犬干扰素基因的生物信息学分析

安徽农业大学学报,2009,36(1):1242127Journal of Anhui Agricultural University藏獒犬α2干扰素全基因的克隆与序列分析陈红英1,2,董海聚1,崔保安1,23,贾艳艳1,2,宋亚朋1,2,王淑娟1(11河南农业大学牧医工程学院,郑州450002;21河南省动物性食品安全重点实验室,郑州450002)摘　要:根据Gen Bank发表的犬α2干扰素(I F N2α)基因核酸序列(AB102731),设计并合成1对引物,利用PCR 技术从藏獒犬肝脏基因组DNA中扩增犬α2干扰素全基因,并进行克隆和测序。

结果表明,获得了犬I F N2α全基因序列,其大小为564bp,包含1个完整阅读框,编码187个氨基酸残基。

序列比较分析发现,克隆的藏獒犬I F N2α基因序列与Gen Bank中5条犬I F N2α基因序列核苷酸同源性在9618%～9913%之间,氨基酸同源性在9417%～9819%之间,并无插入和缺失变异,但是存在氨基酸点变异。

藏獒犬与人和其他8种动物的I F N2α基因序列分析和系统进化分析表明,I F N2α基因存在种属的差异性,亲缘关系越近,同源性越高。

犬I F N2α基因的成功克隆为进一步研究藏獒犬I F N2α基因表达、生物学活性和应用奠定基础。

关键词:犬;α2干扰素基因;扩增;基因克隆;序列分析 中图分类号:Q789文献标识码:A文章编号:16722352X(2009)0120124204C lon i n g and sequence ana lysis of i n terferon2αgene of Zangao can i n eCHEN Hong2ying1,2,DONG Hai2ju1,CU IBao2an1,2,J I A Yan2yan1,2,S ONG Ya2peng1,2,WANG Shu2juan1(1.College of Ani m al Husbandry and Veterinary,Henan Agricultural University,Zhengzhou450002;2.Ani m al Food Safety Key Laborat ory of Henan Pr ovince,Zhengzhou450002)Abstract:One pair of p ri m ers was designed and synthesized according t o the canine interfer on al pha gene (I F N2α)nucleic acid sequence(AB102731)published in the Gen Bank.Canine I F N2αgene was a mp lified by PCR fr om genome DNA extracted directi onally fr om liver of Zangao canine,then cl oned and sequenced.The result showed the full length sequence of Zangao canine I F N2αgene was consisted of564bp,which includes one open2 reading fra me,encoding187a m ino acid residues,three potential N2glycosalati on sites and ten cysteines in deduced a m ino acid sequence.The results of comparative sequence analysis and phyl ogenetic tree analysis showed there was difference of genus in I F N2αgene,the nearer relati onshi p,the higher homol ogy.This study set a basis the way for future study of bi ol ogical functi on and app licati on of canine I F N2α.Key words:canine;interfer on2αgene;a mp lificati on;gene cl oning;sequence analysis 随着人们生活水平日益提高,犬类动物在人类的生活中越来越占据重要的部分,如作为伴侣动物、警犬、救护犬等,但是狂犬病、犬细小病毒病、犬瘟热和犬腺病毒病等各种病毒性疾病严重危害着犬的健康和生存,也困扰着我国的养犬业,加之各种原因造成的免疫程序失败,使病毒病的预防和治疗显得尤为重要。

