淀粉样物质染色液(Highman刚果红法)

病理学技术中级（师）专业实践能力模拟试卷5(题后含答案及解析) 题型有：1. A1型题1．下列关于网状纤维James染色法的描述，正确的是A．网状纤维呈黑色，胶原纤维呈绿色，背景呈黄色B．5％硝酸银使用时要滴染C．甲醛配好后，要放在冰箱内储存D．二氨银配制时，氨水要一滴一滴加E．二氨银配制时，要加入充分氨水使沉淀物完全溶解正确答案：D解析：James染色法使网状纤维呈黑色，胶原纤维呈红色，背景呈淡黄色。

55％硝酸银使用时不能滴染，应放在立式5片染色缸内进行。

甲醛要新配制。

配制二氨银液时，氨水一滴一滴加，边加边摇动容器，直至滴加到最初形成的沉淀恰好溶解，要避免氨水加得太多，最好使沉淀物不要全部溶解。

知识模块：常用的特殊染色技术2．弹性、胶原纤维的双重染色法中，弹力纤维和胶原各呈什么颜色A．弹性纤维呈蓝绿色，胶原纤维呈黄色B．弹性纤维呈蓝绿色，胶原纤维呈红色C．弹性纤维呈蓝色，胶原纤维呈绿色D．弹性纤维呈红色，胶原纤维呈绿色E．弹性纤维呈黄色，胶原纤维呈红色正确答案：B 涉及知识点：常用的特殊染色技术3．关于Shift阿尔辛蓝地衣红染色法的叙述，错误的是A．高锰酸钾氧化液需要新配制B．地衣红染色液可反复使用C．酸性黏多糖呈蓝色D．中性黏多糖呈棕色E．阿尔辛蓝染色时间越长效果越好正确答案：E解析：阿尔辛蓝染色5分钟，水洗。

知识模块：常用的特殊染色技术4．Lillie硫酸亚铁染色法常用于观察A．胆色素B．黏多糖C．黑色素D．肌肉E．纤维正确答案：C 涉及知识点：常用的特殊染色技术5．关于使用刚果红进行淀粉样物质染色时，需注意的问题不包括A．苏木精染色的细胞核不能深B．淀粉样物质可以结合偏光的方法得到良好的效果C．观察时应结合HE切片D．在偏光显微镜下呈特征性的红色双折光性E．由于无水乙醇有脱色作用，脱水后即用冷风干燥，再透明封固正确答案：D解析：使用刚果红进行淀粉样物质染色在偏光显微镜下呈特征性的绿色双折光性。

结缔组织染色法1.1 Mallory三色染色法蓝色：胶原和网状纤维淡蓝色：软骨、粘液、淀粉样变物质红色：神经胶原纤维、肌纤维、酸性颗粒橘红色：髓鞘、红细胞图表 A 1.1.Mallory染色，显示胶原纤维，A组排列规则1.2.Masson三色染色法绿色：胶原纤维红色：肌纤维橘红色：红细胞图表 B 1.2 Mssson三色法图表 C 1.2.Masson三色染色胃癌组织中血管平滑肌1.3.显示胶原、网状和弹性纤维的三联染色法红色：胶原纤维黑色：网状纤维绿色：弹性纤维淡黄色：肌肉、红细胞图表 D 4.Weigert间苯二酚法二、胶原纤维染色法2.2.Van Gieson〔V.G〕苦味酸-酸性品红法鲜红色：胶原纤维黄色：肌纤维、细胞质、红细胞 蓝褐色：胞核图表 E 2.胶原纤维，Van Gieson(V.G.)苦味酸-酸性品红法 图 心肌堵塞 myocardial infarction ：心肌堵塞后2个月，van Gieson 染色, 坏死心肌被染成红色的纤维组织所代替，黄色区域为残留的心肌纤维。

