银杏叶提取物含量计算

《银杏叶提取物国际商务标准》编制说明一、工作简况本标准的制定工作，是由中国医药保健品进出口商会提出而进行的，由中华人民共和国商务部归口，中国医药保健品进出口商会标准化技术委员会负责解释。

本标准由浙江康恩贝制药股份有限公司负责起草，北京绿色金可生物技术股份有限公司、晨光生物科技集团股份有限公司、重庆科瑞南海制药有限责任公司和上海诺德生物实业有限公司等单位复核。

标准主要起草人为王如伟、方玲、姚建标、叶剑锋、姚德中、苏一多、章江生、雷凯琴、胡江宁、何厚洪、吴旭明、吴健、乔洪翔。

二、标准制订的目的及意义银杏叶提取物(Ginkgo leaves extract)是以银杏叶为原料经提取分离制成的植物提取物，是我国乃至世界上重要的天然药物原料之一。

中国是银杏的主产地，由于竞争激烈，各厂家生产设备及工艺水平参差不齐，部分银杏叶提取物厂家为了使产品主要化学指标符合客户标准，采用水提、半萃取，掺入银杏树皮、根皮与银杏叶共同提取，或掺入含有芦丁、槲皮素或山奈素结构的物质共同提取，使用甲醇、工业乙醇提取，这些不当的商业行为，不仅混乱了产品的质量构成，还严重干扰了市场秩序，损害了产品、行业乃至国家声誉，使得银杏叶提取物出口行业境况举步维艰。

随着美国药典、欧州药典对EGB质量标准的修订和不断改进，国外企业在国内的银杏种植基地与产业基地逐步发展壮大，势必对我国的EGB行业构成实质性的冲击。

目前，如何跟进美国药典、欧洲药典银杏叶提取物标准，提高国内EGB的标准，保证银杏叶提取物的质量稳定性，保证人民用药安全是第一紧迫任务。

为了进一步规范国内银杏叶提取物在生产、贮存、运输过程中的质量管理，特制定本标准。

三、国内外有关法律法规和其他标准的关系银杏叶提取物标准已收载于《中国药典》2010年版一部、USP36-N31和EP7.0。

不同药典标准中，银杏总黄酮醇苷、银杏内酯及银杏酸的样品前处理方法、含量测定方法、含量计算方法及标准限度等方面均存在一定的差异。

银杏叶多糖提取、纯化及其含量的测定【摘要】目的研究银杏叶多糖的提取纯化及含量测定。

方法通过对不同的提取次数、固液比及提取时间等实验，以及对粗多糖纯化的研究，确立各因素条件，采用苯酚-硫酸法测定其多糖含量。

结果各因素条件为浸提温度80℃，提取时间3 h，固液比1∶30，提取2次，用活性炭纯化。

由此得银杏叶中粗多糖的得率为12.2%，纯化后的多糖得率为9.8%。

测定提取的粗多糖中多糖含量为35.7%，纯化后的多糖含量为43.3%，多糖含量测定相对标准偏差小于3.0%。

结论该方法纯化效果好，测定重现性好，得出银杏叶中多糖含量为4.3%。

【关键词】银杏叶多糖提取纯化多糖测定Abstract:ObjectiveThe extraction and purification methods for polysaccharide in Gingko leaves were studied and the content of polysaccharide in it was determined.MethodsThe condition of each factor for extraction and pruification from the leaves of Gingko was established through the experiments of extraction times， different ratios of material to extraction solvent and extraction time.The method of phenol-sulfuric acid was applied to determination of the content of the polysaccharide.ResultsThe conditions of the factors were extraction temperature 80℃，extraction time 3h，material to extraction solvent1:30 ，extraction 2 times and activated carbon for purification.Raw polysaccharide in gingko leaves was 12.2%，the polysaccharide after prurified was 9.8%， the content of polysaccharide in the raw polysaccharide was 35.67%，and in the pure one was 43.32%，ConclusionThe purification method is efficient and stable. The content of polysaccharide in gingko leaves is 4.3%.Key words:Ginkgo leaves； Polysaccharide； Extraction；Purification； Determination of polysaccharide多糖又称多聚糖（polysaccharide），是构成生命活动的四大基本物质之一，不仅是机体主要供能物质，同时还具有多种多样的生物学功能，在生命活动中参与了细胞的各种活动。

