍｍ后，Ｂ洗３次后，０ｉＰＳ６％缓冲甘油封片，光显微镜下观察并拍照。荧

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基金项目：黑龙江省自然科学基金项目（ No. D2007-77）通讯作者：田黎明（ 1962-），男，硕士，教授，主要从事药物抗肿瘤研究。第一作者：张涛（ 1964-），女，博士，教授，主要从事植物药抗衰老与抗
肿瘤研究。
1. 2. 2 细胞培养 Hela 细胞培养于含 10% 新生牛血清的 RPMI-1640培养液，置于 37℃ ，50 ml / L CO2 、饱和湿度恒温培养箱中孵育，每 2 ～ 3 d 传代。 1. 2. 3 指标检测 1. 2. 3. 1 噻唑蓝（ MTT）法测定细胞增殖抑制作用水提物终浓度分别为 0. 20，0. 40，0. 80，1. 20 mg / ml；皂苷终浓度分别为 0. 05，0. 10，0. 15，0. 20 mg / ml。另设未加药物只加细胞的对照组，每个浓度设三个复孔，诱导 48 h。细胞生长抑制率 = （ 1 －实验组平均 OD 值 / 对照组平均 OD 值） × 100% 。根据各组药物对细胞的抑制率，运用 SPSS10. 0 软件计算出药物半数抑制浓度（ IC50 ）。 1. 2. 3. 2 光镜观察 Hela 细胞凋亡的形态学特征皂苷 0. 15 mg / ml，水提物 1. 20 mg / ml，阴性对照组培养 48 h 后，磷酸盐缓冲液（ PBS）漂洗，4% 多聚甲醛固定，4℃ 过夜。苏木素-伊红（ H-E）染色，光镜观察拍照。 1. 2. 3. 3 电镜观察 Hela 细胞超微结构的变化用皂苷 0. 15 mg / ml处理 Hela 细胞 48 h 和 72 h 后，树脂包埋，烘烤 24 h 固化成硬块，切成超薄切片（ 50 nm），醋酸铀-枸橼酸铅双重染色后，透射电镜观察细胞超微结构。 1. 2. 3. 4 Hela 细胞 Caspase-3 活性的检测皂苷终浓度为 0. 15、0. 20 mg / ml，水提物终浓度为 0. 80、1. 20 mg / ml，每个浓度设 3 个复孔，同时设阴性对照，按试剂盒说明书操作，酶标仪测定 OD405 值，通过计算 OD 给药组 / OD 阴性对照的倍数来确定各组 Caspase-3 的活化程度。 1. 3 统计学方法应用 SAS9. 13 软件分析，实验数据以 x ± s 表示，组间差异的显著性先方差分析，再采用 Dunnet't 检验。
2结果 2. 1 白花败酱草皂苷和水提物对 Hela 细胞生长的抑制作用
总皂苷和水提取物的 IC50 值分别是 59. 2 μg / ml 和 199. 9 μg / ml。根据美国国家癌症中心（ NCI ）标准： IC50 ≤ 230 μg / ml可作为抗肿瘤药物，说明白花败酱草总皂苷和水提物对 Hela 细胞有明显的细胞毒作用。见表 1，表 2。 2. 2 白花败酱草总皂苷诱导 Hela 细胞的形态学变化 2. 2. 1 HE 染色光镜观察结果光镜下可见对照组的 Hela 细
1 材料与方法 1. 1 细胞株与主要试剂人宫颈癌 Hela 细胞株由哈尔滨医科大学微生物教研室赠送； RPMI-1640 干粉培养基（美国 Gibco 公司）；新生牛血清（杭州四季青公司）； AB8 大孔吸附树脂购于天津南开大学化工厂。 1. 2 方法 1. 2. 1 实验药材与处理白花败酱草购于秦皇岛市民乐医药公司，由安国市昌达中药材饮片有限公司提供。 1. 2. 1. 1 白花败酱草水提物的制备〔3〕白花败酱草粉碎后加适量水，浸泡 3 h，煮沸提取 60 min，收集药液，经旋转蒸发仪 50℃ 减压回收得白花败酱草水提液，真空干燥箱 55℃ 干燥，得败酱草水提物固体干粉。 1. 2. 1. 2 白花败酱草总皂苷的制备取干燥的白花败酱草 4 kg，粉碎，按 1∶ 10 用 70% 食用酒精浸泡 4 h，加热回流提取 2 次，合并滤液减压回收乙醇，得白花败酱草乙醇粗提物。此粗提物加入石油醚脱脂，用 AB8 大孔吸附树脂层析分离总皂苷。白花败酱草醇提物上层析柱后用蒸馏水洗脱至洗脱液中无糖为止（ Molish 反应阴性）。再分别用 30% 、50% 和 70% 乙醇洗脱，收集洗脱液，至各洗脱液 Liberman-Burchard 反应阴性为止。洗脱液减压回收乙醇，真空干燥得淡黄色粗提物，终重量为 25. 2 g，白花败酱草总皂苷的提取率约为 0. 63% 。皂苷鉴定∶ 取少量干燥提取物，与浓硫酸-醋酐（ 1∶ 20）反应显蓝绿色，证明提取物为甾体皂苷〔3〕。
Caspase － 3 参与白花败酱草皂苷诱导 Hela 细胞凋亡
Байду номын сангаас
张涛田黎明朱贵明任继秋张宇田丽华（佳木斯大学基础医学院，黑龙江佳木斯 154007）
〔摘要〕目的研究白花败酱草总皂苷对人宫颈癌 Hela 细胞的抑制作用及其机制。方法采用 MTT 法观察白花败酱草水提液和总皂苷对 Hela 细胞生长增殖的抑制作用；光镜和透射电镜观察总皂苷和水提物诱导 Hela 细胞发生凋亡的情况；观察总皂苷和水提物对 Hela 细胞半胱天冬酶（ Caspase-3）活性的影响。结果白花败酱草总皂苷在体外剂量依赖性地抑制 Hela 细胞的增殖，诱导细胞的凋亡，并通过对凋亡关键酶 Caspase-3 的激活，实现其促进 Hela 细胞凋亡的作用，达到抑制肿瘤细胞增殖的目的。结论 Caspase-3 参与白花败酱草皂苷诱导 Hela 细胞凋亡的作用。
〔关键词〕白花败酱草；皂苷；细胞凋亡； Caspase-3 〔中图分类号〕 R737. 33 〔文献标识码〕 A 〔文章编号〕 1005-9202（ 2012） 11-2321-03； doi： 10. 3969 / j. issn. 1005-9202. 2012. 11. 050
白花败酱草是败酱科草本植物的根茎及带根全草，在中国的华东、华中、华南及西南各地均有分布，是一种常用植物药。白花败酱草具有清热利湿、解毒排脓、活血化瘀、清心安神、改善肝功能、抑菌和抗病毒等作用。关于黄花败酱体内抗肿瘤，体外诱导人乳腺癌（ MCF-7）细胞凋亡的作用曾有报道〔1〕，但白花败酱草及其总皂苷在抗肿瘤方面的作用，较少报道〔2〕。