京巴犬α-干扰素全基因的克隆与分子进化分析陈红英;李新生;董海聚;崔保安;郭明彦;宋亚朋【期刊名称】《江西农业大学学报》【年(卷),期】2009(031)003【摘要】根据基因库(CenBank)中收录的犬α-干扰素(IFN-α)基因核苷酸序列(AB102731),设计并合成了1对引物,PCR扩增京巴犬IFN-α全基因,并克隆、测序.结果表明,犬IFN-α基因全基因序列为564 bp,包含1个开放阅读框,编码187个氨基酸的多肽,推导氨基酸序列有3个潜在的N-糖基化位点,有10个与二硫键形成有关的半胱氨酸.序列比较分析发现,京巴犬IFN-α基因序列与GenBank发表的其它品种犬IFN-α基因序列核苷酸同源性为96.3%以上,氨基酸同源性为94.1%以上,其中与AB102731核苷酸同源性最高,为99.5%.仅有3个碱基差异.京巴犬与人和其他8种动物的IFN-α基因序列分析和系统进化分析表明,IFN-α基因存在种属的差异性,亲缘关系越近,同源性越高.京巴犬IFN-α基因的成功克隆为进一步研究犬IFN-α基因表达、生物学活性和应用奠定基础.【总页数】5页(P512-516)【作者】陈红英;李新生;董海聚;崔保安;郭明彦;宋亚朋【作者单位】河南农业大学牧医工程学院,河南郑州450002;河南省动物性食品安全重点实验室,河南郑州450002;河南农业大学牧医工程学院,河南郑州450002;河南农业大学牧医工程学院,河南郑州450002;河南农业大学牧医工程学院,河南郑州450002;河南省动物性食品安全重点实验室,河南郑州450002;河南农业大学牧医工程学院,河南郑州450002;河南农业大学牧医工程学院,河南郑州450002;河南省动物性食品安全重点实验室,河南郑州450002【正文语种】中文【中图分类】Q789【相关文献】1.地方品种固始鸭γ-干扰素基因的克隆与分子进化分析 [J], 陈红英;崔保安;李新生;胡功政;赵丽;王东方2.梅花鹿α干扰素全基因的克隆与分子进化分析 [J], 苏凤艳;宗颖;魏吉祥;曾范利;王全凯3.梅花鹿α干扰素全基因的克隆与分子进化分析 [J], 苏凤艳4.固始鸭白细胞介素-18全基因克隆与分子进化分析 [J], 陈红英;李新生;崔保安;夏平安;赵丽;方丽云5.藏獒犬α-干扰素全基因的克隆与序列分析 [J], 陈红英;董海聚;崔保安;贾艳艳;宋亚朋;王淑娟因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