中国药典银杏叶提取物质量标准我要投稿作者：不详出处：不详时间：2010-11-23类别：银杏叶提取物人气：432 中国药典银杏叶提取物质量标准：制法：乙醇（不是甲醇）回流提取，大孔树脂吸附，喷干，粉碎。

性状：浅棕黄色至棕褐色粉末；味微苦。

检查：水分小于5.0%；炽灼残渣小于0.8%；重金属不得过百万分之二十，即20ppm以下。

黄酮苷元峰面积比，槲皮素与山奈素的峰面积比应为0.8至1.5。

（如果超过1.5，则应怀疑被人为添加了槲皮素或者芦丁。

）总银杏酸不得过百万分之十，即10ppm。

含量测定高效液相色谱法。

总黄酮醇苷不得少于24.0%；总黄酮醇苷含量=槲皮素含量+山奈素含量+异鼠李素含量萜类内脂总量不得少于6.0%；萜类内脂总量=白果内脂+银杏内脂A+银杏内脂B+银杏内脂C。

银杏叶提取物 Ginkgo Biloba Extract（1）原料级标准（不可直接用于制剂）（1）Routine银杏黄酮≥24% Total Ginkgo flavone glycosides ≥ 24%槲皮素与山奈酚峰比0.8--1.5之间 Quercatin: kaemperol 0.8--1.5银杏总内酯≥6% Total terpene lactones ≥ 6%（2）中国药典2005版标准（2）CP2005银杏黄酮≥24% Total Ginkgo flavone glycosides ≥ 24%槲皮素与山奈酚峰比0.8--1.5之间 Quercatin: kaemperol 0.8--1.5 银杏总内酯≥6% Total terpene lactones ≥ 6%银杏酸＜10ppm Ginkgolic acid ＜ 10ppm(3) 低酸银杏叶提取物 EGB761 (3) EGB761银杏黄酮≥24% Total Ginkgo flavone glycosides ≥ 24%槲皮素与山奈酚峰比0.8--1.5之间 Quercatin: kaemperol 0.8--1.5 银杏总内酯≥6% Total terpene lactones ≥ 6%银杏酸＜5ppm Ginkgolic acid ＜ 5ppm（4）超低酸银杏叶提取物（4）Minimal acid银杏黄酮≥24% Total Ginkgo flavone glycosides ≥ 24%槲皮素与山奈酚峰比0.8--1.5之间 Quercatin: kaemperol 0.8--1.5银杏总内酯≥6% Total terpene lactones ≥ 6%银杏酸＜1ppm Ginkgolic acid ＜ 1ppm（5）中国药典2005标准水溶性银杏叶提取物（5）CP2005（ Water soluble）银杏黄酮≥24% Total Ginkgo flavone glycosides ≥ 24%槲皮素与山奈酚峰比0.8--1.5之间 Quercatin: kaemperol 0.8--1.5银杏总内酯≥6% Total terpene lactones ≥ 6%银杏酸＜10ppm Ginkgolic acid ＜ 10ppm溶解度：1克溶于1000毫升水中 Solubility:1g extract in 1000 ml water (6) 低酸水溶性银杏叶提取物 EGB761 (6) EGB761（ Water soluble）银杏黄酮≥24% Total Ginkgo flavone glycosides ≥ 24%槲皮素与山奈酚峰比0.8--1.5之间 Quercatin: kaemperol 0.8--1.5银杏总内酯≥6% Total terpene lactones ≥ 6%银杏酸＜5ppm Ginkgolic acid ＜ 5ppm溶解度：1克溶于100毫升水中 Solubility:1g extract in 100 ml water （7）超低酸水溶性银杏叶提取物（7）Minimal acid（ Water soluble）银杏黄酮≥24% Total Ginkgo flavone glycosides ≥ 24%槲皮素与山奈酚峰比0.8--1.5之间 Quercatin: kaemperol 0.8--1.5银杏总内酯≥6% Total terpene lactones ≥ 6%银杏酸＜1ppm Ginkgolic acid ＜ 1ppm。

FZD0117
银杏叶提取物中银杏黄酮（Total Flavonglycoside）含量测定方法一、色谱条件
色谱柱：Inertsil ODS-3 4.6×150mm 5μm
流动相：甲醇:水:磷酸(50:50:0.3，V/V)
检测波长：360nm
流速：1mL/min
柱温：室温
进样量：10μL
二、溶液制备
1. 对照品溶液制备精密称取槲皮素对照品约3mg于25mL容量瓶中，加入甲醇溶解定容。

