聚酰胺柱的使用方法

柱色谱是较经典的有机物分离技术，原理和薄层色谱相同，但装置有所不同，主要由一个均匀玻璃柱和填充填料组成，填料是决定柱效的主要因素，填料必须满足具有不溶于所使用流动相、不使欲分离的样品破坏或分解、惰性大、可逆性强和吸附容量大。

同时，填料颗粒直径要均匀。

最常见的柱色谱是硅胶色谱、氧化铝色谱、离子交换柱色谱、聚酰胺柱色谱和凝胶柱色谱。

分配柱色谱是利用混合物中各组分在两种不相混溶的液体之间的分配系数不同，而得到分离的方法，分为正相和反相分配色谱两种类型：正相分配色谱：以水或亲水性溶剂为固定（液）相，以水不相混溶的有机溶剂作移动相的分配色谱称为正相分配色谱。

一般而言，分离水溶性或极性较大的成分，如生物碱、苷类、糖类、有机酸等化合物，常用正相分配色谱。

反相分配色谱：以亲脂性有机溶剂作固定（液）相，以水或亲水性溶剂作移动相的分配色谱称为反相分配色谱。

当分离脂溶性或极性较小的成分，如高级脂肪酸、油脂、游离甾体等物质时，常用反相分配色谱。

实践中有70%以上的分配色谱都采用反相色谱。

分配柱色谱往往适用于分离水溶性或极性较大的组分，如生物碱、苷类、糖类、有机酸、酚类及氨基酸的衍生物；对某些非极性化合物，如油脂、甾体等物质，可采用反相分配柱色谱法。

应用实例：狄戈辛（异羟基洋地黄毒苷）的分离支持剂：国产层析硅胶80 100目，加2/3量的水（以乙酸乙酯饱和），调匀，再以乙酸乙酯（水饱和）浸泡，调成稀糊状，湿法装柱，柱直径与长度比1:2 以上。

实验方法：取样品与1 2倍量硅胶磨匀，加入柱顶，用水饱和的乙酸乙酯（含0.5%甲醇）洗脱，分部收集，各流分均作纸色谱及薄层色谱检查，比移值相同的流分合并，减压蒸干，以甲醇结晶，得到洋地黄毒苷、羟基洋地黄毒苷、异羟基洋地黄毒苷三种单体。

吸附柱色谱是将待分离混合物样品均匀地加在装有吸附剂的柱子中，再加适当的溶剂（洗脱剂）冲洗，由于吸附剂对各组分吸附能力不同，各组分在柱中向下移动的速度不同，吸附力最弱的组分随溶剂首先流出，通过分段定量收集洗脱液而使各组分得到分离。

D101型大孔吸附树脂预处理方法D101型大孔吸附树脂预处理方法：乙醇浸泡24h→用乙醇洗至流出液与水1：5不浑浊→用水洗至无醇味→5%HCl通过树脂柱，浸泡2-4h→水洗至中性→2%NaOH 通过硅胶柱树脂柱，浸泡2-4h→水洗至中性，备用。

在给树脂柱中加入1/3的水，然后将准确量好体积的D101树脂用水转移到树脂柱中，再用70%的乙醇2倍树脂体积处理，流速为1倍树脂体积，过完乙醇后用水洗至无醇味即可进行使用。

D101大孔吸附树脂是完全非极性的,树脂本身用纯水洗后,流出纯水PH6.5-8大孔树脂吸附的是分子态的物质,乙醇洗脱就是和大孔树脂进行对分子态的物质竞争吸附,使物质转为溶解于乙醇,从而被乙醇洗脱液带走比表面比较大。

物理吸附。

作用力为范德华力。

预处理：高温干燥。

100度。

再生：150度吹扫大孔吸附树脂总有气泡怎么办？我的步骤是这样的：先在柱子中装入1/4的乙醇，然后将预先润湿的脱脂棉用玻璃棒推入柱子下端狭窄的部分，打开活塞控制1滴/1秒，将大孔吸附树脂沿着壁，边搅拌边加入柱子中。

一开始一个气泡都没有，用乙醇继续处理时，就开始有气泡，脱脂棉上下都有，到后来连柱子中都有气泡，我都要晕死了，请大家帮帮忙，看看问题到底出在哪？聚酰胺预处理方法称聚酰胺，直接倒进柱子里，摇匀，不要有空气泡，用90%乙醇冲洗柱后，拿到干燥箱里70-80℃烘干，放到室温。