犬β干扰素基因在毕赤酵母中的表达的开题报告1. 研究背景β干扰素是一种重要的细胞因子，具有抗病毒、抗肿瘤、免疫调节等多种生物学功能。

而在犬体内，β干扰素也扮演着重要的生物学角色。

因此，研究犬β干扰素的表达，对于深入了解其作用机制，及其在医学和农业领域中的应用具有极其重要的意义。

毕赤酵母作为一种单细胞真菌，具有表达异源蛋白和蛋白质工程的良好能力。

而且毕赤酵母的乙醇代谢通路与犬乙醇代谢途径相似，为表达犬β干扰素基因提供了可能实现的途径。

2. 研究目的本研究旨在将犬β干扰素基因导入毕赤酵母中，通过优化表达条件，建立表达犬β干扰素的毕赤酵母系统，并对其进行初步的表达性状和功能评价。

3. 研究方法3.1 选择适宜的毕赤酵母菌株本研究将采用毕赤酵母作为表达载体，因此需要选择合适的毕赤酵母菌株。

本研究将采用乙醇代谢能力强、易于表达异源蛋白的毕赤酵母菌株。

并通过PCR验证菌株是否合适，以及是否存在其他异源与E.coli杂交引源序列(HT)。

3.2 构建犬β干扰素基因表达质粒本研究将采用重组DNA技术构建含有犬β干扰素基因的表达质粒。

首先，根据犬β干扰素基因序列设计引物，通过PCR扩增该基因，并与表达载体质粒进行连接。

然后，将重组质粒转化至毕赤酵母中。

3.3 表达犬β干扰素基因将重组质粒转化至毕赤酵母菌株中后，采用不同的诱导剂、初始pH值、密度等条件，寻求最佳表达犬β干扰素的条件。

采用SDS-PAGE和Western blot等方法对犬β干扰素进行初步的鉴定。

同时采用ELISA、吡咯烷酮酸酐(PCA)、细胞毒活性试验等方法，进行表达产品的定量和活性评价。

4. 研究意义犬β干扰素在犬体内具有多种生物学功能，如抗病毒、抗肿瘤、免疫调节等。

而在医学和农业领域中，犬β干扰素的应用前景广阔，例如开发犬用疫苗和治疗药物，治疗犬出血热和犬伤寒等疾病，为犬的养殖和保健提供技术支持等。

此外，本研究还可为毕赤酵母在异源蛋白表达和蛋白质工程方面的应用提供技术参考。

犬干扰素-γ的复性及活性测定的开题报告一、选题背景和意义犬干扰素-γ（Canine interferon-γ, C-IFN-γ）是一种具有抗病毒、抗肿瘤和免疫调节等多种生物学功能的细胞因子。

目前已有大量的研究表明，C-IFN-γ在犬的免疫防御中发挥着重要的作用，尤其在免疫调节和免疫耐受中有着重要的地位。

因此，研究C-IFN-γ的复性及活性测定有着重要的理论和应用价值。

二、研究内容和目标本项目主要研究C-IFN-γ的复性及活性测定方法，具体包括以下内容：1. 犬干扰素-γ的表达、纯化及初步鉴定。

2. 犬干扰素-γ的复性条件的筛选及优化。

3. C-IFN-γ活性测定方法的建立及优化。

本项目旨在建立一个可靠、准确、可重复的C-IFN-γ的复性及活性测定方法，为进一步研究C-IFN-γ的生物学功能提供重要的基础。

三、研究方法和技术路线1. 犬干扰素-γ的表达、纯化及初步鉴定（1）构建表达犬干扰素-γ的载体。

（2）通过真核表达系统表达产生可溶性的C-IFN-γ。

（3）利用亲和层析和凝胶过滤层析进行纯化，初步鉴定纯化产物的纯度。

（4）Western blotting和质谱等方法进行进一步的鉴定和分析。

2. 犬干扰素-γ的复性条件的筛选及优化（1）确定影响犬干扰素-γ复性的因素，如温度、PH值、离子强度等。

（2）通过单因素试验和正交试验等方法进行筛选优化，找出适宜的复性条件。

3. C-IFN-γ活性测定方法的建立及优化（1）选择犬细胞系建立IFN-γ抗病毒活性检测体系。

（2）通过ELISA等方法建立IFN-γ结合活性测定体系。

（3）通过建立IFN-γ抗病毒活性和结合活性的临界浓度测定最优的IFN-γ活性测定方法。

四、预期成果和意义本项目的预期成果为建立C-IFN-γ的复性及活性测定方法，达到如下目标：1. 成功表达并纯化出犬干扰素-γ。

2. 筛选出适宜的C-IFN-γ复性条件。

3. 建立可靠、准确、可重复的C-IFN-γ活性测定方法。

农业生物技术学报Journal of A gricultural Biotechnolog y1999,7(3) 拉布拉多犬和德国牧羊犬干扰素alpha基因克隆及测序夏 春 汪 明 夏兆飞(中国农业大学动物医学院,北京100094)摘 要:本研究采用PCR技术扩增和克隆了拉布拉多犬和德国牧羊犬的干扰素基因alpha IF N。

