实验 RNA的细胞化学——Brachet反应

验证性实验中的探索性教学——以RNA的细胞化学—Brachet反应为例庞敏胡凯熊廷蓉（重庆文理学院林学与生命科学学院，重庆永川402160）摘要：细胞生物学实验是学生了解细胞相关的知识和技能最直接有效的手段。

该文以RNA的细胞化学—Brachet反应的原理为基础，在验证性实验教学的基础上，经过内容的处理和过程的改进后增加了验证性实验的探究趣味，对帮助学生提高创新思维能力、语言表达能力、问题解决能力都起到了非常积极的作用。

在此基础上总结出：验证性实验与探究性实验两者各有优势，对学生教学中有着各自不可替代的作用。

关键词：RNA；验证性实验；探索性实验中图分类号G642.0文献标识码A文章编号1007-7731（2017）05-0135-02How to Turn Verification Test into Exploratory Experiment during the Cell Chemistry——Taking RNA Brachet Reaction as an ExamplePang Min1et al.（College of Forestry and Life Science，Chongqing University of Arts and Sciences，Chongqing402160，China）Abstract：Experiment is a direct and efficient way for student to understand and grasp cell biology knowledge.This paper is based on the principle of cell chemistry RNA——Brachet reaction.On the basis of experiment teaching，af⁃ter improving treatment and process content to increase the exploratory interests of verification experiment.It plays a positive role in helping to innovative students'thinking ability，language expression ability and problem solving abili⁃ty.On the basis of summing up：verification experiment and exploratory experiment both have their own advantages and have irreplaceable role for the teaching of students.Key words：RNA；Verification experiment；Exploratory experiment目前大学实验课以验证性实验最为常见，教材中已经设计好实验课题、实验目的、原理、药品、仪器及具体操作过程，这些实验在巩固理论知识、训练学生基本技能方面起到了重要作用。

前言一、医学细胞生物学实验课的目的和要求医学细胞生物学实验课是医学细胞生物学教学的重要组成部分，它既与医学细胞生物学课堂讲授的理论部分密切联系，同时又有它独特的目的和要求：1. 实验是科学理论的实践与论证，通过实验，使学生从感性认识加深对课堂所获得的理性知识的认识和理解。

2. 通过光学显微镜的使用，临时标本的制作、细胞培养等技术操作，使学生掌握医学细胞生物学的基本实验方法和技能。

3. 通过实验，培养同学观察、比较、分析、综合等科学思维方法、独立工作能力和实事求是的科学态度。

4. 通过实验，使学生获得书写细胞生物实验报告、绘图、制表等方面的基本知识和技能训练。

二、医学细胞生物学实验报告的写作实验报告是科学研究的记录，同学们必须学会客观地、真实地记载实验过程和结果。

实验报告的形式一般可分以下三种：1. 文字报告：要求学员将观察所得和实验结果客观地用文字给以准确、详细的描述和记录。

文字力求简洁明了，条理清楚。

2. 绘图: 绘图是医学细胞生物学实验中常用的报告形式之一, 它既是根据所观察标本的真实记录和研究资料, 又可通过描绘学习更精细观察描述。

医学生物学实验绘图不同于一般艺术性绘图。

医学细胞生物学绘图的基本要求: ①绘图前应对标本加以仔细观察研究，并在正确的理解后方可动手绘制。

图中各种结构的大小应与实物成比例，力求准确，明暗之处以点疏密表示，切勿以铅笔涂施阴影；②绘图要求洁净明了，整齐有序，图的位置大小，要求分配适宜，线条力求匀整；③图绘好后，各部结构要用铅笔详细标注名称，标注的方法是：由所标注的部位引出直线，并将其名称注于线的末端，所引的线条应与报告纸上下沿平行，书写字应当横排，字迹要求端正。