2. 样品溶液制备精密称取银杏叶提取物样品约35mg于100mL 圆底烧瓶中，加入甲醇-25%盐酸(4：1)的混合溶液25ml，振摇使样品溶解后，置沸水浴回流30min，迅速冷却至室温，转移到50mL容量瓶中，用甲醇冲洗圆底烧瓶并定容，摇匀即得供试样品溶液。

三、样品测定
在上述色谱条件下，待仪器稳定、基线平稳后进样测定，槲皮素（Quercetin）保留时间约为13min，山奈酚（Kaempferol）约为21min 异鼠李素（Isorhamnetin）约为23min。

银杏黄酮含量按下式计算：
（2.5Q+2.59K+2.44I）Ws×2
银杏黄酮含量（%）= ×S
As×Wi
式中Q、K、I分别为样品中槲皮素、山奈酚、异鼠李素的峰面积As、Ws分别为槲皮素对照品的峰面积和称样量（mg）
S为槲皮素对照品的纯度(%)
Wi为样品称取量（mg）。

第43卷第2期罗祥敏等：银杏叶提取物中组分定性检测及含量测定191 DOI：10.13822/ki.hxsj.2021007861 化学试剂，2021，43(2)，191 〜195银杏叶提取物中组分定性检测及含量测定罗祥敏a’h，雷芳a’b，陈伟b，何琚(贵州大学a.药学院;b.贵州省生化工程中心，贵州贵阳550025)摘要：通过显色反应实验、泡沫实验和p H试纸对银杏叶提取物中组成成分类别进行定性测试，并采用U V法和高效液相色谱（HPLC)法测定银杏叶提取物中成分含量。

银杏叶提取物均含有黄酮、有机酸、多糖、蒽醌、鞣质、萜类化合物，无皂苷和生物碱类化合物（去掉了各成分含量范围）。

两种银杏叶提取物中黄酮、有机酸、多糖、蒽醌、萜类化合物含量相差不大，鞣质在2015年版药典银杏叶提取物中含量明显高于水溶性银杏叶提取物。

为银杏叶提取物质量整体评价及安全、稳定性研究提供数据参考。

关键词：银杏叶提取物；组成成分分析；定性试验;含量测定；HPLC;黄酮中图分类号：R284.1文献标识码：A 文章编号：0258-3283 ( 2021) 02-019卜05Qualitative Determination and Content Determination of Components in G i n k g o B i l o b a Extract LUO X iang-m ina h, LEI Fangah ^ CHEN W e i',HE7u/i * b( a. College of Pharmacy, b. Research Center of Biochemistry Engineering of Guizhou Province, Guizhou University，Guiyang 550025,C h in a)，Huaxue Shiji,2021，43(2) , 191 〜195Abstract：The constituents of Ginkgo biloba extract were determined by qualitative color development,foam test and pH test pa­per, and the content of active components of Ginkgo biloba extract were determined by UV and HPLC.Gin^o biloba extract con­tains flavonoids,organic acids,polysaccharides,anthraquinones,tannins,terpenoid lactones,no saponins and alkaloids.The content of flavonoids , organic acids, polysaccharides, anthraquinones, terpenoid lactones in two kinds of Ginkgo biloba extract did not differ significantly, tannins content was higher than water-soluble Ginkgo biloba extract in the 2015 edition.Data reference for the overall quality evaluation,safety and stability study of Ginkgo biloba extract was provided.Key words ：biloba extract；constituent analysis；qualitative test；content determination ； HPLC ；flavonoids银杏（G ira/cgo 6iZ o6a)又名白果树、公孙树，素 有“活化石”、“植物界的熊猫”之称，是我国特有的最古老树种之一，约占世界总量的70%[1]，我 国将其列为国家重点保护植物[2‘3]。

10%乙醇提取银杏叶实验报告实验目的：通过低醇提取银杏叶实验，实现提取工序与柱层析工序对接，从而省去浓缩与水沉的工序，降低生产能耗，提高产品效能。

实验方法1.取不同批次银杏叶，分别用10%醇直提、套提，通过残渣检测，及最终产品的收率及质量，比较二者的提取效率。

实验内容实验一、10醇提取预实验1.提取取111.44g银杏叶（厂区后采摘的苗叶，黄酮0.89% 内脂0.44%），粉碎。

用228ml70%乙醇浸泡1h，加水1368ml，在65℃提取2h，过滤，收集滤液，向滤渣中加入1114ml10%乙醇，在65℃下提取2h.过滤后，收集合并两次滤液。

