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2004—2005年度生物工程专业《代谢控制发酵》考试试卷及答案（2005年6月）班级——————姓名————————得分——————一名词解释（每题6分，共60分）1 代谢互锁从生物合成途径来看，似乎是受一种完全无关的终产物的控制，它是在较高浓度下才发生，而且这种抑制（阻遏）作用是部分性的，不完全的。
2 协同反馈抑制在分支代谢途径中，任何一终产物豆不能单独抑制该途径第一个酶，但当几个末端产物同时过量，它们可协同抑制第一个酶反应。
3 优先合成 a D→EA−→−c C−c B−→b F→G底物A经分支合成途径生成两种终产物E和G，由于a酶的活性远远大于b 酶的活性，结果优先合成E。
E合成达到一定浓度时，就会抑制a酶，使代谢转向合成G。
G合成达到一定浓度时就会对c酶产生抑制作用。
4 累积反馈抑制在累积反馈抑制中，每个最终产物只能单独的部分的抑制代谢途径中的第一个酶，当几个末端产物同时存在时，它们的抑制作用是积累的。
5 转化指相当大的游离的供体细胞的DNA片段被直接吸收到受体细胞内，并整合于受体细胞的基因组中，从而使受体细胞获得供体细胞部分遗传性状的现象。
6 转导利用转导噬菌体为媒介，将供体菌DNA导入受体菌中，从而使受体菌获得部分遗传性状的现象。
7代谢控制发酵利用遗传学和生物学方法认为的在DNA分子水平上改变或控制微生物的代谢，使目的产物大量合成、积累的发酵。
8 营养缺陷型突变株代谢途径某一步骤发生缺陷，造成菌株缺乏某一营养物质，终产物不能积累，解除了终产物的反馈调节，使中间产物积累或另一分支途径的末端产物得以积累。
9 渗漏突变株由于遗传性障碍不完全的缺陷菌株，由于遗传突变导致某一种酶的活性下降而不是完全丧失，能够少量合成某一种代谢最终产物。
10 限量补充培养通过在培养基中限量控制营养物的量，解除对酶的反馈调节，从而使目标产物得到积累的培养方法。
二论述题（每题20分，共40分）1 根据D-核糖的生物合成途径及代谢调节机制，阐述D-核糖高产菌的育种思路。
代谢调控发酵习题课件摘要控制细胞膜渗透的⽅法1、化学控制⽅法通过控制发酵培养基中的化学成分，达到控制磷脂、细胞膜的形成或阻碍细胞壁正常的⽣物合成，使⾕氨酸向外渗透。
（1）控制磷脂合成，形成磷脂合成不⾜的细胞膜。
1）⽣物素缺陷型作⽤机制：⽣物素作为关键酶⼄酰辅酶A羧化酶的辅酶，参与脂肪的合成，进⽽影响磷脂的合成。
控制的关键：⽣物素亚适量（5~10ug/l2）添加表⾯活性剂（吐温60)或饱和脂肪酸清除渗透障碍物，积累⾕氨酸。
3)油酸缺陷型由于油酸缺陷型突变株切断了油酸的后期合成，即丧失脂肪酸合成能⼒，直接影响磷脂的合成和细胞膜的渗透性控制关键：必须控制油酸亚适量4)⽢油缺陷型作⽤机制：丧失a-磷酸脱氢酶。
不能合成a-磷酸⽢油和磷脂。
必须由外界供给⽢油才能⽣长。
控制⽅法：⽢油限量供应（添加亚适量的⽢油或⽢油衍⽣物），间接控制磷脂合成。
（2）阻碍⾕氨酸菌细胞壁的合成，形成不完全细胞壁，进⽽导致形成不完全细胞膜。
像在对数⽣长期添加青霉素或头孢霉素C等抗⽣素抑制⾕氨酸⽣产菌细胞壁后期合成乳糖操纵⼦：⼤肠杆菌（E.coli)的⼀种操纵⼦，由启动⼦(promoter,P)、活化蛋⽩结合位点(CAP)、操纵基因(operator,O )、及与乳糖代谢相关的⼏种酶的结构基因(structural gene)组成调节酶包括3个种类：⑴变构酶；⑵同功酶：具有同⼀种酶的底物专⼀性，但分⼦结构不同；⑶多功能酶：能够催化两种以上不同反应的酶。
