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葡萄糖（GLu）测定方法操作规程【产品名称】通用名称：葡萄糖（GLu）测定试剂盒（葡萄糖氧化酶法）使用说明书【摘要】糖是人体的主要供能物质，也是组织细胞的主要成分。
血糖浓度受神经系统和激素的调节而保持相对稳定，当这些调节失去原有的相对平衡时，则出现高血糖或低血糖症状。
1.病理性高血糖：（1）原发性糖尿病（2）内分泌疾病：嗜铬细胞瘤、甲状腺毒瘤、肢端肥大症、巨人症、Cushing综合征、高血糖素细胞瘤；（3）胰腺疾病：急性或慢性胰腺炎、流行性腮腺炎引起的胰腺炎、胰腺囊性纤维化、血色病（血红蛋白沉着症）等；（4）抗胰岛素受体抗体与有关疾病：棘皮症、Wernicke’s脑病。
2.病理性低血糖：（1）胰岛细胞瘤、高血糖素缺乏；（2）对抗胰岛素的激素分泌不足，如垂体前叶功能减退、肾上腺皮质功能减退和甲状腺功能减退而使生长激素、肾上腺皮质激素和甲状腺素分泌减少；（3）严重肝病患者，肝细胞糖原储存不足及糖原异生功能低下，肝脏不能有效地调节血糖。
【预期用途】该试剂盒采用葡萄糖氧化酶法，用于体外定量测定人血清或血浆中葡糖糖的含量。
【检验原理】葡糖糖被葡萄糖氧化酶氧化后生成过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶的作用下，与4-氨基安替比林和对羟基苯甲酸钠缩合，生成醌系色素，通过测定此反应的吸光度可求得葡糖糖的含量。
D-2葡萄糖氧化酶D-葡萄糖醛酮+H2O22 H2O2 + 4-APP ++ H3O+POD醌系色素+ 5H2O【主要组成成份】试剂1（R1）：磷酸盐缓冲液100 mmol/L抗环血酸氧化酶4700 U/L葡糖糖氧化酶4000 U/L试剂2（R2）：磷酸盐缓冲液100 mmol/L过氧化物酶6700U/L4-氨基安替比林0.7 mmol/L对羟基苯甲酸钠 1.3 mmol/L校准品：葡萄糖溶液。
*不同批号试剂盒各组分请勿混用。
【试剂准备】R1：即用液体试剂R2：即用液体试剂【储存条件与有效期】未开启的试剂盒避光保存于无腐蚀性气味和通风良好的室内，在2℃~8℃有效期为一年。
葡萄糖（GLU）测定试剂盒（己糖激酶法）适用范围：用于体外定量测定人体血清中葡萄糖的含量。
1.1 试剂盒包装规格试剂1：1×25ml，试剂2：1×5ml；试剂1：2×60ml，试剂2：2×12ml；试剂1：3×40ml，试剂2：3×8ml；试剂1：4×60ml，试剂2：4×12ml；试剂1：2×400ml，试剂2：1×160ml；试剂1：2×40ml，试剂2：2×8ml。
校准品（选配）：1×1ml；1×3ml。
1.2 试剂盒主要组成成分2.1 外观试剂1：无色澄清液体；试剂2：浅黄色澄清液体。
校准品：无色至淡黄色澄清液体。
2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。
2.3 试剂空白吸光度在37℃、340nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度应不大于0.3。
2.4 分析灵敏度测定浓度为5.55mmol/L样本时，吸光度变化值（ΔA）应在（0.2，0.4）范围内。
2.5 线性范围在（0.5，38.9）mmol/L线性范围内，线性相关系数r不小于0.996。
在[5，38.9）mmol/L范围内的线性相对偏差不大于±10%；测定结果（0.5，5）mmol/L时线性绝对偏差不大于±0.5mmol/L。
2.6 重复性重复测试两份高低浓度的样本，所得结果的变异系数（CV%）应不大于5%。
2.7 批间差不同批号试剂测试同一份样本，测定结果的批间相对极差应不大于6%。
2.8 准确度当参考物质浓度在（0，4.16）mmol/L时，实测值与标示值偏差不应超过±0.833mmol/L；当参考物质浓度在[4.16，38.9）mmol/L时，实测值与标示值偏差应在±20%范围内。
