动物细胞工程 名词解释综合
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细胞工程名词解释名词解释动物细胞培养(animal cell culture):是将来自动物体的某些器官或组织的细胞,在模拟体内生理条件下在体外进行培养,使之存活并生长。
原代培养(primary culture):以直接取自生物体细胞、组织、或器官的培养。
传代培养(passage culture):将原代培养的细胞继续转接培养的过程。
细胞的体外大量增殖是通过传代培养实现的。
细胞系(cell line)由原代培养经传代培养纯化,获得的以一种细胞为主,能在体外生存的不均一细胞群体,。
第一次传代培养后的细胞即为细胞系。
细胞株:从一个经过生物学鉴定的细胞系由单细胞分离培养或通过筛选的方法由单细胞增殖形成的细胞群叫细胞株(cell strain).接触抑制:动物细胞体外培养的方式之一,指由于细胞相互接触而抑制细胞运动性现象。
密度抑制:细胞接触汇合成片后,只要营养充分,细胞仍能进行增殖分裂,但当细胞密度达到一定程度后,营养相对缺乏,代谢产物增多,发生抑制现象。
动物细胞大规模培养:指人工条件下高密度大量培养有用动物细胞生产珍贵药品的技术,是生物工业中大量增殖基因工程、融合或转化细胞所所不可缺少的培养技术。
传代细胞:二倍体细胞,具二倍染色体,具有贴壁和接触依赖性,有限增殖能力,无致瘤性转化细胞:是通过正常细胞转化而来到的分化不成熟、具有无限增殖能力的细胞株。
微载体:依赖贴壁生长的细胞可以附着在微珠的表面繁殖,载体携带细胞在容器中呈悬浮状进行大量培养。
半连续式培养(Semi-continuous culture):在细胞增长和产物形成过程中,每间隔一段时间从中取出部分培养液或者细胞剩余的细胞作为种子,再用新的培养液补足到原有体积。
灌流式培养(Perfusion culture):是把细胞和培养基一起加入生物反应器后,在细胞增长和产物形成过程中,不断地将部分培养液取出,同时又连续不断地补充新的培养液。
干细胞:具有自我更新,高度增值,多向分化潜能的细胞群体胚胎干细胞:一种全能干细胞,是从着床前胚胎内细胞团经过体外分化抑制培养的一种全能干细胞系,可以分化为任何一种组织类型的细胞成体干细胞:成体组织内能够自我更新分化为一种或几种组织细胞的未成熟细胞可塑性:一种组织的成体干细胞向另一种组织的特化细胞分化的能力组织工程:利用生命科学,医学,工程学原理与技术,单独会是组合的利用生物材料,细胞因子实现组织修复再生的一门技术种子细胞:用于组织修复或是再生的细胞材料支架材料:替代细胞外基质使用的生物医学材料生长因子:细胞对外界环境产生的应答通过感知某种化学信号或刺激,并将之传递到细胞核中,调控基因的表达过程单抗:由一个只识别一种抗原决定簇的B细胞克隆产生的同源抗体胚胎工程:是指所有对胚胎进行认为的干预,使其环境因素,发育模式或局部组织功能,发生变化的综合技术胚胎移植:将一头良种母畜配种后形成的早期胚胎取出,移植到另一头同种的,生理状态相同的母畜生殖器官的相应部位,使之发育成为新的个体体外受精:将哺乳动物卵母细胞取出,在体外与精子结合受精的过程胚胎分割:将一个胚胎分割成1/2或1/4胚,移植后获得同卵双生或多生的后代胚胎融合:将两个或几个胚胎的部分或整体融合在一起,使之发育成一个胚胎,然后移植到受体母畜体内让其继续发育成一种嵌合体的技术试管婴儿:从母体中取出卵母细胞在体外进行体外受精,培养形成在其胚胎以后移植到子宫内,使之在子宫内着床,妊娠克隆动物:指不经过生殖细胞而直接采用体细胞的细胞核移植到去核的卵细胞中的方法,获得遗传性状与供核动物完全相同的后代胚胎核移植:将动物早期的胚胎细胞核或卵裂球通过人工操作,移植到去核卵细胞中,重组成新的胚胎并发育成与供体胚胎基因相同的后代的过程体细胞核移植:将动物体细胞经过抑制培养使其处于休眠状态,利用细胞融合技术将体细胞与去核的卵细胞融合重组成新胚胎。
细胞工程名词解释细胞工程 (cell engineering)是以细胞生物学和分子生物学为基础理论,采用原生质体、细胞或组织培养等试验方法或技术,在细胞水平上研究改造生物遗传特性,以获得具有新的性状的细胞系或生物体以及生物的次生代谢产物,并发展有关理论和技术方法的学科。
动物细胞培养(animal cell culture):是指从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞后,模拟动物体内的生理条件,在体外无菌、适当的温度、湿度、酸碱度、气体环境及一定营养条件下,使其不断地生长、增殖并维持其正常的结构和功能的一种技术。
动物器官培养(organ culture):是指对离体的整个器官、器官芽基或器官的一部分进行体外培养,构成器官的不同组织仍保持着它们原来的结构与功能,因而培养的器官在结构、功能上与体内相应的器官非常相近。
动物组织培养(tissue culture):是指取自动物体的某种组织,不经细胞分散处理,对组织团块直接进行体外培养,组织中的细胞与其邻近的细胞、细胞外基质仍然保持着原本的联系,且细胞一直保持原本已分化的特征,组织的结构和功能在培养过程中无明显的变化。