测序结果显示拉布拉多犬和德国牧羊犬的alpha IFN基因序列一致,全长均为513个核苷酸,共编码170个氨基酸。

两种犬alpha IFN蛋白分子量均为18 504kD。

结果也揭示了犬属动物的alpha IF N基因十分保守,仅存在0 3%的变异。

关键词:犬;干扰素基因;P CR法M olecular Cloning of Interferon-alpha Genes from T wo kinds of Dog(Labrader Retriever and German Shepherd Dog)Xia Chun Wang M ing Xia Zhaofei(College of Veterinary M edicine,China A gricultural U niversity,Beijing100094)Abstract:T wo alpha IF N genes were isolated from L abrader Retriever and German Shepherd dog by PCR us-ing primers based on hig hly conserved amino acid sequence blocks of do g's alpha IFN genes.T he cloned I FN g enesbetween L abrader Retriever and German Shepherd dog are similarities,and are513nucleotides long and deduced170amino acid.T his data w ould sug gest the alpha IF Ns o f dog be highly conser ved,and the amino acid sequenceshav e99 3%~100%homolog y with those of dog's alpha IF N g enes.Key words:dog;interferon gene;PCR method干扰素(Interferon,缩写为IFN)是一类能诱导动物细胞产生多种广谱抗病毒蛋白的细胞因子,具有阻止病毒繁殖、调节机体免疫反应的生物学功能,是当今应用前景广阔的重要生物制剂之一[1]。

中国生物制品学杂志2011年9月第24卷第9期Chin J Biologicals September 2011，Vol.24No.9犬干扰素α（Canine interferon alpha ，CaIFN α）是一种广谱的抗病毒细胞因子，目前已克隆表达了8个亚型，其中CaIFN α1的抗病毒作用比较显著［1］。

甲醇营养型酵母虽能高效表达外源真核基因，但对某些含有稀有密码子，尤其是稀有密码子密集区的基因，外源蛋白的翻译速率却很低［2-4］。

Li 等［5］在表达人丙型肝炎病毒蛋白时发现，目的基因选择毕赤酵母偏爱的密码子，蛋白的表达量可提高5倍。

Wang 等［6］利用酵母表达系统表达人的Zbtb7A ，通过将稀有密码子改变为酵母偏爱的密码子，蛋白表达量从基因修饰前无法检出提高到基因修饰后的18μg ∕ml 。

郑佳琳等［7］对狂犬病病毒G 基因的密码子进行了优化，提高了G 蛋白在原核系统中的表达水平。

本实验对CaIFN α1的基因进行了偏嗜性改造，并在巴斯德毕赤酵母表达系统中表达，旨在提高蛋白表达水平及抗病毒活性，为大量发酵生产犬干扰素奠定基础。

1.材料与方法1.1工程菌、载体、细胞及病毒E .coli DH5α、毕赤酵母X33菌株、pPICZ αC 载体、Vero 细胞、MDCK 细胞及水疱性口炎病毒（Vesicular stomatitis virus ，VSV ）均为本院微生物实验室保存。

1.2主要试剂限制性核酸内切酶EcoR Ⅰ、Xba Ⅰ、高纯度dNTP 和Taq DNA 聚合酶均购自TaKaRa 公司；DNA marker作者单位：华南农业大学兽医学院（广州510642）通讯作者：郭霄峰，E-mail ：xfguo＠scau．edu．cn【基础研究】犬干扰素α1基因的修饰及在毕赤酵母中的表达王玉朱艳平郭霄峰【摘要】目的修饰犬干扰素α1（Canine interferon alpha1，CaIFN α1）基因，提高其在毕赤酵母中的表达水平及抗病毒活性。

犬IFN-α基因的克隆、表达及其生物学活性的研究的开题报告一、题目：犬IFN-α基因的克隆、表达及其生物学活性的研究。

二、研究背景和意义：干扰素（IFN）是免疫系统重要的调节因子，可抑制病毒复制、增强细胞免疫功能、调节免疫细胞分化等。

IFN-α属于Type I IFN家族，具有广谱的生物学作用，对于疾病治疗具有广泛的潜在应用价值。

犬作为人类的伴侣动物，在医学和疾病控制方面也具有重要的意义。

因此，研究犬IFN-α基因的克隆、表达及其生物学活性，对犬的免疫系统和人免疫系统的研究都具有重要的意义。

三、研究内容和实施步骤：研究内容：本研究旨在从犬中克隆出IFN-α基因，并在表达系统中构建重组IFN-α蛋白，进一步探讨其可能的生物学活性，从而为IFN-α的研究提供一个新的研究材料。