然后把样品倒进去，用25ml水慢慢冲，样品用玻璃棒引流到入，千万别把聚酰胺颗粒冲起来。

收集滤液即得。

用过的聚酰胺一般用5%NaOH水溶液洗脱，洗至NaOH水溶液颜色极淡为止。

有时因某些鞣质与聚酰胺又不可逆吸附，用NaOH水溶液很难洗脱，可用5%NaOH在柱中浸泡，每天将柱中的NaOH水溶液放出一次，并加入新的5%NaOH水溶液，这样浸泡一周后，鞣质可基本洗脱完。

然后用蒸馏水洗脱至pH8-9，再用2倍量的10%醋酸水溶液洗脱，最后蒸馏水洗脱至pH中性，重复使用。

举例说明黄酮的提取分离方法组长：宁组员：翟雪王璐璐子涵子惠罗春雨红成1.提取方法1.1热水提取法热水提取法一般仅限于提取苷类. 在提取过程中要考虑加水量、浸泡时间、煎煮时间与煎煮次数等因素. 此工艺成本低、安全,适合于工业化大生产。

以水做溶剂,同时提高浸提温度、延长浸提时间和增加液料比(60倍) ,可以明显提高芦丁的产率。

实例桑叶：采用热水提取法测定桑叶中各有效成分含量，发现黄酮类化合物含量为1%以上,其中霜后桑叶黄酮类化合物含量最高为1.54% ,其次是晚秋桑叶,春季桑芽和后期桑叶含量最低。

甘草：过去甘草黄酮的提取主要为水提法,其主要原理通过甘草粉与水按一定配比,加热混合至80～95 ℃浸提甘草粉,利用甘草黄酮的水溶性进而提取甘草黄酮。

此法虽然要求设备简单,但因提取杂质多、提取时间长、提取液存放易腐败变质、后续过滤操作困难、收率较低等缺点,现已不常使用。

1.2有机溶剂萃取法其原理是利用黄酮类化合物与混入的杂质极性不同,选用不同的溶剂萃取。

常用的有机溶剂有甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯等,一般采取乙醇为提取溶剂。

高浓度的乙醇(如90 %～95 %) 适于提取苷元,浓度60 %左右的乙醇适于提取苷类。

提取次数一般为2～4 次,提取方法有热回流提取和冷浸提取两种方式。

实例桑叶：使用乙醇提取桑叶中总黄酮的最正确工艺条件为：乙醇的浓度为70%，料液比为1:15，在80℃的条件下浸泡3h。

使用多种有机溶剂提取发现桑叶中黄酮类化合物的最正确提取溶剂是60%丙酮。

西芹：使用无水乙醇为提取剂，按西芹鲜重与提取剂的比例(W/ V) 1∶2 ,在80 ℃下回流提取2～4h ,制备西芹总黄酮。

银杏叶：从银杏叶中提取总黄酮时, 随乙醇浓度的增加总黄酮提取率逐渐上升, 当乙醇浓度增至70% 时提取率最高, 之后反而下降, 应选用70% 的乙醇作浸提剂最正确。

生：生黄酮提取用40倍原料的90%甲醇溶液, 在60 ~ 65℃条件下提取4 h 为其优化组合, 而其试验组合中以用40倍原料的75%甲醇溶液,在60~ 65 ℃条件下提取2 h的提取效果最好。