3. 制表：将观察所得或实验结果，设计一表格，将有关结果逐项填入，表示其相应关系。

三、实验室规则1. 做好课前预习：实验课前，要认真阅读实验指导及与教材的有关内容，明确实验目的、要求和注意事项，了解实验内容、方法和步骤。

前言细胞生物学是高校生命科学的主干课程之一，是一门实验性很强的学科。

生命科学的许多重大发现与细胞生物学实验技术的不断创新、发展是分不开的。

因此，学习和掌握细胞生物学最基本的技术和最新的实验方法，对于从事生命科学研究工作者来说是非常重要和完全必要的。

目前，适用于高等院校不同层次使用的细胞生物学实验教材不多。

由于细胞生物学已成为重要的前沿生物学科，其发展速度之快可谓日新月异，突飞猛进，异常迅速。

各种研究新方法、新技术如雨后春笋层出不穷。

各学科之间的相互渗透，相互依存紧密相联。

如细胞生物学与分子生物学、分子遗传学等实验技术之间就具有很强的依存性和相融性。

细胞生物学实验技术的巨大变化，将推动细胞生物学向着更深的层次发展。

我们为了紧跟学科发展的趋势，把握学科前进的方向，适应学科发展的要求，将多年来在教学和科研实践中积累及编写的细胞生物学技术编写成《细胞生物学实验》一书。

旨在让学生能掌握细胞生物学研究的基本操作技能和新的实验技术，从细胞生物学的角度分析生物学中的问题，为独立进行研究打下基础。

本书是王金发教授主编的《细胞生物学》的配套教材之一。

全书共有64个实验，内容较丰富，知识面广，既包括常规的经典实验，又新增了不少与现代细胞生物学和分子生物学相关的新技术，如电穿孔和电融合技术、反转录病毒载体介导的基因转导技术、胚胎干细胞的培养和体外分化技术、流式细胞技术、细胞显微注射、共聚焦显微技术、细胞凋亡检测技术等。

这些实验内容新颖、技术先进，可操作性强，对培养学生的动手能力、分析问题和解决问题的能力很有帮助。

本书第1～4章由戚康标编写；第5～7章由何炎明编写；第8章由何炎明、张利红编写；第9、12章及附录由刘兵编写，并对全书进行文字编辑和校对；第10、11章由张利红、张为民编写；冯冬茹参加了部分实验的初稿编写工作。

本书在编写过程中得到王金发教授的亲自指导和中山大学生命科学院的大力支持，在此表示感谢。

由于编者的水平有限，难免出现错误，恳请广大读者给予批评指正。

验证性实验中的探索性教学——以RNA的细胞化学—
Brachet反应为例
庞敏;胡凯;熊廷蓉
【期刊名称】《安徽农学通报》
【年(卷),期】2017(023)005
【摘要】细胞生物学实验是学生了解细胞相关的知识和技能最直接有效的手段.该文以RNA的细胞化学—Brachet反应的原理为基础,在验证性实验教学的基础上,经过内容的处理和过程的改进后增加了验证性实验的探究趣味,对帮助学生提高创新思维能力、语言表达能力、问题解决能力都起到了非常积极的作用.在此基础上总结出:验证性实验与探究性实验两者各有优势,对学生教学中有着各自不可替代的作用.
【总页数】2页(P135-136)
【作者】庞敏;胡凯;熊廷蓉
【作者单位】重庆文理学院林学与生命科学学院,重庆永川 402160;重庆文理学院林学与生命科学学院,重庆永川 402160;重庆文理学院林学与生命科学学院,重庆永川 402160
【正文语种】中文
【中图分类】G642.0
【相关文献】
1.变验证性实验为探究性实验培养学生的科学探究能力——以"制作和观察洋葱表皮临时装片"实验为例 [J], 刘振锋
2.创新性运用解释性、描述性、探索性教学方法增强综合性选课魅力--以《环境激素与生殖健康》课程为例 [J], 陶贤继;魏华;吕为群
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4.由一次验证性实验改为探究性实验引发的思考——以初中实验“鉴定食物中含有蛋白质、淀粉”为例 [J], 徐水华
5.变验证性实验为探究性实验
——以"绿叶在光下产生淀粉"实验为例 [J], 徐力
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brachet反应实验报告Brachet反应实验报告引言：Brachet反应是一种有机合成中常用的重要反应，它能够将醛或酮与亚硫酸氢钠反应，生成相应的亚砜化合物。