实施步骤：1. 从犬体内收集组织，提取全基因组DNA。

2. Amplify适当长度的IFN-α基因片段，通过限制性内切酶切割克隆到表达载体上。

3. 将重组表达载体转化到大肠杆菌中，利用海绵状体做相应蛋白鉴别。

4. 将表达丰富的革兰氏阳性菌株进行转染，观察可能的细胞反应。

5. 通过SDS-PAGE和Western blotting等方法，对表达的蛋白进行鉴定和定量。

6. 进一步研究其可能的生物学活性，例如抗病毒活性，免疫调节活性。

四、研究预期成果：1. 成功从犬中克隆IFN-α基因。

2. 构建重组IFN-α蛋白表达系统，并成功表达出重组蛋白。

3. 鉴定表达的蛋白，研究其可能的生物学活性。

4. 为犬免疫系统和人免疫系统的研究提供一个新的研究材料。

五、研究的意义和价值：1. 探索了IFN-α在犬体内的表达和生物学活性，对于犬的免疫系统和疾病治疗研究具有意义。

2. 为IFN-α的研究提供了一个新的研究材料，对于其在人类疾病治疗方面的应用有所启示。

3. 为兽医学和人类医学的交叉研究提供了新的思路和方法，具有推动兽医医学发展的重要意义。

犬γ-干扰素基因的克隆、序列分析及蛋白质结构预测谢昆;蒋成砚;唐秀华;周文树;王海荣;汪镜【期刊名称】《江苏农业学报》【年(卷),期】2016(032)001【摘要】根据GenBank上犬γ⁃干扰素基因（IFN⁃γ）序列（序列号WO318193），利用Primer 5．0软件设计特异性引物，应用RT⁃PCR技术从100μg／ml ConA刺激24 h后的犬外周血淋巴细胞总RNA中扩增出γ⁃干扰素基因，测序后应用DNAStar软件对克隆的犬γ⁃干扰素基因进行序列分析，并与GenBank上发表的犬、牛、大熊猫、鸡、牦牛、人、猪、野猪、斑马鱼、土拨鼠等的IFN⁃γ基因序列进行同源性比较。

结果显示，克隆的犬IFN⁃γ基因大小501 bp，编码166个氨基酸，与犬、牛、大熊猫、鸡、牦牛、人、猪、野猪、斑马鱼、土拨鼠 IFN⁃γ基因的核苷酸序列同源性分别为98�4％、81�6％、26�1％、26�1％、22�7％、22�7％、80�8％、81�0％、28�5％和25�0％；氨基酸序列同源性分别为95�8％、72�5％、5�4％、5�4％、6�6％、6�6％、68�9％、69�5％、5�4％和5�4％。

运用DNAstar软件对犬γ－干扰素进行蛋白结构预测的结果显示，犬γ⁃干扰素蛋白含有10个α⁃螺旋、9个β⁃折叠、11个β⁃转角和5个无规则卷曲。

【总页数】6页(P170-175)【作者】谢昆;蒋成砚;唐秀华;周文树;王海荣;汪镜【作者单位】红河学院生命科学与技术学院，云南蒙自 661199; 云南省高校农作物优质高效栽培与安全控制重点实验室，云南蒙自 661199;红河学院生命科学与技术学院，云南蒙自 661199; 云南省高校农作物优质高效栽培与安全控制重点实验室，云南蒙自 661199;红河学院生命科学与技术学院，云南蒙自 661199;红河学院生命科学与技术学院，云南蒙自 661199;红河学院生命科学与技术学院，云南蒙自 661199;红河学院生命科学与技术学院，云南蒙自 661199【正文语种】中文【中图分类】S858.292【相关文献】1.贵宾犬α-干扰素基因的扩增、克隆与序列分析 [J], 宋亚鹏;陈红英;崔保安;贾艳艳;郭显坡;张蕾2.中国黑白花奶牛干扰素-τ成熟蛋白基因的克隆与序列分析及牛干扰素-τ的分类[J], 张明;管晓斌;朱庆;刘学方;冯玉梅;赖松家3.猪细小病毒非结构蛋白NS1基因的克隆、序列分析及蛋白质结构预测 [J], 刘建;汤德元;罗险峰;曾智勇;李春燕;甘振磊;王凤;郝飞;王洪光4.藏獒犬α-干扰素全基因的克隆与序列分析 [J], 陈红英;董海聚;崔保安;贾艳艳;宋亚朋;王淑娟5.犬γ干扰素基因的克隆与序列分析 [J], 张桂红;丁乃峥;杨林;师守信;刘宝全因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