原代培养(primary culture):从有机体取得的材料(细胞、组织或器官)在培养容器培养到第一次传代前,即为原代培养或初代培养。
汇合(confluent):指在培养容器中培养的细胞彼此汇合形成单层。
接触抑制(contact inhibition):体外培养的正常动物细胞,在生长过程中达到相互接触时停止分裂和运动的现象。
外植快(explant):用于初始体外培养而切下的一小块组织或器官。
传代(passage):将细胞从一个培养容器移植到另一个培养容器中,也称为传代培养或再培养(subculture)。
细胞系(cell line):原代培养物经首次传代成功后即为细胞系。
如果细胞系不能继续传代或传代次数有限,称为有限细胞系(finite cell line)。
动物细胞⼯程细胞⼯程第⼀讲⼀、概述1、细胞⼯程(cell engineering )定义应⽤现代细胞⽣物学、发育⽣物学、遗传学和分⼦⽣物学的原理⽅法与技术,按照⼈们的需要,在细胞⽔平上进⾏遗传操作,包括细胞融合、核质移植等⽅法,快速繁殖和培养出⼈们所需要的新物种的⽣物⼯程技术。
2、细胞⼯程的研究内容(1)动植物细胞和组织培养植物细胞培养主要⽤于育种和代谢产物制备,⽇本等国家⽤⽣物反应器培养⼈参细胞⽣产有效药⽤成分。
动物细胞培养⽤于制备单克隆抗体、疫苗、⽣长因⼦等。
(2)细胞融合改良性状,培育新品种(3)染⾊体⼯程细胞⼯程动植物细胞和组织培养细胞融合染⾊体⼯程胚胎⼯程细胞遗传⼯程器官培养组织培养细胞培养(快速繁育和产物⼤量制备)(改良性状,培育新品种)(培育新品种,单倍体和多倍体)(获得⼈们需要的成体)(⽆性繁殖,改变性状)克隆转基因技术主要⽤于培育单倍体或多倍体新品种,如四倍体⼩麦,⼋倍体⼩⿊麦(4)胚胎⼯程主要是获得⼈们需要的成体如:胚胎分割技术、胚胎融合技术、卵核移植技术、体外授精技术等最成功应⽤于畜牧业获得优良品种与胚胎保存对⼈类来说主要⽤于不孕症获得试管婴⼉(5)细胞遗传⼯程克隆:⽆性繁殖,动物克隆指经⽆性繁殖⽽产⽣遗传性状完全相同的后代个体。
转基因技术:将外源基因整合到⽣物体内,能够表达并稳定遗传给后代的实验技术。
3、细胞⼯程的优势(1)避免了分离、提纯、剪切、拼接等基因操作,只需将细胞遗传物质直接转移到受体细胞中就能够形成杂交细胞。
(2)不仅可以在植物与植物之间、动物与动物之间、微⽣物与微⽣物之间,甚⾄可以在三者之间形成前所未有的杂交物种。
4、细胞⼯程发展(1)萌芽阶段---理论渊源和早期的尝试(20世纪初-30年代中期)德国植物⽣理学家Haberlandt在1902年提出植物细胞的全能性。
认为植物细胞有再⽣出完整植株的潜在能⼒。
美国⽣物学家Harrison 是公认的动物组织培养的创始⼈,1907年,以淋巴液为培养基观察了蛙胚神经细胞突起的⽣长过程,⾸创了体外组织培养法。
细胞工程题库一、名词解释细胞工程:是指应用细胞生物学和分子生物学的方法,通过某种工程学手段,在细胞水平或细胞器水平上,按照人们的意愿来改变细胞内遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。
细胞全能性:是指已经分化的细胞仍然具有发育成完整个体的潜能。
动物细胞培养:是指将取自不同组织、具有分裂能力的动物细胞,在一定条件下进行体外培养,使细胞增殖的技术。
干细胞:是一类具有自我更新和分化潜能的细胞,它能够产生高度分化的功能细胞。
根据来源不同,干细胞可分为胚胎干细胞和成体干细胞。
核移植:是指将一个细胞的核遗传物质转移到另一个细胞中,使后者获得前者的遗传信息并表现出前者的某些遗传特征的过程。
二、简答题简述动物细胞培养的基本过程。
动物细胞培养的基本过程包括:(1)原代培养,即从动物组织中分离出单细胞,在培养基中形成细胞悬浮液;(2)传代培养,即对原代培养的细胞进行扩增培养,使细胞数量增多;(3)细胞株培养,即通过选择特定的培养条件,使某些具有特定性质的细胞在培养基中大量扩增;(4)细胞系培养,即通过克隆培养技术,将具有相同遗传特征的细胞进行大量扩增。
简述干细胞的分类及特点。
根据来源不同,干细胞可分为胚胎干细胞和成体干细胞。
胚胎干细胞具有发育的全能性,能够分化为各种类型的组织细胞;成体干细胞则具有多能性,能够分化为特定的组织细胞。
干细胞的特点是具有自我更新和分化的能力,可以在体外进行培养和扩增。
三、论述题论述动物细胞工程的主要应用领域及前景。
动物细胞工程的主要应用领域包括:(1)生产生物制品,如疫苗、抗体等;(2)用于疾病治疗,如基因治疗、细胞治疗等;(3)用于药物筛选和研究,如建立药物筛选模型、药物作用机制研究等;(4)用于组织工程和再生医学,如人工器官、组织修复等。
动物细胞工程的前景非常广阔,随着技术的不断发展和完善,它在未来的医疗、生物制品生产、药物研究等方面将会发挥越来越重要的作用。
《动物细胞工程》讲义一、动物细胞工程的概念动物细胞工程是应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法,在细胞水平上进行的操作,以获得人们所需要的生物产品或细胞本身。
