抗-HCV-HCVRNA肝功能联合检测在丙型肝炎病毒感染检测中临床应用
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慢性丙肝患者血清中HCV—RNA与HCV—Ab的相关性分析作者:刘晓许琳婧孙丽萍来源:《中国保健营养·中旬刊》2013年第12期[摘要] 目的探讨慢性丙型肝炎患者外周血中HCV RNA与HCV-Ab联合检测在丙型肝炎诊断的应用价值,为临床提供诊断治疗依据。
方法收集92例可疑慢性丙型肝炎患者血清,采用荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)进行丙型肝炎病毒检测及ELISA法检HCV-Ab。
结果 HCV RNA阳性率为78.3%(72/92);抗-HCV阳性率为73.9%(68/92)最后,利用SPSS软件做统计分析。
结论 HCV RNA含量与抗-HCV含量呈正相关(r=0.892,P[关键词] HCV RNA;实时荧光定量PCR;丙型肝炎病毒抗体丙型肝炎病毒是单股正链RNA病毒,属黄病毒科丙型肝炎属。
丙型肝炎呈世界性分布,丙型肝炎病毒(HCV)是丙型肝炎的病原体,主要由输血和注射等途径传染,其致病机制主要是通过病理性免疫应答导致肝细胞损伤,它还有诱发原发性肝癌的可能[1]。
据世界卫生组织统计,全球丙型肝炎病毒(HCV)的感染率约为3%,每年新发HCV病例约315万例[2],而高度慢性化是该病的最大特征[3],其中10%-15%发展为肝纤维化,最终每年有1%-4%成为肝癌。
由于当前医学界并没有有效的抗病毒药物与HCV疫苗,必须高度重视对于可能患有该类疾病的人群的早发现、早诊断和早治疗,从而有效地对丙型肝炎的发生与传播进行控制。
目前临床对丙型肝炎的诊断仍是以临床症状结合抗-HCV抗体、HCV RNA等实验室指标为临床诊断依据。
HCV RNA是HCV的核心成分,Mercier等[4]发展了HCV RNA的实时荧光定量PCR(FQ-PCR)技术,敏感性高,HCV RNA荧光定量检测被认为是诊断HCV病毒血症的“金标准”[5-6],可以反映HCV的复制状态以及传染性,继而分析受检者感染丙型肝炎病毒的状态。
丙型病毒性肝炎丙肝即丙型病毒性肝炎。
丙型病毒性肝炎(HC)简称丙型肝炎或丙肝(HC),主要是由丙型肝炎病毒(HCV)通过血液传播途径,少数通过密切接触传播途径所引起的急性肝脏炎症,临床表现与乙型肝炎相似。
丙型病毒性肝炎呈全球性分布,流行性很强,国外人群HCV感染率高达3%,我国健康人群HCV抗体阳性率为0.7%~3.1%。
丙型病毒性肝炎传染性很强,一旦感染很难治愈,并极易转为慢性肝炎和发生肝硬化,甚至诱发肝癌。
目录检查1抗-HCV大部分HCV感染者,体内均出现抗HCV。
因此,检测抗-HCV对丙型肝炎诊断很有价值。
抗-HCV阳性是HCV感染的标志。
但目前检测结果不能充分反映急性、慢性抑或恢复期感染。
抗体效价也不能反映HCV感染的强度,至少在动物实验中未能证实。
抗-HCV阳性可能表示近期感染后的免疫状态,但大多数表示现症HCV感染,并在一定程度上反映个体的传染性。
人感染HCV 后至抗-HCV阳转,这段时间个体长短差异很大,目前所用方法,测出抗体较晚,在该期唯一感染的标志患者始终不出现抗-RNA,此外尚有20%丙型肝炎患者始终不出现抗-HCV,故实际感染率比检出率高,抗-HCV阴性不能除外HCV感染丙型病毒性肝炎2.HCV-RNA因丙型肝炎患者血液中HCV含量很低,直接做核酸杂交,很难查到HCV-RNA,须先经核酸扩增后测定。