这种反应具有高效、选择性好的特点，因此在药物合成和有机合成中得到广泛应用。

本实验旨在通过Brachet反应的实验操作，探究其机理和反应条件对反应效果的影响。

实验部分：1. 实验材料和仪器本实验所需材料包括醛或酮底物、亚硫酸氢钠、溶剂等。

仪器设备包括反应瓶、磁力搅拌器、温度控制装置等。

2. 实验操作步骤(1) 准备底物溶液：将所需的醛或酮底物溶解在适量的溶剂中，使其浓度达到实验要求。

(2) 加入亚硫酸氢钠：将适量的亚硫酸氢钠固体加入到底物溶液中，并进行充分搅拌。

(3) 控制反应条件：根据实验要求，控制反应的温度和时间。

(4) 反应结束：反应一定时间后，停止搅拌，并将反应液进行适当处理。

(5) 产物提取：通过适当的提取方法，将产物从反应液中分离出来。

(6) 产物纯化和鉴定：对分离得到的产物进行纯化和鉴定，可以使用色谱法、质谱法等手段。

结果与讨论：通过本实验，我们成功地合成了目标化合物，并对其进行了鉴定。

在实验中，我们发现反应温度和时间对反应效果有着重要的影响。

较高的反应温度和较长的反应时间通常能够提高产物收率和选择性，但也容易导致副反应的发生。

因此，在实际应用中需要根据具体情况进行反应条件的选择。

此外，我们还发现底物的结构对反应的影响也是十分重要的。

不同的醛或酮底物在反应中表现出不同的反应活性和选择性。

这一点在药物合成中尤为重要，因为底物的结构不仅会影响反应的效果，还会对产物的活性和毒性产生重要影响。

总结：通过本次Brachet反应实验，我们了解了该反应的基本原理和操作方法，并对其反应条件和底物结构对反应效果的影响进行了探究。

这对于有机合成和药物合成领域的研究具有重要的意义。

通过进一步的研究和实践，我们可以进一步优化反应条件，提高反应效果，并在实际应用中发挥更大的作用。

RNA的细胞化学高熹1120152430(李安一)（北京理工大学生命学院16121501班）摘要：甲基绿、派洛宁为两种碱性染料。

甲基绿分子有两个正电荷，易与双链DNA结合，使DNA显示绿色，派洛宁分子有一个正电荷，易与RNA结合，使RNA 显示红色。

该实验利用了甲基绿-派洛宁染料，对洋葱鳞茎内表皮进行染色，通过颜色的分布，观察洋葱鳞茎内表皮中的RNA和DNA的分布情况，得出二者的分布规律。

关键词：实验；甲基绿-派洛宁；DNA；RNA；分布1 引言甲基绿—派洛宁（methyl green-pyronin）为碱性染料，它分别能与细胞内的DNA、RNA结合呈现不同颜色。

当甲基绿与派洛宁作为混合染料时，甲基绿与染色质中DNA选择性结合显示绿色或蓝色；派洛宁与核仁、细胞质中的RNA选择性结合显示红色。

其原因可能是两种染料的混合染液中有竞争作用，同时两种核酸分子都是多聚体，而其聚合程度有所不同。

甲基绿易与聚合程度高的DNA结合呈现绿色。

而派洛宁则与聚合程度较低的RNA结合呈现红色（但解聚的DNA也能和派洛宁结合呈现红色）。

即RNA对派洛宁亲和力大，被染成红色，而DNA对甲基绿亲和力大，被染成绿色。

洋葱鳞茎的外表皮中色素含量较高，呈现出了紫颜色，如果对其进行染色会对结果造成一定程度上的干扰，而洋葱鳞茎的内表皮中色素较少，颜色基本上是无色的，进行染色可以清晰地看到染色的结果，减少了其他的干扰。

