烟草及烟草制品 西柏烷二萜醇的测定

二萜含量测定方法说实话二萜含量测定这事儿，我一开始也是瞎摸索。

那时候就像没头的苍蝇一样，到处乱撞。

我试过用高效液相色谱法来测定二萜含量。

这就像一群不同模样的人在一条大道上走，高效液相色谱就是个能把各个模样的人（不同物质）区分开的大关卡。

首先呢，就得准备样品，这个样品准备可讲究了。

就像做一道精美的菜一样，你得把原料（二萜样品）处理得干干净净的，稍微有点杂质就可能影响最后的结果。

我记得我有一次样品处理的时候就没注意清洁够，那最后测定出来的结果简直是一团糟，根本没法用。

还有流动相的选择也很头疼。

我在不同的溶剂之间换来换去，就像挑衣服一样，总想找个最合适的。

有时候选错了流动相，那些二萜就跑不出好看的峰形，要么拖拖拉拉的像个没精神的老头，要么就挤在一起成了连体婴，根本区分不开。

做了好多次之后我才有点门道，知道哪种二萜适合什么样的流动相来让它表现得最好。

后来我又尝试了光谱法。

但是这个方法就像雾里看花一样，不是特别准确。

不过它也有它的好处，操作起来相对简单一点。

我有一次用紫外- 可见光谱法测二萜含量，我觉得它看起来很简单，心里就有点放松了警惕。

结果我忘记校准仪器，这就导致测出来的数据也不太对。

这时候我就明白不管是多么简单的方法，该注意的细节还是要注意的。

要是想更精确地测定二萜含量，我觉得高效液相色谱法还是目前最好的选择。

就算麻烦但是为了得到准确的结果也值得的。

不过在操作的每一步都得小心翼翼的。

处理样品的时候，要处理得像洁癖患者的房间一样干净。

选择柱子的时候也要慎重，柱子就像个住房一样，二萜分子在里面呆着舒不舒服就看柱子对不对，不合适的柱子就会像是把大象放进小房子一样根本不行。

关于具体的条件，比如流速和温度范围，这些东西不同的二萜有时候还会不太一样，这部分我也还在摸索中。

反正测定二萜含量这事儿就得多做实验多积累经验才行。

再说说归一化法。

这个方法呢用来测定二萜含量的时候也有点用。

它的思路很简单，就像是在一个群体里算某个小群体的占比一样。

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YC/T470—2013烟草及烟草制品西柏烷二萜醇的测定气相色谱-质谱联用法
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YC/T471—2013烟草及烟草制品麦角甾醇的测定气相色谱-质谱联用法
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YC/T472—2013烟草及烟草制品微生物学检验霉菌计数
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YC/T475—2013烟草及烟草制品霉变控制指南
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YC/T499—2014烟草及烟草制品硫的测定离子色谱法
4
GB/T18771.5-2002烟草术语第5部分：烟草机械
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GB/T16447—2004烟草和烟草制品调节和测试的大气环境
6
GB/T13595—2004烟草及烟草制品拟除虫菊酯杀虫剂、有机氯杀虫剂、有机磷杀虫剂残留量的测定方法
7
GB/T13596—2004烟草和烟草制品有机氯农药残留量的测定气相色谱法
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YC/T179—2004烟草及烟草制品酰胺类除草剂农药残留量的测定气相色谱法
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YC/T180—2004烟草及烟草制品毒杀芬农药残留量的测定气相色谱法
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YC/T181—2004烟草及烟草制品有机氯除草剂农药残留量的测定气相色谱法
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YC/T184—2004烟草及烟草制品烟草特有N-亚硝胺的测定
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YC/T288－2009烟草及烟草制品多元酸（草酸、苹果酸和柠檬酸）的测定气相色谱法
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YC/T285－2009卷烟配方烟丝中薄荷醇的测定气相色谱法
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YC/T282－2009烟叶游离氨基酸的测定氨基酸分析仪法
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YC/T296—2009烟草及烟草制品硝酸盐的测定连续流动法
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YC/T343—2010烟草及烟草制品磷酸盐的测定连续流动法