反馈阻遏（feedback repression）是由代谢终点产物抑制酶合成的负反馈作⽤。
3. 反馈抑制与反馈阻遏的⽐较反馈抑制的效果⽐较直接⽽快速，因为不涉及蛋⽩质的合成过程，当终产物浓度达到⼀定⽔平时，⽴即使酶的活⼒丧失，待最终产物的浓度降低后，酶的活⼒⼜重新恢复。
反馈抑制作⽤不通过调节基因调节。
反馈抑制的物质基础是变构酶，通过酶的变构作⽤改变酶的活性。
变构酶的结构为基因所决定。
反馈阻遏是调节基因作⽤的结果，这是⽣物不通过基因⽽适应于环境改变的⼀种“措施”，这种“措施”对于环境的改变反应⽐较迟缓。
2003—2004年度生物工程专业《代谢控制发酵》考试试卷及答案（2004年6月）班级——————姓名————————得分——————一、名词解释（20分）：1.Catabolit repression (2分)分解代谢物阻遏：在培养基中有多种营养物质时，微生物先选择利用易分解利用的营养物质，而这种营养物质的分解，对分解利用其它营养物物质所需酶的合成起阻遏作用。
其实质是细胞内cAMP少了。
2．Pasteur effect (2分)巴斯德效应：微生物细胞的有氧呼吸抑制了发酵作用。
酵母发酵酒精时，由于供氧使TCA 循环加快，ATP增加，细胞内能荷增大，反馈抑制和阻遏EMP途径中关键酶FPK酶，使酒精产量下降。
3.Energy charge (2分)能荷：是细胞内能量状态的一个认为假设参数，指细胞内含有的核苷酸中相当于ATP的数量百分比。
能荷＝{[AT P]＋1/2[ADP]}/{ [AT P] ＋[ADP]＋[AMP]×100%4.Concerted feedback inhibition协同反馈抑制：在代谢途径中，会产生两个以上的代谢产物，任何一种代谢产物的积累都不会对代谢途径的第一步反应得酶起抑制作用，只有当代谢产物同时过量积累时，才会对代谢途径的第一步反应得酶起抑制作用。
5.Cooperte (synergistic) feedback inhibition增效性反馈抑制：在代谢途径中，每种代谢产物只能单独地、部分地抑制第一步反应的酶。
当它们均过量积累时，对反应第一步酶起强烈的抑制作用。
此时，抑制作用大于两种代谢产物单独抑制作用之和。
6.Metabolic interlock代谢互锁：在代谢途径中，前端反应的酶受到与其看似无关的代谢产物的抑制（阻遏）作用。
7.Analogue-resistent mutant抗代谢结构类似物突变株：对于代谢产物的结构类似物的抗性突变株。
代谢产物对代谢途径有抑制（阻遏作用），使其酶不能合成，而代谢结构类似物存在时，与代谢产物结构类似，起相同作用，使反应的酶无法合成，但结构类似物并不减少（因为它不参与蛋白质代谢）。
《氨基酸发酵工艺学》试卷A答案一、名词解释（每小题3分，共18分）1、代谢控制发酵：就是用遗传学或其它生物化学的方法，人为的改变、控制微生物的代谢，使有用产物大量生成、积累的发酵。
2、DE值：即葡萄糖值，表示淀粉水解程度及糖化程度。
DE值=还原糖/干物质×100％3、噬菌体效价：每毫升试样中所含有具有侵染性的噬菌体的粒子数4、发酵转换：当发酵条件发生改变时，必然会影响到生物代谢途径分支的关键酶的酶量和酶活性的改变，从而导致发酵方向发生转换，从而产生不同的代谢产物5.淀粉液化：利用α－淀粉酶将淀粉液化，转化为糊精及低聚糖，使淀粉的可溶性增加。
6.临界溶氧浓度：指不影响菌的呼吸所允许的最低氧浓度。