天然药物化学习题参考答案第一章总论一、名词解释1、天然药物化学：运用近代科学技术和方法研究天然药物中的化学成分的一门学科。

2、有效成分：天然药物中具有临床疗效的活性成分。

3、二次代谢及二次代谢产物：二次代谢产物：由植物体产生的、对维持植物生命活动来说不起重要作用的化合物，如萜类、生物碱类化合物等。

一、选择题（选择一个确切的答案）1、波相色谱分离效果好的一个主要原因是：Ａ、压力高Ｂ、吸附剂的颗粒小Ｃ、流速快Ｄ、有自动记录2、蛋白质等高分子化合物在水中形成：Ａ、真溶液Ｂ、胶体溶液Ｃ、悬浊液Ｄ、乳状液3、纸上分配色谱，固定相是：Ａ、纤维素Ｂ、滤纸所含的水Ｃ、展开剂中极性较大的溶剂Ｄ、醇羟基4、利用溶剂较少提取有效成分较完全的方法是：Ａ、连续回流法Ｂ、加热回流法Ｃ、透析法Ｄ、浸渍法5、某化合物用氧仿在缓冲纸层桥上展开，其 R f值随 PH 增大而减小这说明它可能是Ａ、酸性化合物Ｂ、碱性化合物Ｃ、中性化合物Ｄ、两性化合物6、离子交换色谱法，适用于下列（）类化合物的分离Ａ、萜类Ｂ、生物碱Ｃ、淀粉Ｄ、甾体类7、碱性氧化铝色谱通常用于（）的分离，硅胶色谱一般不适合于分离（）Ａ、香豆素类化合物Ｂ、生物碱类化合物Ｃ、酸性化合物Ｄ、酯类化合物二、判断题1、不同的甾醇混合，熔点往往下降特别多2、苦味素就是植物中一类味苦的成分。

3、天然的甾醇都有光学活性。

4、两个化合物的混合熔点一定低于这两个化合物本身各自的熔点。

5、糖、蛋白质、脂质、核酸等为植物机体生命活动不可缺少的物质，因此称之为一次代谢产物。

6、利用13C-NMR 的门控去偶谱，可以测定13C-1H 的偶合数。

7、凝胶色谱的原理是根据被分离分子含有羟基数目的不同．达到分离，而不是根据分子量的差别。

三、用适当的物理化学方法区别下列化合物用聚酰胺柱层分离下述化合物，以稀甲醇—甲醇洗脱，其出柱先后顺序为（）→ （）→ （）→ （）O OOH OHHO OOOHOHHOOHOHO OO OOglu O Rha OOOHOHOOCH3A BC D四、填空某植物水提液含中性、酸性、碱性、两性化合物若干。

