抗生素体外及体内抑菌效应检测的试验综述报告
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一、实验目的1. 了解不同抗生素对细菌的抑菌作用。
2. 探究不同细菌对不同抗生素的敏感性差异。
3. 分析抗生素的抑菌谱,为临床用药提供参考。
二、实验原理抑菌实验是通过观察细菌在含有抗生素的培养基上的生长情况,来评估抗生素对细菌的抑制作用。
实验中,将不同浓度的抗生素分别加入培养基中,然后将接种有细菌的菌种接种于培养基上,观察细菌的生长情况,从而判断抗生素对细菌的抑菌效果。
三、实验材料1. 菌株:金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌等。
2. 抗生素:青霉素、头孢菌素、红霉素、庆大霉素、氯霉素等。
3. 培养基:营养肉汤、营养琼脂、麦康凯琼脂等。
4. 仪器:培养箱、移液器、无菌操作台、显微镜等。
四、实验方法1. 将抗生素配制成不同浓度梯度的溶液。
2. 将菌株接种于营养琼脂平板上,37℃培养过夜。
3. 用无菌移液器将不同浓度的抗生素溶液分别滴加于平板中央,用无菌镊子轻轻按压平板,使抗生素溶液渗透到培养基中。
4. 将平板倒置,37℃培养24小时。
5. 观察并记录细菌在不同抗生素溶液中的生长情况,记录抑菌圈直径。
6. 根据抑菌圈直径,判断细菌对不同抗生素的敏感性。
五、实验结果1. 金黄色葡萄球菌对青霉素、头孢菌素、红霉素等抗生素敏感;对庆大霉素、氯霉素等抗生素不敏感。
2. 大肠杆菌对庆大霉素、氯霉素等抗生素敏感;对青霉素、头孢菌素、红霉素等抗生素不敏感。
3. 肺炎克雷伯菌对庆大霉素、氯霉素等抗生素敏感;对青霉素、头孢菌素、红霉素等抗生素不敏感。
4. 铜绿假单胞菌对庆大霉素、氯霉素等抗生素敏感;对青霉素、头孢菌素、红霉素等抗生素不敏感。
六、实验讨论1. 实验结果表明,不同细菌对不同抗生素的敏感性存在差异。
这可能与细菌的耐药性有关。
2. 在临床用药过程中,应根据细菌的药敏试验结果,选择合适的抗生素进行治疗,以提高治疗效果。
3. 抑菌实验是评估抗生素疗效的重要手段,对于临床用药具有重要的指导意义。
七、实验结论通过本次实验,我们了解了不同抗生素对细菌的抑菌作用,以及不同细菌对不同抗生素的敏感性差异。
体外抗细菌实验报告引言抗生素的研发与应用在医学领域具有重要意义。
目前,细菌对抗生素的耐药性成为严重的问题,需要不断探索新的药物和治疗方法。
本实验旨在评估不同抗生素对细菌的抗菌活性,为临床治疗提供参考和建议。
实验设计材料和方法- 细菌菌株:选择常见的大肠杆菌作为实验菌株。
- 抗生素:选择常用的青霉素、头孢菌素和红霉素作为实验药物。
- 生长培养基:使用适合大肠杆菌生长的营养琼脂培养基。
- 平板计数器:用于计数菌落的数量。
- 培养皿:用于培养菌落。
实验步骤1. 通过接种线接种大肠杆菌菌株于含有足够营养适合培养大肠杆菌的琼脂平板上。
2. 使用接种环将抗生素涂抹在贴近边缘的地方。
每个琼脂平板上涂抹一种抗生素,留有一块区域作为对照组,不涂抹抗生素。
3. 将培养皿在恒温培养箱中培养24小时。
4. 取出琼脂平板,使用平板计数器计算每个区域的菌落数量。
5. 分析数据并得出结论。
结果实验结果如下表所示:抗生素区域菌落数量:: :: ::青霉素 A 120青霉素 B 50头孢菌素 C 80头孢菌素 D 100红霉素 E 150红霉素 F 200对照组G 500讨论与分析通过对实验结果的观察,我们可以得出以下结论:1. 在本次实验中,细菌对红霉素的抗菌活性最强,对青霉素的抗菌活性最弱。
2. 头孢菌素对细菌的抗菌活性居于中等水平。
3. 与对照组相比,使用抗生素处理的培养皿中,菌落数量明显减少。
结论根据本次实验结果,我们可以得出以下结论:1. 青霉素对大肠杆菌的抗菌活性较弱,使用青霉素抗生素时,需注意其治疗效果和耐药性问题。
2. 红霉素对大肠杆菌的抗菌活性较强,可以作为治疗选择之一。
3. 头孢菌素在对抗大肠杆菌方面的抗菌活性居于中等水平。
4. 本实验结果可为临床抗生素选择提供参考和指导。
参考文献(请根据实际情况添加参考文献)。
一、实验目的为了探究不同种类抗生素的抑菌效果,本研究采用体外抑菌实验方法,对青霉素、氨苄西林、头孢克洛和氯霉素四种抗生素进行抑菌活性测试,为临床合理用药提供依据。
二、实验材料1. 实验菌株:金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌等常见革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
2. 实验试剂:青霉素、氨苄西林、头孢克洛和氯霉素等抗生素粉末,琼脂、牛肉膏、蛋白胨、pH试纸、无菌生理盐水等。
3. 实验仪器:培养箱、恒温培养箱、电子天平、移液器、显微镜、培养皿、锥形瓶、滴管等。
三、实验方法1. 菌株活化:将保存的菌株在适宜的培养基上培养24小时,备用。
2. 制备菌悬液:用无菌生理盐水将菌株稀释至适宜浓度,备用。
3. 制备抗生素溶液:分别将青霉素、氨苄西林、头孢克洛和氯霉素粉末用无菌生理盐水溶解,配制成一定浓度的抗生素溶液。
4. 制备琼脂平板:将牛肉膏、蛋白胨、琼脂和蒸馏水按比例混合,加热溶解,冷却至50℃左右,加入一定量的抗生素溶液,搅拌均匀,倒入培养皿中,待凝固。
5. 涂布菌悬液:用无菌棉签将菌悬液均匀涂布在琼脂平板表面。
6. 抑菌实验:将涂布好菌悬液的琼脂平板放入培养箱中,分别加入青霉素、氨苄西林、头孢克洛和氯霉素纸片,培养24小时。
7. 观察结果:观察平板上的抑菌圈直径,记录数据。
四、实验结果1. 青霉素对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和肺炎克雷伯菌的抑菌圈直径分别为:15mm、10mm和8mm。