二、单项选择题（每小题2分，共20分）三、填空题（每空1分，共20分）1.蛋白质水解液抽提法，化学合成法，酶法，微生物发酵法2.控制磷脂的合成添加表面活性剂油酸缺陷型甘油缺陷型温度敏感型（能写出任意三条即可）3.长菌型细胞转移期细胞产酸型细胞4.α-型结晶β-型结晶自然起晶加晶种起晶5.等电点法离子交换法锌盐法6.离子交换法菌体钙离子四、简答题（每小题6分，共30分)1、淀粉水解糖制备中，酸解法的工艺流程？答：淀粉、水、盐酸→调浆→进料→水解→冷却、中和→脱色→过滤→糖化液2、酸法制备淀粉水解糖的质量要求有哪些？答：（1）糖液透光率＞90％（420nm）（2）不含糊精、蛋白质（起泡物质）。
（3）转化率＞90％。
(4) 还原糖浓度＞16％（5）糖液不能变质3、氨基酸发酵菌种为什么要定期分离纯化？有什么意义？定期分离纯化的原因：因为工业生产菌种酵母自身发生了退化，退化的原因：（1）菌种的自发突变在10-8左右（2）由于菌种大多为诱变菌种，容易受外界环境的影响，发生回复突变。
菌种纯化的意义：（1）保证产品的稳产、高产（2）进行生产育种。
4、氨基酸生产中，泡沫对发酵的影响？①发酵液逃逸②感染③降低装填系数，设备利用率降低④影响氧传递（答出任意三条即可）5、氨基酸生产菌菌种的来源有哪些？（1）向菌种保藏机构索取有关的菌株，从中筛选所需菌株。
《代谢控制工程》复习题1.名词解释代谢控制发酵：所谓代谢控制发酵就是利用遗传学的方法或其他生物化学的方法，人为地在脱氧核糖核甘酸的分子水平上，改变和控制微生物的代谢，使有用目的产物大量生成、积累发酵。
关键酶：参与代谢调节的酶的总称。
作为一个反应链的限速因子，对整个反应起限速作用。
变构酶：有些酶在专一性的变构效应物的诱导下，结构发生变化，使催化活性改变，称为变构酶。
诱导酶：诱导酶是在环境中有诱导物(通常是酶的底物)存在的情况下，由诱导物诱导而生成的酶。
调节子：就是指接受同一调节基因所发出信号的许多操纵子。
温度敏感突变株：通过诱变可以得到在低温下生长，而在高温下却不能生长繁殖的突变株。
碳分解代谢物阻遏：可被迅速利用的碳源抑制作用于含碳底物的酶的合成，就称为碳分解代谢阻遏。
氮分解代谢物阻遏：可被迅速利用的氮源抑制作用于含氮底物的酶的合成，就称为氮分解代谢阻遏。
营养缺陷型突变菌株：原菌株由于发生基因突变，致使合成途径中某一步骤发生缺陷，从而丧失了合成某些物质的能力，必须在培养基中外源补加该营养物质才能生长的突变菌株。
渗漏突变株：由于遗传性障碍的不完全缺陷，使它的某一种酶的活性下降而不是完全丧失。
因此，渗漏突变菌株能少量的合成某一种代谢最终产物，能在基本培养基上进行少量的生长。
代谢互锁：从生物合成途径来看，似乎是受一种完全无关的终产物的控制，它只是在较高浓度下才发生，而受这种抑制(阻遏)作用是部分性的，不完全的。
平衡合成：底物A经分支合成途径生成两种终产物E与G，由于a酶活性远远大于b 酶，结果优先合成E。
E过量后就会抑制a酶，使代谢转向合成G。
G过量后，就会拮抗或逆转E的反馈抑制作用，结果代谢流转向又合成E，如此循环。
(P45图)优先合成：底物A经分支合成途径生成两种终产物E和G，由于a酶的活性远远大于 b 酶的活性，结果优先合成E。
E合成达到一定浓度时，就会抑制a酶，使代谢转向合成G。
G 合成达到一定浓度时就会对c酶产生抑制作用。
高二生物传统发酵技术的应用试题1.微生物代谢的人工控制是指（）A. 改变微生物的遗传特性B. 控制发酵时的温度C. 调节发酵过程中的pH，氧气通入量D. 包括A、B、C三项【答案】D【解析】微生物代谢的人工控制，既包括改变微生物的遗传特性，也包括控制发酵条件，故选D。