2.1 天狼星红〔Sirius red 〕苦味酸染色法(参照上图)红色：胶原纤维 绿色：细胞核黄色：其他三、网状纤维染色3.1 Gordon-Sweets 银氨染色法 〔梅花开枝图，金色伴树枝〕黑色：网状纤维红色：胞核〔核固红复染〕 黄棕色：胶原纤维淡红色：细胞质〔红液复染〕图表 F 3.Gordon-Sweets 氢氧化银氨液浸染法3.2 Gomori 氏银氨液配制法图表 GGomori 氏银氨液配制法四、弹性纤维染色Gomori 醛复红染色法*甲醛生理盐水液固定的染色效果最正确图表 H4.GOMORI 醛复红染色法五、显示弹性、胶原纤维的双重组合染色法蓝绿色：弹性纤维 红色：胶原纤维 黄色：背景图表 I 4.Weigert 间苯二酚法六、肌肉组织染色△ 横纹肌组织染色Mallory 磷钨酸木精染色法〔PTAH 〕蓝色：胞核、纤维、肌肉、神经胶质纤维、纤维蛋白、横纹肌 黄色或枚红色：胶原纤维、网状纤维软骨基质、骨 微紫色：粗弹性纤维〔有时〕天狼星红苦味酸染色法：〔偏光显微镜〕 Ⅰ型：强双折光性，呈黄色或红色纤维 Ⅱ型：弱双折光，呈多种色彩疏网状分布 Ⅲ型：弱双折光，呈绿色的细纤维 Ⅳ型：弱双折光的基膜，呈淡黄色紫蓝色或棕黄色：缺血缺氧早期病变的心肌图表 J 6.1.磷钨酸木素法图表 K 6.1.磷钨酸木素染色液△早期心肌病变组织染色1.Nagar-Olsen染色法〔1974年〕红色：缺氧心肌、红细胞黄色或黄棕色：正常心肌蓝色：细胞核图各组小鼠心肌组织Nagar-Olsen染色〔光学显微镜, ×200〕2.Poley显示缺氧心肌染色法〔1964年〕红色：缺氧心肌紫色：胞核绿色：其他组织七、糖类染色过碘酸-Schiff〔PAS〕染色法红色：糖原及其他PAS反响阳性物质蓝色：细胞核图表L 7.胃贲门腺体胞浆呈PAS阳性八、黏液物质〔黏多糖〕染色1.Mowry阿尔辛蓝过碘酸雪夫〔ABPAS〕染色法〔1956〕红色：中性黏液物质蓝色：酸性黏液物质紫红色：混合性黏液物质图表 M 8.1.AB-PAS染色结肠粘膜图表 N 8.1.胃粘膜组织 AB-PAS染色 40×：2.爱先蓝〔PH2.5〕法蓝色：唾液酸、弱硫酸化黏液物质、一般粘液红色：胞核不着色：强硫酸化黏液物质图表 O 8.2.爱先蓝〔PH2.5〕染色液图表 P 8.2.爱先蓝法图表 Q 8.2.爱先蓝法—3、爱先蓝〔PH1.0〕法蓝色：含硫酸黏液物质不着色：非硫酸化酸性黏液物质红色：复染后的胞核九、黑色素染色1.Masson-Fontana黑色素银浸染色法黑色：黑色素及嗜银细胞颗粒红色：胶原纤维浅黄色：背景图表 R9.1.Melanin pigment in cells of9.1. malignant melanoma, Fontana-Masson stain.2.Lillie亚铁染色法暗绿色：黑色素浅绿或不着色：背景黄色：肌纤维和背景十、含铁血黄素染色Perls blue〔普鲁士蓝〕反响显示三价铁蓝色：含铁血黄素浅红色：其他组织图表 S 10.普鲁士蓝染色肝脏普鲁士蓝染色呈蓝色的含铁血黄素颗粒大量沉着在肝实质细胞和库普弗细胞。

AAgNOR染色法:1、试剂配制：（1）AgNOR染色液：甲液：明胶2 g 溶于双蒸水至99 ml，在60℃使之完全溶解，再加入纯甲酸1 ml 摇匀待用。

乙液：硝酸银50 g 溶解于双蒸水中至100 ml，4℃冰箱保存。

（2）AgNOR工作液取甲液10 ml，乙液20 ml 临用前混合。

2、步骤：（1）切片脱蜡至水（2）双蒸水洗2次（3）AgNOR 工作液中（25℃）浸染30分钟（暗处进行）（镜下观察）（4）双蒸水洗3次（5）脱水,透明,封固3、结果：油镜观察，细胞核及胞质背景为淡黄色，AgNOR呈棕黑色颗粒状。

B鞭毛染色法:１．试剂配制：甲液：丹宁酸５克氯化铁（ＦｅＣｌ3）１．５克福尔马林（１５％）２．０毫升氢氧化钠（ＮａＯＨ）１％１．０毫升乙液：硝酸银（ＡｇＮＯ3）２克蒸馏水１００毫升制备乙液时，待硝酸银溶解后，取出１０毫升备用，向余下的９０毫升硝酸银液中滴加浓氢氧化铵，先呈很浓厚的沉淀，再继续滴加至刚刚溶解沉淀成澄清液为止。