2. 氨苄西林对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和肺炎克雷伯菌的抑菌圈直径分别为:10mm、8mm和6mm。
3. 头孢克洛对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和肺炎克雷伯菌的抑菌圈直径分别为:12mm、9mm和7mm。
4. 氯霉素对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和肺炎克雷伯菌的抑菌圈直径分别为:18mm、15mm和13mm。
五、实验结论1. 青霉素、氨苄西林、头孢克洛和氯霉素均具有较好的抑菌效果。
2. 氯霉素对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和肺炎克雷伯菌的抑菌效果最好,其次是青霉素、头孢克洛和氨苄西林。
一、实验目的1. 探究不同抗生素对细菌的抑菌效果。
2. 了解抗生素的抑菌机理。
3. 培养学生的实验操作能力和数据分析能力。
二、实验原理抗生素是一类能够抑制或杀死细菌、真菌等微生物的药物。
本实验通过观察不同抗生素对细菌的抑菌效果,了解抗生素的抑菌机理。
三、实验材料1. 细菌:金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌等。
2. 抗生素:青霉素、链霉素、红霉素、庆大霉素等。
3. 培养基:牛肉膏蛋白胨培养基、营养琼脂培养基。
4. 实验器材:培养皿、接种环、移液枪、显微镜等。
四、实验方法1. 将金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌分别接种于牛肉膏蛋白胨培养基上,37℃培养24小时。
2. 将培养好的菌液用无菌生理盐水稀释至一定浓度。
3. 在培养皿中分别加入不同浓度的青霉素、链霉素、红霉素、庆大霉素溶液。
4. 将稀释后的菌液滴加于培养皿中,使菌液均匀分布。
5. 将培养皿置于37℃培养箱中培养24小时。
6. 观察并记录不同抗生素对细菌的抑菌效果。
五、实验结果1. 青霉素对金黄色葡萄球菌有明显的抑制作用,抑菌圈直径约为20mm;对大肠杆菌和肺炎克雷伯菌的抑制作用较弱,抑菌圈直径分别为10mm和5mm。
2. 链霉素对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和肺炎克雷伯菌均有明显的抑制作用,抑菌圈直径分别为25mm、20mm和15mm。
3. 红霉素对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和肺炎克雷伯菌均有抑制作用,抑菌圈直径分别为15mm、10mm和5mm。
4. 庆大霉素对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和肺炎克雷伯菌均有抑制作用,抑菌圈直径分别为30mm、25mm和20mm。
六、实验分析1. 青霉素属于β-内酰胺类抗生素,主要通过抑制细菌细胞壁的合成来发挥抑菌作用。
本实验结果表明,青霉素对金黄色葡萄球菌的抑制作用最强,对其他两种细菌的抑制作用较弱。
2. 链霉素属于氨基糖苷类抗生素,主要通过干扰细菌蛋白质合成来发挥抑菌作用。
本实验结果表明,链霉素对三种细菌均有明显的抑制作用,且抑菌效果最强。
抑菌检测报告
检测对象:XXX药物
检测目的:获取该药物的抑菌效果,为制定该药物在临床应用中的具体用法提供参考。
检测方法:采用圆片扩散法检测该药物的抑菌效果。
首先,在两个含有不同菌群的琼脂平板上,分别将该药物和氯霉素作为对照物涂抹上去。
然后,根据实验要求,一盘上分别涂抹5个不同浓度的药物液体,另一盘上则是6个不同浓度。
涂抹后将两个琼脂平板在培养箱中进行孵育。
检测结果:根据孵育的结果,我们对该药物的抑菌效果进行了统计和分析。
在两个含菌群的琼脂平板中,该药物的抑菌效果分别优于氯霉素,呈现出强烈的抑菌作用。
通过统计各浓度液体对不同菌株的抑菌效果,我们发现该药物具有一定的抑菌效果,但是在较低浓度下,抑菌效果并不是很显著。
在合理范围内增加药物浓度,抑菌效果得到明显提升,但同时也带来了药物在人体中的毒副作用,需要根据实际情况选择最合适的用药方案。
结论:该药物具有一定的抑菌效果,但需根据药物浓度和用药量选择最合适的使用方案。
探究抗生素抑菌效果试验报告抗生素是一类可以杀灭或抑制细菌生长的药物。
它们是治疗细菌感染的重要药物之一。
本次试验旨在探究不同种类的抗生素在抑制不同菌株生长上的差异。
首先,我们选择了三种不同的抗生素,包括青霉素、氨苄西林和红霉素。
这些抗生素在医学上被广泛应用,并且都具有一定的杀菌效果。
接下来,我们选择了三种不同的菌株,包括大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和链球菌。
这些菌株在日常生活中比较常见,并且也是医院感染的主要病原体之一。
试验步骤如下:1. 准备培养基:我们使用了三种不同的培养基,分别是LB培养基、MHA培养基和BHI 培养基。
这三种培养基分别适用于不同的菌株。
2. 培养菌株:我们使用了以上三种菌株,将它们传到不同的培养基中,并在37℃下进行培养。
培养的时间根据不同的菌株而变化,大约为16-24个小时。
3. 制备抗生素:我们根据不同的抗生素要求,在合适的溶液中制备了不同浓度的抗生素。
4. 试验:将不同菌株在培养基中进行生长,并在生长适当阶段加入适量的抗生素。
接着观察这些菌株的生长状态,比较它们在不同抗生素浓度下的生长情况。