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气相色谱-串联质谱检测新鲜烟叶中的萜类成分郑庆霞;刘萍萍;陈千思;翟妞;徐国云;张慧;金立锋;陈霞;周会娜【摘要】为研究烟叶中的萜类成分含量(质量分数),采用选择反应监测模式,建立了同时测定新鲜烟叶中反,反-金合欢醇、α-植醇、顺冷杉醇、β-植醇、(1S,2E,4S,6R,7E,11E)-2,7,11-西柏烷三烯-4,6-二醇(α-CBD)、(1S,2E,4R,6R,7E,11E)-2,7,11-西柏烷三烯-4,6-二醇(β-CBD)、香紫苏醇、赖百当-13-烯-8, 15-二醇、角鲨烯、2,3-环氧化鲨烯、双氢速甾醇、胆固醇、菜籽甾醇、麦角甾醇、菜油甾醇、豆甾醇、羊毛甾醇、β-谷甾醇、β-香树脂醇、α-香树脂醇、鹅去氧胆酸等21种萜类成分的气相色谱-串联质谱(GC-MS/MS)方法;并采用该方法对云南、河南、贵州等3个产区的成熟期新鲜烟叶样品进行了分析.结果表明:在线性范围内21种萜类成分的R2为0.999 0～0.999 8;方法检测限为12.7～308.7 ng·g-1,定量限为35.8～984.6 ng·g-1;日内、日间精密度(RSD)分别为0.19%～8.28%、1.02%～9.35%.不同产区烟叶中主要萜类成分α-CBD的含量高低顺序为云南(98.83 μg·g-1)＞河南(57.04 μg·g-1)＞贵州(38.61 μg·g-1),且3个产区之间存在显著性差异.贵州产区烟叶中萜类成分含量的分布较云南和河南产区烟叶差异更大,遵义种植的南江3号品种烟叶中萜类含量与其他3个品种差异明显.该方法前处理简单,分析的萜类物质覆盖面广,可用于批量烟叶样品的检测.%In order to quantify tobacco terpenoids, a method for simultaneous determination of 21 terpenoids, including t,t-farnesol, α-phytol, cis-abienol, β-phytol,(1S,2E,4S,6R,7E,11E)-2,7,11-cembratriene-4,6-diol (α-CBD),(1S,2E,4R,6R,7E,11E)-2,7,11-cembratriene-4,6-diol (β-CBD), sclareol, labd-13-ene-8,15-diol, squalene, 2,3-oxosqualene, dihydrotachysterol, cholesterol, brassicasterol, ergosterol, campesterol, stigmasterol, lanosterol,β-sitosterol, β-amyrin, α-amyrin and chenodeoxycholic acid in tobacco was developed using gas chromatography triple quadruples mass spectrometry (GC-MS/MS). The characteristic fragment ion peaks of the 21 terpenoids were obtained under selective reaction monitoring (SRM) mode in positive channels. The results noted that under the optimized conditions, the determination coefficients (R2) of the 21 terpenoids were 0.999 0-0.999 8 in the linear ranges. The limits of detection (LOD) for analytes ranged from 12.7 to 308.7 ng·g-1, and the limits of quantification (LOQ) were 35.8-984.6 ng·g-1. The intra- and inter-day relative standard deviations (RSDs) were 0.19%-8.28% and 1.02%-9.35% respectively. Mature fresh tobacco leaves from Yunnan, Henan and Guizhou Provinces were analyzed using this method. The results showed that the total amount of α-CBD was Yunnan (98.83 μg·g-1) > Henan (57.04 μg·g-1) > Guizhou (38.61 μg·g-1), and there was significant difference among them. In particular, the terpenoid contents in leaves from Guizhou differed substantially from Yunnan and Henan, and that in leaves of cv. Nanjiang No.3 from Zunyi was significantly different from the other three varieties. This method uses only a simple pretreatment and is reproducible, can cover a wide range of terpenoids for batch analysis of tobacco leaves.【期刊名称】《烟草科技》【年(卷),期】2019(052)007【总页数】8页(P61-68)【关键词】烟草;萜类成分;气相色谱-三重四极杆质谱(GC-MS/MS)【作者】郑庆霞;刘萍萍;陈千思;翟妞;徐国云;张慧;金立锋;陈霞;周会娜【作者单位】中国烟草总公司郑州烟草研究院,郑州高新技术产业开发区枫杨街2号 450001;中国烟草总公司郑州烟草研究院,郑州高新技术产业开发区枫杨街2号450001;中国烟草总公司郑州烟草研究院,郑州高新技术产业开发区枫杨街2号450001;中国烟草总公司郑州烟草研究院,郑州高新技术产业开发区枫杨街2号450001;中国烟草总公司郑州烟草研究院,郑州高新技术产业开发区枫杨街2号450001;中国烟草总公司郑州烟草研究院,郑州高新技术产业开发区枫杨街2号450001;中国烟草总公司郑州烟草研究院,郑州高新技术产业开发区枫杨街2号450001;中国烟草总公司郑州烟草研究院,郑州高新技术产业开发区枫杨街2号450001;中国烟草总公司郑州烟草研究院,郑州高新技术产业开发区枫杨街2号450001【正文语种】中文【中图分类】TS411.1萜类成分是植物中重要的次生代谢产物，对植物的生长发育以及抵御外界侵害［1-2］等具有重要的作用。