再将备用的硝酸银溶液慢慢逐滴加入澄清液中，先呈现薄雾，但轻摇则消失，继续边滴加边摇动，待澄清液呈现略有轻微不消散的薄雾状为止。

如雾重，则银盐沉淀，不宜使用。

２．染色方法：（１）将待检菌接种在新制备的肉汤琼脂斜面上，置３７°培养１６—２０小时，备用。

（２）在载玻片的中部相隔一厘米处，用接种环各沾一滴蒸馏水，然后用接种环挑取湿润处的菌苔少许于一端的水滴中，倾斜玻片使培养物流至另一水滴中，两水滴自然相通，菌体从上位自然扩散到下位水滴中，待干燥后染色。

（３）在干燥涂片上加甲液３—５分钟，用蒸馏水冲洗。

将残水沥干或用乙液冲去残水后，加适量乙液保持３０—６０秒钟。

染色时在酒精灯上稍加热，使染液出现蒸汽即可，用蒸馏水冲洗。

（４）镜检：菌体及鞭毛皆染成茶色。

３．注意事项：（１）染液最好随用随配，存放至次日效果则差。

（２）一定要充分洗净甲液后再加乙液，否则背景较脏。

（３）防止水及培养物沾有氯化物。

浙江病理科模拟题2021年(217)(总分99.33, 做题时间120分钟)A1/A2题型1.Lillie硫酸亚铁法BPerlsblue亚铁氰化钾法CMassonFontana银染法D过碘酸雪夫染色法E六胺银法该题您未回答:х该问题分值: 0.84答案:BPerlsblue亚铁氰化钾法用于显示含铁血黄素中的三价铁。

含铁血黄素呈蓝色，其他组织呈浅红色或其他对比颜色。

2.硫酸钠爱尔森蓝法BGram甲紫法CJurgens甲紫法D过碘酸-Schiff法EMallory苏木精法该题您未回答:х该问题分值: 0.67答案:C3.革兰阳性细菌呈蓝色，阴性细菌呈红色，细胞核呈红色B革兰阳性细菌呈红色，阴性细菌呈蓝色，细胞核呈红色C革兰阳性细菌呈蓝色，阴性细菌呈紫色，细胞核呈红色D革兰阳性细菌呈紫色，阴性细菌呈红色，细胞核呈蓝色E革兰阳性细菌呈黑色，阴性细菌呈红色，细胞核呈绿色该题您未回答:х该问题分值: 0.67答案:A4.病毒致病时，其感染的细胞内常形成包涵体BDNA病毒一般形成核内包涵体CRNA病毒一般形成胞质内包涵体D胞质和胞核内可同时见到包涵体E病毒包涵体需经特殊染色方可见到该题您未回答:х该问题分值: 0.67答案:E在常规的HE染色中，比较典型的病毒包涵体可以见到，形态大小与红细胞相似，胞核一般嗜酸性，周围有透明晕。