聚酰胺柱色谱洗脱原理聚酰胺柱色谱是一种常用的色谱分析技术，通过利用聚酰胺柱上的吸附和洗脱过程实现样品分离和分析。

其原理基于样品分子在固定相和流动相之间的相互作用差异，从而实现不同组分之间的分离。

聚酰胺柱色谱的洗脱原理可以从多个方面进行解释。

首先，聚酰胺柱由聚合物制成，并具有一定的化学活性。

这种活性使聚酰胺柱具有较强的吸附能力，可以有效地吸附待分离样品中的化合物。

其次，聚酰胺柱色谱利用流动相流经聚酰胺固定相的过程实现洗脱。

在聚酰胺固定相中，不同化合物和固定相之间的相互作用力不同。

一般来说，极性化合物与聚酰胺柱之间的相互作用较强，因此在流动相中相对难以洗脱；而非极性化合物与聚酰胺柱之间的相互作用较弱，容易在流动相中洗脱。

此外，聚酰胺柱色谱还可以通过调节流动相的组成及pH值来实现洗脱。

在色谱实验中，流动相是一个非常重要的参数，它的性质直接影响着样品的分离效果。

通过改变流动相的有机溶剂的种类、比例和缓冲液的pH值，可以调节流动相的极性，从而实现待分离样品的有效洗脱。

聚酰胺柱色谱的洗脱原理还涉及流动速度的调节。

流动速度的快慢不仅影响样品分离的速度，还与洗脱的效果有关。

一般来说，流动速度过快会导致样品组分无法充分与固定相相互作用，从而影响分离效果；而流动速度过慢则会延长分析时间。

因此，确定适当的流动速度对于聚酰胺柱色谱的洗脱原理十分关键。

最后，聚酰胺柱色谱的洗脱原理还与样品的特性有关。

不同的样品具有不同的化学性质和结构特征，因此对于不同的样品，需要选择适当的流动相、固定相和流动速度。

只有在充分理解样品的特性的基础上，才能实现聚酰胺柱色谱的有效洗脱，并取得准确的分析结果。

综上所述，聚酰胺柱色谱的洗脱原理是通过样品分子在固定相和流动相之间的相互作用差异来实现不同组分之间的分离。

聚酰胺柱具有吸附能力，流动相的性质、流动速度的调节以及样品的特性都对洗脱效果有重要影响。

了解聚酰胺柱色谱的洗脱原理对于合理选择分析方法和优化实验条件具有重要意义。

紫外-可见分光法测定甘草饮片中甘草酸的含量摘要】目的：探讨甘草饮片中甘草酸的含量测定方法，方法：采用乙醇回流提取法提取甘草酸，并采用紫外分光法测定其含量，结果：甘草饮片中甘草酸在0.50～2.50mg/ml范围内线性关系良好，r=0.9994，平均回收率为98.88% RSD为1.47%（n=5）结论：本测定方法快速可靠，可较好控制甘草饮片的质量【关键词】甘草酸；甘草饮片；紫外分光法；含量测定【中图分类号】R927.1 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2016）17-0328-02甘草别名为甜草根为豆科多年生草本植物Glycyrrhiza.uralensis,账果甘草Glycyrrhiza inflate.Bat，感光果甘草Glycyrrhiza.glabra.L的干燥根及根茎，是一种常用药物，被冠以“众药之王”称号，其药用价值倍受人们广泛关注，具有补脾益气，清热解毒，止咳祛痰，和中润肺，调和诸药之功效[1]。

主要化学成分为三萜皂甙类：甘草甜素（甘草酸）、甘草次酸和甘草酸的钾钙盐。

黄酮类化合物：甘草甙、甘草甙元等[2]。

甘草酸具有保肝、抗炎、抗病毒、抗肿瘤及免疫调节等作用[3]，甘草酸的乙醇和氢氧化铵溶液与H2SO4、香兰醛试液显色，在波长544nm 处有最大吸收[4]。

1.材料1.1 药品与试剂甘草饮片（上海医药公司安庆分公司提供并鉴定），甘草酸单铵盐标准品（中国药品生物制品检定所批号110731-201215），香兰醛试液（上海化学试剂分装厂），乙醇、硫酸、氢氧化铵均为国产分析纯试剂1.2 仪器760CRT双光束紫外分光光度计（上海精密科学分析仪器厂），天然药物提取分离设备2.方法与结果2.1 标准曲线方程的绘制以甘草酸单铵盐为标准品，于80℃真空干燥2h后，精密称定，以80%乙醇为溶剂，配成每ml含1mg的标准溶液。

精密吸取0.50、1.00、1.50、2.00及2.50ml,分别置10ml具塞试管中，加入80%乙醇稀释至总体积为5.0ml,并以80%乙醇为空白，各加香兰醛试液0.5ml混合，置水浴中，小心加入70%硫酸5.0ml混合，60℃保温20min,冷至室温后，于波长544nm处分别测定吸光度得回归方程为y=2.34x-0.72(x为mg/ml)r=0.9994,线性范围0.50～2.50mg/ml。

高效液相色谱法测定豆浆中人工合成色素湛珺雯【期刊名称】《食品安全导刊》【年(卷),期】2016(000)018【总页数】2页(P96-97)【作者】湛珺雯【作者单位】德阳市食品药品检验所【正文语种】中文高效液相色谱法（HPLC）测定豆浆中人工合成色素的含量。

样品中加入亚铁氰化钾和乙酸锌除去蛋白质，取上清液过活化后的聚酰胺柱，洗涤、解吸、纯化后测定。

采用Kromasil 100 C18（150 mm×4.6 mm×5 um）色谱柱，流动相为0.02 mol/L乙酸铵-甲醇，梯度洗脱，流速为1.0 mL/min，柱温为30℃，检测波长254 nm，进样量为10 μL。

结果表明：柠檬黄在进样量4 ng～200 ng（Y=14.72x+0.038，r=1.000 0）范围内呈良好的线性、胭脂红在进样量4 ng～200 ng （Y=17.60x+0.007 1，r=1.000 0）范围内呈良好的线性、日落黄在进样量4 ng～200 ng（Y=10.72x+0.0038，r=1.000 0）范围内呈良好的线性，柠檬黄、日落黄、胭脂红平均加样回收率为88.2%、87.8%、87.9%。

试验用于食品中多种合成色素的检测，很好地满足食品检验机构。

目前，我国豆浆供应主要有豆奶粉、豆浆粉及小作坊或街边摊贩等形式，是从大豆中萃取出可溶性的营养成分。

着色剂是食品添加剂的重要组成部分，是以食品着色和改善食品色泽为目的的添加剂，目前，人们经常食用的有柠檬黄、胭脂红、日落黄等。

人工色素主要是从煤焦油中制取或以苯、甲苯、萘等芳香烃化合物为原料合成的有机色素，因种类多、成本低廉、着色力强等特性被广泛使用。

人工色素不仅本身有毒，而且还夹杂着重金属等剧毒物质，故对人体健康尤其是儿童健康有不同程度的损害，能引起儿童多动症的症状，比如：过度活跃、注意力不集中等，而这些有毒有害的物质在儿童食品中出现的频率及含量往往更高。