通过以上步骤,我们获得了以下结论:1. 不同菌株的敏感性有差异。
我们发现金黄色葡萄球菌对青霉素和氨苄西林的敏感性较高,而对红霉素的敏感性较低。
大肠杆菌对三种抗生素的敏感性都较高,经过较低浓度的抗生素处理之后已经无法再生长。
链球菌在较低浓度的抗生素处理下依然能够正常生长。
2. 不同抗生素的抑菌效果不同。
在相同的浓度下,不同抗生素对同一菌株的抑菌效果不同。
我们发现对于大肠杆菌和金黄色葡萄球菌这两种菌株,红霉素的抑菌效果较好,而对于链球菌,则是氨苄西林的抑菌效果较好。
3. 抗生素浓度对抑菌效果有影响。
增加抗生素的浓度会提高抑菌效果,但是超过一定浓度之后,抑菌效果不再增加,甚至还会影响到正常细胞的生长。
总之,抗生素的抑菌效果存在差异,并且不同菌株的敏感性也有所不同。
在有需要开展抗菌治疗的情况下,应该根据具体情况,选择合适的药物并严格按照医嘱使用。
抗生素体外抑菌实验实验报告本实验旨在探究不同类型抗生素对某一细菌菌种的体外抑菌效果。
实验原理:细菌的体外抑菌实验是评估抗菌药物对细菌生长的影响的一种常见方法。
该实验通过在固体培养基上为细菌划线,将抗生素药物涂布在纸片上,再放置于已划好细菌的平板培养基上。
通过比较不同类型药物涂布的纸片与对照的空白纸片对细菌生长的影响,从而评价药物的抑菌作用。
实验步骤:1.选取一种目标细菌,本实验选用金黄色葡萄球菌。
2.准备好含有所需抗生素的培养基。
3.将目标细菌接种在平板培养基上并使其生长至对数生长期。
4.在平板培养基上划线并将贴有不同抗生素药物的纸片置于相应位置。
5.将培养基培养在恰当条件下,通常需要48小时,直到菌落在对照组与不同抗生素组之间的差异变得显著。
6.通过比较不同种类抗生素药物对金黄色葡萄球菌的体外抑菌效果进行分析。
实验结果:利用本实验方法,我们测试了对金黄色葡萄球菌的八种不同类型的抗生素的体外抑菌效果。
实验结果表明不同类型抗生素的抑菌效果明显不同。
其中,抗菌肽和β-内酰胺类抗生素对金黄色葡萄球菌生长的抑制效果最强,其次是氨基糖苷和磺胺类抗生素。
而抗酸菌素类抗生素和大环内酯类抗生素显示出对金黄色葡萄球菌的较弱抑菌能力,而两性霉素B和卡那霉素则没有表现出任何抑菌效果。
实验结论:通过本实验,我们得出了不同类型抗生素对某一细菌(金黄色葡萄球菌)的体外抑菌效果。
不同类型抗生素的抑菌效果明显不同。
抗菌肽和β-内酰胺类抗生素对金黄色葡萄球菌生长的抑制效果最强,其次是氨基糖苷和磺胺类抗生素。
而抗酸菌素类抗生素和大环内酯类抗生素显示出对金黄色葡萄球菌的较弱抑菌能力,而两性霉素B和卡那霉素则没有表现出任何抑菌效果。
这些实验结果对于抗菌药物选择和用药方案的制定具有重要参考意义。
检测报告检测项目:抗生素抑菌实验送检日期:2012-09- 10 送检单位:检验员:周俊实验材料与方法1.1 实验材料指示菌、TSB肉汤、麦氏比浊管、LB平板培养基、MRS肉汤、L型波棒、牛津杯、灭菌陶瓷盖、灭菌试管、微量移液器、密封发酵管、磷酸缓冲液等。
2.1 实验方法2.1.1 指示菌使用大肠杆菌O157,O139,K88,K99型、金色葡萄球菌与沙门氏菌。
2.1.2 指示菌菌悬液的准备(1)细菌复苏:菌种平板划线,36℃培养20h;挑取单菌落于TSB肉汤,置37℃振荡培养16h;接种TSB肉汤,置37℃振荡培养16h。
(2)采用直接菌落悬液法,将培养好的菌液调整到5个麦氏浓度(也就是细菌数为1×108 cfu/ml)。
此时指示菌菌悬液制备完毕。
(注:在调整过程中需使用PH 7.2的磷酸缓冲液进行菌液的麦氏浓度调整)2.1.5 LB检测平板的制备的准备将LB肉汤培养基加入琼脂后,溶解均匀,在高压灭菌釜中。
121℃,高温灭菌20min。
将已灭菌的琼脂培养基倒在玻璃培养皿内,每皿15ml(下层),待其凝固。
再继续将灭好的LB琼脂培养基再次加固在已凝固的培养基上待凝固(上层)。
使LB平板增厚。
凝固后并使培养皿中水份干燥透,取100μl的指示菌菌悬液在平板上用L型波棒均匀涂布,涂布后以平板无可见水滴为准,此时的平板立刻进行抑菌试验。
2.1.6 样品原粉在培养基上的放置精确秤取样品0.05克轻轻放入培养皿中,在水平放置的平皿中均匀地放置。
2.1.7 样品抑菌扩散及指示菌的培养将加入样品原粉的平皿放置37℃的恒温培养箱内,培养16h~24h后,进行拍照记录。
结果:黄褐色褐色粉末为15%杆菌肽锌。
O157 O139K88 K99金葡沙门mm)O157O139K88K99金葡沙门15% 杆菌肽锌222324212823根据标准,当抑菌圈大于15mm时,该药对细菌敏感。
结论:结果表明,该杆菌肽锌抑菌圈均大于15mm,对O157、O139、K88、K99、沙门氏菌、金色葡萄球菌均敏感,具有好的抑菌作用,可以选用。
一、实验目的本实验旨在探究不同种类抗生素对细菌的抑菌效果,以及不同抗生素对同一种细菌的抑菌效果差异,为临床合理使用抗生素提供理论依据。
二、实验原理抗生素是具有抗菌作用的药物,通过抑制细菌生长或杀死细菌来达到治疗感染的目的。
本实验采用琼脂扩散法,将抗生素与细菌共同培养在琼脂平板上,观察抗生素对细菌的抑菌效果。
三、实验材料与仪器1. 实验材料(1)细菌:金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌(2)抗生素:青霉素、氯霉素、硫酸庆大霉素、红霉素(3)琼脂粉、牛肉膏、蛋白胨、生理盐水2. 实验仪器(1)恒温培养箱(2)无菌操作台(3)无菌试管(4)微量移液器(5)培养皿四、实验方法1. 制备菌悬液将金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌分别接种于牛肉膏蛋白胨培养基,37℃恒温培养18-24小时,用生理盐水洗涤3次,制成菌悬液。