它是现代生物技术的重要组成部分,涵盖了细胞培养、细胞融合、细胞核移植、胚胎移植等多个方面。
二、动物细胞培养(一)基本原理细胞培养的基本原理是细胞的增殖。
细胞在适宜的环境中,能够吸收营养物质,进行新陈代谢,并通过分裂增加数量。
(二)培养条件1、无菌、无毒的环境:对培养液和所有培养用具进行无菌处理,通常还会添加一定量的抗生素,以防止培养过程中的污染。
2、营养物质:包括糖、氨基酸、无机盐、维生素等,这些物质要按照细胞所需的种类和量进行精确配置。
3、适宜的温度和 pH:哺乳动物细胞的培养温度一般在 365℃左右,pH 则在 72 74 之间。
4、气体环境:细胞培养所需的气体主要有氧气和二氧化碳,氧气用于细胞呼吸,二氧化碳则用于维持培养液的 pH。
(三)培养过程1、取材:通常从动物的组织或器官中获取细胞,如从胚胎或幼龄动物的器官组织中获取细胞,其分裂能力更强。
2、原代培养:将取得的组织用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理,使其分散成单个细胞,然后制成细胞悬液,放入培养瓶中培养。
3、传代培养:当细胞贴满瓶壁时,需要用胰蛋白酶处理,使细胞从瓶壁上脱落下来,然后分瓶继续培养。
三、动物细胞融合(一)概念动物细胞融合也称细胞杂交,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。
(二)诱导融合的方法1、物理法:如电激融合法。
2、化学法:常用的诱导剂是聚乙二醇(PEG)。
3、生物法:如灭活的病毒。
(三)应用1、制备单克隆抗体:这是动物细胞融合技术最突出的应用。
2、用于基因定位和染色体转移等研究。
四、单克隆抗体(一)概念单克隆抗体是由单个 B 淋巴细胞经过无性繁殖形成的细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体。
(二)制备过程1、给小鼠注射特定的抗原,使其发生免疫反应,产生能分泌特定抗体的 B 淋巴细胞。
高二动物细胞工程知识点动物细胞工程是指运用细胞生物学、遗传学、分子生物学等理论和技术,对动物细胞进行研究、操作和改良的一门学科。
它在农业、医学和科学研究等多个领域具有重要的应用价值。
本文将介绍一些高二动物细胞工程的基础知识点。
一、细胞培养基础动物细胞培养是动物细胞研究中最基本的技术手段之一。
常见的细胞培养基包括无血清培养基和含血清培养基。
无血清培养基不含动物血清,通过添加人工合成的营养物质来满足细胞生长所需。
而含血清培养基则利用动物血清中所含有的生长因子和营养物质来维持细胞的生长。
二、细胞培养技术1. 细胞传代:细胞传代是指将原始培养的细胞分为若干个小培养皿中,使细胞继续生长和分裂。
细胞传代的目的是为了扩增细胞数量,以满足后续的实验需求。
2. 细胞冻存:细胞冻存是将细胞在低温下保存,以便日后使用。
通过添加特定的保护剂和冷冻液,可以在极低温度下减少细胞的代谢活动,避免细胞死亡。
3. 细胞鉴定:细胞鉴定是通过观察细胞的形态、生长特性、标记物等来确定细胞的身份和纯度。
常用的方法包括细胞形态观察、细胞分子标记和遗传分析等。
4. 细胞转染:细胞转染是将外源基因导入细胞的过程。
常用的转染方法有化学法、电穿孔法和病毒介导的转染法等。
三、动物细胞培养的应用1. 药物筛选:动物细胞培养可以用于药物的筛选和评价。
通过将药物添加到细胞培养系统中,观察其对细胞的影响,可以评估药物的毒性和疗效。
2. 组织工程:动物细胞培养可以为组织工程提供细胞来源。
通过培养和增殖体外的细胞,可以获得大量的细胞用于组织重建和移植。
3. 基因工程:动物细胞培养可以用于基因工程研究。
通过导入外源基因,可以改变细胞的性质和功能,用于疾病基因治疗和基因表达研究。
四、动物细胞工程的挑战与展望尽管动物细胞工程在许多领域都已取得了重要的成果,但仍面临着一些挑战。
例如,细胞培养过程中的细胞衰老、细胞突变和污染等问题需要得到解决。
此外,细胞工程的应用还需要更深入的研究和探索,以满足不断发展的医学和科学需求。
细胞工程学名词解释总结高技术:指那些能带来高经济效益、具有高增值作用,并能向经济和社会各领域广泛渗透的新技术。
生物技术:指通过技术手段,利用生物体或生物过程来生产有经济价值产品或创造新物种的综合技术。
狭义指基因重组、细胞融合、固定化酶与细胞、生物反应器等技术领域。
广义包括资源、能量、粮食、饲料生产以及为净化环境所进行的物质分解及发酵技术等。
生化工程:是由生物科学与化学工程相结合的交叉学科,研究生物技术的实验室成果转化为生产力过程的工程技术问题。
细胞工程:是指以细胞为研究对象,应用生命科学理论,借助工程学原理与技术,有目的地利用或改造生物遗传性状,以获得特定细胞、组织产品或新型物种的综合技术。
干热灭菌:指在干燥环境(如火焰或干热空气)进行灭菌的技术。
主要适用于玻璃器皿的消毒灭菌。
湿热灭菌:湿热灭菌即高压蒸气灭菌,指用饱和水蒸气、沸水或流通蒸汽进行灭菌的方法。
(是最常用和最有效的一种方法。
布类、胶塞、金属器械、玻璃器皿及某些培养用液都可用此法消毒灭菌)。
细胞计数:用血球计数板计数细胞悬液中的细胞数目,然后根据需要进行必要的调整。