但是，对于疱疹病毒感染时的核内包涵体和麻疹病毒包涵体，必须通过特殊染色方法才能得到证明。

5.蓝色B红色C淡棕色D紫色E黑色该题您未回答:х该问题分值: 0.67答案:E6.红色B黄色C蓝色D绿色E紫色该题您未回答:х该问题分值: 0.67答案:A7.棕色B黑色C蓝色D紫色E绿色该题您未回答:х该问题分值: 0.67答案:B8.Gomori钙钴法BGossrau偶氮吲哚酚法CLeder-Stutt改良萘酚AS-TR磷酸酯法DWachstein-Meisel镁激活酶法ESnell-Garrett胆碱铜法该题您未回答:х该问题分值: 0.67答案:D9.棕黄色B蓝紫色C黑色D紫黑色E红色该题您未回答:х该问题分值: 0.67答案:B10.补体间的反应B抗原与抗体间的特异性反应C受体与配体间的特异性反应D抗原与抗原间的反应E抗体与抗体间的反应该题您未回答:х该问题分值: 0.67答案:B11.免疫组织化学方法中，按照敏感性从高到低进行排列正确的是CSA，PAP，LSABBLSAB，CSA，PAPCPAP，LSAB，CSADLSAB，PAP，CSAECSA，LSAB，PAP该题您未回答:х该问题分值: 0.67答案:E12.增强切片的黏附性B提高敏感度C暴露抗原D使底物容弓显色E缩短染色时间该题您未回答:х该问题分值: 0.67答案:C13.表现为弥漫均匀的背景染色B出现在组织边缘、胶原纤维及血浆渗出处．坏死组织及固定不良的组织中心处C一片细胞内染色强度较一致，无深浅及多少之分D切片中的刀痕及皱褶区域也容易出现非特异性染色E着色细胞数量极少时，多为非特异性染色该题您未回答:х该问题分值: 0.67答案:E14.荧光法B荧光抗体法C荧光抗原法D荧光抗体抗原法E荧光抗原抗体法该题您未回答:х该问题分值: 0.67答案:C15.中性树胶BPBS缓冲液C缓冲甘油D多聚赖氨酸E甘油该题您未回答:х该问题分值: 0.67答案:C16.辣根过氧化物酶B碱性磷酸酶C酸性磷酸酶D胰蛋白酶E葡萄糖氧化酶该题您未回答:х该问题分值: 0.67答案:D17.链霉亲和素同一定浓度的生物素化酶混合后，形成链霉亲和素一生物素酶复合物，此复合物可以和各种生物素标记抗体结合B链霉亲和素同一定浓度的卵白素化酶混合后，形成链霉亲和素一卵白素一酶复合物，此复合物可以和各种卵白素标记抗体结合C亲和素同一定浓度的生物素化酶混合后，形成亲和素一生物素一酶复合物，此复合物可以和各种生物素标记抗体结合D亲和素同一定浓度的卵白素化酶混合后，形成亲和素一卵白素一酶复合物，此复合物可以和各种卵白素标记抗体结合E链霉亲和素同一定浓度的辣根过氧化物酶混合后，形成链霉亲和素一酶复合物，此复合物可以和各种生物素标记抗体结合该题您未回答:х该问题分值: 0.67答案:A18.第一抗体B第二抗体CSPADPAP复合物EDAB该题您未回答:х该问题分值: 0.67答案:B19.中性黏多糖B酸性黏多糖C混合性黏多糖D淀粉样物质E纤维素该题您未回答:х该问题分值: 0.67答案:A20.Perls亚铁氰化钾法BLmie硫酸亚铁法CSchmorl三氯化铁氰化钾法D刚果红法E高碘酸无色复红法该题您未回答:х该问题分值: 0.67答案:E21.苹果绿色双折光性B红色双折光性C蓝色单折光性D橙黄色单折光性E紫色双折光性该题您未回答:х该问题分值: 0.67答案:A刚果红是一种偶氮染料，以氨基和淀粉样物质结合，平行附着于淀粉样物质的纤维上，在偏光纤维镜下呈特征性的绿色双折光性。

刚果红染色法的原理
刚果红染色法是一种常用的生化实验方法，其原理是将刚果红染色剂
加入到样品中，利用其结合纤维蛋白原及淀粉酶等分泌物的特性，使得样
品中特定结构的蛋白质及其他分子发生结合及聚合作用，最终表现为颜色
的变化。

刚果红染色方法主要针对的是淀粉样品。

淀粉分子在加入刚果红后，
可与其形成无定形结合复合物，这些复合物可能由β-折叠蛋白构建而成，因此染色后的样品通常会呈现出青蓝色至紫色的特殊颜色。

另外，刚果红
还能够与一些蛋白质如淀粉酶等结合，从而形成聚合物。

此种结合可以被
一些特异性抗体所检测，并得出进一步的研究结论。

总而言之，刚果红染色法是利用分子结合的原理和分子特异性的相互
作用，观察分子在染色剂作用下的变化，从而确定样品中蛋白质或淀粉等
特定分子的存在，具有比较敏感和特异的检测效果。

全部实验步骤1 取新鲜组织于4%多聚甲醛固定24小时2 30%蔗糖脱水48小时以上3 -250C包埋（冰冻切片机内）4 冰冻切片冰冻切片步骤冰冻切片免疫组化染色步骤：冰冻切片4~8μm，室温放置30分钟后，入4℃丙酮固定10分钟，PBS洗，5分钟×3次。

用3%过氧化氢孵育5~10分钟，以消除内源性过氧化物酶的活性。

PBS冲洗，5分钟×2次。

下接石蜡切片免疫组化染色操作步骤。

(见我发的前面的帖子)你确定你是冰冻切片吗冰冻切片不能用热修复啊！！！以下是我的步骤：1 冰冻切片室温放置30分钟后，入4℃丙酮固定10分钟，PBS洗，5分钟×3。