同时，洋葱鳞茎内表皮是单层的，平整地铺在载玻片上，无需做其他处理就可以用光镜进行观察。

DNA分子在90摄氏度的时候会发生解螺旋，成为DNA单链，而三氯乙酸对DNA有沉淀作用，使染色剂无法与其有效结合，无法对DNA有效染色。

2 实验材料2.1 实验仪器显微镜、镊子、载玻片、盖玻片、吸水纸。

2.2 实验材料洋葱鳞茎内表皮。

2.3 实验试剂2.3.1 Unna试剂：甲基绿－派洛宁染色液甲液：5％派洛宁水溶液6ml2％甲基绿水溶液6ml蒸馏水16ml乙液：1mol/L乙酸缓冲液（pH4.8）16ml甲液与乙液分别置于4冰箱备用，使用时两溶液混匀即可。

细胞组分的化学反应一、实验目的了解核酸、蛋白质、糖及酶的细胞化学反应原理，掌握Brachet反应及碱性蛋白、酸性蛋白、糖原和过氧化物酶的细胞化学染色方法。

二、实验用品1.材料和标本蟾蜍、小白鼠各一只、肝脏石腊切片、培养的Hela细胞。

2. 器材和仪器光学显微镜、解剖器材、蜡盘、载玻片、吸水纸、染色缸、盖玻片、水浴箱。

3.试剂PBS缓冲液(pH7.2)、甲基绿一呱咯宁醋酸缓冲液、纯丙酮、l/2丙酮+1/2二甲苯、纯二甲苯、70％乙醇、5％三氯醋酸、0.1％碱性固绿、0.1％酸性固绿、0.5％硫酸铜、联苯胺混合液、1％番红、无水乙醇、过碘酸酒精液、Schiff氏酒精液、亚硫酸水、Ehrlieh苏木精、95％乙醇、Carnoy固定液(甲醇：冰醋酸=3:1，体积比)三、实验内容细胞的组织化学方法，是研究细胞成分常用的方法之一。

它是利用化学试剂与细胞内的某些物质进行化学反应，从而在细胞局部形成有色沉淀物，再通过显微镜对组织内的生物化学成分进行定性、定位、定量研究。

1.细胞内碱性蛋白和酸性蛋白的显示（1）原理由于不同的蛋白质分子所带的碱性和酸性基团的数目不同，在pH值不同的溶液中，蛋白质分子所带的净电荷多少不同。

如在生理条件下，整个蛋白质所带负电荷多，则为酸性蛋白质；带正电荷多，则为碱性蛋白质。

据此，可将标本经三氯醋酸处理提出核酸后，用不同pH值的固绿染液分别染色，细胞内的酸性蛋白和碱性蛋白质显示出来。

（2）方法① 以破坏脊髓法处死蟾蜍，将其腹面向上放人蜡盘中，剪开胸腔，打开心包。

小心将心脏剪一小口，取心脏血一滴滴在干净载玻片一端，推片，按此法制备二张血涂片，室温晾干。

② 将涂片作好标记放在70％乙醇中固定5分钟，室温晾干。

③ 放入5％三氯醋酸中60℃30分钟，抽提出核酸。

④ 清水冲洗多次（3分钟以上），以冲去痕迹的三氯醋酸。

⑤ 滤纸吸干玻片上水分。

⑥ 一张片放入0.1％碱性固绿(pH8.0～8.5)中染色10～15分钟,另一张片放入0.1％酸性固绿(pH2.0～2.5)染色5～10分钟。

Feuglen 反应、 Brachet 反应和 PAS 反应显示 DNA 、 RNA 及多糖物质生物122 祝洪晨 1202040220 实验目的:掌握 Feuglen 反应和 Brachet 反应的原理及关键步骤,观察 DNA 、 RNA 在细胞中的分布;了解 PAS 反应的原理并掌握其方法步骤,观察 PAS 反应的染色结果。