mtt法:又称mtt比色法,是一种检测细胞存活和生长的方法。
在一定细胞数范围内,mtt结晶形成的量与细胞数成正比。
活细胞表现出线粒体脱氢酶活性,可将染料mtt还原为难溶的紫色结晶物沉积在细胞内,经酸性异丙醇溶解后呈现的色度可反映出生活细胞的代谢水平,而死细胞则无此酶活性。
活体染色:在体外条件下用某种染色剂对活的组织或细胞进行染色,而对活细胞的生理活动不产生任何明显的影响。
成集落试验:在集落刺激因子存在下培养细胞,可刺激培养细胞分化产生大小不同的细胞集落,这样的集落形成细胞称体外培养集落形成细胞,它是检验培养细胞能否增殖的过硬指标之一。
污染:一切与培养无关的杂质(微生物、化学物、细胞等)进入培养系统,影响培养物的正常生理机能。
动物细胞工程:以动物细胞为基本单位在体外条件下进行培养、繁殖和人为操作,使细胞产生某些人们所需要的生物学特性,从而改良品质,加速繁殖动物个体或获得有用品系的技术。
动物细胞工程第一章动物细胞工程概论一、动物细胞工程的概念1.动物细胞工程的定义动物细胞工程是应用细胞生物学和分子生物学的技术方法对动物细胞进展各种操作并使其在体外生长、增殖、分化以生产有用产品或引向成体化〔产生型生物个体〕的技术体系,是生物技术〔生物工程〕的重要组成局部。
狭义细胞工程指对细胞个体进展的各种操作,广义的细胞工程包括对细胞、组织、器官所进展的各种操作。
2.动物细胞工程争论的主要内容以狭义细胞工程为主,兼顾组织、器官工程等内容的争论。
(1)狭义细胞工程:争论体外分别、培育、增殖、分化动物细胞的条件以及保存、操作及利用动物细胞的工艺技术体系。
(2)组织工程:争论体外培育、增殖动物组织的条件以及保存、操作及利用动物组织的工艺技术体系。
(3)器官工程:争论体外培育、增殖器官的条件以及保存、操作及利用动物器官的工艺技术体系。
(4)动物胚胎工程:争论动物胚胎生产、保存、操作及移植的工艺技术体系。
3.动物细胞工程争论的意义(1)是动物生殖的重要技术手段加快动物生殖速度:A.体外受精生产胚胎 B.胚胎移植生产动物 (2)是人类关心生殖技术的重要组成局部体外受精—胚胎移植技术,可以抑制雄性不育和雌性不孕;(3)是动物遗传育种的重要技术手段对精子或卵子进展遗传操作,或利用细胞融合、胚胎嵌合技术可以使假设干个动物性状进展有机组合,产生的生物个体;(4)生产药物直接培育细胞或组织,从细胞或组织代谢物中直接获得药物;对细胞进展遗传操作,生产转基因动物,利用转基因动物生产药物〔生物反响器〕;(5)保存珍惜动物资源由于动物克隆技术的成功,保存细胞、组织、胚胎,就意味着保存一个生命个体,保存细胞、组织、胚胎,就意味着保存一个生物种群(6)供给人类器官移植的材料人类器官移植进展很快,目前可以进展心脏、肝、肾脏移植,可以进展皮肤、角膜、骨髓细胞移植。
三、动物细胞工程讲授的主要内容1.动物细胞、组织培育2.动物细胞融合3.动物细胞重组4.向细胞内引入高分子物质5.动物细胞冷冻保存6.动物胚胎工程四、动物细胞工程试验〔实习〕内容1.试验仪器设备的识别与使用2.动物细胞培育用液的制备3.动物胎儿成纤维细胞分别与培育4.动物细胞常规检查和生物学检测5.培育细胞的冻存与复苏五、动物细胞工程争论取得的重要进展1.采集、冷冻与人工授精技术的成熟和进展,为充分发挥利用雄性动物生殖潜力奠定了根底;2.雌性动物卵母细胞体外成熟培育技术的成功,使人们在体外完成动物生殖过程成为可能;3.体外受精与胚胎移植技术的成功,产生了试管婴儿,试管牛,试管猪,试管山羊,试管兔;4.细胞核移植技术的成功,使人们克隆高等哺乳动物的梦想得以实现体细胞核移植、胚胎细胞核移植、胚胎干细胞核移植技术的成功,为克隆动物和转基因动物生产供给了技术支撑;5.胚胎干细胞与组织干细胞成功分别、体外扩增与诱导分化争论的成功,为人类医学进展供给了贵重的材料;胚胎干细胞,胰腺干细胞,神经干细胞,骨髓干细胞,皮肤干细胞,角膜干细胞6.转基因细胞〔细胞转染基因〕技术的成功,为转基因动物的生产制造了条件;7.胚胎嵌合技术一种或两种动物胚胎共同生长发育形成一个生物个体的技术,即在一个生物体内,含有来源于两个不同胚胎的细胞和组织;8.细胞融合技术将两种或两种以上的细胞融合,形成一个具有性状的细胞,这种技术称为细胞融合技术。
动物细胞工程末考复习一、名词解释接触抑制指体外培养细胞时,细胞相互接触时能抑制细胞的运动和生长的现象。
细胞相互接触后,如果培养的是正常细胞,由于细胞的相互接触能抑制细胞的运动,这种现象称接触抑制。
密度抑制当细胞密度进一步增大,培养液中营养成分减少,代谢产物增多时,细胞因营养的枯竭和代谢物的影响,导致细胞分裂停止,则发生密度抑制。
细胞分裂指数:细胞群中每1000个细胞中的分裂相数。
器官培养:指从供体取得器官或器官组织块后,不进行组织分离而直接在体外培养,保持其原有器官细胞的结构和联系。
离体授粉:是指在无菌条件下培养离体的未受精子房或胚珠和花粉,使花粉萌发产生的花粉管进入胚珠完成受精而结实的过程。
原代培养:是从动物机体内取出组织接种培养到第一次传代阶段。
传代培养是将原代培养容器内的细胞接种到新培养容器内继续扩大培养的过程。
它们的区分是否更换新的培养容器进行培养。
