实验三_水及食品中微生物的检测
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水中细菌总数的测定和大肠菌群的检测(一)实验目的(1)了解和学习水中细菌总数和大肠菌群的测定原理和测定意义。
(2)学习和掌握用稀释平板计数法测定水中细菌总数的方法。
(3)学习和掌握水中大肠菌群的检测方法。
(二)实验原理水是微生物广泛分布的天然环境。
各种天然水中常含有一定数量的微生物。
水中微生物的主要来源有:水中的水生性微生物(如光合藻类)、来自土壤径流、降雨的外来菌群和来自下水道的污染物和人畜的排泄物等。
水中的病原菌主要来源于人和动物的传染性排泄物。
水的微生物学的检验,特别是肠道细菌的检验,在保证饮水安全和控制传染病上有着重要意义,同时也是评价水质状况的重要指标。
国家饮用水标准规定,饮用水中大肠菌群数每升中不超过3个,细菌总数每mL不超过100个。
所谓细菌总数是指1mL或1g检样中所含细菌菌落的总数,所用的方法是稀释平板计数法,由于计算的是平板上形成的菌落(colony-forming unit,cfu)数,故其单位应是cfu/g(mL)。
它反映的是检样中活菌的数量。
所谓大肠菌群,是指在37℃24h内能发酵乳糖产酸、产气的兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌的总称,主要由肠杆菌科中四个属内的细菌组成,即埃希氏杆菌属、柠檬酸杆菌属、克雷伯氏菌属和肠杆菌属。
水的大肠菌群数是指100mL水检样内含有的大肠菌群实际数值,以大肠菌群最近似数(MPN)表示。
在正常情况下,肠道中主要有大肠菌群、粪链球菌和厌氧芽胞杆菌等多种细菌。
这些细菌都可随人畜排泄物进入水源,由于大肠菌群在肠道内数量最多,所以,水源中大肠菌群的数量,是直接反映水源被人畜排泄物污染的一项重要指标。
目前,国际上已公认大肠菌群的存在是粪便污染的指标。
因而对饮用水必须进行大肠菌群的检查。
水中大肠菌群的检验方法,常用多管发酵法和滤膜法。
多管发酵法可运用于各种水样的检验,但操作繁琐,需要时间长。
滤膜法仅适用于自来水和深井水,操作简单、快速,但不适用于杂质较多、易于阻塞滤孔的水样。
实验一玻璃器皿的准备、常用仪器的使用及培养基的制备[实验目的]1、系统掌握玻璃器皿的准备方法及常用仪器的使用。
2、掌握一般培养基制备的原则和要求,熟悉一般培养基制备的过程。
[实验原理]一、玻璃器皿的无害处理:1、新购置的玻璃器皿因含有游离碱,一般在2%的盐酸溶液中浸泡数小时后再用清水洗净,也可在洗衣粉水中煮30-60min,取出用清水洗净。
2、常用玻璃器皿洗涤时可用鬃刷蘸取洗衣粉刷洗,然后用自来水冲洗干净。
3、带油污玻璃器皿先将倒空的玻璃器皿用10%的氢氧化钠浸泡半小时或放在5%的苏打液内煮两次,去掉油污,再用洗衣粉和热水刷洗。
4、带菌玻璃器皿经121℃高压蒸汽灭菌20min后,趁热倒去内容物,再用洗衣粉水刷洗干净,以水在内壁均匀分布成一薄层而不出现水珠为油垢除尽的标准。
经以上处理的玻璃器皿,可满足一般实验用。
少数实验对玻璃器皿清洁度要求较高,除用上述方法外,还应先用2%的HCl溶液浸泡数10min,再用自来水冲洗,蒸馏水淋洗2-3次。
有的尚需超纯水淋洗然后烘干备用。
二、玻璃器皿的包扎:吸管、平皿、瓶口等的包扎。
三、玻璃器皿的灭菌:分为两种,高压蒸汽灭菌法和干热灭菌法。
高压蒸汽灭菌法是湿热灭菌中应用最为广泛的一种方法。
其原理是依据在一个密闭的高压蒸汽灭菌器中,水的沸点随水蒸汽压的增加而上升,加压是为了提高水蒸汽的温度。
把待灭菌物品放在灭菌器内,当灭菌器内压力为0.1MPa时,温度可达到121℃,一般维持20min,即可杀死一切微生物的营养体及其孢子。
一般的培养基、玻璃器皿、金属用具、实验服、传染性标本等均可用这种方法有效灭菌。
灭菌的温度及时间视灭菌物品中的微生物种类及数量而定。
干热灭菌法也叫热空气灭菌法。
实验室通常使用恒温控制的电热鼓风干燥箱作为干热灭菌器。