采用半定量聚合酶链反应(HCVcDNA/PCR,简称cPCR)测定肝和血清中HCV-RNA,具有特异性强、灵敏度高、快速的优点。
HCV-RNA 阳性是HCV感染的直接证据,是HCV复制指标,有传染性。
因HCV-RNA较抗-HCV出现早,故可用于早期诊断及献血员的筛查。
HCV-RNA阴性,说明HCV被清除,因此,也可作为判断预后和疗效的指标。
2诊断1.抗HCV即丙肝抗体。
丙型肝炎病毒是目前诊断丙型肝炎的主要指标。
但因感染HCV后抗HCV出现较慢,一般在发病后2~6个月,甚至1年才转阳,故不能作为早期诊断丙型肝炎的方法。
浅谈丙肝抗体阳性者血清中HCV 摘要:目的:探讨丙肝抗体阳性者血清中hcv-rna的阳性率,为临床诊断、治疗hcv感染提供依据。
方法:采用pcr实时荧光定量法对36例丙肝抗体阳性患者进行丙型肝炎病毒rna检测。
结果:36例丙肝抗体阳性患者中,20例hcv-rna阳性,阳性率为55.56%。
结论:抗-hcv和hcv-rna的联合检测,对于丙型肝炎的诊断及治疗具有重要的价值及临床意义。
关键词:丙型肝炎病毒;抗丙肝病毒抗体;pcr实时荧光定量法【中图分类号】r564【文献标识码】b【文章编号】1672-3783(2012)11-0128-01丙型肝炎病毒(hcv)是一种经血传播的疾病,临床以elisa法检测的抗-hcv抗体为主,但抗体阳性并不能说明病人携带丙型肝炎病毒,也不能反映其是否具有传染性。
为了更好指导临床用药,现就在我院就诊的36例丙肝抗体阳性患者血清进行hcv-rna检测,现报告如下。
1资料与方法1.1对象:自2011年1月~2012年12月,在我院就诊并经elisa 法检测为抗-hcv抗体阳性的患者标本,采集静脉血5ml,及时分离血清,若不能当日检测冰冻保存。
1.2方法及仪器1.2.1检测抗-hcv抗体:试剂由山东潍坊3v生物工程公司提供,仪器选用mk3酶标仪及普朗洗板机,操作严格按标准的操作规程进行,并进行室内质量控制。
1.2.2丙型肝炎病毒rna测定:试剂由中山达安基因有限公司提供,仪器为美国abi 7300实时荧光定量分析仪,采用pcr实时荧光定量法对36例丙肝抗体阳性患者进行丙型肝炎病毒rna的检测。
2结果36例抗-hcv抗体阳性患者中,其中20例hcv-rna阳性,阳性率为6667%,病毒量为1.0×103-5.0×106 iu/ml。
3讨论丙型肝炎病毒(hcv)属于黄病毒科,丙型肝炎病毒属,单股正链rna病毒。
hcv感染人体后,有将近一半的人会变为慢性肝炎,并且慢性hcv患者可能发展为肝硬化,并可能导致肝细胞癌。
医学基础与药学研究·96·丙肝患者血清抗-HCV、HCVRNA载量与肝功能关系研究陈继梅1 施志农2 李坤宝1【中图分类号】 R512.63 【文献标识码】 A 【文章编号】 1671-8054(2019)05-0096-03【摘 要】 目的:探讨慢性丙型肝炎患者血清丙肝抗体、HCVRNA载量及肝功能的关系。
方法:分别用ELISA法、实时荧光定量PCR法及全自动生化仪对确诊的83例慢性丙肝患者血清进行丙肝抗体、HCVRNA载量及肝功能指标进行检测。
结果:慢性丙型肝炎患者HCVRNA检出率显著低于丙型肝炎抗体,差异具有统计学意义(P<0.05),有病毒复制慢性丙肝患者ALT、AST水平显著高于无病毒复制者,差异均具有统计学意义(P<0.05),ALT、AST水平在高、中、低病毒复制组间差异均无统计学意义(P>0.05),ALT、AST水平并不随HCVRNA载量升高而升高。