犬的α干扰素CaIFN-a的生物信息学分析摘要：犬的α干扰素（CaIFN- α)具有广谱抗病毒、抗肿瘤、抑制细胞增殖以及提高免疫功能等作用，有很高的研究应用价值。

利用生物信息学的方法与手段对犬的α干扰素基因序列进行分析对重组干扰素的基因设计，蛋白大量表达乃至临床应用均具有极大地意义。

关键词：生物信息，犬的α干扰素；序列分析Bioinformatics analysis of CaIFN-aAbstract：Dogs α interferon (CaIFN-α) has broad-spectrum anti-viral, anti-tumor, inhibition of cell proliferation and enhance immune function, has high research value. Bioinformatics methods and means of interferon-α gene sequences were analyzed dogs genetically engineered recombinant interferon, a large number of protein even have clinical applications are greatly significant.Keywords: Bioinformatics；CaIFN- α; Sequence analysis前言：干扰素（Interferon,IFN）是人和动物细胞受到病毒感染，或者核酸、细菌内毒素、促细胞分裂素等干扰素诱生剂刺激后，由巨噬细胞、淋巴细胞等产生的一种高活性、多功能糖蛋白。

在正常机体的脾、肝、肾、外周血淋巴细胞和骨髓中都可以检出。

具有广谱抗病毒、抗肿瘤和增强免疫等多生物活性，为现今一种最理想的抗病毒生物制剂。

干扰素分为两大类：Ⅰ型和Ⅱ型[1]。

Ⅰ型干扰素由白细胞产生，主要功能为抗病毒、免疫激活和细胞生长调节。

犬β干扰素的表达及其抗细小病毒复制的研究犬细小病毒（Canine Parvovirus,CPV）病作为危害犬类健康最严重的传染病之一,对犬类的健康和生存有着巨大的威胁。

随着时间的变化CPV也在不断地发生变异,给此病的预防与治疗带来巨大挑战。

干扰素（interferon,IFN）是一种广泛表达于脊椎动物体内的多功能细胞因子,并且具有一系列的生物活性如抗病毒、抗增殖、抗肿瘤及免疫调节作用。

其中IFN-β是天然免疫和适应性免疫中的一个重要的中间诱导分子和效应分子,它对抗病毒机制的独特作用是IFN-α及其亚型无法代替和弥补。

现有的动物干扰素主要采用原核表达的方法来制备,需要经过变性和复性的过程来获得具有活性的蛋白质,生产工艺复杂,大大限制了干扰素在兽医临床上的应用,而利用真核细胞表达的干扰素更接近天然干扰素的结构。

相比大肠杆菌表达的犬IFN-α,CHO表达的干扰素具有良好的抗病毒活性和免疫原性,并且副作用更小。

本研究从贵州大学动物医院采集犬血液,利用分离的外周血淋巴细胞中来提取总DNA,PCR扩增犬IFN-β基因,克隆并进行序列分析;构建犬IFN-β真核表达质粒,将其在CHO-K1细胞中表达,并研究其对CPV的抗病毒活性。

本论文主要研究内容包括:1.犬IFN-β基因的扩增、克隆及序列分析根据GenBank登录的犬IFN-β基因序列（FJ194477）设计合成特异性引物,通过PCR从犬外周血淋巴细胞总DNA中扩增IFN-β基因CDS区并进行克隆测序。