实验原理:Feuglen 反应:经弱酸水解后, DNA 上的嘌呤和脱氧核糖之间的键打开, 使脱氧核糖的一端形成游离的的醛基在原位与 Schiff 试剂 (无色品红亚硫酸溶液反应, 形成紫红色化合物, 使细胞中含有 DNA 的部位呈紫红色阳性反应。

Brachet 反应:DNA 与 RNA 结构上有较多相似之处,但在聚合程度上有显著差异。

在 Brachet 反应中,采用两种碱性染色——甲基绿和派洛宁对标本进行染色处理。

在染色过程中甲基绿对高聚合的 DNA 分子有亲合力, DNA 被染成绿色; 而派洛宁对聚合度较低的 RNA 有亲合力, RNA 被染成红色。

PAS 反应:在细胞中的多糖分子中存在自由的醛基, 但不能采用醛基反应试出。

多糖中的醛基必须在某些氧化剂和水解剂的作用下才能露出。

过碘酸是把多糖氧化成高分子醛化物的氧化剂,可将多糖的 CHOH-CHOH 氧化为 CHO-CHO ,这种高分子醛化物可被 Schiff 试剂染色并呈现为紫红色。

Feuglen 反应和 Brachet 反应操作中需要对照组实验。

实验步骤:Feuglen 反应:①取出固定好的材料,用 50%酒精、 30%酒精、蒸馏水各冲洗 5分钟, 除去材料上的醋酸。

②水解:用 1mol/L的冷 HCl 冲洗材料一次,然后放入 60℃的 1mol/L的 HCl 中,水解 10分钟,取出材料后再用 1mol/L的冷 HCl 冲洗一次。

③染色:将水解后的材料放入 Schiff 试剂中染色 30分钟, 根尖部分会出现紫红色。

姓名班级 13级生命基地班学号同组者：科目细胞生物学实验实验题目脂类细胞化学--苏丹III染色法【实验题目】脂类细胞化学--苏丹III染色法【实验目的】1. 了解脂肪染色的原理、掌握脂类标本制片；2. 学习用苏丹III染色法进行脂肪细胞的染色技术；3. 学会用断头法处理小白鼠以及小白鼠的解剖方法。

【实验材料与用品】1. 试剂：苏丹Ⅲ染液、70%乙醇溶液、甲醛钙2. 器具：显微镜，载玻片，盖玻片，胶头滴管，镊子，剪刀，解剖盘3. 材料：小白鼠【实验原理】脂类包括的范围很广，有单纯脂、复合脂、衍生脂等。

脂肪依其性质可分为中性脂肪、脂肪酸、胆固醇、鞘磷脂以及其他类脂质。

脂肪是体内储存能量和供给能量的重要物质。

很多细胞都含有脂肪，游离状态的脂肪呈小滴状悬浮于细胞质内，比较显著的如肝细胞。

脂肪小滴可以集合，将细胞质及细胞核挤到一旁，如脂肪细胞。

脂肪与类脂类和蛋白质结合时，往往不易显出，但用重铬酸钾、升汞、硝酸钴或硝酸铀氧化组织块或切片，可以显现出脂肪和类脂类。

脂类不溶于水，易溶于浓乙醇、苯、氯仿和乙醚等，因此脂类标本的制作，需用不含酒精或不能溶脂的液体固定，一般常用甲醛类固定剂。

脂溶性染料显示法利用苏丹染料中的苏丹III、苏丹IV、苏丹黑或者苏丹红等溶于脂类，而使脂类显色的原理显示脂类，使用时，要注意选择溶剂，要求既要溶解苏丹染料，又不溶掉脂肪。