1. 采用溶剂法提取中药有效成分时，如何选择溶剂？溶剂对所需成分的溶解度要大,对杂质的溶解度要小,或反之溶剂不能与天然药物成分发生反应,即使反应亦属于可逆性的溶剂要经济易得并具有一定的安全性沸点宜适中,便于回收反复利用2. “水提醇沉”和“醇提水沉”各除去什么杂质？保留哪些成分？水提醇沉是除去水溶性杂质,保留脂溶性成分醇提水沉是除去脂溶性杂质,保留水溶性成分3. 举例说明酸碱溶剂法在中药有效成分分离中的应用。

例如萝芙木总碱中利血平,阿马林碱,蛇根碱的分离先加入10%的醋酸溶解萝芙木总碱,得提取液,再用氯仿萃取,氯仿层的利血平,醋酸层加NaOH调pH至8.0,过滤,沉淀物得阿马林碱,碱水得蛇根碱,再调pH至10以上,用有机溶剂萃取即得蛇根碱4. 吸附色谱分离中药化学成分的原理是什么？简述硅胶、氧化铝、聚酰胺、活性炭这四种吸附剂的主要用途和特点。

原理:利用混合物中各组分对固体吸附剂(固体组)的吸附能力不同而达到分离物理吸附:(极性)相似相溶(易于吸附0极性吸附剂 SiO2 酸性吸附剂,适用于中性或酸性成分的层析Al2O3 碱性吸附剂,实用于一些碱性天然药物成分分离,如生物碱类非极性吸附剂活性炭对非极性化合物的吸附力强,洗脱时洗脱力随洗脱剂的极性降低而增大半化学吸附聚酰胺吸附层析原理:氢键吸附分子中的酰胺羰基与酚类、黄酮类化合物的酚羟基,或酰胺键上的游离胺基与醌类、脂肪羧酸上的羰基形成氢键缔结而产生吸附5. 简述凝胶过滤色谱的原理。

SephadexLH-20与Sephadex G有何区别？在中药有效成分分离中有何应用？原理:加入试样混合物,用同一溶剂洗脱时,由于凝胶网孔半径的限制,大分子不能渗入凝胶颗粒内部,随溶剂从柱底先流出,小分子渗入到凝胶颗粒内部,通过色谱柱时阻力增大,较晚流出。

试样混合物中各成分因子大小差异渗入凝胶颗粒的程度也不同,经历一段时间并达平衡后按分子由大到小顺序先后流出并得到分离区别：-OH总数无改变但碳原子所占比例相对增大，可在水中应用，也可在极性有机溶剂或他们与水组成的混合物中应用应用：适用于有机混合物质的分离，尤其SephadexLH-20在极性和非极性溶剂组成的混合溶剂中还可以起反相分配色谱的作用,适用于不同类型有机物分离6. 简述离子交换色谱法的分离原理及应用，以生物碱为例简述分离过程。

层析用聚酰胺树脂使用说明书1.产品介绍1.1技术指标：分子量：14000~17000比表面积：5~10m2/gPH值：6~7溶解度：溶于浓盐酸，甲酸，微溶于醋酸，苯酚等溶剂，不溶于水，甲醇，乙醇，丙酮，乙醚，氯仿和苯等常用有机溶剂，对碱较稳定，对酸的稳定性较差，尤其是无机酸，在温度高时更敏感。