2.层析将上述滤液冷却后，通过混合树脂（AB-8与ADS017各75g）吸附，并用600ml水洗，150ml15%乙醇洗涤，用70%乙醇进行洗脱。

收集洗脱液，回收乙醇，烘干。

3.实验结果4.本次实验讨论1）通过预实验可知，10%乙醇提取后直接上柱黄酮回收率为86.9%，内脂回收率为59.2%，并不低于现车间生产工艺。

有效成分达到银杏叶提取物标准，不足的是提取溶剂量大。

2）实验时发现，粉碎后提取液较混作，上柱难度变大。

实验二、10%乙醇提取放大实验1.提取取500g银杏叶（批号16081401），剪碎。

用1000ml50%乙醇浸泡1h，加水4000ml，在65℃提取2h，过滤，收集滤液，向滤渣中加入4000ml10%乙醇，在65℃下提取2h.过滤后，向滤渣中加入4000ml10%乙醇，在65℃下提取1h.收集合并三次滤液。

2.层析将上述滤液冷却后，分别通过两根混合树脂（AB-8与ADS017各75g）吸附，并用600ml水洗，继用15%醇洗脱。

用70%乙醇进行洗脱。

分别收集洗脱液，回收乙醇，烘干。

3.实验总结5.本次实验讨论1）由于实验时上柱量未固定，使实验数值横向比较时，未规律的分布。

根据实验结果数值分析，树脂柱1和树脂柱3含量偏低原因可能是上柱量较少引起。

银杏叶中的主要药用化学成分---共轭提取分离方法及药理作用应用化学1003 沈薇娜 201067090309引言天然产物有效成分是只要的重要原料，银杏黄酮类及其他主要要用成分更是天然药物研究的热点。

文献报道的银杏的药用成分共轭提取分离方法及药理作用。

银杏树又称白果树和公孙树, 属银杏科银杏属植物, 原产我国, 是当今地球上最古老的树种之一。

银杏叶提取物(EGB) 具有独特药理活性和巨大的临床应用价值, 应用领域包括医药、品保健品、化妆品、工艺品和植物保护等[ 1] 。

大量研究表明, 黄酮类化合物是银杏叶提取( EGB)中主要生理活性成分之一[2] 。

银杏叶黄酮具有扩张血管、抑制血小板活化因子、抗氧化、调血脂和抗肿瘤等药理作用[ 3 ] 。

近年来, 对银杏叶黄酮的提取和测定方法研究十分活跃。

对银杏叶黄酮类化合物提取与测定研究进行系统总结, 可以有针对性地加强银杏叶黄酮研发的力度, 提高银杏叶提取物产品在国际市场的竞争力, 使我国银杏开发事业跻身于世界先进行列。

摘要国内外的大量研究表明[4] ,银杏叶的化学成分十分复杂,主要的生物活性成分为黄酮类、萜内酯、聚戊烯醇和多糖类化合物。

此外,还含有机酸、烷基酚酸类、氨基酸、甾类、微量元素等。

据不完全统计,从银杏叶分离出的化合物有140多种。

临床研究表明,银杏叶提取物是三种血管(动脉、静脉和毛细血管)的有效调节剂,能治疗心血管系统疾病、急性脑梗死、单纯性糖尿病视网膜病变,银杏叶多糖的辅助抗肿瘤治疗作用。

关键词银杏叶；药用成分；提取方法；药理作用一、银杏叶中的主要药用化学成分1 、黄酮类化合物银杏叶中黄酮类化合物由黄酮及其苷、双黄酮、儿茶素3类组成[ 5] 。

到目前为止已分离出40种黄酮类化合物,其中黄酮及苷类28种,由槲皮素、山萘素、异鼠李素、杨梅皮素、木犀草素、洋芹素及其单、双、三糖苷组成,包括桂皮酰黄酮苷。

单黄酮类化合物主要是由山萘素、槲皮素和异鼠李素与各种糖基形成的苷,它们的结构中均含有5, 7, 4′-三羟基和连接糖基的3-羟基,而糖基可以是单糖、双糖、三糖, 大多数为葡萄糖和鼠李糖[ 6 ] ,其中大多数是槲皮素、山萘素及其苷,其母核结构如下。