苏丹染料是偶氮染料，它对脂类的显示是一种简单的物理变化。

苏丹染料也是一种脂溶性染料，易溶于乙醇但更易溶于脂肪，所以当含有脂肪的标本与苏丹染料接触时，苏丹染料即脱离乙醇而溶于该含脂肪结构中而使其显色。

脂肪染料一般选用有机溶剂做溶剂，丙酮和乙醇对染料和脂肪都是很好的溶剂，这样可以染色大的脂肪积累块，但是小的脂肪滴会溶解。

60%异丙醇当溶剂，可以减轻脂类的溶解。

丙二醇或磷酸三乙酯不会溶解脂类物质，但是能溶解染料，是比较理想的溶剂。

用这些溶剂姓名 班级 13级生命基地班 学号 同组者：科目 细胞生物学实验 实验题目 脂类细胞化学--苏丹III 染色法配的染料溶液要过滤以去掉沉淀，防止蒸发，因蒸发会引起染料在材料中积累。

细胞实验全集细胞生物学添加时间：2008.10.28|作者：admin实验一普通光学显微镜与特殊显微镜的使用一、实验目的1.强化普通光镜结构和使用技能的知识，掌握让其发挥最佳效能的方法。

2.了解相差显微镜、荧光显微镜的构造和原理，并掌握它们使用方法。

二、实验原理（一）普通光学显微镜普通光学显微镜的构造主要分为三部分：机械部分、光学部分和照明部分。

1.机械部分：（1）镜座。

（2）镜柱。

（3）镜臂。

（4）镜筒。

（5）物镜转换器(旋转器)。

（6）镜台(载物台)。

（7）调节器：①粗调节器(粗螺旋)，②细调节器(细螺旋)。

2.照明部分：包括反光镜，集光器和光圈。

3.光学部分：（1）目镜，（2）物镜：装在镜筒下端的旋转器上，一般有3－4个物镜，其中最短的刻有10符号的为低倍镜，较长的刻有40符号的为高倍镜，最长的刻有100符号的为油镜，此外，在高倍镜和油镜上还常加有一圈不同颜色的线，以示区别。

在物镜上，还有镜口率(N.A.)的标志，它反应该镜头分辨力的大小，其数字越大，表示分辨率越高，各物镜的镜口率如下表：物镜镜口率(N.A.)工作距离(mm)100.285.40400.650.391001.300.11表中的工作距离是指显微镜处于工作状态(物象调节清楚)时物镜的下表面与盖玻片(盖玻片的厚度一般为0.17mm)上表面之间的距离，物镜的放大倍数愈大，它的工作距离愈小。

显微镜的放大倍数是物镜的放大倍数与目镜的放大倍数的乘积，如物镜为10，目镜为10，其放大倍数就为1010=100。

（二）相差显微镜人类的眼睛只能在光波的波长和振幅有差异时才能识别被检物体。

波长决定颜色、振幅决定明暗。

在镜检的标本中，经固定、染色的标本就具有上述两种差异称振幅差标本，振幅差标本用普通光学显微镜就可以看得清楚；另一类标本没有明显的波长和振幅的差异，但其各部分却有厚度、折射率的不同，因而具有一定的相位差，称为相位差标本，如活细胞就属于这类标本。

brachet反应的原理Brachet反应的原理引言Brachet反应是一种重要的有机合成方法，它可以实现碳-碳键的形成。

本文将介绍Brachet反应的原理及其应用。

Brachet反应是通过酰胺的缩合反应来实现碳-碳键的形成，具有高效、高产率、选择性好等优点，因此在有机合成中得到广泛应用。

一、Brachet反应的基本原理Brachet反应是通过酰胺的缩合反应来实现碳-碳键的形成。

具体而言，该反应是通过酰胺中的氨基与活性羰基化合物中的羰基进行缩合反应，生成酰胺中的氨基与活性羰基化合物中的羰基进行缩合反应，生成酰胺中的碳-氮双键断裂，形成新的碳-碳键。