2.9校准品溯源性依据GB/T 21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》的要求，校准品溯源至中国计量科学研究院生产的有证参考物质（GBW10062）。
己糖激酶法测定葡萄糖参数的正确设置葡萄糖相关研究是一项十分重要的专业，因为葡萄糖是重要的热量来源，在生物体内起着重要的作用。
因此，对葡萄糖参数的准确测定就显得尤为重要。
己糖激酶法是测定葡萄糖参数最常用的方法之一，但是测定过程较为复杂，需要合理安排参数，以得到准确的测定结果。
一、己糖激酶法的原理和测定步骤己糖激酶法是一种通过利用葡萄糖氧化本身的特性来测定葡萄糖含量的方法，该法是利用己糖氧化生成糖醛酸，随后糖醛酸被糖醛酸酶氧化消除成乙醇和乙酸，乙醇和乙酸随后反应生成醛酸，醛酸再通过反应变成氧化酶进行测定，可以根据吸光度求出葡萄糖含量。
具体的测试步骤为：（1）准备样本：样本分离，浓缩，配制到给定的体积，然后放置恒温器中。
（2）加入反应液：将糖醛酸酶、己糖氧化酶和其他辅助酶加入样本中，使反应液的体积配制到给定的鼓泡液中。
（3）加入标准溶液：将经过稀释的反应液倒入干净的烧杯中，然后加入标准溶液，使样本和标准溶液中的葡萄糖含量得到恒定。
（4）测定反应体系：用分光光度计测定反应液中的吸光度，可以根据吸光度大小来判断样本中的葡萄糖含量。
二、己糖激酶法的参数设置在测定葡萄糖含量参数的过程中，己糖激酶法的参数设置至关重要，以确保最终的测试结果是准确可靠的。
（1）反应温度：反应温度一般在30-40°C，温度过高或过低会影响激酶活性，使反应速率受到影响。
（2）反应时间：一般反应时间为1.5-2小时，反应时间较短则测定结果偏低，反应时间较长可以抑制非葡萄糖物质以获得较准确的结果。
（3）pH值：反应的pH值一般在7-8之间，较高的pH值会影响糖醛酸酶活性，从而使反应时间变长。
（4）酶用量：糖醛酸酶和己糖氧化酶用量应根据浓度适当调整，过多或过少都会影响测定结果的准确性。
（5）测定溶液体积：测定溶液的体积应控制在给定的比例，以确保测定的精准度。
三、结论由上文可以看出，己糖激酶法是一种测定葡萄糖含量的重要方法，但是要想得到准确的测定结果，就必须正确设置测定的参数，包括反应温度、反应时间、pH值、酶用量等，这样才能保证得到准确可靠的测定结果。
葡萄糖测定的标准操作规程【目的】体外检测血清中葡萄糖（GLU ）的含量。
【职责】1.实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP ，室负责人监督落实。
2.本SOP 的改动，可由任一使用本SOP 的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
【标本类型及实验前准备】1.受检者的准备病人空腹12h ，不饮酒24h 后采集血样。
体检对象抽血前应有两周的的正常状况。
孕妇应在产后或终止哺乳3个月后检验。
此外，有无服用影响的药物以及采血的季节都应做相关记录。
2.静脉采血除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。
体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。
在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。
【仪器设备】东芝TBA-FX8全自动生化分析仪，低速离心机一、检测原理本试剂所采用的反应式如下：+--+++-−−−→−+--+--−→−+H NADH PG NAD ADPATP PDH G HK 6666磷酸葡萄糖磷酸葡糖糖葡萄糖式中：ATP 为三磷酸腺苷；ADP 为二磷酸腺苷；HK 为己糖激酶；G-6-PDH 为葡萄糖-6-磷酸脱氢酶；6-PG 为6-磷酸葡萄糖酸上述反应中，NADH 的生成量与样本中葡萄糖的浓度成正比，通过在340nm 处测定吸光度的变化值，即可测得样本中葡萄糖的浓度。