1.2主要用途：聚酰胺特别适用于多元酚类化合物的分离，如黄酮、醌类、酚酸、含羰基化合物、羧基化合物等。

由于其对鞣质吸附强，也可用于将植物粗提物中的鞣质除去。

2.使用说明书2.1树脂性能简介：聚酰胺是由酰胺键聚合形成的高分子化合物。

其酰胺基可与羟基酚类，酸类，醌类，硝基等化合物以氢键形成结合而被吸附，其脂肪长链可作为分配层析的载体。

聚酰胺在含水系统中层析时，聚酰胺作为非极性固定相，其层析行为反向柱层析；在非水溶剂系统时，聚酰胺作为分配层析的载体，其层析行为为正向柱层析。

2.2预处理：取聚酰胺以90-95%乙醇浸泡，不断搅拌，除去气泡后装入柱中。

用3-4倍体积的90-95%乙醇洗脱，洗至洗脱液透明并在蒸干后无残渣（或极少残渣）。

再依次用2-2.5倍体积5%NaOH水溶液、1倍体积的蒸馏水、2-2.5倍体积的10%醋酸水溶液洗脱，最后用蒸馏水洗脱至pH中性，备用。

2.3：使用方法：1、装柱：一般将颗粒状聚酰胺混悬于水中，使其充分膨胀，然后装柱，让聚酰胺自由沉降；当用非极性溶剂系统时候，则用组分中低级性的溶剂装柱。

2、稀释适当浓度上样：一般每100ml聚酰胺上样1.5-2.5g，样品先用洗脱溶剂溶解，浓度为20%-30%。

水溶性化合物直接上样；若提取物水溶性不好，则用挥发性有机溶媒溶解、拌适量聚酰胺、挥干或减压蒸干、干法装入柱顶。

3、水洗：先用水洗脱。

4、醇洗：在水中递增乙醇浓度至浓乙醇溶液，或氯仿、氯仿-甲醇，递增甲醇至纯甲醇洗脱。

若仍有物质未被洗脱，可用稀氨水或稀甲酰胺溶液洗脱，分段收集。

5、找到最佳吸附比：先小量试验找到最佳吸附比。

本人第一次用聚酰胺柱子，实验室有聚酰胺粉，之前网上也看了参差不齐的资料。

想知道整个流程是怎么做的。

我现在醇提100g生药样品，然后用10g聚酰胺粉拌样，现在是想知道怎么装柱，要用聚酰胺粉多大量，然后是怎么上样，怎么洗脱？新买的聚酰胺取聚酰胺以90-95%乙醇浸泡，不断搅拌，除去气泡后装入柱中。

用3-4倍体积的90-9 5%乙醇洗脱，洗至洗脱液透明并在蒸干后无残渣（或极少残渣）。

再依次用2-2.5倍体积5%NaOH水溶液、1倍体积的蒸馏水、2-2.5倍体积的10%醋酸水溶液洗脱，最后用蒸馏水洗脱至pH中性，备用。

1、装柱：一般将颗粒状聚酰胺混悬于水中，使其充分膨胀，然后装柱，让聚酰胺自由沉降；当用非极性溶剂系统时候，则用组分中低级性的溶剂装柱。

2、稀释适当浓度上样：一般每100ml聚酰胺上样1.5-2.5g，样品先用洗脱溶剂溶解，浓度为20%-30%。

水溶性化合物直接上样；若提取物水溶性不好，则用挥发性有机溶媒溶解、拌适量聚酰胺、挥干或减压蒸干、干法装入柱顶。

3、水洗：先用水洗脱。

4、醇洗：在水中递增乙醇浓度至浓乙醇溶液，或氯仿、氯仿-甲醇，递增甲醇至纯甲醇洗脱。

若仍有物质未被洗脱，可用稀氨水或稀甲酰胺溶液洗脱，分段收集。

5、找到最佳吸附比：先小量试验找到最佳吸附比。

6、放大：根据小试及最佳吸附比进行放大试验。

7、聚酰胺的回收：使用过的聚酰胺一般用5%氢氧化钠溶液洗涤，然后水洗，再用10%醋酸液洗，然后用蒸馏水洗至中性，即可。

聚酰胺柱层析的不足：比如机械强度不大，粒度不均匀，分离时流速较慢一些小分子杂质混入的问题采用的解决方案有：1.装柱前先过筛2.装柱时用5%甲醇或10%盐酸预先除去小分子杂质3.与硅藻土混合制粒以增加机械强度。

anyluk(站内联系TA)很简单：找一根中等大小的柱子，对于装多样聚酰胺，不必拘泥于课本教材上说的那么严格，大概有40厘米长或者30厘米长内径大于5厘米小于10厘米的柱子，拿聚酰胺袋直接装就是了，边装边用洗耳球在柱顶敲打，以便装实，看装的差不多了，在把你所拌的样品装上，离磨口有2-3厘米即可，放一层棉花，套上即可。