此法常用于空的玻璃器皿、金属器具和其他耐高温的物品(如陶瓷培养皿盖、石蜡油、碳酸钙)的灭菌。
其优点是灭菌器皿保持干燥。
但带有胶皮、塑料的物品、液体及固体培养基不能用此法。
水的微生物检验一、器材:1 •培养基:PCA、灭菌双料5支、单料10支/每个样品(乳糖蛋白胨)2.仪器或其他用具:灭菌三角烧瓶(带塞)且加入稳定剂,灭菌培养皿、灭菌吸管、灭菌镊子、灭菌棉球、灭菌10 ml 生理盐水(灭菌9 ml 生理盐水)、酒精灯(打火机、酒精棉球)、样品筐二、水样的采集:1 • 用灭菌棉球将水龙头擦干(钢铁管口用酒精灯烧灼消毒水龙头周围 3 分钟)2. 完全打开水龙头使水流2-5分钟后,将水龙头关小,以灭菌三角烧瓶接取水样。
方法二:1. 流1-2分钟2. 关上,擦水龙头四周3. 打开水龙头,流2-5 分钟4. 接水注意:1.加硫代硫酸钠的量:500 ml水加1.5%硫代硫酸钠2ml或每500 ml加0.4ml硫代硫酸钠。
2. 样品瓶必须专瓶专用,灭菌后须干燥。
3. 人手和手套不得与样品瓶内壁或瓶塞接触。
4. 采样记录用胶纸粘贴或悬挂标签于水样瓶上,注明水样编号、采样者、日期、时间及地点等。
5. 运送水样应避免瓶摇动(充满容器并密封,除冷冻样品),以免水样溢出后又回流瓶中增加污染。
6. 取样后2 小时内检验,冷藏4小时内检验7. 做样在无菌间做。
三、细菌总数、大肠菌群测法参照GB5750-85 (2001 版)水的余氯检测程序一、器材:配好的比色管10 支,洁净的50ml 比色管1 支,三角锥瓶2个(带塞)二、水样采集:打开水龙头流水1-2 分钟后,以三角烧瓶接取水样,涮洗3 次,接取200ml 左右,迅速送到实验室比色。
三、操作:准确吸取2.5ml 邻联甲苯胺溶液于50ml 比色管中,加水样至50ml 刻度处。
当接近刻度时,改用滴管加至刻度处,以与眼平行时,凹液面与刻度相平为准。
(盖上瓶塞,颠倒混匀2-3 次),迅速比色,然后审核并做记录。
四、注意事项:1. 抽取时间:车间上班30 分钟后。
2. 每天三角锥瓶、比色管用完后刷洗并控干。
3. 5ml 吸管每月换1(或2)支。
4. 抽取按编号顺序抽取。
微生物检验流程及操作标准全文共四篇示例,供读者参考第一篇示例:微生物检验是一种重要的实验室技术,用于检测食品、水质、环境等样品中的微生物存在情况。
微生物检验需要严格遵守一系列操作标准和流程,以确保检验结果的准确性和可靠性。
下面我们将介绍一下微生物检验的流程及操作标准。
一、样品采集1. 样品的采集需要采用无菌工具,并保持样品在采集过程中不受到外界环境的污染。
2. 样品的采集过程应尽量避免接触到任何可能引入外源微生物的物质,比如皮肤、空气等。
3. 采集的样品应标明正确的标识信息,包括样品名称、采集地点、采集日期等。
二、样品处理1. 样品收到实验室后,需要尽快进行处理,避免样品内的微生物增殖或死亡。
2. 样品处理过程需要保持在无菌条件下进行,使用无菌工具进行操作。
3. 样品处理过程中需要按照检验要求进行适当的稀释,以确保实验得出准确的结果。
三、培养基准备1. 培养基的制备需要按照标准的配方和步骤进行,以确保培养基的质量符合要求。
2. 制备培养基时需要严格遵守无菌操作规范,避免细菌、真菌等外源微生物的污染。
3. 制备好的培养基需要在适当的条件下保存,确保培养基的稳定性和有效性。
四、接种操作1. 在进行微生物检验之前,需要准备好无菌的接种环、移液器等工具。
2. 采取适当的方法将处理好的样品接种到培养基上,避免接种时引入外源微生物。
3. 接种操作需要在无菌条件下进行,避免培养物受到任何污染。
五、培养与观察1. 接种后的培养基需要置于适当的温度和湿度条件下进行培养,促使样品中的微生物生长。
2. 定期观察培养基上的生长情况,记录生长的数量和形态,用于后续的分析和鉴定。
3. 在观察过程中需要注意反复进行无菌操作,避免细菌、真菌等外源微生物的污染。
六、鉴定与结果解读1. 当样品中的微生物生长到一定程度时,需要进行鉴定和分析,确定其种属和数量。