2. 配制抗生素溶液将青霉素、氯霉素、硫酸庆大霉素、红霉素分别用生理盐水配制成不同浓度的溶液。
3. 制备琼脂平板将牛肉膏蛋白胨培养基与琼脂粉混合,加入适量的生理盐水,高压蒸汽灭菌后,倒入培养皿中,待凝固。
4. 琼脂扩散法(1)将菌悬液均匀涂布于琼脂平板表面。
(2)用无菌移液器吸取抗生素溶液,滴加于琼脂平板上,使抗生素溶液在琼脂平板上扩散。
(3)37℃恒温培养24小时,观察并测量抑菌圈直径。
五、实验结果与分析1. 不同抗生素对金黄色葡萄球菌的抑菌效果实验结果显示,青霉素、氯霉素、硫酸庆大霉素、红霉素对金黄色葡萄球菌均具有明显的抑菌效果,其中青霉素的抑菌效果最强,抑菌圈直径为15mm;氯霉素次之,抑菌圈直径为12mm;硫酸庆大霉素和红霉素的抑菌圈直径分别为10mm和8mm。
2. 不同抗生素对大肠杆菌的抑菌效果实验结果显示,青霉素、氯霉素、硫酸庆大霉素对大肠杆菌均具有明显的抑菌效果,其中青霉素的抑菌效果最强,抑菌圈直径为12mm;氯霉素次之,抑菌圈直径为10mm;硫酸庆大霉素的抑菌圈直径为8mm。
抗生素抑菌实验实验报告抗生素抑菌实验实验报告一、引言抗生素是一类能够抑制或杀死细菌的药物,对于治疗细菌感染起着至关重要的作用。
然而,近年来,抗生素耐药性的问题日益严重,给人类健康带来了巨大的挑战。
本实验旨在通过抗生素抑菌实验,研究不同抗生素对细菌生长的抑制作用,进一步了解抗生素的作用机制,为合理使用抗生素提供实验依据。
二、实验材料与方法1. 实验材料:- 大肠杆菌培养基- 水平培养皿- 纯化的不同抗生素溶液(包括青霉素、头孢菌素和红霉素)- 细菌培养液2. 实验方法:- 准备细菌培养液:将大肠杆菌接种于含有营养物质的培养基中,培养24小时。
- 制备抗生素溶液:将各种抗生素溶解于适量的溶剂中,制成不同浓度的溶液。
- 进行抗生素抑菌实验:将细菌培养液均匀涂布于水平培养皿中,然后在不同区域加入不同浓度的抗生素溶液。
培养24小时后,观察抗生素对细菌生长的抑制情况。
三、实验结果在本实验中,我们选择了青霉素、头孢菌素和红霉素作为抗生素,分别制备了不同浓度的溶液。
实验结果显示,随着抗生素浓度的增加,对细菌的抑制作用也逐渐增强。
在低浓度下,细菌的生长并未受到明显的抑制,但随着抗生素浓度的增加,细菌的生长逐渐减缓甚至停止。
在高浓度下,细菌的生长完全被抑制,培养皿上观察不到任何细菌生长。
四、讨论与分析通过本实验,我们可以看出抗生素对细菌的抑制作用与其浓度呈正相关关系。
这是因为抗生素能够干扰细菌的生长和繁殖过程,从而达到抑制细菌的效果。
当抗生素浓度较低时,其作用不足以抵消细菌的生长速度,因此细菌仍能够继续繁殖。
但随着抗生素浓度的增加,抗生素对细菌的抑制作用逐渐增强,最终导致细菌生长停止。
同时,不同的抗生素对不同类型的细菌也会产生不同的抑制效果。
一些细菌可能对某种抗生素具有抵抗能力,即产生了抗药性。
这是由于细菌的遗传变异导致的,使其能够产生能够破坏或改变抗生素的作用机制的酶。
因此,在临床使用抗生素时,应根据细菌的抗药性情况选择合适的抗生素。
实验名称:某新型抗菌剂的体外抗菌活性研究实验日期:2023年3月15日实验目的:本研究旨在通过体外实验评估某新型抗菌剂对常见细菌和真菌的抗菌活性,为该抗菌剂在临床应用提供实验依据。
实验材料:1. 实验菌株:金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、大肠杆菌(Escherichia coli)、白色念珠菌(Candida albicans)等。
2. 实验试剂:某新型抗菌剂原液、生理盐水、细菌培养基、真菌培养基、微量移液器、无菌操作台等。
3. 实验仪器:恒温培养箱、振荡培养箱、酶标仪、显微镜等。
实验方法:1. 菌株活化:将保存的实验菌株从冻存管中取出,接种于相应的培养基中,37℃恒温培养24小时。
2. 制备菌悬液:将活化后的菌株用生理盐水洗涤3次,调整菌液浓度为1×10^6 CFU/mL。
3. 实验分组:将实验分为阴性对照组、阳性对照组和实验组,每组设置3个平行实验。
- 阴性对照组:生理盐水处理。
- 阳性对照组:已知抗菌活性药物处理。
- 实验组:某新型抗菌剂原液处理。
4. 抗菌活性测定:- 细菌实验:采用微量稀释法,将菌悬液与不同浓度的抗菌剂原液混合,置于37℃恒温培养箱中培养24小时,观察菌落生长情况。
- 真菌实验:采用微量稀释法,将菌悬液与不同浓度的抗菌剂原液混合,置于25℃恒温培养箱中培养48小时,观察菌落生长情况。
5. 数据分析:采用GraphPad Prism 7软件进行统计分析,比较各组间差异,P<0.05为具有统计学意义。
实验结果:1. 细菌实验结果:- 阴性对照组:菌落生长良好。
- 阳性对照组:菌落生长受到抑制。
- 实验组:随着抗菌剂浓度的增加,菌落生长逐渐受到抑制,在较高浓度下,菌落生长完全被抑制。
2. 真菌实验结果:- 阴性对照组:菌落生长良好。
- 阳性对照组:菌落生长受到抑制。
- 实验组:随着抗菌剂浓度的增加,菌落生长逐渐受到抑制,在较高浓度下,菌落生长完全被抑制。
实验11-抗生素的抑菌试验实验目的:本实验的目的在于了解抗生素的抑菌作用并学习抗生素敏感性试验的方法。
实验原理:抗生素是广泛用于医生领域以及日常生活中的一种药物。
抗生素可以抑制或杀死致病菌,从而治疗疾病。
不同类型的抗生素作用机制不同,但抗生素大部分作用于细菌的生长和繁殖过程中的关键步骤,如细菌细胞壁的合成或DNA复制等。
不同种类的细菌对抗生素的敏感性也不相同,有些细菌对某些抗生素产生了耐药性,因此了解细菌对抗生素的敏感性是非常重要的。
抗生素敏感性试验是一种常见的实验方法,旨在寻找一种特定的抗生素是否能够杀死或抑制正在生长的细菌。
该实验方法可以采用不同的技术,例如扩散法、筛选法、稀释法等。
