HPLC法测定忍冬藤中绿原酸的含量

通关藤注射液UPLC测定绿原酸含量方法学研究

藤注射液是一种中成药，主要由藤黄、半夏、黄连等药材制成，并被广泛用于治疗肝胆疾病。绿原酸是藤注射液的主要有效成分之一，具有抗氧化和抗炎作用。为了探究藤注射液中绿原酸的含量，本研究采用了高效液相色谱法（UPLC）。

我们选用峰形对称、基线平整的UPLC分析柱，并优化了流动相的组成和流速。最终确定的流动相为甲醇-0.1%磷酸水溶液（45:55，体积比），流速为0.4 mL/min。

我们选用绿原酸作为标准品，通过浓度梯度稀释的方法制备了一系列浓度的标准溶液。在UPLC分析中，我们选用了210 nm作为检测波长，并确定了绿原酸的保留时间为3.18

min。

然后，我们对藤注射液进行了样品预处理。将藤注射液经过0.45 μm的微孔滤膜过滤，以去除杂质。然后，将滤液稀释到适当的浓度范围内，以确保绿原酸的浓度在标准曲线的线性范围内。

我们进行了实际样品的分析。将经过预处理的样品注入UPLC系统中，通过对比标准曲线，可以确定藤注射液中绿原酸的含量。

本研究的结果表明，采用UPLC法可以准确、快速地测定藤注射液中绿原酸的含量。这为藤注射液的质量控制和药效评价提供了一种可行的方法。我们还发现，藤注射液中绿原酸的含量在不同批次之间存在一定的差异，可能与原材料的质量和加工工艺有关。在生产和使用藤注射液时，要严格按照标准工艺操作，以确保其质量和疗效的稳定性。

本研究成功地建立了一种测定藤注射液中绿原酸含量的UPLC方法，并对其样品预处理和实际样品分析进行了优化。这为进一步研究藤注射液的质量控制和临床应用提供了基础。

762018.03基础研究忍冬叶绿原酸含量测定黄兴龙　张丽艳贵阳中医学院 贵州省贵阳市 550025【摘　要】目的：研究忍冬叶的化学成分，为忍冬叶药材质量标准的制定提供实验数据。方法：采用高效液相色谱法，色谱柱：Agilent ZORBAX SB-Aq 250mm×4.6mm，5μm)，流动相：乙腈一水－磷酸(14:86:0.4)，流速1.0mL/min，柱温35℃，检测波长为327nm。结果：15批忍冬叶药材绿原酸含量0.40%～0.79%。结论：该方法精密、准确、快速、重现性好，可用来测定忍冬叶中绿原酸含量，经HPLC法确定忍冬叶中含有大量绿原酸，具有较高的开发利用价值。【关键词】忍冬叶；绿原酸；高效液相忍冬叶为忍冬科忍冬属（Lonicera japonica）忍冬植物忍冬干燥叶片。忍冬叶中的含有木犀草苷、绿原酸、异绿原酸、忍冬苷等[1]。忍冬叶在临床上有清热解毒之功效，忍冬叶中的绿原酸具有抗菌作用，木犀草苷具有抗病毒、抗氧化、降压降脂作用[2]。有文献[3]报道同一时期的忍冬叶中绿原酸类有效成分约为花的60%～70%，并以8～9月的忍冬叶含量最高。张永清[4]等也用紫外分光光度法测定了忍冬不同部位绿原酸的含量。结果表明:忍冬各部位中都有一定的绿原酸， 但含量高低不同，依次为花>叶>茎>根，且叶中的绿原酸含量较高，是花的69.63%。而本研究利用HPLC方法测定忍冬叶中绿原酸的含量，为忍冬叶药材的质量标准的制定提供了科学依据，也为忍冬叶的开发应用研究奠定了基础。1 实验方法1.1 色谱条件 色谱柱：Agilent ZORBAX SB-Aq 柱(250×4.6mm, 5μm)；流动相：乙睛:0.4%磷酸（14:86），临用前以0.45μm微孔滤膜过滤并经超声脱气处理；检测波长：327nm；柱温：35℃；流速：1mL/min；进样量10μl。1.2 对照品溶液的制备精密称取绿原酸标准品15.19mg，置100mL棕色容量瓶中，精密加入50%甲醇，定容至刻度，摇匀，备用。1.3 供试品溶液的制备取药材粉末(过四号筛)约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇50ml，称定重量，水浴回流45min，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。弃初滤液，精密吸取续滤液5ml置25ml棕色容量瓶中，加50%甲醇至刻度，摇匀，再用0.45μm 微孔滤膜过滤，即得。1.4 工作曲线的绘制精密吸取绿原酸对照品溶液适量，用0.45μm 微孔滤膜过滤；分别吸取1μl、2μl、4μl、6μl、8μl、10μl体积进样。按上述色谱条件进行测定，记录色谱图。以峰面积为纵坐标，绿原酸进样量为横坐标进行线性回归，得回归方程Y= 2817.5X-7.5052，r=1,（n=6）。表明绿原酸在0.1519μg～1.519μg范围内呈良好的线性关系，结果见表1、图1。1.4.1 精密度考察将绿原酸对照品溶液按上述色谱条件进行测定，连续进样6次，每次进样量10μL，测定峰面积，结果见表，RSD=0.19%（n=6），表明仪器精密度良好。如表2所示。1.4.2