二、试剂1.试剂本科使用上海复星长征医学科学有限公司HDL-C 试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：试剂1（R1）三磷酸腺苷 0.75mmol/L葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 375U/LNAD 15mmol/L哌嗪-N,N ’-双（2-乙磺酸）缓冲液 50 mmol/L试剂2（R2）己糖激酶 60KU/L哌嗪-N,N ’-双（2-乙磺酸）缓冲液 50 mmol/L2.校准要求2.1校准品：使用与试剂配套使用的复星长征临床化学校准血清（货号：4490050/4590050）对测定进行校准。
己糖激酶法血糖标准(一)己糖激酶法血糖标准是什么己糖激酶法是测量血液中葡萄糖（血糖）浓度的常用方法之一，通过测量血液中己糖和葡萄糖间的酶促反应来确定血糖浓度。
己糖激酶法需要血液样本，并且已被证明是一种准确可靠的测试方法。
血糖标准己糖激酶法可以精确地测量血糖水平，这是诊断和监测许多疾病、特别是糖尿病所必需的。
对于大多数人来说，血糖最好保持在以下范围内： - 餐后2小时血糖小于7.8mmol/L - 空腹血糖小于6.1mmol/L糖尿病患者的血糖标准对于糖尿病患者来说，血糖标准略有不同。
他们需要密切监测血糖水平，以确定是否需要调整药物或饮食。
以下是糖尿病患者的血糖标准：- 餐后2小时血糖小于10.0mmol/L - 空腹血糖小于7.0mmol/L如何测量血糖要获得准确的血糖测量结果，请按照以下步骤操作： 1. 洗手并准备好所有必需的测试材料。
2. 用消毒棉球消毒手指。
3. 使用血糖仪器采集血液样本。
4. 将血液样本放入血糖仪器中。
5. 等待几秒钟，直到血糖仪器显示出血糖浓度。
结论己糖激酶法是一种可靠的血糖测量方法，可以帮助人们诊断和监测糖尿病及其他相关疾病。
了解血糖标准并定期检查血糖水平可以帮助人们更好地管理自己的健康。
如何控制血糖除了定期测量血糖之外，以下方法可以帮助人们控制血糖： - 控制饮食，特别是限制碳水化合物和糖分摄入。
- 多进行身体活动，例如散步、跑步、游泳等。
- 定期服用药物，如胰岛素或口服降糖药。
-减轻压力，例如吸烟、饮酒或冥想等。
- 在医生的指导下监测和调整治疗方案。
注意事项在进行己糖激酶法血糖测试时，请注意以下事项： - 准确使用血糖仪，遵守使用说明。
- 每次测试时使用新的血糖测试条。
- 清洁测试区域并使用消毒棉球消毒手指。
- 在低血糖症状出现时及时应对，并在必要时咨询医生。
- 定期检查自己的血糖水平，并及时咨询专业人士。
结语己糖激酶法血糖标准的了解和掌握对于人们的健康非常重要，特别是对于糖尿病患者来说。
己糖激酶法测定葡萄糖参数的正确设置
自糖激酶法测定葡萄糖的正确设置：
一、准备抗原和抗体试剂：
1. 从市售的ELISA试剂盒中准备抗原溶液。
2. 从市售的ELISA试剂盒中准备抗体溶液。
二、准备标本：
1. 以葡萄糖水溶液（葡萄糖溶液浓度1-20）为标准样品，采集样品并分装各个浓度(0.1 mg/ml, 10 mg/ml, 20 mg/ml)，以便后续检测。
2. 采集检测样品，并分装各个浓度，以便后期检测。
三、测定样品：
1. 将抗原溶液和抗体溶液交叉配制在一起，得到联合液。
2. 将标准样品，以1 ml为比填充管，在37℃酶标仪上建立标准曲线。
3. 将检测样品，以1 ml为比填充管，并按1:20（反应液：样品）比例
加入联合液，37℃水浴振荡混匀；以540nm波长进行读数。
四、计算：
1. 获取标准曲线结果，根据OD值和标准曲线，计算出检测样品中葡
萄糖的浓度。
2. 根据测定结果，计算检测样品中的葡萄糖含量，以获得最终结果。
五、校验：
1. 检查标准曲线的准确性，如果偏离标准误差，则重新生成标准曲线。
2. 如果最终测定结果与实际结果相差较大，可考虑重新检测，或者使
用其他检测方法，如采用紫外吸收法重新检测结果。
葡萄糖1.目的规范葡萄糖测定的操作程序，确保葡萄糖测定结果准确。