【考点】本题考查微生物的利用等相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
2.用带盖瓶子制作果酒时，每隔一段时间（一般为12小时左右）要对瓶盖进行一次操作，下列关于操作及其作用的组合正确的是（）A．拧松，进入空气B．打开，进入空气C．拧松，放出CO2D．打开，放出CO2【答案】C【解析】用带盖瓶子制作果酒时，每隔一段时间拧松瓶盖，以释放出二氧化碳，防止瓶子爆裂；但不能打开瓶盖，一防止杂菌进入，污染培养液，二防止空气进入使得发酵中断．【考点】酒酵母制酒及乙酸菌由酒制醋【名师】酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖，表达式为：C6H12O6+O2→CO2+H2O+能量；酵母菌进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，表达式为：C6H12O6→C2H5OH+CO2+能量．果酒制作过程中产生CO2，所以每隔一段时间需拧松，放出CO2，以免造成瓶子爆裂．3.制作泡菜时，所用的菜坛子必须密封，其原因是A．防止水分的蒸发B．防止菜叶萎蔫C．乳酸菌在有氧条件下发酵被抑制D．防止产生的乳酸挥发【答案】C【解析】密封的目的不是防止水分蒸发，是为乳酸菌提供无氧环境，A错误；密封的目的是为乳酸菌提供无氧环境，不是防止菜叶萎蔫，B错误；乳酸菌是厌氧菌，需要无氧环境，所以密封的作用是为了防止乳酸菌在有氧条件下发酵被抑制，C正确；密封的目的是防止氧气进入，而不是防止产生的乳酸挥发，D错误。
【考点】制作泡菜【名师】乳酸菌是厌氧菌，只有在无氧条件下才能生存，有氧时，其无氧呼吸会受到抑制，因此制作泡菜、酸菜时，所用菜坛子必须密封，目的是为乳酸菌提供无氧环境，防止其氧气进入抑制乳酸菌发酵。
新陈代谢与发酵工程一、选择题（每题只有一个正确选项）1、某植株成熟叶正常，部分幼叶出现病态，用Ca（NO3）2根部施肥后幼叶恢复正常。
下面是施肥后根尖成熟区细胞吸收Ca2+、NO3-和Ｈ2Ｏ的示意图，正确的是（）H2NO3-Ca2+A B C D2、乙图是甲装置置于自然环境中，测定南方某一晴天一昼夜中小室内氧气的增加量或减少量而得到的。
下列说法错误的是（）A．如将甲装置中的大豆换为甘蔗，乙图12时对应的点应向上移动B．如该植株培养液中缺Mg，那么a点应向右移动C．a→b段的限制性因素主要是CO2 D．小室内O2总量最大时刻是16点3、下列关于微生物营养的叙述，正确的是（）A 异养微生物都能利用糖类做碳源B利用无氮培养基可分离根瘤菌C培养微生物室必须加入生长因子D培养基中的C/N比会影响微生物的生长和代谢4、下图是某种细菌在灭菌后的恒定容积的液体培养基中，并置于适宜条件下培养，定期取样测定出的生长速率曲线，在a→d4个阶段中有关变化的叙述，不正确的有（）A．a过程中合成的酶可能有诱导酶，a→d阶段存在酶活性的调节B．若用细菌数目的对数作纵坐标，a→c阶段形成“S”型曲线C．c阶段生长速率为0，表示活菌数目已达到环境容纳的最大值D．导致d阶段种群数量变化的主要因素有种内斗争以及种间竞争等5．下列关于动物新陈代谢的叙述，正确的是（）A．在正常情况下，肝脏细胞可以将多余的脂肪合成为脂蛋白B．当血糖含量升高时，肌肉细胞可以将葡萄糖分解成为乳酸C．糖类分解时可以产生与必需氨基酸和非必需氨基酸相对应的中间产物D．氨基酸脱氨基产生的含氮部分转变为尿素和尿酸后排出体外6.A. 甲物质可能抑制该酶的活性B. 该酶比较适合在40℃的环境下起作用C. 该酶在作用35min后便失去活性D. 该酶在中性环境下的催化效率比碱性环境高7、英国首席兽医官于2008年6月5日证实，6月3日在英格兰中部地区发现的禽流感病毒为H7N7型高致病型禽流感病毒（核酸为RNA）。