2. 鉴定过程需要参考相关的鉴定手册和标准,进行适当的试验和测试。
3. 根据鉴定结果进行结果解读,判断样品中微生物的种类和数量是否符合标准要求。
实验三水中细菌总数的测定实验目的:1.掌握测定水中细菌总数的方法;2.理解水质检测的原理和意义。
实验原理:在水体中存在着大量的微生物,其中包括细菌、藻类、真菌、原生动物等。
其中,细菌是最常见的一种。
水中细菌的检测可以对水质进行评估。
水中细菌的测定方法有多种,其中最常用的是悬浮液涂片法。
具体步骤如下:1.样品采集:准备好采集样品的器具,比如采样瓶。
在采集水样之前,要仔细洗手,并戴上手套。
2.处理样品:将样品过滤筛,去除水中的大颗粒。
然后用吸头从样品瓶中吸取适量的水样,放入卡片内。
3.制作涂片:将取出的水样涂在普通菌落计数板上。
涂片的方式要均匀,涂抹的厚度要适中。
制片完成后,可将板在37℃恒温条件下培养24小时。
4.统计菌落数目:待培养时间结束后,统计平板上的菌落数目。
实验步骤:1.准备实验药品和器具,保持清洁卫生,避免造成污染。
3.取出一片净化涂片,并用酒精灯或消毒灯消毒。
4.用吸头从采样瓶中取出适量的水样,均匀地涂在净化涂片上。
5.将制片好的涂片在恒温器中培养,待24小时后取出观察。
统计涂片上菌落的数目,计算出水样的细菌总数。
6.实验结束后,将药品和器具进行清理和消毒。
实验注意事项:1.实验过程中要注意保持清洁卫生,防止污染;2.涂片的制作要均匀,厚度不要过薄或过厚;3.涂片不要碰触手指等其他物体,否则影响菌落生长;4.待菌落计数板培养后不要翻盘,以免影响菌落的计数。
实验结果分析:通过实验,我们可以了解到水中细菌总数的检测方法,并从中得出有关水质的检测数据。
水中细菌总数越高,说明水质越差,这意味着我们在使用这种水源时需要更加谨慎和严格。
因此,水质检测对于保障人们的健康和生命安全非常重要,需要时常进行检测和监控。
第1篇一、实验目的1. 掌握测定食品中维生素C含量的原理和方法。
2. 熟悉实验操作过程,提高实验技能。
3. 分析食品中维生素C含量的影响因素。
二、实验原理维生素C(抗坏血酸)是一种水溶性维生素,对人体健康具有重要意义。
本实验采用2,6-二氯靛酚滴定法测定食品中维生素C的含量。
该方法基于维生素C具有还原性,能将2,6-二氯靛酚(氧化剂)还原成无色物质,通过滴定计算样品中维生素C的含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:苹果、梨、柑橘等富含维生素C的食品。
2. 试剂:2,6-二氯靛酚标准溶液、碘化钾溶液、醋酸缓冲溶液、淀粉指示剂等。
3. 仪器:酸式滴定管、锥形瓶、电子天平、烧杯、玻璃棒、滴定管夹等。
四、实验步骤1. 样品处理:将苹果、梨、柑橘等食品洗净,去皮去核,切成小块,用组织捣碎机捣碎,取适量匀浆,用醋酸缓冲溶液定容至100 mL。
2. 标准溶液的配制:准确称取2,6-二氯靛酚标准品0.1 g,用醋酸缓冲溶液溶解并定容至100 mL,配制成0.1 mg/mL的标准溶液。
3. 滴定实验:准确吸取10.0 mL样品匀浆,置于锥形瓶中,加入2 mL醋酸缓冲溶液,滴加几滴淀粉指示剂,用2,6-二氯靛酚标准溶液滴定至溶液变为蓝色,记录消耗标准溶液的体积。
4. 计算维生素C含量:根据标准溶液的浓度和消耗体积,计算样品中维生素C的含量。
五、实验结果与分析1. 实验结果(1)苹果中维生素C含量:5.28 mg/100 g(2)梨中维生素C含量:4.32 mg/100 g(3)柑橘中维生素C含量:3.76 mg/100 g2. 分析(1)实验结果表明,苹果、梨、柑橘等水果中均含有较高的维生素C。
(2)样品处理过程中,捣碎程度和匀浆的浓度对实验结果有一定影响。
(3)实验过程中,滴定速度、指示剂加入量等因素也会影响实验结果。
六、实验结论通过本次实验,我们掌握了测定食品中维生素C含量的原理和方法,分析了实验过程中可能影响结果的因素。
食品化学实验教案一、实验目的1. 理解食品中各种成分的化学性质和作用。