细胞融合:是指两个或两个以上来源相同或不同的细胞合并成一个细胞的过程。
细胞融合的基本原理是细胞膜的流动性。
杂交瘤技术:指将骨髓瘤细胞与B淋巴细胞杂交,以建立可以合成并分泌单一性抗体的杂交瘤细胞系的技术。
超数排卵:是指在动物发情周期的适当时期,用促性腺素进行处理,诱发其卵巢上大量卵泡同时发育并排卵的技术。
胚胎移植:指对优秀雌性动物进行超数排卵处理,在其发情配种后一定时间内从其生殖道取出早期胚胎,移植到同期发情的普通雌性动物生殖道的相应部位,让其生产后代的技术。
干细胞:是指具有无限或较长期的自我更新能力,并能产生至少一种高度分化子代细胞的细胞。
转基因动物:指通过基因工程技术将目的基因导人生殖细胞、早期胚胎干细胞或早期胚胎,使之整合到受体细胞的基因组中,经发育而产生的个体。
染色体工程的概念:指人们按照一定的设计,计划地合并、添加、替换、消减或易位单条染色体或染色体片段,对生物染色体组或染色体结构进行改造,以定向改变物种遗传特性的新技术。
雌性发育的概念:指用物理方法、化学方法或精子进入卵子(精子的细胞核并未参与受精卵的发育,精子在染色体中很快消失),使卵子激活,胚胎的发育仅是在母体遗传控制下进行的一种发育方式。
动物细胞工程技术动物细胞工程技术是一种涉及生物学、生物技术、化学、工程学等多学科的综合技术,主要目的是利用现代生物工程技术手段制造出高纯度、高效率的生物制品,以满足医药、生物学研究、工业等领域的需求。
动物细胞工程技术涉及广泛,主要包括细胞培养、基因工程、重组蛋白、单克隆抗体等多个方面,下面就对这些方面做一下简单的介绍。
一、细胞培养生物领域中,动物细胞培养起到了至关重要的作用。
通过体外培养,我们可以控制培养环境,从而使某些组织或细胞进行生理学实验,用于研究肿瘤的形成、药物毒性等。
此外,细胞培养也是动物细胞工程技术中其他方面的前提。
细胞培养受到一些重要的因素的影响,包括培养基和组织细胞。
培养基内有一系列溶质、成分和营养物质,能够支持细胞的生长、增殖、生理学功能和代谢活动的正常实现。
组织细胞来源可以是成体细胞或胚胎干细胞。
在细胞培养中,还需要考虑生长动力学、传质驱动力、流体流动、传热和气体传递等工程学因素。
二、基因工程基因工程已经成为了现代生物技术中不可或缺的一部分。
利用基因工程技术可以针对特定的基因进行操作,从而达到对特定功能的调控、改善或增强的目的。
基因工程专业涉及许多实验室技术,包括PCR、DNA序列化、合成基因、重组DNA等。
基因工程技术应用广泛,特别是在药物研究和生产中。
举个例子,利用基因工程技术可获得抗体,有助于身体抵御流感和病毒等感染。
基因工程技术还可用于工业基础研究、新药研发和基于基因优化的婴儿高科技。
三、重组蛋白由于细胞生长环境的丰富程度及复杂性,使得生产蛋白范围广泛。
利用基因工程的方法,人们能够从细胞内提取精细的蛋白,以达到需要的目的。
例如,疫苗中的细菌毒素、生物学诊断中的酶等等,都可以利用重组蛋白的方式制造出来。
重组蛋白的过程中欧冠些参数受到严格的控制,例如pH、温度、氧分压、流动条件、转染电流强度等。
重组蛋白工程技术是一项涉及许多领域的技术,包括生物制造、生物学、化学、医药等。
绪论1.细胞培养与组织培养:属于体外培养,是指生物细胞和组织在离体条件下的生长和增值。
细胞的离体培养称为细胞培养,组织的离体培养称为组织培养。
2.细胞融合:又称细胞杂交,是指两个或两个以上的细胞融合形成一个细胞的过程。
3.细胞核移植:是利用显微镜操作技术将细胞核与细胞质分离,然后再将不同来源的核与质重组,形成杂合细胞的过程。
4.干细胞:是动物体内具有分化潜能、并能自我更新的细胞,分为胚胎干细胞和组织干细胞。
5.转基因动物:是通过基因工程技术将外源的目的基因导入受体动物染色体内,外源基因与动物基因整合后随细胞的分裂而扩增,在体内表达并能稳定地遗传给后代的动物。
第一章1.细胞工程实验室与其他一般实验室的区别:要求保持严格无菌环境、避免微生物及其他有害因素的影响。
2.细胞工程能进行的六方面工作:无菌操作、培养、制作、清洗、消毒灭菌处理和储藏。
3.植物细胞工程实验室特殊的设置:光照条件的培养箱、试管苗需要温室和移植驯化室。
4.细胞工程实验室通用的仪器设备:超净工作台、二氧化碳培养箱、倒置显微镜、电热干燥箱、水纯化装置、低温装置、高压蒸汽消毒器。
5.实验室的生物安全分为p1,p2 ,p3 和p4四个生物安全等级,其中P4生物安全实验室等级最高。
第二章1.清洗的主要目的是清除培养器皿中的杂质和微生物等影响细胞生长的成分。
2.细胞培养过程中主要使用两类消毒方法:物理灭菌法法和化学消毒法。
物理法灭菌法:a.紫外线法适用于无菌室或超净工作台的台面等大面积消毒。
紫外线照射工作台面的距离不应超过1.5cm,照射时间以30min左右为宜。
(注意:紫外灯关闭5min后方可进入使用)b. 湿热消毒:适用于含有不耐热成分的培养基和试剂的消毒,为121.3℃,20min .(注意点:加足水、排尽气、气压降到0时才能打开盖)c.干热消毒法:适用于消毒玻璃仪器,160℃以上,并保持90~120min,以杀死细菌和芽孢 d.过滤除菌:是将液体或气体用微孔薄膜过滤,薄膜0.22~0.45um直径。