超高效液相色谱法测定烟草西柏三烯二醇付秋娟;杜咏梅;刘新民;张怀宝;王爱华;刘翠翠;牛焕杰;冯迪【摘要】建立了超高效液相色谱-紫外检测(UPLC-UV)外标法定量测定烟草α和β-2,7,11-西柏三烯-4,6-二醇的方法.烟草样品以乙酸乙酯为萃取剂,液料比为50:1,在超声频率45 kHz,提取温度为25~30℃,提取时间10 min条件下进行目标化合物提取,提取液经氮气吹干,用流动相溶解,以ACQUITY UPLC BEH C18(2.1mm×50 mm,1.7μm)为分离色谱柱,以70%乙腈为流动相,流速为0.3 mL/min,柱温为35℃,在波长为200 nm条件下进行检测.结果表明,α和β-2,7,11-西柏三烯-4,6-二醇线性范围分别为12.14~194.2、6.229~99.67μg/mL,仪器检出限分别为0.1166、0.1495μg/mL,方法定量限分别为33.8、49.8μg/g,在3个加标浓度下,平均回收率分别在96.7%~98.8%、96.2%~98.4%,方法重现性相对标准偏差分别为3.46%、3.11%.本方法与行业标准相比,对烟草西柏三烯二醇的测定结果无显著差异.该方法操作简单、溶剂用量少,检测周期短,精密度和准确度均较高,适用于烟草α和β-2,7,11-西柏三烯-4,6-二醇批量检测.%A quantitative method using ultra performance liquid chromatography (UPLC) with UV detector was developed for the determination ofα andβ-2,7,11-Cembratriene-4,6-diol of tobacco. Ethyl acetate was used as solvent for extraction with a liquid-material ratio of 50:1. The ultrasonic frequency used was 45 kHz andthe temperature of extraction was room temperature above 25℃.The time of extraction was 10 min. The extracts obtained with above experiment conditions were dried by nitrogen and dissolved with mobile phases and the target compounds were separated on an ACQUITY UPLC BEH C18 column using acetonitrile-water (70:30) as mobile phase by gradientelution. The flow rate was set at 0.3 mL/min, the column temperature was 35℃ and quantitative wavelength of UV detector was set at 200 nm.The results indicated that the calibration curves ofα andβ-2,7,11-Cembratriene-4,6-dio were linear in the range of 12.14-194.2μg/mLand 6.229-99.67μg/mL respectively. The limits of detection (LOD,S/N=3) were 0.1166 and 0.1495μg/mL respectively, and the limits of quantification(LOQ,S/N=10) were 33.8μg/g and 49.8μg/g respectively. The average recoveries of standard addition of samples were 96.7%-98.8% and 96.2%-98.4% respectively at three spiked concentration levels, and the relative standard deviations (RSDs) of reproducibility of the method were 3.46% and 3.11% respectively. There was no significant difference in the measurement results of tobacco samples between this method and the tobacco industry-standard method. The method was simple, sensitive and accurate, and was suitable for large scale determination ofα andβ-2,7,11-Cembratriene-4,6-dio in tobacco .【期刊名称】《中国烟草科学》【年(卷),期】2017(038)003【总页数】7页(P67-73)【关键词】超高效液相色谱;烟草;α和β-2,7,11-西柏三烯-4,6-二醇【作者】付秋娟;杜咏梅;刘新民;张怀宝;王爱华;刘翠翠;牛焕杰;冯迪【作者单位】中国农业科学院烟草研究所,青岛 266101;中国农业科学院烟草研究所,青岛 266101;中国农业科学院烟草研究所,青岛 266101;中国农业科学院烟草研究所,青岛 266101;中国农业科学院烟草研究所,青岛 266101;中国农业科学院烟草研究所,青岛 266101;中国农业科学院烟草研究所,青岛 266101;中国农业科学院烟草研究所,青岛 266101【正文语种】中文【中图分类】TS41+1西柏三烯二醇属西柏烷型二萜化合物，西柏烷型二萜最早于1951年发现至松属植物和烟草，随后从海洋生物中发现了大量该类化合物，目前分离得到的该类化合物均具有较好的细胞毒和抗肿瘤活性[1-3]。