在该实验中,我们将采用扩散法来测定细菌对抗生素的敏感性。
扩散法试验包括以下几个步骤:1. 准备培养基:将适量的琼脂糖肉汤(TSA)加入试管中,加热至完全融化,然后立即冷却至50℃左右,以避免其蒸发。
2. 种植细菌:将待测试的细菌菌液转移到琼脂糖肉汤中,并搅拌均匀。
然后,将菌液倒入含有琼脂糖的平板培养基中。
让其在室温下凝固,然后将其在温度适当的培养箱中孵育24小时。
3. 准备抗生素滤纸:将抗生素滤纸切成适当大小,并在其中加入一定量的抗生素药物。
4. 将滤纸放在琼脂糖肉汤的表面上,让其均匀地铺在平板表面上。
然后,将詹森器或其他适当的装置用于压缩滤纸,使其与培养基接触。
5. 将培养板放置于适当的环境中孵育,一般是37℃下的恒温箱。
然后,在24小时后,评估抗生素在细菌生长上的作用。
根据细菌在平板上的生长和抗生素滤纸周围的清晰区域,可以得出抗生素对细菌的敏感性结果。
实验材料:1. 感兴趣的抗生素药物2. 琼脂糖肉汤(TSA)3. 需要测试的细菌菌液实验步骤:1. 准备琼脂糖肉汤培养基。
2. 在试管中接种需要测试的细菌,搅拌均匀。
将其倒入含有琼脂糖肉汤的平板培养基中。
在放置室温下使其平板凝固,然后将其置于适当温度的培养箱中孵育24小时。
抗生素体外及体内抑菌效应检测的实验综述报告1 实验意义本综合实验项目作为微生物学实验的补充和深入,选择抗生素为实验材料,主要内容包括抗生素的体外抑菌实验、抗生素的体内抗菌实验,形成一个整体的综合性实验。
在实验内容上强调系统性、专业性、实用性和趣味性;涉及微生物学专业多项技术原理、复杂流程,将整体实验课程的水平从分散的基础实验提升到综合性、系统性更高的层次,对学生的动手能力、专业水平、科研素质等进行全面的培养和提高,此即本项目设计的意义所在。
2 实验目的(1)了解常用抗菌药物的抗菌作用及抗菌范围,并掌握抗菌药物的某些体外抗菌实验;(2)观察血液、细菌、药物三者相互作用,以加深学生对抗菌药物药理作用的认识;(3)通过理论联系实际的学习和操作训练,训练学生掌握医学微生物学综合实验技能和实验技巧,提高动手能力,有助于学生科学世界观的形成;(4)培养学生独立操作、分析解决问题的能力,提高对微1/ 7生物学的兴趣,为学生独立创业提供一些创业技能思路。
3 实验原理金黄色葡萄球菌是机会致病菌,而抗菌药物在一定浓度下对其有抑制和杀灭作用。
抗菌药物一般是指具有抑菌或杀菌活性的药物,包括各种抗生素、磺胺类、咪唑类、硝基咪唑类、喹诺酮类等化学合成药物。
由细菌、放线菌、真菌等微生物经培养而得到的某些产物,或用化学半合成法制造的相同或类似的物质,也可化学全合成。
药物的体外抑菌实验,是指在体外测定药物抑制或杀灭细菌能力的实验。
它是常用抗菌实验的方法,其中最常用的方法有系列稀释法和琼脂扩散法。
稀释法有液体培养基连续稀释法和固体稀释法(斜面法)两种,这两种方法都可以用来测定药物的最小抑菌浓度(MIC):是指该药物能抑制细菌生长的最低浓度,通常用?滋g/mL或U/mL 表示。
其结果判断方法为凡无肉眼可见细菌生长的药物最低浓度即为该菌的最小抑菌浓度(MIC)。
琼脂扩散法是将抗菌药物加至接种试验菌的平板表面,抗菌药物在琼脂胶内向四周自由扩散,其浓度随扩散距离增大而降低。
抗生素体外及体内抑菌效应检测的实验综述报告
抗生素体外及体内抑菌效应检测是抗生素研究中最常用的实验技术,它可以用来评估抗生素抑制菌的程度。
主要包括体外试验和体内试验两部分。
体外实验主要有浓度效应曲线法、磷酸盐抗性测定法、Minimal Inhibitory Concentration(MIC)分析法和Mueller-Hinton法。
这些方法可以确定抗生素对待测菌的最小抑制浓度。
体内抑菌效应实验主要有咪唑类菌的试验室动物模型、抑菌作用的动物试验室模型和免疫功能障碍实验室模型。
这些实验都可以评估抗生素对各种病原微生物的抑制作用。
总而言之,抗生素体外及体内抑菌效应检测是衡量抗生素作用的重要方法,为临床药物的使用提供依据。
抗生素抑菌实验报告抗生素抑菌实验报告引言:抗生素是一类能够抑制或杀死细菌生长的药物,广泛应用于医疗领域。
然而,近年来,由于滥用和不当使用抗生素,细菌对抗生素的抵抗性逐渐增强,导致了严重的公共卫生问题。
为了更好地了解抗生素的抑菌效果,本实验旨在研究不同类型的抗生素对细菌生长的影响。
实验设计:1. 实验材料:- 细菌培养基:含有营养物质的培养基,提供细菌生长所需的营养。
- 不同类型的抗生素:如青霉素、头孢菌素等。
- 培养皿:用于培养细菌的容器。
- 细菌培养物:含有特定细菌的培养物,用于实验。
- 培养箱:用于控制实验环境的温度和湿度。
2. 实验步骤:- 步骤一:准备细菌培养基和培养皿,将细菌培养基均匀倒入培养皿中。
- 步骤二:在培养皿上均匀涂抹细菌培养物,使细菌均匀分布。
- 步骤三:在培养皿上分别滴加不同类型的抗生素,形成不同的实验组。
- 步骤四:将培养皿放入预先调节好的培养箱中,控制温度和湿度。
- 步骤五:观察培养皿中细菌的生长情况,记录实验结果。
实验结果与分析:经过一段时间的培养,观察到不同实验组中细菌的生长情况有所不同。
下面将对实验结果进行分析:1. 对照组:对照组中没有加入任何抗生素,细菌在培养基上生长繁殖。
这是因为培养基提供了细菌所需的营养物质,使其能够正常生长。
2. 青霉素组:青霉素是一种广谱抗生素,对多种细菌具有抑制作用。
观察到在青霉素组中,细菌的生长明显受到抑制,数量较对照组明显减少。
这是因为青霉素能够破坏细菌细胞壁的合成,导致细菌无法正常生长和繁殖。
3. 头孢菌素组:头孢菌素是一种β-内酰胺类抗生素,对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均具有抑制作用。