一、名词解释1、细胞工程(cell engineering):应用细胞生物学和分子生物学的方法,通过类似于工程学的步骤,在细胞整体水平或细胞器水平上,按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质以获得新型生物或一定细胞产品的一门综合性科学技术。
2、细胞培养(cell culture):是指生物细胞和组织在离体条件下的生长和增殖。
8、植物细胞工程:以植物组织细胞为基本单位,在离体条件下进行培养、繁殖或人为的精细操作,使细胞的某些生物学特性按人们的意愿发生改变,从而改良品种或创造新物种,或加速繁殖植物个体,或获得有用物质的过程。
动物细胞工程:以动物细胞为基本单位在体外条件下进行培养、繁殖和人为操作,使细胞产生某些人们所需要的生物学特性,从而改良品质,加速繁殖动物个体或获得有用品系的技术。
9、脱分化:离体培养条件下,一个已分化的细胞回复到原始无分化状态或分生组织细胞状态或胚性细胞的状态的过程。
11、细胞全能性:一个细胞所具有的产生完整生物个体的固有能力。
12、外植体:植物组织培养中用来进行无菌培养的离体材料,可以是器官、组织、细胞和原生质体等。
13、愈伤组织:脱分化后的细胞,经过细胞分裂,产生无组织结构、无明显极性的、松散的细胞团。
14、细胞分化:在个体发育中,由一个或一种细胞增殖产生的后代,在形态结构和生理功能上发生稳定性差异的过程。
器官发生:是指植物根茎叶花果实等器官的分化和形成18、体细胞胚或胚状体:离体培养下没有经过受精过程,但经过了胚胎发育过程所形成的胚的类似结构统称为体细胞胚19、初代培养:原代培养也称初代培养,严格的说即从体内取出组织接种培养到第一次传代阶段,但实际上,通常把第一代至第十代以内的培养细胞统称为原代细胞培养20、继代培养:将初代培养产物转入继代培养基上,使愈伤组织分化出丛生芽、不定芽继续增殖、胚状体发育成完整植株22、花药培养(anther culture):把发育到一定阶段的花药接种在人工培养基上,使其发育和分化成为植株的过程.23、花粉培养(pollen culture):也叫小孢子培养(microspore culture),是从花药中分离出花粉粒,使之成为分散的或游离的状态,通过培养使花粉粒脱分化,进而发育成完整植株的过程.31、细胞同步化:同一悬浮培养体系的所有细胞都同时通过细胞周期的某一特定时期。
一、名词解释1、细胞工程(cell engineering ):应用细胞生物学和分子生物学的方法,通过类似于工程学的步骤,在细胞整体水平或细胞器水平上,按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质以获得新型生物或一定细胞产品的一门综合性科学技术。
2、细胞培养(cell culture ):是指生物细胞和组织在离体条件下的生长和增殖。
8、植物细胞工程:以植物组织细胞为基本单位,在离体条件下进行培养、繁殖或人为的精细操作,使细胞的某些生物学特性按人们的意愿发生改变,从而改良品种或创造新物种,或加速繁殖植物个体,或获得有用物质的过程。
动物细胞工程:以动物细胞为基本单位在体外条件下进行培养、繁殖和人为操作,使细胞产生某些人们所需要的生物学特性,从而改良品质,加速繁殖动物个体或获得有用品系的技术。
9、脱分化:离体培养条件下,一个已分化的细胞回复到原始无分化状态或分生组织细胞状态或胚性细胞的状态的过程。
11、细胞全能性:一个细胞所具有的产生完整生物个体的固有能力。
12、外植体:植物组织培养中用来进行无菌培养的离体材料,可以是器官、组织、细胞和原生质体等。
13、愈伤组织:脱分化后的细胞,经过细胞分裂,产生无组织结构、无明显极性的、松散的细胞团。
14、细胞分化:在个体发育中,由一个或一种细胞增殖产生的后代,在形态结构和生理功能上发生稳定性差异的过程。
器官发生:是指植物根茎叶花果实等器官的分化和形成18体细胞胚或胚状体:离体培养下没有经过受精过程,但经过了胚胎发育过程所形成的胚的类似结构统称为体细胞胚19、初代培养:原代培养也称初代培养,严格的说即从体内取岀组织接种培养到第一次传代阶段,但实际上,通常把第一代至第十代以内的培养细胞统称为原代细胞培养20、继代培养:将初代培养产物转入继代培养基上,使愈伤组织分化出丛生芽、不定芽继续增殖、胚状体发育成完整植株22、花药培养(anther culture): 把发育到一定阶段的花药接种在人工培养基上,使其发育和分化成为植株的过程.23、花粉培养(pollen culture): 也叫小孢子培养(microspore culture), 是从花药中分离出花粉粒,使之成为分散的或游离的状态,通过培养使花粉粒脱分化,进而发育成完整植株的过程.31、细胞同步化:同一悬浮培养体系的所有细胞都同时通过细胞周期的某一特定时期。
细胞工程(Cell engineering):是指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法,通过某种工程学手段,在细胞整体水平或细胞器水平上,按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。