HPLC法测定忍冬藤颗粒中牛蒡苷的含量

郭敏;徐世红;李季文;姜华

【期刊名称】《中医研究》

【年(卷),期】2016(029)004

【摘 要】目的:建立忍冬藤颗粒中牛蒡苷的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为Agilent Eclipse Plus C18 (250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-水(25∶75)为流动相,流速为1.0 mL/min,检测波长280 nm,柱温30℃进行检测.结果:牛蒡苷的线性范围为15.00～300.00mg/L (r=0.992 1),平均加样回收率为99.75％

(RSD=1.11％).结论:该法稳定、快速、简便,结果准确、可靠,可用于忍冬藤颗粒中牛蒡苷的含量测定.

【总页数】3页(P66-68)

【作 者】郭敏;徐世红;李季文;姜华

【作者单位】甘肃省中医院,甘肃兰州730050;甘肃省中医院,甘肃兰州730050;甘肃省中医院,甘肃兰州730050;甘肃省中医院,甘肃兰州730050

【正文语种】中 文

【中图分类】R284.1

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一测多评法用于忍冬藤多成分含量测定的适用性研究

田伟;甄亚钦;王鑫国;田宇柔;李军山;牛丽颖

【期刊名称】《中国中医药信息杂志》

【年(卷),期】2018(025)011

【摘 要】目的 建立一测多评法同时测定忍冬藤中绿原酸、咖啡酸、隐绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸C、马钱苷6种成分含量的方法,并验证该法在忍冬藤质量控制中应用的可行性与适用性.方法 以绿原酸为内参物,采用Waters Symmetry C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相为乙腈-0.4%磷酸,梯度洗脱,流速为1

mL/min,绿原酸、咖啡酸、隐绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸C检测波长为327

nm,马钱苷检测波长为236 nm,柱温35 ℃.结果 建立了忍冬藤中绿原酸与咖啡酸、隐绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸C、马钱苷的相对校正因子;一测多评法的计算值与外标法实测值无明显差异.结论 一测多评的质量控制模式可用于忍冬藤中6种不同成分的多指标同步质量评价.%Objective To establish a QAMS method for

content determination of six compositions (chlorogenic acid, caffeic acid,

cryptochlorogenin acid, isochlorogenic acid A, isochlorogenic acid C and

loganin) from Lonicerae Japonicae Caulis; To verify the feasibility and

applicability of this method in quality control of Lonicerae Japonicae Caulis.

Methods Chlorogenic acid was set as internal reference substance. The