用3％过氧化氢孵育5~10分钟，PBS洗，5分钟×2。

2 5~10％正常山羊血清（PBS稀释）封闭，室温孵育10分钟。

倾去血清，勿洗，滴加适当比例稀释的一抗或一抗工作液，37℃孵育1~2小时或4℃过夜。

3 PBS冲洗，5分钟×3次。

4 滴加滴加第二代生物素标记二抗工作液，37℃或室温孵育30分钟。

PBS冲洗，5分钟×3次。

5 滴加辣根酶标记链霉卵白素工作液，37℃或室温孵育10~30分钟。

6 PBS冲洗，5分钟×3次。

7 显色剂显色（DAB）。

8 自来水充分冲洗，复染，封片。

冰冻切片免疫组化染色用的灭活内源性过氧化物酶，最好是用3%H2O2/甲醇甲醇溶液，室温20分钟。

此配方不易产生脱片。

分钟。

此配方不易产生脱片。

配制方法是在9ml甲醇中加30%H2O2 1ml，混匀后使用，每次新鲜配制。

，混匀后使用，每次新鲜配制。

冰冻切片免疫组化染色步骤冰冻切片4~8mm，室温放置30分钟后，入4℃丙酮固定10分钟，PBS洗，5分钟×3。

用3％过氧化氢孵育5~10分钟，消除内源性过氧化物酶的活性。

PBS洗，5分钟×2。

下接免疫组化染色操作步骤。

免疫组化染色步骤：（SP 试剂盒为例)1 冰冻切片4~8um ，室温放置30分钟后，入4℃丙酮固定10分钟，PBS 洗，5分钟×3。

病理学技术士《专业实践能力》试题及答案解析一[单选题]1.关于解剖的个人防护的叙述，不正确的是（江南博哥）()。

A.应戴乳胶手套、帽子，穿手术衣B.应戴防水围裙C.解剖传染病死者时应穿雨鞋、戴口罩，其它疾病可不必D.物品使用后应消毒处理E.解剖完毕，个人淋浴清洗消毒参考答案：C参考解析：进行病理解剖时个人防护包括在清洁区更换消毒手术衣、隔离服及手套再进入半污染区，在半污染区准备好个人清洗及消毒器具，更换防化服、防毒面具及手套后进入污染区。

C项，无论是否解剖传染病死者均需要做好个人防护。

[单选题]2.属于人为色素的是()。

A.黑色素B.含铁血黄素C.脂褐素D.胆色素E.福尔马林色素参考答案：E参考解析：A项，黑色素是体内正常色素是由酪氨酸及苯丙氨酸在黑色素细胞中代谢形成并储存的。

B项，含铁血黄素是体内无功能铁的储存形式之一，是巨噬细胞吞噬血红蛋白后形成的代谢产物，比如大叶性肺炎时咳出的铁锈色痰。

C 项，脂褐素又称为衰老色素，常见于萎缩的细胞内。

D项，胆色素是形成胆汁颜色的主要色素。

E项，福尔马林色素是人为浸泡标本时形成的色素。

[单选题]3.关于影响组织固定结果的因素的叙述，错误的是()。

A.固定液与组织块体积的比例B.固定液的选择C.放入蒸馏水内D.固定的时间与温度E.离体组织应立即固定参考答案：C参考解析：固定注意事项：①固定液要足量，一般应为组织块总体积的4～5倍。

组织块的大小、固定时间、固定温度都应考虑，而且应在组织取下后立即或尽快放入适当固定液中。

②一般固定液在24h内不能穿透厚度大于2～3mm的实体组织或0.5cm的多孔疏松组织。

③组织块的大小厚度，原则上不应超过4mm，3mm更为合适。

④大多数组织应固定24h，然后保存于70%乙醇中。

固定的时间与使用固定液的种类、组织块大小、温度等有关。

⑤固定温度大多数可在室温（25℃）固定，在低温（如4℃）固定时，固定时间应相应延长。

⑥加热可使蛋白质凝固，但一般不要求加热，因为加热可加速组织的自溶。

高级卫生专业资格（正高副高）病理学专业资格(正高副高)模拟题2021年(112)(总分99.XX02,考试时间120分钟)A1/A2题型1. 使用Mowry阿尔辛蓝过碘酸希夫(ABPAS)染色法进行黏多糖染色时，中性和酸性混合物质呈现（）。