2. 学习食品化学实验的基本操作技能。
3. 培养学生的实验观察能力和科学思维。
二、实验原理1. 食品中的营养成分:碳水化合物、蛋白质、脂肪、维生素、矿物质等。
2. 食品腐败变质的原因:微生物的生长和繁殖,食品的化学变化等。
3. 食品保存的方法:低温保存、高温杀菌、干燥保存、腌制等。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:鸡蛋、牛奶、面包、水果、蔬菜等。
2. 实验仪器:天平、量筒、烧杯、试管、滴定管、pH计等。
四、实验内容与步骤1. 实验一:食品中碳水化合物的测定步骤:(1) 准备样品,如面包、水果等。
(2) 采用滴定法测定样品中的碳水化合物含量。
(3) 记录数据,进行分析。
2. 实验二:食品中蛋白质的测定步骤:(1) 准备样品,如鸡蛋、牛奶等。
(2) 采用凯氏定氮法测定样品中的蛋白质含量。
(3) 记录数据,进行分析。
3. 实验三:食品中脂肪的测定步骤:(1) 准备样品,如肉类、植物油等。
(2) 采用酸价法或皂化法测定样品中的脂肪含量。
(3) 记录数据,进行分析。
4. 实验四:食品中维生素C的测定步骤:(1) 准备样品,如水果、蔬菜等。
(2) 采用碘量法测定样品中的维生素C含量。
(3) 记录数据,进行分析。
5. 实验五:食品中矿物质的测定步骤:(1) 准备样品,如面包、牛奶等。
(2) 采用原子吸收光谱法测定样品中的矿物质含量。
(3) 记录数据,进行分析。
五、实验报告要求2. 实验报告包括实验目的、原理、材料与仪器、实验步骤、实验结果和分析等内容。
3. 实验报告要求条理清晰,数据准确,分析深入。
六、实验六:食品添加剂的使用与检测1. 实验目的了解食品添加剂的种类、作用及限量标准。
学习食品添加剂的检测方法。
2. 实验原理食品添加剂包括着色剂、防腐剂、甜味剂、香料等,它们可以改善食品的色泽、口感、保质期等。
但过量使用对人体有害,需掌握其检测方法。
微生物检验实验报告微生物检验实验报告一、引言微生物检验是一项重要的实验室技术,用于检测食品、水源、环境等中的微生物污染情况。
本次实验旨在通过对不同样本的微生物检验,了解微生物在不同环境中的存在情况以及对人体健康的影响。
二、实验目的1. 掌握微生物检验的基本原理和方法;2. 分析不同样本中的微生物存在情况;3. 了解微生物对人体健康的影响。
三、实验方法1. 样本采集:从不同环境中采集样本,如食品、水源、空气等;2. 样本处理:将样本分别进行过滤、培养和培养基涂布等处理;3. 培养:将处理后的样本接种于适当的培养基上,并进行培养;4. 观察和记录:观察培养基上的微生物生长情况,并记录结果。
四、实验结果与讨论在本次实验中,我们采集了来自不同环境的样本,并进行了微生物检验。
以下是我们的实验结果和讨论:1. 食品样本我们采集了市场上的鸡肉样本,并进行了微生物检验。
结果显示,鸡肉样本中存在大量的大肠杆菌和沙门氏菌。
这表明鸡肉可能受到了粪便污染,存在潜在的食品安全隐患。
因此,在食用鸡肉时,应注意烹饪充分,以杀死潜在的致病菌。
2. 水源样本我们采集了自来水和河水样本,并进行了微生物检验。
结果显示,自来水样本中微生物数量较少,符合卫生标准。
而河水样本中存在大量的肠道致病菌和其他细菌,这表明河水受到了污染。
因此,我们在户外活动时应尽量避免直接饮用河水,以防止疾病传播。
3. 空气样本我们采集了室内和室外空气样本,并进行了微生物检验。
结果显示,室内空气中存在较多的真菌,可能与室内潮湿环境有关。
而室外空气中微生物数量较少,符合正常范围。
因此,我们在室内应保持良好的通风,避免潮湿环境,以减少真菌滋生。
五、结论通过本次微生物检验实验,我们得出以下结论:1. 食品样本中存在潜在的致病菌,食用前应进行充分烹饪;2. 河水样本受到了污染,应避免直接饮用;3. 室内空气中存在较多的真菌,应保持良好的通风。
六、实验心得通过本次实验,我们深入了解了微生物检验的原理和方法,并通过实际操作获得了实验结果。