代谢控制发酵试题库1. 脱敏作用：变构酶经特定处理后，不丧失酶活性而失去对变构效应物的敏感性。
注：处理方法：①使变构酶解聚，②基因突变2．分解代谢物阻遏：当细胞具有一优先利用的底物（通常是，但并不总是葡萄糖）时，很多其他分解反应途径受到阻遏3. 营养缺陷型：就是指原菌株由于发生基因突变，致使合成途径中某一步骤发生缺陷，从而丧失了合成某些物质的能力，必须在培养中外源补加该营养物质才能生长的突变型菌株。
P32 最典型例子：高丝氨酸营养缺陷型（Hom﹣）或苏氨酸营养缺陷型（Thr﹣）菌株达到赖氨酸的积累4. 平衡合成：底物A经分支合成途径生成两种终产物E与G，由于a酶活性远大于酶b ,结果优先合成E。
E过量后就会抑制a酶，使代谢转向合成G。
G过量后，就会拮抗或逆转E的反馈抑制作用，结果代谢流又合成E，如此循环。
5. 优先合成：底物A经分支合成途径生成两种终产物E与G，由于a酶活性远大于酶b ,结果优先合成E。
E过量后就会抑制a酶，使代谢转向合成G。
G合成达到一定浓度时就会对c酶产生抑制作用。
6. 限量补充培养法：将经适当稀释的浓缩处理液涂布于含有微量蛋白胨或0.1%完全培养基成分的基本培养基平板上。
经培养后，野生型细胞迅速生长成较大菌落，而缺陷型细胞生长缓慢只能形成小菌落。
这些小菌落大多数为营养缺陷型，将其转接到完全培养基斜面保存待测。
7. 代谢互锁指从生物合成途径来看，酶受一种与此代谢途径完全无关的终产物的控制，它只是在较高浓度下才发生，而且这种抑制(阻遏)作用是部分性的，不完全的。
8. 反馈抑制的调节类型可以分为以下几种：（1）单功能途径中酶活性的调节类型：①前体激活，②补偿性激活。
（2）多功能途径中酶活性的调节类型：①协作反馈抑制或称多价反馈抑制②合作反馈抑制③积累反馈抑制④顺序反馈抑制⑤假反馈抑制：指结构类似物的反馈抑制⑥同功酶9. 转导指利用转导噬菌体为媒介而将供体菌的部分DNA导入受体菌中，从而使受体菌获得部分遗传性状的现象。
其中必须具有3个组成部分，即供体，转导噬菌体和受体10. 代谢控制发酵：是指利用遗传学方法或其它生物化学方法，人为地在脱氧核苷酸（DNA）的分子水平上，改变和控制微生物的代谢，使有用目的产物大量生成、积累的发酵。
11. 代谢控制发酵的基本思想：⑴切断支路代谢：①选育营养缺陷型突变株，②选育渗漏缺陷突变株。
⑵解除菌体自身的反馈调节：①选育抗类似物突变株②酶活性的利用③营养缺陷型回复突变株的应用。
⑶增加前体物的合成⑷去除终产物⑸特殊调节机制的利用：①多种产物控制机制的利用②平衡合成的利用③代谢互锁的利用④优先合成的变换。
⑹条件突变株的应用⑺选育不生成副产物的菌株⑻选育生产代谢拮抗物质的菌株12. 转化：转化就是指相当大的游离的供体细胞的DNA片段被直接吸收到受体细胞内，并整合于受体细胞的基因组中，从而使受体细胞获得供体细胞部分遗传性状的现象。
包括3个步骤，即供体DNA的制备，受体细胞对DNA的吸收及转化子的选择13. 基本培养基：能满足野生型或原养型菌株的最低营养成分的培养基。
15. 诱变育种中的几个问题①出发菌株的选择：⑴出发菌株对诱变剂的效应，⑵染色体组倍数对诱变剂的效应。
②细胞悬浮液的制备：⑴同步培养，⑵菌龄，⑶细胞悬浮液浓度，⑷细胞悬浮液的制备。
③诱变剂的选择及处理方法的选择：⑴诱变剂的选择，⑵诱变剂量的选择，⑶诱变剂处理方法的选择。