观察到在头孢菌素组中,细菌的生长也受到明显抑制,数量明显减少。
这是因为头孢菌素能够抑制细菌的细胞壁合成,导致细菌无法正常生长和繁殖。
结论:通过本实验的结果可以得出以下结论:1. 抗生素对细菌的生长具有明显的抑制作用。
2. 不同类型的抗生素对细菌的抑制效果有所差异,这与抗生素的作用机制和细菌的耐药性有关。
6种抗生素类药物对大肠杆菌的体外抑菌试验xxx(山东农业大学)摘要:研究6种抗生素药物对大肠杆菌体外抑菌的作用。
通过在琼脂平皿上贴药敏片,测量抑菌圈的直径来确定抑菌作用。
结果表明大肠杆菌对青霉素、头孢他啶表现中度敏感,其他表现为高度敏感关键词:抗生素;大肠杆菌;抑菌文献综述:大肠杆菌是肠杆菌科埃希菌属中具有代表性的菌种,主要寄居在人和动物肠道中,其特性为革兰氏阴性,对营养要求不高,在普通培养基上就能很好的生长,并广泛分布于水、土壤或腐败物中。
禽大肠杆菌病是由埃希氏大肠杆菌引起的多种病的总称,包括大肠杆菌性肉芽肿、腹膜炎、输卵管炎、脐炎、滑膜炎、气囊炎、眼炎、卵黄性腹膜炎等疾病,对养禽业危害严重。
大肠杆菌病的发生,常与许多不利的外界条件密切相关。
发生时具备如下特点:发病率高,死亡率高,复发率高;各日龄均易感染,症状典型;混合感染严重;传播途径较多:呼吸道、消化道(包括滥用药物引起的肠道菌群失调)、垂直传播;治疗困难。
多年来,随着抗生素的大量应用致使大肠杆菌病的耐药菌株越来越多,耐药谱也越来越广。
本实验通过6种临床常用抗生素对大肠杆菌的药敏试验,检测临床常用的六种抗生素对大肠杆菌的敏感性以便准确有效的利用药物进行治疗。
1 药敏实验简介抗菌药物敏感性试验(AST,简称药敏试验):用于测试抗菌药物在体外对病原微生物有无抑制作用。
常用最低抑菌浓度(MIC)表示,即体外能够抑制细菌生长的最低药物浓度。
通常根据MIC结合常用剂量时体内该药所能达到的血药浓度,划定细菌对各种抗生素敏感或耐药的界限,给出S(敏感)、I(中介)、R(耐药)等定性的结果来分别表示实验菌对抗菌药物的敏感性。
高度敏感(s )表示用某种药物治疗某种细菌引起的感染常用剂量就有效,或者说常规剂量达到的平均血药浓度超过该药对细菌的MIC 的5 倍以上;中度敏感(I )表示用某种药物治疗某种细菌引起的感染仅在高剂量时才有效,或者说常规剂量达到的血药浓度相当于或略高于对细菌的MIC ; 耐药(R )表示药物对某一细菌的MIC(最低抑菌浓度)高于治疗量的药物在血液或体液内可能达到的浓度,或细菌能产生灭活抗菌药的酶,无论其MIC 值大小都要判定为耐药。
2021年抗生素抑菌实验实验报告探究抗生素抑菌效果试验报告实验报告实验目的:探究丌同种类抗生素的灭菌效果实验器材:培养皿,量筒,滴管,锥形瓶,显微镜等实验药品:琼脂,牛肉膏,蛋白胨,、溶液,菌落培养液,氯霉素,青霉素,硫酸庆大霉素等实验基本原理:一、常用的抗生素的分类:倍他-内酰胺类:(1).V、阿莫西林、哌拉西林针;(2).头孢类:如头孢氨苄、头孢拉定; 大环内酯类(红霉素类):、罗红霉素、阿奇霉素、克拉霉素等; 喹诺酮类:诺氟沙星、氧氟沙星、左氧氟沙星等; 氨基糖苷类:四环素类:土霉素、四环素、米诺环素,美满环素等; 氯霉素类抗生素:、甲砜霉素、无味氯霉素等其他类:甲氧苄啶、磺胺嘧啶、克林霉素、呋喃唑酮等。
(本实验中选择生活中最常见的青霉素、氯霉素和硫酸庆大霉素)二、抗生素抗菌的机理分类:阻碍细菌细胞壁的合成。
以这种方式作用的抗生素主要是β-内酰胺类抗生素(头孢菌素类)。
不细菌核糖体或其反应底物相互所用,抑制蛋白质的合成。
以这种方式作用的抗生素包括四环素类抗生素、大环内酯类抗生素、氨基糖苷类抗生素(庆大霉素)、氯霉素等。
不细菌细胞膜相互作用,增强细菌细胞膜的通透性、打开膜上的离子通道,让细菌内部的有用物质漏出菌体或电解质平衡失调而死。
阻碍细菌 DNA 的复制和转录影响叶酸代谢实验步骤:用蒸馏水清洗用具并制作九只培养基。
适当稀释菌落培养基后,各取 0.1ml 菌液,使用涂布平板法分别接种到九只培养基上。
将九只培养基编号,并均分为 A、B、C 三组。
用滤纸剪出 18 个直径 2cm 的圆片,6 个浸泡青霉素,6 个浸泡氯霉素,6 个浸泡硫酸庆大素。
完成后贴在培养基上,每只培养基贴 2 片。
将做好标记的培养基培养一段时间,观察细菌生长情况。
取出平板,测量出抑菌圈的直径大小,并做好记录。
整理数据,得出结论。
结果统计表(注:抑菌圈半径记为 R1;圆片半径 1cm 记为 R2)实验结论: 硫酸庆大霉素抑菌效果最好,青霉素抑菌效果最差。
为了评估不同抗生素药物的抗菌能力,本实验通过体外抑菌实验,观察并记录抗生素对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌等常见细菌的抑菌效果,以期为临床合理用药提供参考。
二、实验材料1. 菌株:金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌等。
2. 药物:头孢克洛、氨苄西林、阿莫西林、庆大霉素、红霉素等。
3. 培养基:牛肉膏蛋白胨琼脂培养基、M-H肉汤培养基。
4. 实验器材:培养皿、移液器、无菌试管、锥形瓶、酒精灯、高压蒸汽灭菌器等。
三、实验方法1. 菌株培养:将菌株接种于牛肉膏蛋白胨琼脂培养基,37℃培养24小时。
2. 药物制备:将抗生素药物溶解于M-H肉汤培养基中,制成不同浓度的药物溶液。
3. 抑菌实验:将培养好的菌株接种于牛肉膏蛋白胨琼脂培养基,制成平板。
将不同浓度的药物溶液滴加于平板上,37℃培养24小时,观察抑菌圈直径。
4. 数据记录:记录不同浓度药物溶液的抑菌圈直径,计算抑菌率。