结论:综合检测HCV抗体和HCVRNA载量可以明确诊断慢性丙肝感染及判断病毒复制情况。
病毒复制可造成肝脏炎症,但肝脏炎症程度并不随HCVRNA载量升高而升高。
【关键词】 慢性丙型肝炎 丙肝抗体 HCVRNA载量 肝功能丙型肝炎病毒(HCV)感染呈现全球分布,是常见的慢性肝病之一,我国丙肝的患病率为1.3%[1]。
感染后如不进行适当的抗病毒治疗,20%~30%的丙肝病毒感染者10~20年后会发展为肝硬化,2%~7%会进展为原发性肝癌[2]。
大多数丙型肝炎感染者早期症状不典型,无明显临床症状,患者感染多呈隐匿,对丙肝的筛查和诊断多依赖实验室检查。
为了解慢性丙型肝炎患者丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)、血清丙型肝炎病毒核酸(HCVRNA)载量与肝功能损害的关系,本文通过回顾性分析我院确诊的83例慢性丙型肝炎患者抗HCV抗体、HCVRNA载量及肝功能等项目检测结果,探讨慢性丙型肝炎患者此三项检测的临床意义,为HCV的诊治提供信息。
抗-HCV\HCVRNA及肝功能联合检测在丙型肝炎病毒感染检测中
的临床应用
丙型肝炎是比较严重的病毒性肝炎之一,who估计全球有1.7亿
人感染丙型肝炎病毒。在我国健康人群中抗hcv阳性率为0.7-3.1%,
约3800万人。急性丙型肝炎容易慢性化,慢性丙型肝炎不经积极
有效治疗易发展为肝硬化和肝癌。因此,早期正确诊断显得龙为必
要[1]。目前丙型肝炎病毒(hcv)感染的检测包括血清学检测和核
酸检测,前者包括hcv抗体(抗-hcv)、核心抗原检测,后者包括
定性/定量rna检测和基因型 /亚型检测[2] 。目前,临床上习惯
以检测抗-hcv抗体来判断患者是否为丙肝患者,但抗-hcv产生后
可长期存在,对诊断和治疗效果的评价并无太在意义[3]。丙型肝
炎病毒所导致肝脏损伤情况主要靠肝功能各项检测指标。近年的许
多研究表明,应用荧光定量pcr技术检测丙型肝炎病毒rna具有快
速、特异、高灵敏度等优点。此方法的准确性对于丙型肝炎患者的
早期确诊、疗效观察、感染人群的普查及污染源的监测均具有较高
的实用价值[6]。本实验先采用elisa检测抗-hcv怀疑hcv感染的
临床标本,筛选出194份抗-hcv阳性标本(排除hav、hbvhev阳性),
再采用荧光定量pcr检测hcvrna,并同时采用生化分析仪检测alt、
ast、ggt、alp、tba、tbil、dbil、pa、tp、、alb、glob等肝功能
水平,以探讨这些指标之间的相关性。
1材料和方法
1.1标本来源
2011年本院门诊及住院经elisa法判为抗-hcv阳性或在治疗的
丙型肝炎病人的标本194份:其中hcv-rna标本用edta-2k抗疑的
血浆标本,每周二检测一次;alt、ast标本为血清标本,每日检测;
抗-hcv为血清标本,每周检测3次。
1.2检测方法
1.2.1抗-hcv采用elisa法检测,检测试剂为上海科华生物公司
提供,具体操作按sop进行。
1.2.2hcvrna采用荧光定量pcr:取50ul血浆离心沉淀 ,经rna
提取,逆转录后吸取5ul样本点样到pcr反应管内在abi7500扩增
仪进行pcr扩增检测。试剂由中山大学达安安基因诊断公司提供,
具体操作按sop进行,hcv-rna含量的正常值为0.05)两者之间相
关性无统计学意义。
2.2讨论
本文经统计分析显示,131份ast异常,异常率67.5%(r=-0.213
p=0.003);84份ggt异常,异常率43.3%(r=-0.288 p<0.001),