2.检验方法氧化酶法（两点终点法） 3.检验原理 葡萄糖+O 2+H 2O 葡萄糖酸+H 2O 2H 2O 2+4-AAP+苯酚红色醌亚胺+4H 2O在波长505nm 处比色，计算出GLU 浓度。
4.临床意义临床检测GLU 浓度主要用于糖尿病诊断、昏迷鉴别诊断及糖代谢研究。
血糖增高主要见于：①生理性高血糖：可见于饭后1-2小时或情绪紧张肾上腺分泌增加时;②病理性高血糖：可见于内分泌功能障碍引起的糖尿病、颅外伤、颅内出血、脑膜炎引起的颅内高压、脱水引起的高血糖、急慢性胰腺炎、肝功能障碍等。
血糖降低主要见于：①生理性低血糖：常见于饥饿和剧烈运动后。
②病理性低血糖：可见于高胰岛素血症、非胰性肿瘤、糖原累积症、自身免疫性疾病、半乳糖血症和肾脏疾病等。
5.标本采集及干扰因素 5.1标本要求空腹不抗凝静脉血2~3ml 。
5.2标本保存室温保存，及时送检。
血清ALT 在20-25℃可稳定24小时，在2-8℃储存可稳定7d ，-20℃冰冻保存可稳定30d 。
5.3注意事项推荐选用血清，避免溶血，红细胞中ALT 比血浆高约7倍，溶血时红细胞内ALT 可进入血浆，导致测定结果偏高。
标本应避免溶血、脂血、黄疸。
6.检测仪器日立7180全自动生化分析仪，使用具体要求和校准程序详见《仪器GOPOD操作规程》。
7.试剂 7.1试剂品牌美康生物 7.2包装规格200mL （R1:2×65mL+R2:1×70mL ） 7.3主要组成成分 试剂成分含量（最终反应体系） 试剂1 磷酸盐缓冲液 0.1mol/L 苯酚0.01×10-3mol/L 试剂2葡萄糖氧化酶 16000u/L 过氧化物酶 1000u/L 4-氨基安替比林0.02×10-3mol/L不同批次的试剂不推荐混合使用 7.4储存条件有效期试剂在2-8℃保存可稳定1年，试剂开瓶后于2-8℃可稳定1个月。
葡萄糖试剂盒（己糖激酶法）标准操作程序1. 摘要本试剂盒供医疗机构用于体外定量测定人血清或血浆中葡萄糖的含量。
2. 适用范围程序适用于日立7600自动生化分析仪检测血清或血浆中葡萄糖的含量。
3. 职责使用日立7600自动生化分析仪进行测定葡萄糖浓度的工作人员要严格按照本SOP 程序进行，室负责人监督管理；本SOP 的改动，可由任一使用本SOP 的工作人员提出，并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。
4. 检测方法上海科华生物工程股份有限公司生产的葡萄糖试剂盒采用的是己糖激酶法(HK)。
5. 原理葡萄糖在三磷酸腺苷（ATP ）和镁离子存在下被已糖激酶（HK ）磷酸化，产生葡萄糖-6-磷酸（G-6-P ）和二磷酸腺苷（ADP ）。
葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G-6-PDH ）使G-6-P 氧化为6-磷酸葡萄糖，同时使烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+）还原为烟酰胺腺嘌呤二核苷酸还原型（NADH ）。
在340/380nm 的吸光度变化与标本中存在的葡萄糖数量成正比。
+++−−−→−+--+--−→−+HNADH ADP P G ADPP G ATP PDH G HK磷酸葡萄糖葡萄糖-66666. 仪器日立7600自动生化分析仪 7. 试剂7.1 试剂来源：上海科华生物工程股份有限公司提供 7.2 试剂瓶内主要成分：R1：Good ’s 缓冲液、G-6-PDH 、ATP ； R2：Good ’s 缓冲液、HK 、NAD +； 校准品：葡萄糖7.3 试剂稳定性：试剂于2℃-8℃避光保存，有效期为一年。
开瓶后存放在生化分析仪试剂仓中可稳定7天。
8.标准品和质量控制8.1校准程序：使用某某公司的校准品对自动分析仪进行校准。
按照公司标准品使用要求，并以9g/L氯化钠溶液或去离子水为空白，经校准测定，仪器自动对标准品通过合适的数学模型绘制校准曲线。
8.2质控品：某某公司提供的生化复合定值质控血清作为室内质控品。