四、实验结果1. 头孢克洛对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌的抑菌效果较好,抑菌圈直径分别为18mm、15mm、13mm。
2. 氨苄西林对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的抑菌效果较好,对铜绿假单胞菌的抑菌效果较差,抑菌圈直径分别为12mm、10mm、5mm。
3. 阿莫西林对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的抑菌效果较好,对铜绿假单胞菌的抑菌效果较差,抑菌圈直径分别为10mm、8mm、4mm。
4. 庆大霉素对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌的抑菌效果较好,抑菌圈直径分别为20mm、18mm、16mm。
5. 红霉素对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的抑菌效果较好,对铜绿假单胞菌的抑菌效果较差,抑菌圈直径分别为14mm、12mm、6mm。
1. 头孢克洛、庆大霉素等抗生素对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌具有较强的抑菌效果,可作为临床治疗此类细菌感染的首选药物。
2. 氨苄西林、阿莫西林等抗生素对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的抑菌效果较好,但对铜绿假单胞菌的抑菌效果较差,临床应用时需注意。
一、实验目的本实验旨在通过体外抗菌实验,探究不同抗生素对特定细菌的抑菌效果,为临床用药提供参考依据。
二、实验材料1. 实验菌株:金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌等。
2. 抗生素:青霉素、头孢唑啉、头孢他啶、阿莫西林、左氧氟沙星等。
3. 培养基:营养肉汤、营养琼脂、麦康凯琼脂等。
4. 实验器材:培养皿、培养箱、无菌操作台、移液器、微量滴定板、显微镜等。
三、实验方法1. 菌株培养:将实验菌株接种于营养肉汤中,37℃恒温培养18小时,制成菌悬液。
2. 抗生素配比:根据抗生素说明书,将抗生素配制成不同浓度的溶液。
3. 平板涂布法:将菌悬液均匀涂布于营养琼脂平板上,待菌落生长后,用无菌移液器吸取抗生素溶液,滴加于平板上,使其形成直径约10mm的抑菌圈。
4. 观察结果:将平板放入培养箱中,37℃恒温培养24小时,观察抑菌圈的大小。
5. 数据处理:记录抑菌圈直径,计算抑菌率。
四、实验结果1. 青霉素对金黄色葡萄球菌的抑菌效果最佳,抑菌圈直径为15mm。
2. 头孢唑啉对大肠杆菌的抑菌效果较好,抑菌圈直径为12mm。
3. 头孢他啶对肺炎克雷伯菌的抑菌效果较好,抑菌圈直径为13mm。
4. 阿莫西林对铜绿假单胞菌的抑菌效果较好,抑菌圈直径为11mm。
5. 左氧氟沙星对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌均有一定的抑菌效果,抑菌圈直径分别为14mm、10mm、12mm、9mm。
五、实验讨论1. 本实验结果表明,不同抗生素对特定细菌的抑菌效果存在差异,可能与抗生素的药理作用和细菌耐药性有关。
2. 青霉素对金黄色葡萄球菌的抑菌效果最佳,可能是由于金黄色葡萄球菌对青霉素的敏感性较高。
3. 头孢唑啉、头孢他啶、阿莫西林、左氧氟沙星等抗生素对其他细菌也有一定的抑菌效果,可根据临床需求选择合适的抗生素进行治疗。
4. 本实验采用平板涂布法进行体外抗菌实验,操作简便,结果可靠,但仅限于体外实验,临床应用时还需结合患者具体情况和细菌耐药性进行综合判断。
抗生素体外及体内抑菌效应检测的实验
综述报告
1实验意义
本综合实验项目作为微生物学实验的补充和深入,选择抗生素为实验材料,主要内容包括抗生素的体外抑菌实验、抗生素的体内抗菌实验,形成一个整体的综合性实验。
在实验内容上强调系统性、专业性、实用性和趣味性;涉及微生物学专业多项技术原理、复杂流程,将整体实验课程的水平从分散的基础实验提升到综合性、系统性更高的层次,对学生的动手能力、专业水平、科研素质等进行全面的培养和提高,此即本项目设计的意义所在。
2实验目的
(1)了解常用抗菌药物的抗菌作用及抗菌范围,并掌握抗菌药物的某些体外抗菌实验;
(2)观察血液、细菌、药物三者相互作用,以加深学生对抗菌药物药理作用的认识;
(3)通过理论联系实际的学习和操作训练,训练学生掌握医学微生物学综合实验技能和实验技巧,提高动手能力,有助于学生科学世界观的形成;
(4)培养学生独立操作、分析解决问题的能力,提高对微
生物学的兴趣,为学生独立创业提供一些创业技能思路。
3实验原理
金黄色葡萄球菌是机会致病菌,而抗菌药物在一定浓度下对其有抑制和杀灭作用。
抗菌药物一般是指具有抑菌或杀菌活性的药物,包括各种抗生素、磺胺类、咪唑类、硝基咪唑类、喹诺酮类等化学合成药物。
由细菌、放线菌、真菌等微生物经培养而得到的某些产物,或用化学半合成法制造的相同或类似的物质,也可化学全合成。
药物的体外抑菌实验,是指在体外测定药物抑制或杀灭细菌能力的实验。
它是常用抗菌实验的方法,其中最常用的方法有系列稀释法和琼脂扩散法。
稀释法有液体培养基连续稀释法和固体稀释法(斜面法)两种,这两种方法都可以用来测定药物的最小抑菌浓度(MIC):是指该药物能抑制细菌生长的最低浓度,通常用?滋g/mL或U/mL 表示。
其结果判断方法为凡无肉眼可见细菌生长的药物最低浓度即为该菌的最小抑菌浓度(MIC)。
琼脂扩散法是将抗菌药物加至接种试验菌的平板表面,抗菌药物在琼脂胶内向四周自由扩散,其浓度随扩散距离增大而降低。
在药物一定的扩散距离内,由于药物的抗菌效应,试验菌不能生长,此无菌生长的范围称为抑菌圈。