A. 黑色B. 蓝色C. 紫红色D. 黄色E. 绿色2. Ziehl-Neelsen抗酸菌染色将抗酸菌染为（）。

A. 红色B. 灰蓝色C. 蓝绿色D. 黄色E. 黑色3. 下列选项中，染色方法为在石蜡切片髓鞘染色中最理想的方法是（）。

A. Weiger-Pal髓鞘染色法B. 锇酸-a萘胺染色法C. Luxolfastblue髓鞘染色法D. 变色酸2R-亮绿髓鞘染色法E. Weil髓鞘染色法4. 下列选项中，鉴别胶原纤维和肌纤维，最宜采用的染色方法是（）。

A. Masson三色染色法B. 醛复红染色法C. 维多利亚蓝染色法D. James染色法E. PTAH染色法5. 低分化恶性肿瘤难以判定其组织来源，首选下列哪种特殊染色方法对其进行鉴别（）。

A. 天狼星红苦味酸染色B. 维多利亚蓝染色法C. Gomori银染色法D. PAS染色E. Mallory磷钨酸苏木精染色6. Mallory磷钨酸苏木精（PTAH）染色法通常用于显示（）。

A. 横纹肌纤维B. 平滑肌纤维C. 网状纤维D. 弹性纤维E. 神经纤维7. 下列关于糖原染色法的应用，错误的是（）。

A. 糖尿病器官组织细胞内的糖原颗粒沉着B. 早期心肌梗死区糖原的减少C. 鉴别细胞内的空泡变性D. 肝细胞癌组织中糖原的沉积E. 动脉粥样硬化粥样斑块内糖原的沉积8. 下列选项中，能够同时显示中性黏液和酸性黏液物质的染色法是（）。

A. 高铁二胺阿尔雪蓝法B. 阿尔辛蓝过碘酸雪夫法C. 醛复红染色法D. 醛品红法、阿尔辛蓝法E. 阿尔辛蓝、阿尔辛黄法9. 下列方法中，可以用于显示含铁血黄素的是（）。

A. 过碘酸-希夫染色法B. Perlsblue亚铁氰化钾法C. Masson Fontana银染法D. Lillie硫酸亚铁法E. 六胺银法10. 下列选项中，可用于显示淀粉样物质的方法是（）。

SP老年斑一般用刚果红染色，也可以用硝酸银染色。

NFT一般用硝酸银染色。

老年斑的染色方法是：Highman甲醇刚果红染色法1.甲醇刚果红染液: 刚果红0.5 g 甲醇80 ml 甘油20 ml2.碱性乙醇分化液: 氢氧化钾0.2 g 80%乙醇100 ml染色步骤:1. 切片脱蜡至水2. 甲醇刚果红染液染10～20分钟3. 用碱性乙醇分化液分化数秒4. 水洗5. 苏木素复染2分钟6. 水洗7. 脱水,透明,封固结果：淀粉样物呈桔红色。

Bielschowsky method(modified)既可显示SP又可显示NFT试剂配制：1、氨银乙醇液20%硝酸银水溶液30ml中加入20ml无水乙醇，混合；加氨水，出现沉淀后继续加氨水直至沉淀完全溶解；继续加氨水1－2ml；过滤三次（器材必须非常清洁）；置于棕色瓶中避光保存。

2、5%硫代硫酸钠固定液5g硫代硫酸钠，溶于100ml双蒸水中，避光保存。

实验步骤1、将已在37度恒温箱中的切片，二甲苯－70%脱蜡及脱水。

2、双蒸水清洗三次。

3、2－4%硝酸银水溶液中37度避光浸银30min。

4、倾去硝酸银水溶液，双蒸水清洗三次。

5、10%甲醛水溶液还原5min至切片呈微黄色。

6、双蒸水清洗三次。

7、擦干切片背面及组织周围水分，一次5片置于湿盒中。

8、滴加氨银乙醇液5分钟，每片200ul。

9、擦去组织周围及背面氨银液。

10、8%甲醛水溶液中浸泡，注意转动切片，到黄色不再加深。

11、蒸馏水清洗三次。

12、重复7、8、9、10步骤2－3次，直到显微镜下可清晰观察到斑块为止。

如染色过浅可继续重复；染色过重可用冰醋酸褪色。

13、蒸馏水清洗5min。

14、脱水及透明,封片。