47份tba高于正常值,异常率为24.2%(r=-0.355 p<0.001);49
份pa低于正常参考值,异常率25.3% (r=-0.198 p=0.012);86
份glob升高,异常率44.3%( r=-0.191 p=0.013);hcvrna与ast、
ggt、tba、pa、glob的相关性有统计学意义,且异常率很高,说明
这些患者中有近一半的患者存在不同程度的肝损伤。zechini认为,
alt水平特别是ast水平,与肝损伤的程度有关[4],即hcvrna水
平与alt、ast水平无相关性,表明hcvrna含量与肝损伤相关,但
是不能反映肝脏损伤的程度[4]。
从表2中得知,194份hcv-rna阳性病例中,大部份病例的rna
含量集中在103-106拷贝/ml之间,共有175例(占90%),达到107
且拷贝/ml的仅占8例,<103拷贝/ml 的仅有11例。生化指标中
alt、ast、ggt、glob的异常率也主要集中在106以内,ast、ggt、
tba、pa异常率在hcv-rna103-104拷贝/ml时达高峰,说明由于hcv
病毒的长期持续感染,肝细胞逐渐损伤破坏,反映了hcv病毒引起
肝细胞慢性损伤的过程,特别是86份glob升高,异常率44.3%
( r=-0.191 p=0.013);hcvrna 与tba(r=-0.355 p<0.001),说
明有部份患者肝细胞损伤严重或向慢性肝炎转化。hcv--rna达到
107且拷贝/ml的仅占8例,各项生化指标在这个阶段的异常率较
低,病毒载量与生化指标不一致,可能的原因是首先病例少不具有
代表性,其次可能是处在hcv感染的“窗口期”,此时hcv-rna含
量很高,但生化指标还没发生变化或是变化很轻微。本资料显示,
当hcv-rna<103拷贝/ml(共11例)时,各生化指标也处于较高水
平,其原因有待进一步研究。
机体感染hcv后产生抗-hcv抗体的时间为1-7月,平均3个月,
抗体检测具有简单、方便、快速、经济等特点[1],抗-hcv产生是
病毒感染的间接证据,不能区别是现症感染还是病毒已被清除,不
能作为抗病毒治疗的适应症。抗-hcv“窗口期”较长,而血清中rna
出现较早,从感染到能检测到rna “窗口期”只有1周左右[4]。
hcv-rna能反映病毒复制与传染性,有确诊价值和用于抗病毒治疗
疗效的评估[5] ,应用荧光定量pcr技术检测丙型肝炎病毒rna具
有快速、特异、高灵敏度等优点,此方法的准确性对于丙型肝炎患
者的早期确诊、疗效观察、感染人群的普查及污染源的监测均具有
较高的实用价值[6]。杨瑞锋等[2]认为hcvrna阳性是慢慢性丙型
肝炎抗病毒治疗的适应症,只有rna检测阳才考虑进行治疗,基线
rna水平与治疗预后相关,高病毒载量的预后不及低病毒载量。早
期感染、传染性评估、疗效观察、预后评估需要进行hcvrna检测;
肝功能损伤情况需靠肝功能各项指标联合检测,单一指标并不能完
全反映肝脏受损情况,alb半衰期长(21天),多在病情较重时才
发生变化,但pa是肝细胞合成的快速转运蛋白之一,半衰期短(仅
1.9天),它能更敏感的反映肝脏的合成功能,它比alb更能反映肝
细胞损伤;tba若持续升高说明患者肝细胞损伤严重或向慢性肝炎
转化。因此,判断肝功损伤情况要靠多种生化指标综合检测。
综上所述,抗-hcv、hcvrna和肝功能联合检测在临床上有重要价
值。
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