④中间培养16．代谢产物大量积累措施：①应用营养缺陷性菌株②选育抗反馈调节突变株③选育细胞膜通透性突变株④利用营养缺陷性回复突变株或条件突变株的方法⑤构建目的工程菌株⑥环境控制机表面活性剂的使用。
17. D-核糖发酵的代谢控制育种：①出发菌株的选择，②转酮酶缺陷突变株的分离：⑴选育不利用D-葡萄糖酸或L-阿拉伯糖的突变株，⑵选育莽草酸缺陷突变株，⑶选育L-色氨酸缺陷、L-酪氨酸缺陷、L-苯丙氨酸缺陷、CoQ缺陷、维生素K缺陷或叶酸缺陷突变株。
③其他标记，④利用基因工程技术构建核糖工程菌株，⑤发酵控制。
18 赖氨酸发酵：①切断或减弱支路代谢，②解除反馈调节，③解除代谢互锁，④改善膜的通透性，⑤增加前体物的合成，⑥选育温度敏感突变株，⑦选育脲酶回复突变株，⑧利用基因工程技术构建赖氨酸工程菌株19、谷氨酸发酵：①切断或减弱支路代谢，②解除自身反馈调节，③增加前体物，④提高细胞膜的渗透性⑤选育强化能量代谢的突变株⑥其他遗传标记⑦利用基因工程技术构建谷氨酸工程菌株。
20、色氨酸发酵：①切断支路代谢，②解除自身反馈调节，③增加前体物，④切断进一步代谢，⑤利用基因工程技术构建色氨酸工程菌株，⑥其他标记。
⑦利用细胞融合或转导的方法进行遗传重组可使产量提高。
1.转化和转导都是将外源基因导入受体细胞的方法，只是受体存在差异。
×，转导需要载体，而转化不需要载体。
2.紫外线照射后的菌悬液，不能移至可见光下进行筛选和检出。
√，由于光复活作用，不能移至可见光下3.酶的诱导和酶的阻遏都是指终产物对酶合成过程的促进或阻碍。
×，酶诱导是底物对酶合成的促进，酶阻遏是产物对酶合成的抑制4.一个操纵子中的结构基因通过转录、转译控制蛋白质的合成，而操纵基因和启动基因通过转录、转译控制结构基因的表达。
×，操纵基因和启动基因只起调节作用，本身不表达。
5.诱变处理的菌液进行中间培养主要是为了克服表型延迟。
√，解释表型延迟。
6.转化和转导都是将外源基因导入受体细胞的方法，只是供体存在差异。
×，转化是外源基因直接导入，转导是以噬菌体为载体导入。
7.为了克服表型延迟，必须将诱变处理的菌液进行中间培养，即将一定量的菌液接入基本培养基中培养过夜。
×，诱变处理的菌液必须接入完全培养基培养过夜。
8.限制性内切酶有三类，在基因工程操作中常用Ⅰ型限制性核酸内切酶。
×，基因工程操作中常用Ⅱ型限制性内切酶。
9.反馈抑制作用的酶一定是变构酶，而反馈阻遏作用的酶不一定是变构酶。
√，分析反馈抑制和反馈阻遏的概念三、单项选择题1.酶合成调节速度比酶活力调节速度（B ）A 快B 慢C 相等D 无法比较2.受反馈调节的酶一般是（C ）A 同功酶B 组成酶C 变构酶D 激酶3.变构酶的动力学曲线为（B ）A 双S形B S形C 直线形D 抛物线4.在支链代谢途径中，任何一个终产物都不能单独抑制途径第一个共同酶地反应，但当两者同时过剩时，它们协同抑制第一个酶反应，这种调节类型称为（A ）A 多价反馈抑制B 合作反馈抑制C 积累反馈抑制D 顺序反馈抑制5.在支链代谢途径中，当任何一个终产物单独过剩时，只部分地反馈抑制第一个酶活性，只有终产物同时过剩时，才能引起强烈抑制，其抑制程度大于各自单独存在的和，这种调节类型称为（B ）A 多价反馈抑制B 合作反馈抑制C 积累反馈抑制D 顺序反馈抑制6.下列氨基酸中，其合成途径属于非支路代谢途径的为（B ）A 赖氨酸B 精氨酸C 苏氨酸D 亮氨酸7.利用酶特性进行代谢控制时，利用酶的（D ）特性A 专一性强B 变性C 变构D 专一性差8.在诱变处理后，能使DNA链中胸腺嘧啶形成二聚体的诱变剂为（A ）A 紫外线B 亚硝酸C 烷化剂D 激光9.在诱变处理后，能使碱基氧化脱氨的诱变剂为（B ）A 紫外线B 亚硝酸C 烷化剂D 激光10.诱变处理时所用的出发菌细胞应处于（B ）A 延迟期B 对数生长期C 稳定期D 衰亡期四、填空题1.在代谢工程中，改变代谢流的措施有构建代谢旁路改变分叉代谢途径的流向改变能量代谢途径加速速度限制反应。