注射用银杏叶提取物及其制剂中总银杏酸含量的测定【摘要】本研究旨在开发一种测定注射用银杏叶提取物及其制剂中总银杏酸含量的方法。

样品经过制备后，通过色谱条件进行分析，采用定量方法测定银杏酸含量，并进行方法验证。

结果分析表明，该方法准确可靠，适用于银杏酸的测定。

结论指出，本研究为注射用银杏叶提取物及其制剂的质量控制提供了重要参考，具有一定的应用前景。

【关键词】注射用银杏叶提取物、总银杏酸含量、测定、样品制备、色谱条件、定量方法、方法验证、结果分析、总结、展望1. 引言1.1 研究背景目前，国内外对于银杏叶提取物中总银杏酸含量的测定方法主要有高效液相色谱法、气相色谱法、紫外分光光度法和色谱质谱联用法等。

这些方法在测定精度、灵敏度和准确性上各有优劣，但都需要进行方法的验证和结果的分析，以确保测定结果的可靠性和准确性。

本研究旨在建立一种简便、准确的方法，用于测定注射用银杏叶提取物及其制剂中总银杏酸的含量，并进行方法验证和结果分析，为其临床应用提供科学依据。

1.2 研究目的本研究旨在建立一种精确、快速、稳定的测定注射用银杏叶提取物及其制剂中总银杏酸含量的方法。

当前市面上对注射用银杏叶提取物及其制剂中总银杏酸含量的测定方法存在一定的局限性和不足，在一定程度上影响了产品质量的监控和控制。

本研究的目的是对现有的测定方法进行改进和优化，使其具有更高的灵敏度、准确度和稳定性，从而为相关企业提供更准确、可靠的产品质量控制手段。

通过该研究，也将为相关行业的技术研发和质量监管提供参考和借鉴，推动该领域的发展和进步。

2. 正文2.1 样品制备样品制备是该研究的关键步骤之一，其质量直接影响到后续的分析结果。

需要选择高质量的注射用银杏叶提取物作为样品。

样品的选择应该考虑到其来源、保存条件以及处理方式等因素，以确保样品的稳定性和纯度。

在实际操作中，可以选择市售的银杏叶提取物作为样品，也可以自行提取银杏叶提取物。

在样品制备过程中，需要注意保持样品的稳定性和一致性。

从银杏叶片中提取分离银杏内酯银杏叶的主要化学成分到目前为止，文献报道的银杏叶主要的化学成分包括黄酮类、萜内酯、聚戊烯醇和多糖类化合物。

此外，还包含烷基酚酸类、有机酸、甾类、微量元素等。

1银杏内酯概况银杏叶提取物制剂是目前世界上最畅销的植物药之一银杏萜内酯为银杏叶提取物中主要的药效成分, 为二萜内酯化合物, 包括银杏内酯A、B、C、J 和M 等, 它们是血小板活化因子( p la t e l e t ac t iv a t in g f a c t o r ,P A F ) 的强有力的拮抗物, 是目前所有在售的银杏叶提取物制剂中最主要的药效成分, 其分子结构式如图所示在银杏叶提取物的药理作用研究报告的基础上, 人们发现银杏内酯和白果内酯具有独特的药理作用.19 87 年P.B r a q u e t 等报道银杏内酯B 具有抗血小板活化因子P A F 活性作用以来, 银杏内酯才真正引起人们的注意, 成为研究的热点.国内外学者对银杏菇内酯的药理和生理作用进行了广泛而深人的研究.银杏内酯包括银杏内酯A, B, C, J. M和白果内酯，它们都具有特殊立体化学结构。

国外对这类成分做了大量化学、药理和临床研究，发现银杳内酯均为血小板活化因子强拮抗剂，其中银杏内酯B由于分子中醚氧与羰基氧之间的距离和PAF中的相一致，活性最强。

血小板活化因子(Platelet-activating factor, PAF)是由血小板和多种炎症细胞产生分泌的一种内源性磷脂，它是迄今为止发现最强的血小板聚集诱导剂，它直接参与血栓形成，与许多疾病的发生、发展密切相关。

此外，银杏内酯对单一缺血损伤和中枢神经系统有保护作用，具有抗过敏、抗休克、抗器官移植排斥反应等作用。

因此，银杏内酯类是银杏叶中特殊生理活性的最重要成分，具有很高的药用价值和广阔的临床应用前景。

银杏内酯的复杂化学结构决定了化学合成的困难性，因此天然提取工艺将是生产银杏内酯的主要发展方向。