转基因动物(Transgenic Animals):一种生物(通常是老鼠),将外来基因转入其体内成为其基因组的一部分。
引入的基因先被分离出来并设计使其携带适当片段。
然后将这段基因注入受精卵试管婴儿:采用人工方法让卵细胞和精子在体外受精,并进行早期胚胎发育,然后移植到母体子宫内发育而诞生的婴儿。
性别控制(sex control):通过对动物的正常生殖过程进行人为干预,使成年雌性动物产出人们期望性别后代人工器官:暂时或永久性地代替身体某些器官主要功能的人工装置。
动物克隆:动物克隆是一种通过核移植过程进行无性繁殖的技术。
发育早期的动物胚胎细胞,或成年动物的体细胞,经显微手术移植到去掉细胞核的卵母细胞中之后,在适当的条件下,可以重新发育成正常胚胎。
光学显微镜:光学显微镜是利用光学原理,把人眼所不能分辨的微小物体放大成像,以供人们提取微细结构信息的光学仪器显微结构:在普通光学显微镜中能够观察到的细胞结构。
组织工程(tissue engineering):组织工程师应用工程学和生命科学的原理来研究开发生物代替物,用于恢复,维持或者改进组织的生物学功能。
细胞学说(cell theory):1>所有生物都是由一个或多个细胞组成的(1838,Scheiden&Sehwann);2>细胞是生物形态结构和功能的基本单位(1838,Scheiden&Sehwann);3>一切细胞只能来自原来的细胞,机体一切病理基于细胞的损伤(1885,Rudolf Virchow).分辨率(R-resolving power):(1)指能将非常靠近的两个点(物像)清楚辨析的能力(微生物的解释)(2)显微镜或人眼在25cm明视距离处,能清楚分辨被检物细微结构的最小间隔能力人眼R=100um 光学显微镜R=0.2um (动物细胞工程资料上的解释)光衍射效应(diffraction effects):光线并不是完全直线前进,光波沿各种有细微不同的路线通过一个光学系统,以致相互干涉产生衍射红外线(infraved ray):分辨极限(limit resolution):苏木精(hematoxylin):对负电荷分子有亲和性,常用于核酸的染色,能将细胞核染色伊红(eosin):酸性染料,可以对细胞质染色苏丹染料(suclan dye):乙醇饱和液,可以将脂肪染成橘黄色或红色,染色机制尚不清楚H.E.染色:苏木精和伊红联合染色活性基因(cytochemistry):孚尔根反应(Feulgen):荧光显微技术(Fluorescence Microscope):相差显微技术(Phase contrast microscope):显微电影技术(Vedio-recording):电子显微技术(Electron microscopy):扫描电子显微镜(Scanning election microscope):绿色荧光蛋白(GFP Fluorescent protein):干细胞(stem cell):遗传诊断(genetic analysis):胚胎性生殖细胞():胚胎干细胞(Embryonic stem cell):肝脏干细胞(Fetal liver stem cells):星状细胞(astrocyte monolayer):一种神经胶质细胞,可诱发分化为多钱能的神经样干细胞少突细胞(Oligodendrocyte precursor cells OPC):一种神经胶质细胞,它负责制造包囊神经细胞的髓鞘上皮干细胞(Epithelial stem cell):碱性磷酸酶(Akp):SSEA:胚胎干细胞的标志物SSEAs 最初是用来鉴定识别糖脂表位的三个单抗。
SSEA-1表达在前移植期的鼠胚表面(如八细胞期)并且也发现存在于畸胎瘤干细胞表面,但不存在分化的衍生细胞中。
输卵管上皮、子宫内膜、附睾, 成年鼠脑和肾小管区域也发现和SSEA-1抗体反应。
SSEA-3和4在卵子发生时合成,在卵母细胞、受精卵和早期卵裂球细胞膜上存在。
这些与糖链相关的分子的生物学功能被认为是调控发育期的细胞膜间的相互作用。
未分化的灵长类ES细胞,人的EC 和ES细胞表达SSEA-3和SSEA-4,但不表达SSEA-1。
未分化的小鼠ES细胞表达SSEA-1,但不表达SSEA-3或SSEA-4.ICM:胚胎干细胞(embryonic stem cell,ESC)是指从早期胚胎的囊胚内细胞团(inner cell mass,ICM)分离出来的具有自我更新和多向分化潜能的细胞快绿染色法:饲养层(feeder layer):条件培养基(conditioned medium,CM):分化抑制因子(differentiation inhibition activity):神经干细胞(Neutral stem cell):神经干细胞(neural stem cell,NSCs)是一类具有分裂潜能和自我更新能力的母细胞,它可以通过不对等的分裂方式产生神经组织的各类细胞。
需要强调的是,在脑脊髓等所有神经组织中,不同的神经干细胞类型产生的子代细胞种类不同,分布也不同。