2.切断支路代谢的措施为营养缺陷型突变，渗漏缺陷型突变。
3.去除终产物主要是通过改变细胞的细胞膜透性来实现。
4.诱变剂可分为杀菌，诱变。
5.营养缺陷型检出的方法有逐个检出法，夹层培养法，限量补充培养法，影印接种法。
6.原生质融合育种的步骤为标记菌株的筛选，原生质体的制备，原生质体的再生，原生质体的融合，融合子的选择，实用性菌株的筛选。
7.转化过程包括供体DNA的制备，受体细胞对DNA的吸收，转化子的选择。
8.基因工程技术诞生技术上的三大发明DNA的体外切割与连接技术；基因工程载体的使用；DNA的核酸序列分析技术、琼脂糖凝胶电泳和Southern转移杂交等技术。
9.脱敏作用是指变构酶经特定处理后，不丧失酶活性而失去对变构效应物的敏感性。
10.设计育种及发酵工艺控制的“五字策略”为进、通、节、堵、出。
11.酶合成的调节包括酶的诱导，酶的阻遏。
12.影响原生质体制备的因素主要有菌体的前处理，菌体的培养时间，酶浓度，酶解温度，酶解时间，渗透压稳定剂。
13.基因工程五大单元操作为切，接，转，增，检。
14.转导必须有供体、转导噬菌体和受体3个组成部分。
15.表型延迟包括生理性延迟，分离性延迟两种。
16.酶合成的阻遏包括末端代谢产物阻遏，分解代谢产物阻遏。
17.解除菌体自身反馈抑制的措施有抗类似物突变，酶特性的利用，营养缺陷型回复突变。
18.诱变剂都具有杀菌，诱变双重效应。
19.营养缺陷型浓缩常用的方法有青霉素法，D-环丝氨酸，五氯酚法，亚硫酸法，制霉菌素法，脱氧葡萄糖法，过滤法，差别杀菌法。
20.基因工程技术诞生理论上的三大发现确定DNA是遗传物质，DNA双螺旋结构模型和半保留复制机理，提出了“中心法则”和操纵子学说，并成功破译了遗传密码。
五、简答题1.简述营养缺陷型菌株的浓缩方法。
营养缺陷型菌株的浓缩方法有青霉素法，D-环丝氨酸，五氯酚法，亚硫酸法，制霉菌素法，脱氧葡萄糖法，过滤法，差别杀菌法。
2.简述夹层培养法进行营养缺陷型菌株检出的原理和步骤。
融化分装在试管中的l0ml基本培养基，冷却至45～50℃，加入适当稀释的经浓缩处理的菌液(每皿50～100个菌落)，混匀，立即倾于预先准备好的基本培养基甲板上，待凝固后培养1～2天。
长出菌落后，从培养皿的背面用记号笔将长出菌落的地方作好标记。
然后在其上加入融化并冷却至45～50℃的10mi完全培养基，凝固后，培养2—3天，将会在前次没有菌落的地方，生出菌落。
这些新生出的菌落(第2次生长菌落)可能是营养缺陷型。
将其转入完全培养基斜面中保存待测。
3.简述转化的概念及步骤。
设计育种及发酵工艺控制的“五字策略”为进、通、节、堵、出。
4.简述基因工程诞生理论上的三大发现。
.基因工程理论上的三大发现：确定DNA是遗传物质，DNA双螺旋结构模型和半保留复制机理，提出了“中心法则”和操纵子学说，并成功破译了遗传密码。
5.简述营养缺陷型菌株的浓缩方法及其机理。
.营养缺陷型浓缩的方法有：青霉素法，D-环丝氨酸，五氯酚法，亚硫酸法，制霉菌素法，脱氧葡萄糖法，过滤法，差别杀菌法。
前6种化学药物能选择性地除去经中间培养后群体细胞中的野生型(原养型)细胞，从而提高缺陷型细胞的分离和检出效率，因为野生生长速度远远快于缺陷型。