反应的机理如下：1. 活性羰基化合物的生成：首先，将活性羰基化合物与酸性条件下的酰胺反应，生成酰胺中的氨基与活性羰基化合物中的羰基进行缩合反应，生成临时的亚胺中间体。

2. 酰胺中的碳-氮双键断裂：接着，通过加热或加碱的方式，酰胺中的碳-氮双键断裂，生成亚胺中间体和氨。

3. 碳-碳键的形成：最后，亚胺中间体与活性羰基化合物中的羰基发生亲核加成反应，形成新的碳-碳键。

二、Brachet反应的应用Brachet反应在有机合成中具有广泛的应用价值，可以用于合成各种具有生物活性的化合物。

以下将介绍该反应在几个重要领域中的应用。

1. 药物合成：由于Brachet反应可以高效地形成碳-碳键，因此在药物合成中得到广泛应用。

例如，利用该反应可以合成抗癌药物、抗生素、抗病毒药物等。

2. 天然产物合成：Brachet反应也被广泛用于天然产物的合成。

天然产物通常具有复杂的结构和多样的生物活性，而Brachet反应可以实现多步反应的简化，从而提高合成效率。

3. 功能材料合成：Brachet反应还可以用于合成具有特殊功能的材料。

例如，通过该反应可以合成具有特殊光学性质的材料、具有特殊电子性质的材料等。

结论Brachet反应是一种重要的有机合成方法，通过酰胺的缩合反应实现碳-碳键的形成。

【实验目的】了解Brachet反应的原理，掌握有关的操作方法。

【实验原理】甲基绿—派洛宁（Methyl green-Pyronin）为碱性染料，它能分别与细胞内的DNA、RNA 结合而呈现不同颜色。

当甲基绿与派洛宁作为混合染料时，甲基绿和染色质中DNA选择性结合显示绿色或蓝色；派洛宁与核仁、细胞质中的RNA选择结合显示红色。

其原因可能是两种染料的混合染液中有竞争作用，同时两种核酸分子都是多聚体，而其聚合程度有所不同。

甲基绿易与聚合程度高的DNA结合呈现绿色。

而派洛宁则与聚合程度较低的RNA结合呈现红色，但解聚的DNA也能和派洛宁结合呈现红色。

即RNA对派洛宁亲和力大，被染成红色，而DNA对甲基绿亲和力大，被染成蓝绿色。

【实验仪器、材料和试剂】（一）器材显微镜、镊子、载玻片、盖玻片、吸水纸（二）材料洋葱鳞茎表皮（三）试剂1．Unna试剂：甲基绿—派洛宁（Methyl green-Pyronin）染色液甲液：5%派洛宁水溶液6ml2%甲基绿水溶液6ml蒸馏水16ml乙液：1M醋酸缓冲液（pH=4.8）16ml甲、乙两液分别置4℃冰箱备用，用时甲乙两液混匀。

2．1M醋酸缓冲液（pH=4.8）配方A液：冰醋酸6ml加蒸馏水至100ml 。

B液：醋酸钠13.5g加蒸馏水100ml 。

取A液40ml+ B液60ml 混匀即为pH=4.8 。

配制注意事项：（1）Pyronin可加热助溶。

（2）Methyl green批号不同，染色效果差别很大。

商品Methyl gr e en常混有甲基紫，影响染色效果，应先把药品放在分液漏斗中，加入足量的氯仿，用力振荡，然后静置，直到洗脱甲基紫为止，最后干燥备用。

【方法与步骤】1．用镊子撕取洋葱鳞茎内表皮一小块，置于载玻片上。

2．滴一滴Unna试剂，染色30min。

3．蒸馏水洗两次，吸水纸吸去多余的水分。

4．盖上盖玻片，镜检。

对照片：（1）撕取洋葱鳞茎内表皮，经5%三氯醋酸中90℃水浴处理15min 。