每日在测定前做一次质控。
编写葡萄糖检验操作规程1. 引言本操作规程用于指导实验人员进行葡萄糖检验的操作步骤和注意事项。
2. 实验目的本实验的主要目的是检测样本中的葡萄糖浓度，以便进行相关疾病的诊断和治疗。
3. 实验材料•葡萄糖检测试剂盒•试管架•试管•移液器•吸光度计•离心机•电子天平4. 实验步骤4.1 样本提取1.获取待测样本，并记录样本来源和样本编号。
2.密闭保存样本，并迅速送入实验室。
4.2 样本处理1.取出存储的样本，并将其均匀摇匀。
2.使用电子天平称量10mL待测样本，并记录称量值。
4.3 反应液制备1.按照葡萄糖检测试剂盒说明书中的比例，将试剂与稀释剂加入一个干净的试管中。
2.轻轻摇匀试管，直到试剂和稀释剂充分混合。
4.4 反应体积设定1.使用移液器在每个试管中分别加入不同体积的反应液（通常为1mL）。
2.记录每个试管中反应液的体积。
4.5 预热吸光度计1.打开吸光度计，并将其设置至葡萄糖检测模式。
2.预热吸光度计至适当的工作温度。
4.6 吸收值测量1.将含有反应液的试管放入试管架中。
2.使用移液器将待测样本均匀地滴入每个试管中，并立即开始计时。
3.在规定的反应时间后，将试管从试管架中取出，并放入吸光度计中进行吸收值测量。
4.记录每个试管的吸收值，并确保测量结果的准确性。
4.7 数据处理和分析1.将吸收值数据整理并计算样本中葡萄糖的浓度。
2.使用适当的统计方法对数据进行分析，并生成实验结果报告。
5. 实验注意事项1.所有实验操作前需佩戴手套和实验服，以防止污染样本和受到伤害。
2.实验过程中，避免与其他化学药品接触，以免产生意外反应。
3.注意样本的标记，确保样本的来源和编号清晰可辨。
4.操作时要准确、迅速地吸取和加入试剂和样本，以确保结果的准确性。
5.注意吸光度计的预热和校准，以获得准确的吸收值测量结果。
6.所有实验后的废液和废品都要进行正确的处理，以保护环境和实验室安全。
6. 实验结果分析根据实验数据分析结果，我们可以得出样本中葡萄糖的浓度。
义乌市廿三里医院检验科临检室程序管理文件文件编号：SOP-SH-019 版本：1.0页码：共 4 页Glu（己糖激酶法）标准操作程序目录目录 (1)第1章目的和范围 (2)1.1 目的 (2)1.2 适用范围 (2)第2章操作规程 (2)2.1 测定原理 (2)2.2 试剂贮存与稳定性 (2)2.3 试剂与样本准备 (2)2.4 测定参数 (2)2.5 操作步骤 (3)2.6 校准和质控 (3)第3章结果计算 (3)3.1 吸光度变化的计算 (3)3.2 浓度的计算 (3)第4章方法学特性 (3)4.1 正常参考范围 (3)4.2 线性范围 (4)第5章临床意义 (4)第6章安全防护 (4)第1章 目的和范围1.1 目的为用户使用迈瑞公司Glu （己糖激酶法）试剂时，提供正确的操作流程和操作规范。
1.2 适用范围适用于各级医疗机构的用户。
第2章 操作规程2.1 测定原理葡萄糖＋ATP 葡萄糖-6-磷酸＋ADP葡萄糖-6-磷酸 + NAD + 6-磷酸葡萄糖酸 + NADH + H + NADH 的生成，引起340nm 吸光度的增加，增加的幅度与样本中葡萄糖的浓度成正比。
2.2 试剂贮存与稳定性试剂贮存在2～8℃环境时，在试剂盒上规定的有效期前可以保持稳定。
注意：试剂不可冰冻。
2.3 试剂与样本准备本试剂为液体双试剂，取出后可以直接使用。
样本为血清或血浆，加入糖分解抑制剂（NaF ，KF ）后的稳定性：15～25℃保存可稳定1天、4～8℃保存可稳定7天。
注意：（1）测定前应仔细检查试剂液面，并去掉其面上的气泡；（2）测定前应仔细检查样本，并去掉其中飘浮的纤维蛋白；（3）血清、血浆应在血液采集1小时内，尽早分离。
2.4 测定参数测定波长：340nm ；分析类型：终点法，扣除试剂空白；孵育时间：5分钟；G6P-DHHK反应时间：5分钟；第一试剂/样本/第二试剂比例：250/3/125。
注意：迈瑞公司有各型生化分析仪的详细测定参数备索。