胚胎干细胞(Embryonic stem cell):一由早期胚胎内细胞团或原始生殖细胞经体外分化抑制培养,在传代过程中筛选的具全能型的干细胞脐带血肝细胞(Umbilical cord blood stem cells):脐带血的采集是在新生儿出生以后,取婴儿端3-8cm脐带储两把止血钳结扎、断脐,婴儿被抱走处理,贴近母端止血钳处消毒并将针头插入脐静脉,采集脐血。
脐血采集不同于传统的骨髓采集,不需要进行麻醉,无痛、无副作用,胎盘和脐带原本在胎儿出生后,就是作为废物扔掉的,脐血采集是在胎盘、脐带与母体和胎儿完全分离以后进行的,因此对母亲和孩子没有任何不良影响,属于“废物利用,变废为宝”。
脐带血里头含有大量的干细胞;而干细胞其实是人体的主要细胞,人的身体可以说是由干细胞所组成。
外周血干细胞(peripheral blood stem cells):外周血是除骨髓之外的血液,临床上常用一些方法把骨髓中的造血干细胞释放到血液中,再在从血液中提取分离得到造血干细胞,我们把这样得到的干细胞成为外周血干细胞造血干细胞(haematopoietic stem cell HSC):造血干细胞(hemopoieticstemcellHSC)是存在于造血组织中的一群原始造血细胞,它不是组织固定细胞,可存在于造血组织及血液中单核细胞(monocytes):单核细胞是体积最大的白细胞。
其细胞核常偏位,呈多形性,如卵圆形、肾形(a)、马蹄形(b)、不规则形(c)等,常有折叠感(c);染色质呈疏松网状,着色较浅。
胞质较多,嗜碱性,但因含大量细小的嗜天青颗粒而染成灰蓝色,颗粒含过氧化物酶。
血涂片,Giemsa染色嗜中性粒细胞(neutrophil):嗜中性粒细胞描述:最多,圆形,胞质淡红色。
胞核幼稚型的呈杆状或马蹄形,成熟的呈分叶状,三叶的较多见。
中性粒细胞来源于骨髓的造血干细胞,在骨髓中分化发育后,进入血液或组织嗜曙红粒细胞():肥大细胞(mast cells):嗜碱性细胞在结缔组织和粘膜上皮内时,称肥大细胞,其结构和功能与嗜碱性细胞相似。
细胞呈圆形或卵圆形,细胞核小,呈圆形或椭圆形,染色浅,位于细胞中央。
细胞常成堆或单个分布于血管附近。
细胞呈圆形或卵圆形,细胞质中充满大小一致、染成蓝紫色的颗粒,均匀分布在核周围。
红细胞(Erythrocytes):在所有的脊椎动物及若干无脊椎动物,其血红素(无脊椎动物也有时是蚯蚓红血朊)包含在特定的细胞中来进行其机能活动,这种血球称为红细胞。
多,小而圆,中央着色较浅,无核。
红细胞中含有血红蛋白,因而使血液呈红色巨核细胞(megacaryocyte):巨核细胞是骨髓中的一种从造血干细胞分化而来的细胞,核很大,但数量非常少,研究起来非常困难。
系正常骨髓中的一种能生成血小板的成熟细胞,前身为颗粒巨核细胞。
该细胞体积巨大,成熟的巨核细胞边缘部分破裂脱落后形成血小板。
每个巨核细胞平均能生成2000个左右的血小板。
血小板(blood platelet):是哺乳动物血液中的有形成分之一。
形状不规则,比红细胞和白细胞小得多,无细胞核,成年人血液中血小板数量为100~300×1000000000个/L,它有质膜,没有细胞核结构,一般呈圆形,体积小于红细胞和白细胞。
血小板在长期内被看作是血液中的无功能的细胞碎片。
直到1882年意大利医师J.B.比佐泽罗发现它们在血管损伤后的止血过程中起着重要作用,才首次提出血小板的命名。
细胞系(cell line):原代培养物经首次传代成功即称为细胞系(Cell Line),因此细胞系可泛指一般可能传代的细胞。
其中能够连续传代的细胞叫做连续细胞系或无限细胞系,不能连续培养的称为有限细胞系。
大多数二倍体细胞为有限细胞系淋巴前体(common lymphoid progenitor CLP):骨髓前体(common myeloid progenitor CMP):长期体内造血能力(long-term repopulation):肿瘤干细胞(cancer stem cell):a cell within a tumor that possess the capacity to self-renew and to cause the heterogeneous linkages of cancer cells that comprise the tumor是肿瘤内具有自我更新能力,能产生表形多样的肿瘤细胞群体,并驱动肿瘤发生的一类干细胞Normal stem cells: Rare cells within organs with the ability to self-renews and give rise to all types of cells within the organ to drive organogenesisCancer stem cells :Rare cells within tumors with the ability to self-renews and give rise to the phenotypically diverse tumor cell population to drive tumorigenesis流式细胞分离(flow cytomertry,FCM):是利用流式细胞仪进行的一种单细胞定量分析和分选技术。