抑菌圈的大小与药物的抑菌效应成正比。
琼脂扩散法常有纸片法、管碟法、打洞法和挖沟法。
一般药敏实验常采用纸片法,我们可以根据抑菌圈的大小,来判断
菌种对药物的敏感性,是敏感,中度敏感还是耐药。
药物的体内抗菌实验又称为动物实验治疗试验或保护力试验。
当抗菌药物进入机体后,其效力的发挥要受体内各种因素的影响。
如血液及组织内的蛋白质或磷脂、浓汁内的核酸均与药物结合,降低药物的活性;坏死组织内的酸性环境也能影响药物的活性。
机体内的微生物代谢活动较低,对药物的敏感性降低,有时还可以形成细胞壁缺陷型细菌,对某些药物不敏感。
机体内各组织中药物的吸收、分布不同,使药物的浓度难以恒定。
因此在评定新药的药效时除做体外抑菌实验外还需要做体内的抗菌实验。
4实验操作
4.1实验材料与用品
材料:宿主(兔、鸡等)经抗凝处理后血液全血组分,人工培养的人单核巨噬细胞U937,金黄色葡萄球菌209-P(或*****5)标准株。
器材:灭菌EP管(EP管),EP管架,新鲜全血,枪头(黄、白、蓝),微量移液器(10?滋L,100?滋L,1mL),灭菌小棉签,小镊子,圆形滤纸(直径为6 mm),培养皿,紫外分光光度计,电热恒温培养箱,恒温振荡培养,细胞培养板。
药品与试剂:青霉素,链霉素,四环素,氯霉素,红霉素,
碘酊,柠檬酸钠,75%酒精,PBS缓冲液。
4.2培养基的制备
(1)TSB+agar培养基:胰蛋白大豆肉汤粉末30.0g, NaCl 30.0g,蒸馏水1000mL,pH 7.2,琼脂20.0g,溶化后分装,121℃灭菌15min备用。
(2)TSB 肉汤培养基:胰蛋白大豆肉汤粉末30.0g,NaCl 30.0g,蒸馏水1000mL,pH 7.2,121℃灭菌15min 备用。
4.3抗菌药物的体外抑菌实验
4.3.1试管法
(1)取灭菌EP管10只,按1-10编号,排列于EP管架上。
无菌操作,分别加入TSB肉汤培养基0.5mL。
用微量移液器吸取40U/mL的青霉素药液0.5mL放入第1管,并反复吸匀。
从第1 管吸出0.5mL放入第2管,吸匀后吸出0.5mL放入第3管,依此法逐管进行稀释至第9管。
第10管不加药液作为对照管。
(2)各EP管加入0.5mL新鲜配置的稀释浓度为10-4的金黄色葡萄球菌209-P菌液,放入孵箱内于37℃孵育24h后取出,觐察细菌生长情况并将结果记录于表中。
细菌不生长的最小浓度为青霉素对金黄色葡萄球菌的MIC。
(3)其余抗菌药物均按上述方法测定对金黄色葡萄球菌
209-P 的MIC。
4.3,2纸片法
(1)以灭菌小棉签蘸取金黄色葡萄球菌液,在管壁上旋转挤
压几次,去掉过多的菌液,然后轻轻地从4个不同方向平行交叉划线,使菌液均匀涂布于整个琼脂平板表面。
(2)取2000U/mL的青霉素、2000的/mL的链霉素、四环素、氯霉素、红霉素、2.5%的碘酊各2 mL分装于试管中。
用无菌小镊子取圆形滤纸12张,每两张浸于同一种药液中,浸透后取出,沥去过多的药液。
将2片含一种药液的滤纸分别放在已接种细菌的琼脂平板表面的不同区域。
为了位置间隔准确,最好事先在皿底用标记笔做上记号。
(3)将培养皿放入孵箱内于37℃孵育24 h,观察纸片周围有无抑菌圈,将结果记录于表中。
测量抑菌圈的直径,比较各药的抗菌效力。
4.4抗菌药物的体内抗菌实验
4.4.1接种法及细菌存活测试
4.4.2色葡萄球菌各菌株划线至TSB + agar平板上培养16h;
4.4.3上挑取多个克隆到含有PBS的EP管中,离心收集菌,用PBS洗涤两遍后调菌液浓度至吸光度OD600=0.6,稀释100倍后取100?滋L菌液和lmL全血混合37℃摇床培养。
(3)分别在Oh, 1h, 3h, 5h, 7h, 9h 时间点取100?滋L 混合培养液,用无菌水稀释10倍、100倍、1000倍涂平板,放置
37℃培养20 h后,计数生长出来的细菌克隆数,以0 h的克隆数
作为对照,计算存活率,作图。
4.4.4抗生素醴内治疗干预实验
(1)依据步骤4.3.1体外抗菌实验的得到的各抗生素的最小抑菌浓度值,配制各种常用抗生素合适浓度的母液。
(2)金黄色葡萄球菌各菌株划线至TSB+agar平板上培养16h;
(3)从板上挑取多个克隆到含有PBS的EP管中,离心收集菌,用PBS洗涤两遍后调菌液浓度至吸光度OD600=0.6,稀释100倍后取100?滋L菌液和l mL全血混合,再加入工作浓度的各种抗生素,37℃摇床培养。
(4)分别在0h, 1h, 3h, 5h, 7h, 9h 时间点取100?滋L 混合培养液,用无菌水稀释10倍、100倍、1000倍涂平板,放置37℃培养20 h后,计数生长出来的细菌克隆数,以0 h的克隆数作为对照,计算存活率,作图。
5注意事项
(1)充分灭菌的枪头和EP管应当烘干后使用,避免枪头和EP
管中残余的水株对稀释结果产生影响。
(2)菌液稀释时,确保正确使用移液器,确保吸取的菌液体积正确。
(3)用移液枪吸取较为粘稠的血液时,动作应当轻柔缓慢,以免血液进入枪管,影响移液枪使用。
(4)使用灭菌小棉签蘸取金黄色葡萄球菌液涂布琼脂平板表面时,棉签蘸取菌液后应当在EP管壁上碾压一下,避免涂布后在平板上留下过多菌液,长成较厚菌苔进而影响后期抑菌圈观察。
(5)菌液涂布时,应当在平板上均匀涂布,避免留下空白区域,影响抑菌圈大小测定。
(6)在进行纸片法测定抑菌效果时,含有抗生素的滤纸片应当贴在事先划好区域的中央,避免抑菌圈交叉对后续观察实验的影响。
(7)滤纸片应当轻轻贴附在平板表面,可用无菌的镊子轻轻按压,切勿造成固体琼脂的破裂和变形,以免影响抑菌圈的大小和形状。
(8)涂布器在涂布前应当使用酒精灯外焰充分灼烧,在无菌区内晾凉后进行涂布实验,避免涂布器温度过高烫死细菌,影响实验数据。