运用生物信息学方法对犬IFN-β基因进行序列分析,并对其理化性质以及编码蛋白质的二级结构、三级结构进行预测,构建分子系统进化树。

结果显示:犬IFN-β基因编码区全长561 bp,共编码186个氨基酸,其分子式可表示为C₁₀₁₄H₁₅₉₃N₂₆₃O₂₉₀S₉,分子质量为22.40 ku;属于亲水性蛋白,理论等电点为5.98;犬IFN-β含有丰富的二级结构,以α螺旋（76.88%）和无规卷曲（19.35%）为主,蛋白质三级结构呈弯曲螺旋结构;与貉、威德尔海豹、金钱豹、家猫、宽吻海豚、人、鸡和绿头鸭相对应序列核苷酸序列同源性分别为98.4%、87.2%、85.2%、84.7%、79%、74.9%、43.9%和43.3%。

犬α-干扰素蛋白在不同表达载体中的生物学活性比较刘欢;金红岩;侯强;史秋梅;董瑞凯;张通明;侯绍华;沈萍【期刊名称】《中国畜牧兽医》【年(卷),期】2016(043)010【摘要】根据 GenBank 中公布的犬α-干扰素(CaIFN-α)基因核酸序列，去掉信号肽后设计并合成1对引物，引入EcoRⅠ和HindⅢ酶切位点。

以提取的犬肝脏DNA 为模板，利用 PCR 技术扩增 CaIFN-α基因，并分别克隆至表达载体pBV220、pET-32a(His 标签)中，转化大肠杆菌 BL21(DE3)原核表达系统。

重组融合蛋白经 SDS-PAGE 及Western blotting 鉴定。

纯化目的蛋白，并采用MDCK/VSV 微量细胞病变抑制法检测其抗病毒活性。

试验结果表明，与 pBV220载体连接的目的基因表达的蛋白活性较低，而与 pET-32a(His 标签)连接的目的基因表达的蛋白活性较高，达2.56×106 U/mL。

通过分析不同载体对 IFN-α的表达情况，为生产高活性的 IFN 奠定基础。

%According to the sequence of canine interferon-α (CaIFN-α)gene published in Gen-Bank,primers were designed,synthesized and introduced EcoRⅠand HindⅢ restriction sites.U-sing canine liver DNA as a template,CaIFN-α gene was amplified by PCR,then the gene was cloned into pBV220 and pET-32a(+)expression vector,and transformed into the BL21(DE3)ex-pressionsystem.Recombinant fusion protein was analysed by SDS-PAGE and Western blotting. Protein was purified and the antiviral activity was detected by MDCK/VSV cytopathic inhibition assay.The results showed that pBV220-α-IFN recombinant protein has a low activity,but the ac-tivityof pET32a-α-IFN recombinant protein was up to 2.56×10 6 U/mL.This study laid a founda-tion for production of highly active IFN.【总页数】6页(P2560-2565)【作者】刘欢;金红岩;侯强;史秋梅;董瑞凯;张通明;侯绍华;沈萍【作者单位】河北科技师范学院预防兽医实验室，秦皇岛 066003; 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，北京 100193;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，北京 100193;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，北京 100193;河北科技师范学院预防兽医实验室，秦皇岛 066003;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，北京100193;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，北京 100193;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，北京 100193;河北科技师范学院预防兽医实验室，秦皇岛066003【正文语种】中文【中图分类】Q78【相关文献】1.小鼠CD47-Fc融合蛋白表达载体构建、表达纯化及其生物学活性研究 [J], 郭亚楠;陈阳;崔利董;赵梅杰;张守涛2.注射用重组人血清白蛋白-干扰素α2b融合蛋白生物学活性检测方法学研究 [J], 陈通威;杜莹莹;薛冲;武福军;张娜3.注射用重组人血清白蛋白-干扰素α2b融合蛋白生物学活性检测方法学研究 [J], 陈通威;杜莹莹;薛冲;武福军;张娜4.γ-干扰素诱导蛋白-10融合蛋白的表达纯化及其生物学活性测定 [J], 代吕霞;李明远;蒋中华;张林;李虹5.犬干扰素α2与犬白蛋白融合基因在昆虫细胞中的表达与活性分析 [J], 王晶宇; 欧阳伟; 钱晶; 王晓丽; 夏兴霞; 诸玉梅; 毕振威; 王永山因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。